G418筛选tzmbl细胞适宜浓度实验
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4.
表1含有不同剂量组G418的DMEM培养基配制
0
1
2
3
4
5
G418体积(பைடு நூலகம்L)
100
(从前一管中吸取,后面类推)640
5000
5000
5000
5000
DMEM体积(μL)
900
9360
5000
5000
5000
5000
管中G418浓度(μg/mL)
50000
3200
1600
800
400
200
每孔G418含量(μg)
对照
C
D
表2不同剂量组G418的DMEM培养基加入96孔板
三、2~3天更换新鲜培养基,培养2周,选择细胞全部死亡的最低G418浓度作为细胞筛选的浓度。最终确定筛选用G418浓度为---------μg/mL。
2.G418储液浓度为500mg/mL=500μg/μL,先用DMEM培养基将其稀释为50μg/μL的工作液。
3.每个剂量组做三个复孔,每孔加入100μL含有G418的DMEM培养基,每次准备的各个剂量DMEM培养基按500μL计算,一次性配制10次的培养基量,为5000μL。对照组,加入100DMEM培养基
320
160
80
40
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每孔加入体积(μL)
100
100
100
100
100
G418工作液浓度(μg/mL)
3200
1600
800
400
200
(0号管为1.5 ml EP管,2-5号为15 ml无菌离心管)
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B
3200μg/mL
1600μg/mL
800μg/mL
400μg/mL
200μg/mL
建立MicoRNA稳转TZMbl细胞系所用G418筛选浓度实验
实验目的
实验细胞
G418
G418储液浓度
建立MicoRNA稳转TZMbl细胞系所需要的G418筛选浓度
TZM-bl细胞
实验室自制
2006
500mg/mL
一、将TZM-bl细胞以1000个/孔的密度接种到96孔板中。
二、1.24 h后,弃去旧的培养基,分别用含有200μg/mL、400μg/mL、800μg/mL、16 000μg/mL、3200μg/mL G418的DMEM培养细胞。
表1含有不同剂量组G418的DMEM培养基配制
0
1
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G418体积(பைடு நூலகம்L)
100
(从前一管中吸取,后面类推)640
5000
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DMEM体积(μL)
900
9360
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管中G418浓度(μg/mL)
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每孔G418含量(μg)
对照
C
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表2不同剂量组G418的DMEM培养基加入96孔板
三、2~3天更换新鲜培养基,培养2周,选择细胞全部死亡的最低G418浓度作为细胞筛选的浓度。最终确定筛选用G418浓度为---------μg/mL。
2.G418储液浓度为500mg/mL=500μg/μL,先用DMEM培养基将其稀释为50μg/μL的工作液。
3.每个剂量组做三个复孔,每孔加入100μL含有G418的DMEM培养基,每次准备的各个剂量DMEM培养基按500μL计算,一次性配制10次的培养基量,为5000μL。对照组,加入100DMEM培养基
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每孔加入体积(μL)
100
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G418工作液浓度(μg/mL)
3200
1600
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(0号管为1.5 ml EP管,2-5号为15 ml无菌离心管)
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3200μg/mL
1600μg/mL
800μg/mL
400μg/mL
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建立MicoRNA稳转TZMbl细胞系所用G418筛选浓度实验
实验目的
实验细胞
G418
G418储液浓度
建立MicoRNA稳转TZMbl细胞系所需要的G418筛选浓度
TZM-bl细胞
实验室自制
2006
500mg/mL
一、将TZM-bl细胞以1000个/孔的密度接种到96孔板中。
二、1.24 h后,弃去旧的培养基,分别用含有200μg/mL、400μg/mL、800μg/mL、16 000μg/mL、3200μg/mL G418的DMEM培养细胞。