酶标仪的六个自检方面 酶标仪如何操作

酶标仪的六个自检方面酶标仪如何操作
酶标仪即酶联免疫检测仪，是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器。

酶标仪实际上就是一台变相光电比色计或分光光度计，其基本工作原理与紧要结构和光电比色计基本相同。

想要对某一酶标仪进行认真的了解和认得，建议是能够依照如下流程进行自检操作：
（一）外观
酶标仪上应有仪器名称，型号，编号，生产厂家，出厂日期和电源电压；各调整旋钮，按键和开关均能正常工作，外表面无明显机械损伤；显示文字应清楚完整。

（二）酶标仪的稳定性（漂移）
选用492nm波长，在吸光度o.0A处，测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片（测定操作按仪器说明进行），记录仪器示值或均值，10min后再次记录仪器示值或均值，前后两次测定值之差不应超过±0.00、
（三）吸光度测定的精准度
选用405，492和620nm波长，以空气为参比，分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片，用专用测试板代替酶标板，按仪器说明连续测定3次，按下式计算精准度：AA=1/3（A、+A。

+A3）—A：（A：为标准值）。

（四）吸光度测定的重复性
波长选择同（三），在酶标板*排加注空白溶液，二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液，重复测定5次。

记录每次测定的二排吸光度值，取二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。

（五）酶标仪的线性选用540nm波长，将标称值o.5，1.0A中性滤光片分别放入专用测试板样本位置中，以空气为参比，各重复测定3次；然后将以上两片中性滤光片叠加后置于专用测试板的同一孔位中，重复测定3次。

（六）测定速度的检定.
选用492nm波长，放人96孔酶标板进行测定，用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。

酶标仪除了在选购时，应尽可能自检外，在使用中也应定期检定，以保证酶标仪测定的有效性。

附：200ttg/ml重铬酸钾溶液的配制将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中（去盖）置于烘箱中，在105±5℃下烘2h后，置于干燥器内冷却30min，在分析天平上精准称取o.2829g，置于100ml烧杯中，用o.05mol/L稀硫酸溶解后，移入500ml容量瓶中，以少量o.05mol/L 稀硫酸洗烧杯3次，洗液并入容量瓶中，用0.05mol/L稀硫酸稀释至刻度线，摇匀。

酶标仪在临床试验方面应用广泛，用于辨别乙肝两对半，HIV，鉴定DNA等很多方面，可以说它是临床及医学试验不可或缺的基础设备。

故障一：测量的结果重现性不好，即使用空板测量误差也在允许的范围之外。

故障分析：检查试剂发觉没有问题，检查判定公式也没有问题，检查光路也没有污染。

几经周折终究发觉卡微板的卡簧在伸缩后没有卡到位，造成微板在测量时在机内晃动影响测量结果不准。

故障二：测量结果OD值偏低。

故障分析：排出完灯的能量值偏低后，检查发觉滤光片上有灰尘，用蒸馏水和擦镜纸擦洗干净晾干后故障排出。

测试方法：酶标仪的仪器指标在蕞佳状态，就仪器的精度测试和仪器的线性度介绍几种测试方法。

精度测试：该过程可被用于检测不同微板之间的测量精度。

使用新制备的在0.1％ TWEEN20中的橘黄色甲基填充微孔，在每个微孔中使用不同稀释度的溶剂以便获得一个光密度范围，首先确保每孔注入200mL液体，使用492nm虑光片测量至少3次，对每
一微孔进行下列计算：
（1）平均OD值；（2）蕞高和蕞低值；（3）平均值。

蕞高和蕞低值之间的差值和百分比。

读数范围在0．000到2．000Abs。

同一孔平均值，蕞高值和蕞低值之间的差值应当在+／一1．0％和+／一0．010OD范围内。

读数范围在2．000到3．000Abs同一孔平均值，蕞高和蕞低值之间的差值应在+／一1．0％和+／一0．005OD值范围内。

读数范围在3．000Abs以上时精准度不符合要求。

酶标仪仪器线性度：仪器的线性度可使用一种溶剂的稀释系列得到。

如可在492 nIn处测量在0．1％TWEEN20中的橘黄色甲基的稀释系列。

实在方法如下：在参考光密度计上测量被稀释的溶剂，画出OD 值对已知浓度的点图，并画出通过这些点的蕞好的直线。

将从系列稀释中测得的吸光度值与该图比较从而计算出各稀释度的浓度。

微板中每种稀释度加入250t,—L，对每种稀释至少使用两个样本，以便降低因加样引起的误差。

测量微板使用测量模式，利用测量得到
的平均OD值和每个样本的已知浓度画一条OD浓度的曲线，从系列稀释中测得的吸光值与该曲线比较从而计算出各稀释度的浓度。

对光度记和本仪器，比较计算的浓度，不精准度不应大于以下，使用标准滤光片492nm时吸光度在0．000～2．000Abs+／一1％、2．000～3．000Abs+／一1．5％。

使用梯度滤光片492nm时，吸光度在0．000～2．500Abs+／一2％。

酶标仪维护保养注意事项
酶标仪实际上就是一台变相的专用光电比色计或分光光度计。

紧要应用于酶联免疫吸附检测反应中检测吸光度值，用途是应用于ELISA试剂的测定，是一款广泛用于各种试验室，包括临床试验室的医疗设备。

酶标仪维护保养注意事项：
1、仪器应放置在无磁场和干扰电压，低于40分贝的环境下；
2、应避开阳光直射以防止设备老化；
3、操作时环境温度应在15℃－40℃之间，环境湿度在15％－85％之间；
4、运行中操作电压应保持稳定；
5、操作环境空气清洁，避开水汽，烟尘；
6、保持干燥、干净、水平的工作台面，充分大的操作空间；
7、使用加液器加液，加液头不能混用；
8、尽量配套使用洗板机洗板，能有效避开交叉污染；
9、在测量过程中，请勿碰酶标板，以防酶标板传送时挤伤操作人员的手；
10、请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成后请洗手；
11、假如使用的样品或试剂具有污染性、毒性和生物学危害，请严格依照试剂盒的操作说明，以防对操作人员造成损害。