饲料检验和质量控制手册

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饲料容重的测量方法
制备用于显微镜观察的样品时须将试样彻底混合。

饲料原料样品的容重应作记录,并与纯料的容重对比(表1)。

若含有杂质或掺杂物,容重即会改变(或大,或小)。

比较好的做法是再对样品作更仔细的观察,特别注意细粉粒。

一般来说,掺杂物有时被粉碎得格外细以逃避检查。

当然,实际上纯原料粉碎后每单位容积的最终重量应该是衡定的。

下一步就取决于分析人员的技艺,通过考虑饲料的形状、颜色、粒度、松软度、硬度、组织、气味、霉菌和污点等来鉴别其外观。

饲料容重测量的样品制备
1.整颗谷粒应彻底混合,无需粉碎。

2.颗粒、碎粒和粉粒状态的饲料必须用效果均匀的粉碎机(10目筛板)粉碎。

程序:
1.将样品非常轻而仔细地放入1000毫升的量筒内,直到正好达到1000毫升为止。

用一刮铲或匙子调整容积。

2.将样品从量筒中倒出并称量。

3.以克/升为单位计算样品的容重(每一样品反复测量三次,用其平均值作为容重)。

(见第88—91页彩色图片)
饲料容重的样品制备
第一步样品制备需要的器材第二步将样品从袋中倒入盘中第三步用手彻底混合
第四步将样品在盘中铺开
第五步用刮铲或直尺调整盘中样品的高度第六步将样品分成两份
第七步再将样品分成四份第八步盘中样品已分成四份第九步用四等分法正确取样
第十步将样品饲料非常轻而仔细地倒入1000毫升的量简。

用匙子调整容积。

然后将样品从量筒中倒出并称重。

快速试验和点滴试验的特定分析方法
1.矿物质的点滴试验
动物饲料中使用的矿物质或者说无机化合物不是自然产生的就是化学合成的。

它们是骨头、血、蛋白质、脂肪的重要成分,并能调节消化液的酸碱度。

样品制备
混合饲料中的矿物质一般是粉状物或者说细小颗粒体。

筛分样品,并将其颗粒较细的部分倒入盛有氯仿的100毫升烧杯中,倒出上浮物,再把剩下的试料用小勺撒到滤纸上做点滴试验。

其方法如下:
钴、铜、铁
试剂:
溶液A——酒石酸钾纳溶液(罗谢尔盐=KNaC4H4O6·HzO)。

用蒸馏水溶解100克该盐,制成500毫升溶液。

溶液B——亚硝基-R-盐溶液。

用蒸馏水溶解l克1-亚硝基-2-经基萘-3,6二磺酸纳盐,制成500毫升溶液。

程序:
1.用3-4滴溶液A浸湿滤纸。

2.将试样撒到纸上。

3.加2-3滴溶液B。

让滤纸干燥后用显微镜仔细检查。

阳性反应:
1.钴显现粉红色。

2.铜显现淡褐色,呈环状。

3.铁显现深绿色。

(见第95—97页上的彩色图片)。


(二氧化锰、硫酸锰和碳酸锰试验)
试剂:
溶液A——2M氢氧化钠。

溶液B——将0.07克联苯胺=盐酸盐溶解于10毫升冰醋酸中,搅拌,再用蒸馏水稀释到100毫升。

程序:
1.用溶液A浸湿滤纸。

2.撒试样于滤纸上,让其静置1分钟。

3.加2-3滴溶液B。

4.若不立即发生反应,再加溶液B但不要溢出。

阳性反应:
1.氧化锰显现深兰色,带一黑色中心。

2.硫酸锰很快显现出较大的浅兰色斑色。

(见第98页上的彩色图片)

(碘——碘化钾试验)
试剂:
淀粉试纸。

溴溶液——将l毫升饱和溴水,用蒸馏水稀释至20毫升。

程序:
1.用溴溶液浸湿淀粉试纸。

2.撒试样于淀粉试纸上。

阳性反应:
碘化物显现出兰紫色。

(见第99页上的彩色图片)

