HPLC法测定雾化吸入用聚乙烯塑料安瓿

３ １５４
３ １ ３ 重复性和中间精密度
选取 ３ꎬ５ － 二叔丁基 － ４ － 羟基苯甲醛进行试验ꎮ
低密度聚乙烯药用 ３ ｍＬ 安瓿 ３５ 支ꎬ混匀于容器中ꎬ
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第 ３４ 期
２０２２ 年 １２ 月
Ｎｏ ３４
基金项目:上海市 ２０１８ 年度“ 科技创新行动计划” 产学研医合作领域项目ꎻ项目名称:吸入创新药物研发与
儿童吸入药物临床评价ꎻ项目编号:１８ＤＺ１９１０６００ꎮ
作者简介:邵奇(１９８６— ) ꎬ男ꎬ上海人ꎬ高级工程师ꎬ博士ꎻ研究方向:生物医药ꎮ
∗通信作者:毛毅斌(１９７１— ) ꎬ男ꎬ上海人ꎬ高级工程师ꎬ硕士ꎻ研究方向:生物医药ꎮ
抗氧剂组分抗氧剂 １３１０、１０１０、３３０、１０７６、１６８ 及 ３ꎬ５ －
二叔丁基 － ４ － 羟基苯甲醛、３ － ( ３ꎬ５ － 二叔丁基 － ４ － 羟
基苯基) 丙酸等的定量检测 [６－７] ꎬ并考察了这些抗氧
剂在稳定性期间的浸出变化ꎬ为同类雾化吸入产品的
制剂开发提供参考ꎮ
１ 仪器与试剂
１ １ 实验仪器
２ 实验
２ １ 标准品贮备液制备
２ １ １ 混标中间溶液
梯
取 ７ 种抗氧剂适量ꎬ用乙腈溶解并在 １０ ｍＬ 的容
度
量瓶中定容ꎬ用乙腈制备质量浓度为 １０ μｇ / ｍＬ 的混
０ ００
３０
３ ００
２０
２ ００
３ ５０
２０ ００
２５ ００
２ １ ２ 内标中间溶液
称取抗氧剂 ３０ ０２３ ８３ ｍｇ 于 ２５ ｍＬ 容量瓶中ꎬ乙
果均未检出相关抗氧剂ꎮ 结果表明ꎬ该方法准确、稳定、检测灵敏度高ꎮ
关键词:聚乙烯塑料安瓿ꎻ抗氧剂ꎻ吸入溶液ꎻ浸出物与提取物
中图分类号:Ｒ９４４ 文献标志码:Ａ
０ 引言
根据世卫组织制定的 Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ Ｆｏｒ Ａｓｈｔｍａ
(ＧＩＮＡ) 指导原则ꎬ短效 β ２ 受体激动剂药物能够快速
７０
８０
０
１００
３０
７０
０
２０ ５０
标中间溶液ꎮ
７０
３０
１００
３０
７０
３ 实验结果
腈溶解定容至刻度ꎬ移取定容液 ５ ３５０ μＬ 于 ５０ ｍＬ 容
３ １ 方法学验证
量瓶中ꎬ再用乙腈稀释至刻度得质量浓度为 １００ μｇ /
２ ２ 提取样品制备
３ １ １ 线性关系试验
选取 ３ꎬ５ －二叔丁基 － ４ －羟基苯甲醛进行试验( 见
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第 ３４ 期
２０２２ 年 １２ 月
Ｎｏ ３４
Ｄｅｃｅｍｂｅｒꎬ２０２２
江苏科技信息科学与社会
ＲＤ ＴＭ ꎬ５６９１ － ０１ ) ꎻ 抗 氧 剂 １６８ ( ＡＣＣＵＳＴＡＮＤＡＲＤ ＴＭ ꎬ
５６９０ －０１) ꎻ抗氧剂 ３３０( ＡＣＣＵＳＴＡＮＤＡＲＤ ＴＭ ꎬ１３４８７) ꎻ
Ａ－４
２ ８０９
Ｂ－１
２ ７８１
Ｂ－３
２ ９０４
Ａ－５
重复性 ＲＳＤ / ％
