常见微生物指标检测—菌落总数的测定(食品微生物检验技术课件)

36 3.6×103（cFu/mL）
（4）根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度， 本次实验分别选取1：10；1：100；1：1000三个稀释液，以吸取该稀释度的吸 管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。 （ 5 ） 稀 释 液 移 入 平 皿 后 ， 应 及 时 将 凉 至 460C 营 养 琼 脂 培 养 基 注 入 平 皿 15ml~20mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释 液（不含样品）的灭菌平皿内作空白对照。 （6）等琼脂凝固后，翻转平板，置（36±1）0C恒温箱内培养（48±2）h取出， 计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1g（1mL）样品所含菌落总数。
1、菌落总数检验程序
2、检样稀释及培养
（1）以无菌操作，将检样25mL放于含有225mL灭菌蒸馏水水的三角锥瓶 中，摇匀，做成1：10的均匀稀释液。 （2）另取1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭 菌水（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做 成1：100的稀释液。 （3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递 增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。
3、菌落计算方法
（1）菌落计数方法 做平板菌落计数时，可用肉眼观查，必要时用放大镜检查，以防
遗漏。在记下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总 数。
（2）菌落计数的报告
酱油中细菌总数结果记录
稀释度 平板
10-1
1
2
10-2
12Biblioteka 10-312
菌落数 ＞300 ＞300
35 37
2
未检出
平均菌落数 细菌总数
1、学习食品中细菌总数测定的技术方法； 2、掌握食品细菌总数的结果报告方式。
二、实验材料
1、仪器：电热恒温培养箱、恒温水浴锅、托盘天平、 电炉、灭菌吸管、灭菌三角瓶、灭菌平皿、灭菌试管、 试管架、酒精灯、75%酒精棉球、记号笔；
2、试剂：75%乙醇、生理盐水或无菌水、营养琼脂培 养基等
三、实验方法
细菌检测的意义
细菌总数是指食品检验经过处理，在一 定条件下（培养基成分、培养温度和时间、pH、 需氧性质等）培养后，所得1mL（g）检验中 所含细菌菌落总数。
食品菌落总数可作为判定食品被污染程 度的指标，同时，也可以用于观察细菌在食品 中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评 价时提供依据。
一、实验目的