(硫酸镁试验)
试剂:
溶液A——1M氢氧化钾。

溶液B——在25毫升蒸馏水中溶解12.7克碘和40克碘化钾,搅匀,再稀释到100毫升
程序:
1.将溶液A与超量的溶液B混合制成很深的褐色混合液。

2.取少量该混合液,加入2-3滴溶液A直至其变成淡黄色。

3.用此淡黄色溶液浸湿滤纸,再撒上少量试样。

阳性反应:
镁呈现出黄褐色斑点。

注意:溶液A和溶液B的混合液变质非常快,要现用现配。

(见第100页上的彩色图片)

试剂:
溶液A——2M氢氧化钠。

溶液B——溶解O.1克双硫脘脘于100毫升四氯化碳中。

程序:
1.用溶液A浸湿滤纸。

2.撒上少量试样。

3.加2-3滴溶液B。

阳性反应:
锌显现出木莓红色。

(见第101页上的彩色图片)
硝酸盐
试制:
1.二苯胺
2.浓硫酸
3.蒸馏水
程序:
1将试样置于白色滴试板上,加2-3颗二苯胺晶粒和一滴蒸馏水。

2.再加一滴浓硫酸。

阳性反应:
硝酸盐显现深兰色。

(见第102页上的彩色图片)
磷酸盐
试剂:
溶液A——溶解5克钼酸胺于100毫升冷蒸馏水中,倒入35毫升硝酸。

溶液B——溶解0.05克联苯胺采用碱或其盐酸盐于10毫升冰醋酸中,并用100毫升蒸馏水稀释溶液C——饱和醋酸钠溶液。

程序:
1.用溶液A浸湿滤纸并在烘箱中烘干。

2.加1-2滴试样,接着加一滴溶液B和一滴溶液C。

阳性反应:
磷酸盐显现兰色斑点或环。

(见第103页上的彩色图片)
硫酸盐
试剂:
1.氯化钡(5%)
2.盐酸(1:1)
程序:
1.将试样置于表面玻璃上或者陪替氏培养皿中,然后加2-3滴盐酸。

2.加1-2滴氯化钡。

阳性反应:
有白色沉淀物产生。

(见第l04页上的彩色图片)
硫(游离态)
试剂:
1.氢氧化钠稀溶液
2.氰化钾溶液(1%)
3.硫酸(1:3)
4.氯化铁稀溶液
程序:
1.样品制备与氯化物试验所述相同。

2.取几毫升样品放入陶瓷坩埚中,同附加入4-5滴氢氧化钠与其混合。

3.将坩埚置于热盘上使混合物蒸发变干,然后再加2-3滴氰化钾溶液,再次蒸发。

4.往蒸发剩余物中加3-4滴硫酸,再加氯化铁溶液。

5.硫存在时显现出明显的红色。

(见第105页上的彩色图片)
钴试验
第一步用罗谢尔盐浸湿滤纸
第二步将试样撒到滤纸上
第三步加亚硝基-R-盐。

阳性反应:粉红色
第四步矿物质混合物的阳性反应
铜试验
第一步用罗谢尔盐浸湿滤纸,然后将试样撒到滤纸上第二步加亚硝基-R-盐。

阳性反应:淡褐色环
铁试验
第一步用罗谢尔盐浸滤纸,然后将试样撒到滤纸上第二步加亚硝基-R-盐。

阳性反应:深绿色
第三步矿物质混合物的阳性反应
锰试验
第一步用溶液A浸滤纸
第二步撒上试样,停留一分钟,然后加溶液B 碘试验
第一步用淀粉溶液浸湿滤纸
第二步用溴溶液浸湿淀粉试纸
第三步将试样撒到试纸上
镁试验
第一步将溶液A与B混合制成褐色混合液,加入2-3滴溶液A直至其变成淡黄色第二步用此淡黄色溶液浸湿滤纸,撒上试样
第三步阳性反应:黄褐色斑点
锌试验
第一步用溶液A浸湿滤纸
第二步将试样撒到试纸上
第三步加2-3滴溶液B
硝酸盐试验
第一步用溶液A浸湿滤纸
第二步加2-3滴试样
第三步加1滴溶液B
第四步加1滴溶液C 阳性反应:呈现蓝色斑点或环硫酸盐试验
第一步将试样置于陪替氏培养皿中
第二步加1-2滴氯化钡。