２ ８２０
２ ８０５
２ ８６９
Ｂ－４
２ ８０５
Ａ－６
３ꎬ５－二叔丁基－４－羟基苯甲醛 / ( μｇｍＬ －１ )
２ ８０８
Ｂ－５
２ ５４６
２ ８３２
Ｂ－６
４ ４
２ ６５０
重复性 ＲＳＤ / ％
中间精密度 ＲＳＤ / ％
０ ００７ ９ μｇ / ｍＬꎮ 参考相容性指导原则考察了 ３ 种模拟提取条件 ５０％乙醇水溶液、ｐＨ ３ ０ 磷酸盐缓冲
溶液、正己烷下的迁移水平ꎮ 该方法回收率在 ９２ ７％ ~ ９５ ０％ꎬＲＳＤ 在 １ ２％ ~ ２ ７％ꎮ 利用该方法可
以有效完成 ７ 种抗氧剂的分析ꎬ并能够检测硫酸沙丁胺醇雾化吸入溶液制剂中的浸出物水平ꎬ检测结
２
３
１ ５
３ ０
１５９ ７９９ ６７
２９６ ２４９ ９７
４
４ ５
５
４３９ ６７１ １４
相关系数( Ｒ)
５ ４
５３０ １９５ ９８
０ ９９９ ７
同法配置空白样ꎬ考察目标物出峰保留时间ꎬ检测结
果ꎬ如表 ３ 所示ꎮ
表 ３ 抗氧剂专属性结果
化合物名称
３ꎬ５－二叔丁基－４－羟基苯甲醛
出峰时间( 保留时间:ｍｉｎ)
Ｃ３１００８６４ꎬ分析纯) ꎻ３ꎬ５ － 二叔丁基 － ４ － 羟基苯甲醛
( ＣＮＷꎬＢ０６３０００５) ꎻ３ －(３ꎬ５ － 二叔丁基 － ４ － 羟基苯基)
丙酸 ( ＡｌｆａＡｅｓａｒꎬ １０２０５１４４ ) ꎻ 抗 氧 剂 １０１０ ( ＡＣＣＵＳＴ
ＡＮＤＡＲＤ ＴＭ ꎬ５６９２ － ０１) ꎻ 抗氧剂 １０７６ ( ＡＣＣＵＳＴＡＮＤＡ
摘要:文章采用 ＨＰＬＣ 法建立雾化吸入用聚乙烯塑料安瓿中 ７ 种抗氧剂的迁移及浸出水平的检测
方法ꎬ并进行分析方法验证ꎬ在完成验证的基础上对迁移物和浸出物进行检测ꎮ 结果表明:该方法
测定的 ７ 种抗氧剂具有良好的线性关系ꎬＲ≥０ ９９ꎬ检出限( ＬＯＤ) 和定量限( ＬＯＱ) 分别为 ０ ００２ ４ 和
料ꎬ应根据国家药监局 ２０２０ 年印发的« 化学药品注射
剂生产所用的塑料组件系统相容性研究技术指南» 要
求ꎬ开展相关的提取物与迁移物研究ꎬ考察产品在稳
定性周期内的相容性ꎮ 本文结合指导原则的要求ꎬ对
硫酸沙丁胺醇雾化吸入溶液与具有良好生物相容性
的聚乙烯塑料安瓿包装组成的产品开展了相容性研
究 [３－５] ꎬ主要考察了聚乙烯材料的塑料安瓿中潜在的
质量浓度 / ( μｇｍＬ )
化合物响应值
６８ ０１１ ７６
ｙ ＝ ９６ ７６９ ３ｘ＋７ ０６４ ９
－１
３ １ ２ 专属性试验
选取 ３ꎬ５ － 二叔丁基 － ４ － 羟基苯甲醛进行试验ꎮ
低密度聚乙烯药用 ３ ｍＬ 安瓿 ３５ 支ꎬ混匀于容器中ꎻ取
２ ０ ｍＬ 于 ４０ ｍＬ 容器中ꎬ加入 ３ ０ ｍＬ 超纯水混匀ꎻ加
Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ －Ｃ８ 柱(４ ６ × １５０ ｍｍꎬ５ μｍ)ꎻ０ １％磷酸盐
药信 谊ꎬ ＬＤＰＥ３０２０Ｄ 安 瓿 ＸＥ２５４５Ｌ２１、 ＸＧ２０４５Ｋ２１、
２７５ ｎｍ保持 １５ ｍｉｎꎬ２２５ ｎｍ 保持 ５ ｍｉｎꎬ２７５ ｎｍ 直至结
