抗甲状腺过氧化物酶标准操作规程

抗甲状腺过氧化物酶（Anti TPO ）标准操作规程
1.【实验目的】
通过ARCHITECTAnti-TPO检测可以对甲状腺状态进行辅助评估。

2.【职责】
2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负
责人、科主任。

3.【样品类型及实验前准备】
3.1样本类型：血清和血浆：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA、
肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本，无黄疸、无溶血、无脂血，已分离出的样本应立即分析。

稳定性：2-8C可稳定3天。

样品贮存于-10C或更低温度下30天没有表现出性能方面的差异。

3.2患者准备：实验前正常饮食，晨起空腹，安静状态下抽取静脉血，条件特殊情况
下可非空腹抽血检测。

3.3容器，添加剂类型：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA三
钾、肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本。

3.4仪器设备：雅培ARCHITECT i10SR,低速离心机
3.5实验试剂：
3.5.1. 1 ARCHITECT Anti-TPO 试剂盒（2K47 ）
甲状腺过氧化物酶包被的磁性微粒子
MES缓冲液中
3.5.1.2其他试剂：激发液、预激发液、清洗缓冲液（需另行配置）
3. 5.2校准品：
名称：美国雅培 i10sR Anti-TPO 校准品 LIST NO: 2K47-01
规格浓度(IU/mL) 体积（ml）
校准品A 0.0 4.0
校准品B 5.0 4.0
校准品 C 20.0 4.0
校准品 D 62.5 4.0
校准品 E 250.0 4.0
校准品F 10.0 4.0
3.5.3质控品
名称：美国雅培 i10SR Anti-TPO 质控品 LIST NO: 2K47-10
水平浓度(IU/mL) 范围(IU/mL)体积
(ml)
质控一0. 5< 2. 15
4.0
75 45 - 105
质控+
4.0
4.【实验原理】
ARCHITECT门0弘Anti-TPO是采用化学发光微粒子免疫分析（ChemiluminesentMicroparticle ImmunoAssay, CMIA ）技术，夹心两步法对待测样品中的甲状腺过氧化物酶抗体（Anti-TPO）进行定量检测。

5.【操作步骤】
按照要求准备标本，离心分离血清后，放入i10sR标本位进行检测（具体操作详见相关仪器操作手册）
样品稀释操作：
Anti-TPO值超过10.0IU/毫升的样品，都会标记为“>10.0”，可以使用自动
稀释步骤和人工稀释步骤进行稀释。

如果使用自动稀释步骤，系统会执行1：2的样品稀释，并自动计算稀释样品
的浓度和报告结果。

Anti-TPO值超过20.0IU/毫升的样品，都会标记为“>20.0”，可以使用人工
稀释步骤进行稀释。

人工稀释按照如下方式进行：
对Anti-TPO的建议稀释比例为1： 20.建议不要超过这一比例。

例如，对于1：20的稀释，添加10微升患者样品到190微升的Anti-TPO校准品A中。

操作人员必须在患者或质控品申请屏幕中输入稀释因数。

系统会使用该稀
释因数
自动计算样品未稀释浓度。

此为报告结果。

该结果（使用稀释因数前的）应该大
于 5.6 IU/mL。

有关申请稀释的详细说明，见ARCHITECT系统操作手册第5单元。

6.【质控程序】.
1.每隔24小时运行每个质控水平。

2.如果质控结果不在实验室所规定的可接受范围值内，则患者值可疑。

需使用
新鲜质控品
重复质控。

3.如果质控结果仍不在可接受标准范围内，则需重新校准。

4.每次更换试剂批次后，都要检查质控结果和可接受标准。

校准程序：
如欲执行一次ARCHITECTAnti-TPO校准操作，则对标准品A,B,C,D,E,F进行
复管
检测。

Anti-TPO质控品所有水平的单一样品必须接受检测，以对检测校准进行评估。

确保检测质控值都在质控品包装说明书中所规定的范围内。

标准品应优先进样。

校准范围值：0.0-10.0IU/mL
ARCHITECTAnti-TPO校准被接受并保存后，所有随后的样品都无需进一步校
准可以直接检测，除非：
使用新的批号的试剂盒
质控品不在范围值内
有关如何进行检测校准的详细说明，见ARCHITECT系统操作手册第6单元。

7.【结果计算与判断】
ARCHITECT甲状腺过氧化物酶抗体通过四参数Logistic曲线拟合(4PLC, Y-加权)数据约简法生成一条校准曲线。

8.【生物参考区间】
＜5.61 IU/mL
本实验室参考值：＜12 IU/ML
9.【危急值与警示】
当出现异常报告时，请根据操作手册查询错误原因及解决方案。

如无法解决问题，可联络雅培公司工程技术人员。

灵敏度：ARCHITECT Anti-TPO检测的分析灵敏度设计为＜1.0 IU/mL。

灵敏度作为超过ARCHITECT抗Tg标准品A ( 0.0 IU/mL )的平均值两个标准差的浓度进行
定义的。

干扰性：在ARCHITECT抗Tg检测中，对来源于血红蛋白，胆红素，甘油三酸脂和蛋白质的潜在干扰进行了试验。

ARCHITECT抗Tg检测证明了以下干扰性＜15%。

血红蛋白-10毫克/分升
胆红素-20毫克/分升
甘油三酸脂-10毫克/分升
总蛋白4克/分升
10克/分升上
线性：ARCHITECT Anti-TPO检测的线性是根据国家临床实验室标准委员会标准(NCCLS )规程EP6-A中的说明确定的。

其线性为3.0 --10.0 IU/mL
10.【临床意义】
TPO自身抗体固定补体具有潜在毒性，在自身免疫性甲状腺疾病中可能起致病作用。

在多数桥本甲状腺炎、原发性粘液腺瘤和Graves病患者中，经常发现甲状腺过氧化物酶自身抗体与甲状腺球蛋白自身抗体同时存在。

在没有甲状腺球蛋白自身抗体存在时，通常也可以检测出甲状腺过氧化物酶抗体，特别是在甲状腺微肿患者和自身免疫性甲状腺功能减退病例以内。

总而言之，甲状腺过氧化物酶抗体主要用于诊断甲状腺疾病。

11.【注意事项】
1.抗体的测定是多项诊断标准之一。

出于诊断目的，测试项目之间应结合临床症状联合
使用。

2.在健康人群中，会出现大约20%的抗TPO自身抗体阳性而无阳性体症。

抗TPO的出现可
能于选择人群的年龄，性别和地理位置有关。

3.因为自身抗体具有生化特性的异质性，一些标本不能被线性稀释。

4.一些接受过鼠单克隆抗体诊断和治疗的病人体内可能含有人抗鼠抗体(HAMA)。

25这类
标本会显示结果的假性升高或降低因为试剂包中含有鼠单克隆抗体。

25,瞒测试结果若
与临床结果不符，则诊断需要提供额外的信息。

5.嗜异性性抗体能和试剂中的免疫球蛋白反应，干扰体外免疫测定。

27病人标本中嗜
异性性抗体的存在会引起一个反常的结果。

27测试结果若与临床结果不符，则诊断需
要提供额外的信息。

12.【参考文献】
1.Trotter WR,Belyavin G,Waddams A.precipitating and complement-fixingantibodies
in Hashimoto’ s disease.Proc Royal Soc Med.1959;50:961-962.
2.R oitt IM, Doniach D.Human auto-immune
thyroiditis:ncet.1958;7055:1027-1033.。