一种益生菌培养基及其制备方法[发明专利]

(10)申请公布号
(43)申请公布日 (21)申请号 201310530558.6
(22)申请日 2013.10.31
C12N 1/20(2006.01)
C12N 1/16(2006.01)
(71)申请人刘桐言
地址730700 甘肃省白银市白银区东星街
22号9室
(72)发明人刘桐言
(54)发明名称
一种益生菌培养基及其制备方法
(57)摘要
本发明涉及一种能够促进益生菌快速增长的
新型培养基，属于医学检验技术领域，具体地说是
一种益生菌培养基及其制备方法。

其特征在于：
该液体培养基包括基础培养基、生长剂、营养剂和
抑菌剂四种组成。

其有益效果在于：该培养基同
时含有双重培养基的营养成分，因此能促进益生
菌的快速生长，提高培养阳性率；本发明中加入
了菊芋粉作为益生菌的增菌剂和活性保护剂，保
证了贮存期间菌的活性。

(51)Int.Cl.
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书3页
(10)申请公布号CN 104593280 A (43)申请公布日2015.05.06
C N 104593280
A
1/1页
1.一种益生菌培养基，包括基础培养基、生长剂、营养剂和抑菌剂四种组成，其特征在于：其组成配比如下：
基础培养基：硫酸铜0.001～0.002g 、硫酸锌0.001～0.002g 、氯化钙0.001～0.002g 、硫酸镁0.01～0.02g 、油酸0.01～0.02g 、枸橼酸铁铵0.05～0.1g 、枸橼酸钠0.1～0.2g 、硫酸铵0.2～0.4g 、丙酮酸钠0.5～1g 、吐温-800.5～1g 、天门冬素1～2g 、磷酸二氢钾1～2g 、磷酸二氢钠2～4g 、中性甘油8～12ml 、蒸馏水1000ml ；
生长剂：菊芋原粉150～300g 、甘露醇20～40g 、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯50～200g 、羟丙基甲基纤维素20～30g 、蒸馏水1000ml ；
营养剂：胺鲜酯1～50g 、乳化分散剂1～5g 、分散剂2～10g 、崩解剂10～30g 、蒸馏水1000ml ；
抑菌剂：由浓度分别为50ug ～lOOug/ml 的氨苄青霉素、二性霉素B 、多粘菌素B 、奈啶酮酸和阿洛西林的蒸馏水溶液等量混合而成。

2.如权利要求1所述一种益生菌培养基，其特征在于：所述基础培养基、生长剂、营养剂和抑菌剂的组分比例为：基础培养基4～8ml 、生长剂1～2ml 、营养剂8ml 和抑菌剂0.1～0.2ml 。

3.一种益生菌培养基的其制备方法，其特征在于：
①将基础培养基各组份用蒸馏水溶解，在115～125℃高温下灭菌10～15min ，冷却，置于4℃冰箱保存；
②将生长剂的各组份用蒸馏水溶解，然后灭菌过滤、分装，置于4℃冰箱保存；
③将抑菌剂的各组份分别用蒸馏水配制成浓度为50～1OOug/ml 的溶液，然后等量混合；
④最后将基础培养基、生长剂和抑菌剂加入营养剂混合均匀制得。

4.权利要求3所述一种益生菌培养基的其制备方法，其特征在于：所述基础培养基、生长剂、抑菌剂、营养剂各组份的投料比例为：基础培养基4～8ml 、生长剂1～2ml 、营养剂8ml 、抑菌剂0.1～0.2ml 。

权 利 要 求 书CN 104593280 A
一种益生菌培养基及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种能够促进益生菌快速增长的新型培养基，属于医学检验技术领域，具体地说是一种益生菌培养基及其制备方法。