ＴＭ
ＸＥ２７４５Ｌ２１) ꎻ 硫 酸 沙 丁 胺 醇 雾 化 吸 入 溶 液 样 品
μｇ / ｍＬ的标准曲线工作液ꎮ 在选定的色谱条件下进
５ ０ ｍＬ 正己烷萃取ꎬ 合并萃取液至氮吹管中ꎻ 加 入
行检测ꎬ考察各目标物浓度与峰面积之间的线性关系
１ ０ ｍＬ 乙腈ꎬ４０ ℃ 氮吹至 １ ０ ｍＬ 刻度下ꎻ再用乙腈
定容至 １ ０ ｍＬꎬ摇匀制得空白样品 １ꎬ２ꎬ３ꎮ
( 线性范围参考« 中国药典»２０２０ 年版 ９１０１ 药品质量
ＲＳＤ≤２０％) ꎮ
属性试验方法配置加标样品 Ｂꎮ 同法各配置 ６ 份平
要求ꎬ 接 受 标 准 为 重 复 性 ＲＳＤ ≤ １５％ꎬ 中 间 精 密 度
表 ４ 抗氧剂重复性和中间精密度试验结果
序号
Ａ－１
３ꎬ５－二叔丁基－４－羟基苯甲醛 / ( μｇｍＬ －１ )
序号
２ ７２９
Ｂ－２
Ａ－２
Ａ－３
２ ５ ｍＬ:２ ５ ｍｇ ( 上药信谊ꎬ２０３０７０１ － ４、２０３０７０２ － ４、
束ꎻ流速 １ ５ ｍＬ / ｍｉｎꎻ柱温为 ３０ ℃ ꎻ进样量为 ５０ μＬꎮ
表 １ 流动相梯度表
２０３０７０４ － ４) ꎮ
时间 / ｍｉｎ 流动相 Ａ 质量分数 / ％ 流动相 Ｂ 质量分数 / ％
第 ３４ 期
２０２２ 年 １２ 月
江苏科技信息
Ｊｉａｎｇｓｕ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ
Ｎｏ ３４
Ｄｅｃｅｍｂｅｒꎬ２０２２
ＨＰＬＣ 法测定雾化吸入用聚乙烯塑料安瓿中
抗氧剂的含量研究
邵 奇ꎬ周雅茹ꎬ孙宁云ꎬ毛毅斌 ∗
( 上海上药信谊药厂有限公司ꎬ上海 ２０１２０６)
２ ３ 色谱条件
３００( ＴＣＩꎬ１３０５６) ꎻ低密度聚乙烯药用 ３ ｍＬ 安瓿( 上
溶液为流动相 Ａꎬ乙腈为流动相 Ｂ(见表 １)ꎻ检测波长
抗氧 剂 ３１１４ ( ＡＣＣＵＳＴＡＮＤＡＲＤ ꎬ １３０５６ ) ꎻ 抗 氧 剂
安 捷 伦 ＨＰＬＣ１２６０ 高 效 液 相 色 谱 仪ꎻ 安 捷 伦
２ ７
３ ５
３ １ ４ 加标回收率试验
选取 ３ꎬ５ － 二叔丁基 － ４ － 羟基苯甲醛进行试验ꎮ
１００ μｇ / ｍＬ 的内标中间溶液混匀ꎬ调节 ｐＨ<２ ０ꎬ分 ３
溶液ꎬ其中 ３ 份加入 １０ μｇ / ｍＬ 混标中间溶液 ６０ μＬꎻ
下ꎬ用乙腈定容至 １ ０ ｍＬꎬ取样检测ꎮ 检测结果如表
瓿各 ４ 支ꎬ均匀剪碎后置于容器中ꎬ按照空白制备方
为线性相关系数 Ｒ≥０ ９９) ꎮ
标准分析方法验证指导原则中的相关要求ꎬ接受标准
样品制备:取 ３ 批次低密度聚乙烯药用 ３ ｍＬ 安
法配置得样品溶液 １、２、３ꎮ
化合物名称
３ꎬ５－二叔丁基－４－羟基苯甲醛
线性方程
序号
表 ２ 抗氧剂线性试验结果
１
０ ６０
酸盐缓冲溶液、正己烷 ３ 种溶液ꎬ分别置于 ６０ ℃ 烘箱
μＬꎬ５４０ μＬꎬ加入质量浓度为 １００ μｇ / ｍＬ 的内标中间
ｍＬ 的内标中间溶液( 内标不参与计算) ꎮ
表 ２) ꎮ 取混标中间溶液 ６０ μＬꎬ１５０ μＬꎬ３００ μＬꎬ４５０
