蛋白激酶BIN2的纯化及活性分析

蛋白激酶BIN2的纯化及活性分析
袁敏;齐玉荣;王瑞菊
【期刊名称】《生物技术通报》
【年(卷),期】2017(033)007
【摘要】BIN2是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在油菜素内酯(BR)信号转导中发挥重要作用.为了获得具有激酶活性且不带标签的BIN2蛋白,将BIN2基因构建到带eXact标签的pPAL8表达载体上,获得BIN2基因的原核表达载体eXact-BIN2,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3).摸索合适的诱导条件后成功诱导出51 kD的eXact-BIN2蛋白.经eXact纯化介质纯化并切除标签,获得质量较高、不带标签的BIN2蛋白.该BIN2蛋白具有较高的激酶活性,能够在体外磷酸化MBP-BZR1蛋白.%BIN2 is a kind of Ser/Thr protein kinase,and plays important roles in BR signal transduction pathway. In order to obtain the active and tag-free BIN2 protein,the BIN2 gene was cloned into the prokaryotic expression vector pPAL8 to obtain BIN2-pPAL8 expression vector. The correct plasmid BIN2-pPAL8 was transformed into E.coli expression strain BL21(DE3). After exploring the proper induction conditions,the 51 kD eXact-BIN2 protein was successfully induced and purified using eXact purification system. The high-quality and tag-free BIN2 protein was obtained through cleaving the eXact tag. The purified BIN2 protein is highly active,which could phosphorylate MBP-BZR1 in vitro.
【总页数】5页(P145-149)
【作者】袁敏;齐玉荣;王瑞菊
【作者单位】华北理工大学生命科学学院基因组学与计算生物学研究中心,唐山063000;河北师范大学生命科学学院,石家庄 050024;河北师范大学生命科学学院,石家庄 050024
【正文语种】中文
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