背景技术
[0002] 随着生活水平的提高，现代人更重视营养。

但是高脂肪、高蛋白摄入过多，食物纤维摄入过少，很容易导致体内菌群失衡，从而导致亚健康的状态甚至是疾病。

通过益生菌来调节人体的微生态平衡，在有效防治各种疾病的同时使人远离药物的副作用。

渴望健康长寿是很多人所追求的，益生菌会帮助你保持健康的身体状态，消除健康隐患。

[0003] 益生菌（Probiotics）是一类对宿主有益的活性微生物，是定植于人体肠道、生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物的总称。

人体、动物体内有益的细菌或真菌主要有：酪酸梭菌、乳酸菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、放线菌、酵母菌等。

目前世界上研究的功能最强大的产品主要是以上各类微生物组成的复合活性益生菌，其广泛应用于生物工程、工农业、食品安全以及生命健康领域。

[0004] 益生菌大规模生产中成本控制的关键是提高细菌培养效率和加工过程中活菌的损失率。

益生菌的培养效率与培养条件、培养基的组成密切相关。

自90年代初以来，形形色色的“益生菌”类保健品风靡了整个世界。

与此同时，“益生菌”的研究业已成为国际上的热门研究课题。

何谓益生菌？国际营养学界普遍认可的定义是：益生菌系一种对动物有益的细菌，它们可直接作为食品添加剂服用，以维持肠道菌丛的平衡。

[0005] 在国外已开发出数以百计的益生菌保健产品，其中包括：含益生菌的酸牛奶、酸乳酪、酸豆奶以及含多种益生菌的口服液、片剂、胶囊、粉末剂、抑菌喷剂等等。

针对人研究的不多，国内对益生菌的认知度还不是很强，这使得益生菌的产品线应用还不是很广泛，因为存活率就是一大技术难题。

[0006] 目前，国内外普遍使用的培养基，培养时间需时较久（通常需4～8周），阳性率不高（通常为10～30%），远不能满足临床诊治和防病的需要。

因此，迫切需要一种快速、灵敏的益生菌培养基。

发明内容
[0007] 本发明的目的在于提供一种益生菌培养基及其制备方法，以传统的培养基为基础，再加入液体培养基培养组成，该液体培养基包括基础培养基、生长剂、营养剂和抑菌剂四种组成，该培养基在组分与配比上用料精选，使得益生菌生长健康品质优良。

[0008] 为实现上述目的，本发明所述一种益生菌培养基，包括基础培养基、生长剂、营养剂和抑菌剂四种组成，其特征在于：其组成配比如下：
[0009] 基础培养基：硫酸铜0.001～0.002g、硫酸锌0.001～0.002g、氯化钙0.001～0.002g、硫酸镁0.01～0.02g、油酸0.01～0.02g、枸橼酸铁铵0.05～0.1g、枸橼酸钠0.1～0.2g、硫酸铵0.2～0.4g、丙酮酸钠0.5～1g、吐温-800.5～1g、天门冬素1～2g、
磷酸二氢钾1～2g、磷酸二氢钠2～4g、中性甘油8～12ml、蒸馏水1000ml。

[0010] 生长剂：菊芋原粉150～300g、甘露醇20～40g、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯50～200g、羟丙基甲基纤维素20～30g、蒸馏水1000ml。

[0011] 营养剂：胺鲜酯1～50g、乳化分散剂1～5g、分散剂2～10g、崩解剂10～30g、蒸馏水1000ml。

[0012] 抑菌剂：由浓度分别为50ug～lOOug/ml的氨苄青霉素、二性霉素B、多粘菌素B、奈啶酮酸和阿洛西林的蒸馏水溶液等量混合而成。

[0013] 所述基础培养基、生长剂、营养剂和抑菌剂的组分比例为：基础培养基4～8ml、生长剂1～2ml、营养剂8ml和抑菌剂0.1～0.2ml。

[0014] 本发明所述一种益生菌培养基的其制备方法，其特征在于：
[0015] 1、将基础培养基各组份用蒸馏水溶解，在115～125℃高温下灭菌10～15min，冷却，置于4℃冰箱保存；
[0016] 2、将生长剂的各组份用蒸馏水溶解，然后灭菌过滤、分装，置于4℃冰箱保存；[0017] 3、将抑菌剂的各组份分别用蒸馏水配制成浓度为50～1OOug/ml的溶液，然后等量混合；
[0018] 4、最后将基础培养基、生长剂和抑菌剂加入营养剂，各组份的投料比例为：基础培养基4～8ml、生长剂1～2ml、营养剂8ml、抑菌剂0.1～0.2ml。