空白制备:取 １２０ ｍＬ ５０％乙醇水溶液、ｐＨ ３ ０ 磷
也逐渐替代玻璃安瓿用于注射液、滴眼液、雾化吸入
液等小容量液体制剂的主流包材
[３]
ꎮ
目前ꎬ关于聚乙烯包装的研究主要集中在注射液
和滴眼液等产品ꎬ对于雾化吸入用聚乙烯塑料的研究
相对较少ꎬ部分研究者根据相关管理规定和研究内容
对塑料材料中的塑化剂及抑菌剂等做了相应的质量
控制
[４]
ꎮ 作为雾化吸入制剂的直接接触药品包装材
松弛气管平滑肌ꎬ扩张支气管ꎬ其中硫酸沙丁胺醇吸
入更能够有效地缓解哮喘症状ꎬ是哮喘疾病治疗的首
选药物 [１] ꎮ 硫酸沙丁胺醇雾化吸入溶液是临床应用
中较为常见的吸入治疗方法之一ꎬ其操作简单和给药
剂量小等优势已被广泛认可
[２]
ꎮ 随着吹制 － 灌装 － 密
封三合一技术( Ｂｌｏｗ￣Ｆｉｌｌ￣ＳｅａｌꎬＢＦＳ) 的应用ꎬ塑料安瓿
入 ３００ μＬ 质量浓度为 １０ μｇ / ｍＬ 的混标中间溶液ꎻ和
２０ μＬ 质量浓度为 １００ μｇ / ｍＬ 的内标中间溶液混匀后ꎬ
调节 ｐＨ<２ ０ꎻ分 ３ 次ꎬ每次加入 ５ ０ ｍＬ 正己烷萃取ꎬ
合并萃取液至氮吹管中ꎻ加入 １ ０ ｍＬ 乙腈ꎬ４０ ℃ 氮气
吹至 １ ｍＬ 刻度以下ꎬ用乙腈定容至 １ ０ ｍＬꎬ取样检测ꎮ
述步骤完成样品配置后ꎬ分别加入 ２０ μＬ 质量浓度为
标准为平均回收率 ７０％ ~ １３０％ꎬ回收率 ＲＳＤ≤１５％) ꎮ
１０ μｇ / ｍＬ 混标中间溶液 ４５０ μＬꎻ１ 份待用ꎮ 按照上
溶 液 ２０ μＬꎬ 再 用 乙 腈 配 置 成 质 量 浓 度 为 ０ ６０
放置 ３ ｄꎻ取出后放置室温冷却ꎬ从对应溶液中分别取
μｇ / ｍＬꎬ １ ５ μｇ / ｍＬꎬ ３ ０ μｇ / ｍＬꎬ ４ ５ μｇ / ｍＬꎬ ５ ４
出 ７ ０ ｍＬ 浸泡于 ４０ ｍＬ 容器中ꎬ分 ３ 次ꎬ每次加入
次ꎬ每次加入 ５ ０ ｍＬ 正己烷萃取ꎬ合并萃取液至氮吹
按重复性和中间精密度加标样品 Ｂ 的方法配置 １０ 份
管中ꎻ加入 １ ０ ｍＬ 乙腈ꎬ４０ ℃ 氮气吹至 １ ｍＬ 刻度以
３ 份加入 １０ μｇ / ｍＬ 混标中间溶液 ３００ μＬꎻ３ 份加入
５ 所示( 回收率参考« 中国药典» ２０２０ 年版 ９１０１ 药品
高效液相色谱仪 ( 安捷伦 ＨＰＬＣ１２６０) ꎻ 电 子 天
平ꎻ氮吹管ꎮ
１ ２ 实验试剂
色谱柱为 Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ － Ｃ８ Ｃｏｌｕｍｎꎬ４ ６ ×
１５０ ｍｍꎬ５ μｍꎻ磷酸( 分析纯) ꎻ乙醇( 分析纯) ꎻ乙腈
( ＣＮＷꎬ Ｄ６６７１４４０ꎬ 分 析 纯 ) ꎻ 正 己 烷 ( ＣＮＷꎬ
Ｄｅｃｅｍｂｅｒꎬ２０２２
江苏科技信息科学与社会
按照专属性试验方法配置加标样品 Ａꎮ 再取低密度
示( 重复性和中间精密度参考« 中国药典» ２０２０ 年版
聚乙烯药用 ３ ｍＬ 安瓿 ６５ 支ꎬ混匀于容器中ꎬ按照专
９１０１ 药品质量标准分析方法验证指导原则中的相关
行样ꎬ计算 １２ 份浓度值的 ＲＳＤꎮ 检测结果ꎬ如表 ４ 所