阳性反应:产生白色沉淀第三步100倍显微镜下的白色沉淀物
硫试验
第一步加4-5滴氢氧化钠到几毫升试样上,在电炉上蒸发到干第二步加2-3滴氰化钾再次蒸发
第三步加3-4滴硫酸,再加2-3滴氯化铁溶液
第四步阳性反应:明显的红色
2.矿物质和其它成份的快速试验
碳酸盐
试剂:
1.盐酸(1:1)
2.水
程序:
1.取少量试样放在表面玻璃上或者陪替氏培养皿中。

2.加4-5滴冷盐酸,再在蒸汽浴上加热。

3.用手持式放大镜观察,有气泡产生。

(见第110页上的彩色图片)
氯化物
试剂:
1.硝酸银溶液(5%)
2.硝酸溶液(1:2)
3.氨水(1:1)
程序:
1.往100毫升烧杯内放入l-2克试样,再加30毫升硝酸,搅拌,并静置2-3分钟让其反应。

2.取2-3滴反应液放到陪替氏培养皿中,再加2-3滴硝酸银,即产生白色沉淀。

3.为了证实试验结果,加入3-5滴氨水,沉淀即溶解,整个白色沉淀消失。

(见第111页上的彩色图片)
盐(氯化钠)
试剂:
1.硝酸银溶液(5%)
2.硝酸溶液(1:2)
3.氨水(1:1)
4.标准氯化钠溶液(O、0.1、O.2、0.3%)
程序:
1.称1克样品,加l0O毫升蒸馏水,搅拌,而后用Whatman4号滤纸过滤。

2.用吸移管吸1毫升氯化钠溶液和8毫升硝酸溶液,搅拌,然后再加入1毫升硝酸银溶液。

3.搅拌并将试验样品与标准样品作比较。

这一试验应在5分钟内观察完毕。

阳性反应:
盐显现出白色混浊。

(见第112页彩色图片)
糖(蔗糖)
试剂:
1.蒽酮
2.浓硫酸
3.蒸馏水
程序:
1.取0.1克试样放入20毫升试管中,加4-5毫升蒸馏水。

2.握住试管,倾斜40°- 45°,沿试管壁加入蒽酮粉末0.05克。

3.仔细地加入2-3滴浓硫酸。

4.兰绿色表示蔗糖存在。

(见第113页彩色图片)
尿素
试剂:
1.尿素酶溶液——将0.2克尿素酶粉末溶解于50毫升蒸馏水中。

2.标准尿素溶液(0、1、2……5%)
3.甲酚红指示剂(0.1%)
程序:
1.称取10克试样,加100毫升蒸馏水,搅拌,然后用Whatman4号滤纸过滤。

2用吸移管吸2毫升标准溶液和试样分别放于白瓷滴试板上。

3.加2-3滴甲酚红指示剂,然后加2-3滴尿素酶溶液。

4.主其反应3-5分钟,若有尿素存在即显出深红紫色,且散开得象蜘蛛网似的;无尿素存在则显出黄色。

5.将试验样品与标准样品作比较。

此试验应在10-12分钟内观察完毕。

(见第114页彩色图片)

试剂:
1.溶液A——溶解1克P,P-苯甲叉-重-N,N-二甲基苯胺于100毫升冰醋酸内,然后用150毫升蒸馏水稀释
2.冰醋酸
3.双氧水(3%)
程序:
1.将几颗血粒试样置于载玻片上。

2用4体积的溶液A和1体积的3%双氧水混合(用时现配)
3.在试样上加1-2滴混合液。

4.如有血存在,血粒四周呈现深绿色,反之则为淡绿色。

采用低倍显微镜观察。

(见第115页彩色图片)
蹄或角
(快速试验)
试剂:
1.醋酸(1:1)
程序:
1.为了进行快速试验,挑选2-3粒琥珀色试样放入蒸发皿中。

2.往蒸发皿中加5毫升冰醋酸,让其静置60分钟。

3.若有蹄角存在,试样颗将仍然保持硬而坚韧。

明胶侧将变得软而膨胀。

(见第115-116页彩色图片)
皮革粉
(快速试验)
试剂:
1.钼酸铵溶液——溶解5克钼酸铵于100毫升蒸馏水中,再倒入35毫升硝酸。

程序:
1.挑选褐色到黑色的试样颗粒,放于陪替氏培养皿中。

2.加3-5滴钼酸铵溶液,然后让其静置5-10分钟。

3.皮革粉不会有颜色变化,而肉骨粉则显出绿黄色
(见第117页彩色图片)
尿酸
试剂:
1.硝酸(1:1)
2.氢氧化钠(50%)
程序:
1.将2-3克试样放入100毫升烧杯中,加50毫升蒸馏水,搅拌,然后让其静置2-3分钟。