[0019] 本发明所述一种益生菌培养基及其制备方法，其有益效果在于：该培养基同时含有双重培养基的营养成分，因此能促进益生菌的快速生长，提高培养阳性率；本发明中加入了菊芋粉作为益生菌的增菌剂和活性保护剂，保证了贮存期间菌的活性。

具体实施方式
[0020] 以下实施例为本发明作进一步出阐述。

[0021] 实施例1
[0022] 1.基础培养基组成成分如下：硫酸铜0.001g、硫酸锌0.001g、氯化钙0.001g、硫酸镁0.01g、油酸0.01g、枸橼酸铁铵0.05g、枸橼酸钠0.1g、硫酸铵0.2g、丙酮酸钠0.5g、吐温-800.5g、天门冬素1g、磷酸二氢钾1g、磷酸二氢钠2g、中性甘油8ml、蒸馏水1000ml；配制方法是先将上述各成分溶解，然后115～121℃高压灭菌10～15min，冷却，经无菌试验后置4℃冰箱保存备用；
[0023] 2.生长剂组成成分如下：盐酸吡哆醇0.01g、生物素0.01g、辅酶A0.1g、三磷酸腺苷0.1g、过氧化氢酶0.1g、a-萘乙酸0.1g、蛋白胨1g、葡萄糖10g、牛血清白蛋白V5因子100g；配制方法是先将上述成分溶解，然后无菌过滤、分装，经无菌试验后置4℃冰箱保存；[0024] 3.营养剂组成成分如下：胺鲜酯1g、乳化分散剂1g、分散剂2g、崩解剂10g、蒸馏水1000ml；配制方法是先将上述各成分溶解，然后115～121℃高压灭菌10～15min，冷却，经无菌试验后置4℃冰箱保存备用；
[0025] 4.抑菌剂配制：分别将氨苄青霉素、二性霉素B、多粘菌素B、奈啶酮酸和阿洛西林配制成50ug～1OOVg/ml浓度的蒸馏水溶液，取等量混合而成。

[0026] 5.取上述组配的液体培养基，其中基础培养4ml、促生长剂1ml、营养剂4.9ml、抑菌剂0.1ml、混合均匀，即得所需培养基。

[0027] 实施例2：
[0028] 1.基础培养基组成成分如下：硫酸铜0.0015g、硫酸锌0.0015g、氯化钙0.0016g、硫酸镁0.018g、油酸0.016g、枸橼酸铁铵0.07g、枸橼酸钠0.15g、硫酸铵0.3g、丙酮酸钠0.7g、吐温-800.7g、天门冬素1.3g、磷酸二氢钾1.5g、磷酸二氢钠3g、中性甘油10ml、蒸馏水1000ml；配制方法是将上述各成分用水溶解，然后115～121℃高压灭菌10～15min，冷却，经无菌试验后置4℃冰箱保存备用；
[0029] 2.生长剂组成成分如下：盐酸吡哆醇0.015g、生物素0.015g、辅酶A0.15g、三磷酸腺苷0.15g、过氧化氢酶0.15g、a-萘乙酸0.15g、蛋白胨1.5g、葡萄糖15g，牛血清白蛋白V5因子150g；配制方法是用水将上述成分溶解，然后无菌过滤、分装，经无菌试验后置4℃冰箱保存；其余条件同实施例1。