黄柏中小檗碱的提取、分离与鉴定（2010）实验报告

黄柏中⼩檗碱的提取、分离与鉴定（2010）实验报告
实验三黄柏中⼩檗碱的提取、分离与鉴定
(⼀)实验⽬的要求
学习和掌握⼩檗碱的结构特点和特殊的理化性质，及⼩檗碱的⼀般提取精制⽅法。

(⼆)实验的基本原理
1.⼩檗碱的提取原理
根据⽔溶性季铵碱在⼄醇和碱⽔中溶解度⼤性质，利⽤⼄醇回流法和碱⽔提取法进⾏提取。

2.⼩檗碱的分离原理
(1)利⽤⼩檗碱的盐酸盐在⽔中溶解度⼩（1：500），采⽤盐析法使⼩檗碱沉淀析出，达到纯化的⽬的。

(2)利⽤盐析法分离⼩檗碱
(三)实验内容
1. ⽤⼄醇回流提盐析法、醇索⽒提盐析法和碱渗漉提盐析法提取黄柏中盐酸⼩檗碱。

2. 溶剂重结晶精制盐酸⼩檗碱。

3. 薄层显⾊反应鉴定盐酸⼩檗碱
(四)实验药材仪器与试剂
1. 实验药材黄柏30g。

2. 仪器：250ml烧瓶、500ml烧杯，冷凝管、渗漉筒250ml，粉碎机、减压过滤装置、纱布、漏⽃，层析缸等。

3. 试剂：氧化钙，氨⽔，NaCI，盐酸、H2SO4，三氯甲烷，甲醇，⼄醇，改良碘化铋钾等。

(五)实验步骤及现象
Day 1 （2011-5-21）
1.⼩檗碱的提取(醇索⽒提盐析法)
称取黄柏(图3-1)15.00g，粉碎成粗粉，⽤滤纸包成筒状，置于索⽒提取器(图3-2)中(长度要适宜，使滤纸筒正好位于提取器上下两孔之间)。

⽤棉花包住提取器侧管，防⽌蒸汽接触使侧管的温度过⾼。

⼀开始再烧瓶中加⼊105ml的95%⼄醇，量不够，回流4-5次颜⾊仍较深,后⼜补加少许。

⽔浴提取，刚开始提取液是黄⾊的（图3-3），回流七次后颜⾊变淡，⼤概⽤三个⼩时。

回流过程中由于溶沸腾，有些蒸汽直接从下⼝进⼊提取器，所以如果观察到颜⾊变淡反应程度不⼀定⾼（图3-4）。

取出烧瓶中的提取液加⽔约40mL，滤出沉淀，沉淀物深黄⾊，很黏。

向滤液中加⼊6.05g NaCl固体,溶解后静置过夜,得到黄⾊的固液混合物,固体很少抽滤⼲燥,得到粗提物(3-5)。

Day 2 （2011-5-22）
2．精制
产物过少，没有精制。

3.鉴定
（1）检识反应取盐酸⼩檗碱少许，加蒸馏⽔3ml，缓缓加热。

第⼀次取样过多，⼤量固体没有溶解。

后重新取样，溶解显黄⾊(3-7),和另⼀组已加碱液的溶液对照明显（3-6），加氢氧化钠试液2滴，显橙⾊，但不明显(3-8)，溶液放冷，加丙酮4滴，即发⽣混浊(3-9)。

（2）薄层⾊谱鉴定
吸附剂：硅胶GF254薄层板（5.0cm X 10.0cm）。

样品：⾃制盐酸⼩檗碱（⽤甲醇溶解）
展开剂：三氯甲烷-甲醇-氨⽔（14∶4∶0.5）
两个样品同时展开,左侧为提取样品,右侧为精制后的春样品。

显⾊：a.展开前，点样后，先在可见光下观察（3-10），有亮点的痕迹，拖尾现象较明显，粗体样品的Rf值较⼤（3-11），然后在紫外光下观察，可以看到样品的移动痕迹。

b.喷改良碘化铋钾液显⾊，在荧光下观察，样品吸光明显（3-13）。

(六)结果计算及分析
⼩檗碱得率：滤纸+产物重0.4603g 滤纸重0.4516g
原料重15.00g
得率=（0.4603-0.4516）/15.00=0.58%（过少）
原因：1、提取时间不够；
2、溶剂量少；
3、溶剂（95%⼄醇）极性⼩；
4、装滤纸筒、过滤等过程损失。

⽐移值：实验组Rf=4.1/7.6=0.539
对照组Rf=3.4/7.6=0.447
原因：溶剂极性⼩，含⾮极性杂质较多，样品和硅胶板亲和⼒⼩，保留时间短，随展开剂移动较快。

（七）⼼得体会
合作不仅是⼩组成员之间的，也是每个⼩组之间的。

1-111-12
1-18 1-17
3-9
3-11 3-12。