2.将试样转移到蒸发皿中,并放在热盘上或者烘箱内加热到100℃左右。

3.往蒸发皿的边上加几滴(小滴)硝酸,让其流下以浸湿颗粒,然后蒸发0.5-1.0分钟使之变干。

(见第118页彩色图片)
尿素酶活性
(定性)
原理:
采用的是Gold Kist的方法。

大豆饼粕尿素酶的活性是通过在有苯酚红指示剂的情况下使尿素转化成氨气作定性测量的。

试剂:
1. 0.1M氢氧化钠
2. 0.05M硫酸
3. 尿素苯酚红溶液:溶解0.14克苯酚红于7毫升0.1M氢氧化钠和35毫升蒸馏水中。

溶解21克尿素(试剂级) 于300毫升蒸馏水中。

将两种溶液混合,再用0.05M硫酸滴定到琥珀色(PH=1)。

程序:
1.用0.05M硫酸将尿素苯酚红溶液调到琥珀色。

2.将一茶匙作过充分混合的标准大豆饼粕粉(含1、3、5、7、9、11%生大豆粉)和试样大豆饼粕放入一系列陪替氏培养皿中。

将试样放在中间的一个培养皿里。

3.加入5-8滴琥珀色苯酚红溶液,轻轻地旋动以使皿内的样品能均匀浸湿。

4.静置5分钟,然后将大豆饼粕粉试样与各种标准大豆饼粕粉样品作比较。

读标:
No.1稍有活性:散布着的红紫色颗粒很少。

No.2中等活性:约25%的表面复盖着红紫色颗粒。

No.3活性:约50%的表面复盖着红紫色颗粒。

No.4非常活性:约75%的表面复盖着红紫色颗粒。

No.5蒸炒过度:5分钟后看不见有红紫色出现。

让样品再静置25分钟,若仍无红紫色出现,该大豆饼粕即为蒸炒过度。

(见第119页彩色图片)
碳酸盐试验
第一步将少量试样置于陪替氏培养皿中
第二步加4-5滴盐酸。

阳性反应产生气泡
第三步比较不同矿物质来源的碳酸盐试验(上:石灰石,右:骨粉;下:牡蛎壳;左:磷酸盐岩)第四步在每种矿物上加4-5滴盐酸
第五步每种矿物中碳酸盐的阳性反应
氯化物试验
第一步往烧杯中放入1-2克试样,再加30毫升硝酸,搅拌,静置2-3分钟第二步取2-3滴反应液放入陪替氏培养皿中,再加2-3滴硝酸银
第三步阳性反应:白色沉淀
第四步加3-5滴氨水,白色沉淀即溶解
第五步确认反应结果:白色沉淀消失
盐试验
第一步将8毫升硝酸溶液和1毫升标准溶液混合
第二步加1毫升硝酸银,搅拌。

形成明显的白色混浊
第三步比较试验样品和标准样品
糖试验
第一步手持盛有试验溶液的试管,与桌面成40-45o角第二步将蒽酮粉末沿管壁加入试管
第三步仔细地加入2-3滴浓硫酸
第四步阳性反应:蓝绿色
尿素试验
第一步用吸移管吸1毫升标准尿素溶液和试样置于滴试板上第二步加2-3滴甲酚红指示剂
第三步加2-3滴尿素酶溶液
第四步静置3-8分钟,呈现深红紫色,象蜘蛛网一般扩散开来第五步比较试样和标准尿素样品
血试验
第一步第二步
将血粒置于载玻片上,在试样上加1-2滴试剂阳性反应:血粒四周呈现深绿色
蹄或角(快速试验)
比较用醋酸处理前后的试样
前蹄粉:试样颗粒保持硬而坚韧
皮革粉的快速试验
第一步取试样置于陪替氏培养皿中
第二步加3-5滴钼酸铵,静置5-10分钟
第三步皮革粉无颜色变化,肉骨粉则显出绿黄色尿素试验
第一步加50毫升蒸馏水到2-3克样品上,制备试样.搅拌,静置2-3分钟
第二步将试样转移到皿中,预热至约100℃.加几滴硝酸,蒸发至干
第三步阳性反应:加热时呈桔红色至深红色
第四步使蒸发皿冷却后,用沾有50%氢氧化钠溶液的细玻璃棒在颜色区内快速划动第五步确认反应结果:浓紫色几乎即现
尿素酶活性试验
第一步用0.1N硫酸调整尿素苯酚红溶液
第二步琥珀色的尿素苯酚红溶液
第三步一些标准大豆饼粕样品和中间的一个大豆饼粕试样
第四步加5-8滴琥珀色苯酚红溶液
第五步静置5分钟后观察
维生素的快速检测
这里介绍的检验方法取自文献资料,本人已对其中某些方法作了改进以派作特定用途。

