微生物的生化鉴定

微
生 物
4.甲基红实验（M.R实验）
生
（3）结果观察记录
化
鉴
加入甲基红1~2滴，红色——M.R实验阳性，用 + 表示；不变色——M.R
定
实验阴性，用 - 表示。分别将试验（“+”表示阳性，“-”表示阴性）
技
术37℃恒温倒置培养24-48h。
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生 物
2.淀粉水解实验
生
（3）结果观察记录
化
鉴
将平板打开盖子，滴入少量Lugol’s碘液于平皿
定
中，轻轻旋转平板，使碘液均匀铺面整个平板，
技
术
判断结果。
有水解圈—淀粉水解实验阳性，用 + 表示；
无水解圈—淀粉水解实验阴性，用 - 表示。
食品微生物检验技术
目录页
微生物生化鉴定原理 微生物生化鉴定常规实验
— 1—
微生物生化鉴定原理
— 2—
• 微生物生化鉴定的原理
微
生
物 生
微生物代谢类型多样性具体表现在生化反应的多样性，
化
不同微生物分解生物大分子的能力，分解利用含碳化合物、
鉴
含氮化合物的途径和产生代谢产物也各不相同。
定
微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产
技 术
的小导管，包扎灭菌。
试管标记：培养基名称和接种细菌菌名。
（试管4支，分别标记大肠杆菌、枯草杆菌，金黄色葡萄球菌，第四支空白对照）
接种培养：挑取少量菌种于试管中，37℃培养24h。
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生 物
1.糖发酵实验
生
（3）结果观察记录
化
鉴
如颜色未变化，则表明不能利用某种糖，记“-”；如变为黄色，则表明
技 术
馏水1000ml、琼脂15-20g；方法：包扎灭菌，倒四个平板。
试管标记：翻转平板使底皿背面向上，用记号笔在皿底上画上三个圆圈 。
接种培养：将大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌分别在不同平板上的
圆圈中间以点植（或十字接种）的方式接上菌种；37℃恒温倒置培养24-48h。
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
物
磷酸氢二钾2g 、蒸馏水
生
（2）方法步骤
1000ml；方法：分装四
化 鉴
制备培养基：葡萄糖蛋白胨培养基
个试管，包扎灭菌。
定
试管标记：培养基名称和接种细菌菌名。
技 术
（试管4支，分别标记大肠杆菌、枯草杆菌，金黄色葡萄球菌，第四支空白对照）
接种培养：挑取少量菌种于试管中，37℃培养24h。
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
定
能分解糖产酸，记“+”；如变黄且有气泡，则表明能分解糖产酸产气，
技
术
记“⊕”。
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生
2.淀粉水解实验
物
生
（1）原理
化
淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域，用碘测定不再产生
鉴
蓝色，表明细菌产生淀粉酶。
定
技
术
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生
2.淀粉水解实验
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生
3.脂肪水解实验
物
生
（1）原理
化
油脂（脂肪酶）水解生成甘油和脂肪酸，在中性红指示剂下形成红色斑点。
鉴
中性红,酸碱指示剂，pH 6.8(红)～8.0(黄)。
定
技
术
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生
物 生
3.脂肪水解实验
化 鉴
（2）方法步骤
定
制备油脂培养基：牛肉膏5g、蛋白胨10g 、氯化钠5g 、香油或花生油10g 、蒸
技 术
物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的 微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依
据之一。
— 1—
微生物生化鉴定常规实验
1.糖发酵实验 2.淀粉水解实验 3.脂肪水解实验
— 2—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生
1.糖发酵实验
物
生
（1）原理
化 鉴 定
细菌具有分解某些糖类的特定酶，可根据细菌分解利用糖能力的差异， 表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。
化 鉴 定
肠杆菌科各菌能发酵葡萄糖，在分解葡萄糖过程中产生丙酮酸，进一步 分解中，由于糖代谢的途径不同，可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等
技
大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂由黄
术
色变红色。
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生
4.甲基红实验（M.R实验）
蛋白胨10g 、葡萄糖5g 、
微
生 物
3.脂肪水解实验
生
（3）结果观察记录
化
鉴
将平板打开盖子，滴入少量中性红液于平皿中，轻轻旋转平板，使之均
定
匀铺面整个平板，判断结果。油脂（脂肪酶）水解生成甘油和脂肪酸，
技
术
在中性红指示剂下形成红色斑点，用 + 表示。
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生
4.甲基红实验（M.R实验）
物
生
（1）原理
技
是否产酸，可在糖发酵培养基中加入指示剂，经培养后根据指示剂的颜
术
色变化来判断。是否产气，可从培养基中的杜氏小管中是否有气泡观测。
— 1—
• 微生物生化鉴定常规实验
微
生
1.糖发酵实验
物
生
（2）方法步骤
化 鉴
制备糖发酵培养基：牛肉膏5g、蛋白胨10g 、氯化钠3g 、葡萄糖5g 、蒸馏水
定
1000ml、0.2%溴麝香草酚蓝12ml；方法：分装4个试管，每个加10ml，放入倒置
物 生
（2）方法步骤
化 鉴
制备淀粉培养基：牛肉膏5g、蛋白胨10g 、氯化钠5g 、可溶性
定
淀粉2g 、蒸馏水1000ml、琼脂15-20g；包扎灭菌，倒四个平板。
技 术
试管标记：翻转平板使底皿背面向上，用记号笔在皿底上画上
三个圆圈 。
接种培养：将大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌分别
在不同平板上的圆圈中间以点植（或十字接种）的方式接上菌种；