由于维生素有水溶性和脂溶性两类,为了获得满意的检测结果,须用适当的溶剂将维生素化合物制成溶液。

为了使某种维生素的颜色特征明显有别于其它维生素,应采用多种试剂,一些维生素可用与药物、抗生素及矿物质相同的试验鉴别出。

维生素的细小颗粒与溶剂表面接触的反应区只有针尖大小,为了观察在如此之小的面积上所显现的颜色,要使用解剖显微镜。

记录下颜色反应的形式。

积累一些经验后,显微镜检人员就有能力判别色影的特点,从而增强其应用这些检测方法的信心。

这类检测方法的基本原理包括两种已使用成功了的试剂面。

一种是将滤纸放入小陪替氏培养皿,用试剂润湿,再将饲料撒在湿的表面上。

这种方法显现出较大的表面积,容易用显微镜仔细观察。

另一种可采用白瓷滴试板,试剂可直接混合在其空穴中。

然后将试样直接撒在试剂表面上。

使用带滴管的小试剂瓶便于操作。

不管哪种检测方法都简单迅速。

维生素、药物和抗生素大多都存在于同一饲料或预混料中。

附表介绍了用相同试剂检测的各种维生素、药物和抗生素所发生的反应。

反应方式应记录下来,并与表中所列的对比。

维生素A和红、黄卡诺费尔(carophyll)
试剂:
1.Sakaguchi试剂:将1克硼酸溶解于100毫升80%的硫酸中。

程序:
1.将0.2克试样或饲料放在白瓷滴试板上。

2.加入10毫升Sakaguchi试剂。

3.维生素显现深褐色。

如果维生素A已陈,有时需将饲料即维生素样品粉碎以便把维生A从小颗粒中释放出来。

4.红卡诺费尔显现深绿色。

5.黄卡诺费尔显现深紫罗兰色。

维生素A和红、黄卡诺费尔
采用SakMguchi试剂检测产生的阳性反应:
维生素A显深褐色,红卡诺费尔显深绿色,
黄卡诺费尔显深紫罗兰色。

核黄素(维生素B2)
试剂:
1.乙二胺(试剂级)
2.Sakaguchi试剂:与维生素A检测所用相同。

程序:
1.样品制备与抗坏血酸检测一项所述相同。

2.将1克样品放入白瓷滴试板。

3.用乙二胺或Sakaguchi试剂浸湿试样。

4.用乙二胺试剂,核黄素显现出由粉末产生的深黄色踪迹。

5.用Sakaguchi试剂;核黄素显现出桔黄色到黄色踪迹。

核黄素检测
抗坏血酸(维生素C)
试剂:
1.硝酸银酒精溶液:将3克硝酸银溶解于100毫升乙醇(95%)中。

2.四氯化碳或氯仿。

程序:
1.用四氯化碳或氯仿将饲料中的矿物质和有机物浮选分离开来。

2.取0.1克矿物质放在白瓷滴试板上。

3.用硝酸银酒精溶液浸湿试样。

4.沉淀物的兰黑色表示有抗坏血酸存在。

抗坏血酸检测
用硝酸银洒精溶液代测,阳性反应产生兰黑色沉淀物。

维生素K(甲萘醌和亚硫酸氢钠甲萘醌)
试剂:
1.乙二胺(试剂级)
2.四氯化碳
程序:
1.试样制备与抗坏血酸检测相同。

2.取0.1克样品放在白瓷滴试板上。

3.用乙二胺试剂将样品浸湿。

4.甲萘酮显现不明亮灰绿色到黄褐色。

5.亚硫酸氢钠甲萘醌显现橄榄绿色。

甲萘醌和亚硫酸氢钠甲萘醌检测
用乙二胺试剂检测甲萘醌,阳性反应用乙二胺试剂检测亚硫酸氢钠甲萘醌,
显现不明亮灰绿色到黄褐色。

阳性反应显现橄榄绿色。

注意:(JSK溶液的替代品)
我们收到许多读者提出的对JSK溶剂混合液的需求。

由于中国使用者很难从泰国进口该溶液,所以我们已请美国加利福尼亚州大学的普兰·沃拉教授建议代替JSK的其它溶剂。

下面是沃拉教授建议的可使大部分植物浮起的溶剂。

您可以试一下,看哪种更适合您的需求。

饲料添加剂的定性检测
自第二次世界大战以来,饲料添加剂(如药和抗生素)迅速发展,被广泛地应用于动物饲养中,因为它们能加快动物的生长速度,提高增重效率.然而,尽管添加剂使用得当非常有益,但它们对动物的健康还是有潜在危险的。

因为这个原因,FAO所订“饲料生产规程”(GMP,即“Good Manufacturing Practices”)的现行规定中要求饲料生产厂家对添加剂要应用处理适当,并对产品中的含量等情况进行适当监控。

快速定性检测的早斯开创工作大部分是美国饲料显微镜检工作者协会做的。

其中许多检测方法,没有经过专门化学训练并且只有很少仪器设备的工厂检验人员也可以采用。

定性检测的资料主要来源于美国饲料显微镜检工作者协会出版的“饲料添加剂概要(1980-1983)”、“饲料显微镜分析手册”以及历届年会论文。

这里介绍的分析方法,可帮助饲料显微镜检人员证实经过注册的加药饲料中到底是否含有某种作为饲料成分添加的药物。

检测颜色是唯一能将某种区物从其它饲料组中鉴别出来的特征。

氨丙嘧吡啶(安普洛里)
试剂:
1.溶液A——将1.25克铁氰化钾和3克氢氧化钠溶解于500毫升蒸馏水中。

2.溶液B——将50毫升2.7-苯二酚溶解于500毫升甲醇和150毫升蒸馏水中。

3.溶液C——水、甲醇和氯仿(1∶1∶1)。

程序:
1.将4毫升溶液A与13毫升溶液B混合。

2.将8-10克试样加到30毫升溶剂C中,摇动1分钟,然后静置1分钟让其沉淀。

3.将5毫升试样的上层清液滗入溶液A和溶液B的混合液,并充分混合。

4.若有氨丙嘧吡啶存在,溶液即呈紫色。

(见第146页彩色图片)
对氨基苯胂酸或对氨基苯胂酸钠
试剂:
1.浓盐酸
2.0.1%亚硝酸钠
3.0.5%氨基磺酸铵
4.0.1%N-1-苯基乙烯二胺二盐酸盐水溶液
程序:
1.将0.1克试样和4毫升水放到蒸发皿内,边加热边摇动,再加入1毫升浓盐酸,混合并过滤。

2.往滤出液中加2毫升0.1%亚硝酸钠溶液,混合均匀后静置5分钟;再加入2毫升0.5%氨基磺酸铵溶液,混合均匀后静置2分钟。

3.再加入1毫升0.1%双盐酸化N-1-苯基乙烯水溶液。

4.如有对氨基苯胂酸存在,即呈紫色。

(见第147页彩色图片)
杆菌肽
(杆菌肽锌和甲叉双水杨酸杆菌肽)
溶剂:
1.茚满三酮溶液——将200毫克茚满三酮溶解于100毫升正丁醇中。

2.醋酸盐缓冲溶液PH4——4ml0.2M醋酸钠溶液和16ml0.2M醋酸的混合液
程序:
1.用茚满三酮溶液渗透滤纸(Whatman 2号)然后放入100℃烘箱中烘5分钟。

2.将0.1克试样放在滤纸中央,加1滴醋酸盐缓冲液,再放入烘箱内烘5分钟。

3.若有杆菌肽存在,即呈现紫粉红色。

(见第148页彩色图片)
红霉素
(硫氰酸红霉素)
试剂:
与杆菌肽检验相同。

程序:
1.按照杆菌肽检验的程序做。

2.若有红霉素存在,即呈现紫粉红色。

(见第148页彩色图片)
3-(2-喹嗯啉基甲叉)—N1、N4—二氧化物
(卡巴多,即肥猪公)
试剂:
1.溶液A——将4克氢氧化钠溶解于1000毫升甲醇中。

2.溶液B——将80克氯化亚锡(Sncl2)溶解于80毫升浓盐酸中,然后用甲醇稀释到l000毫升。

程序:
1.将l克试样与10毫升溶液A混合摇匀,即呈现出黄色。

2.加入20毫升溶液B,混合。

3.若有卡巴多存在,溶液将由黄变兰,然后变成紫色。

(见第149页彩色图片)
金霉素、土霉素和维生素A
试剂:
改进的Sakaguchi试剂——将10克硼酸溶解于300毫升蒸馏水中,边仔细地加水边搅拌,然后再加入700毫升浓硫酸(贮存在冰箱里)。

程序:
1.将每种试样取少量放在滴试板上或陪替氏培养皿里,加2-3滴Sakaguchi改良液。

2.若有金霉素存在,试剂一加入即呈现深紫蓝色。

3.若有土霉素存在,试剂一加入立即出现亮红色。

4.维生素A小粒将呈现出与金霉素相同的颜色,但保持其球形特征。

上述观察的速度应尽可能决。

反应采用低倍显微镜观察。

(见第150页彩色图片)
痢特灵
试剂:
1.4%氢氧化钾溶液——将4克氢氧化钾溶解于96毫升乙醇或甲醇中。

2.N,N—二甲替甲酰胺
3.Wirthmore溶液——将10毫升氢氧化钾溶液与90毫升N,N二甲替甲酰胺混合(现用现配)。

程序:
1.将约25毫升Wirthmore溶液放人50毫升的烧杯内。

2.用刮勺取一定量的试样,拿在靠近烧杯上方,每次轻轻敲抖掉少量试样于烧杯中,在样粒沉淀过程中注意观察。

3.痢特灵颗粒在沉降过程中呈现兰色踪迹。

为了观察清楚,试验须在良好光照条件下将样品放在眼睛高度进行。

(见第151页彩色图片)
呋喃西林
试剂:与痢特灵试验相同。

程序:
1.按痢特灵试验的相同程序做。

2.若有呋喃西林存在,试粒沉降时立即出现亮红色踪迹。

(见第151页彩色图片)
青霉素或普鲁卡因青霉素
试剂:
1.溶液A——pH4醋酸盐缓冲溶液
2.溶液B——Ehrlich试剂:将2克对二甲胺基苯甲醛溶解在100毫升20%盐酸中。

程序:
1.将少量试样放在陪替氏培养皿中或白色滴试板上,加2-3滴溶液A,再加2-3滴溶液B。

2.当普鲁卡因青霉素晶粒透明并完全溶解在Ehrlich试剂中时即呈现出浓黄色。

(见第152页彩色图片)
胡椒嗪
试剂:
1.1M氢氧化钠——将4克氢氧化钠溶解于50毫升蒸馏水中,用95%乙醇定容到100毫升。

2.溶液A——将0.03克1,2-萘醌-4-磺酸钠溶解于20毫升水中。

程序:
1.将试样放在滤纸上,用1M氢氧化钠和溶液A浸湿。

2.出现亮红色即表示有胡椒嗪存在。

(见第153页彩色图片)
吩噻嗪(硫化二苯胺)
试剂:
1.二甲替甲酰胺(DMF)和氢氧化钾:将10份DMF与1份4%的氢氧化钾酒精溶液(4克KOH溶于l00毫升乙醇或甲醇)混合。

2.Sakaguchi试剂:1克硼酸溶于100毫升80%的硫酸中。

程序:
1.将0.1克试样放在陪替氏培养皿中。

2.加3-5滴二甲替甲酰胺——氢氧化钾试剂或Sakaguchi试剂。

阳性反应:
1.二甲替甲酰胺——氢氧化钾试剂:吩噻嗪呈现出绿黄色。

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