2019版高考生物一轮复习方略课件：第十二单元 选修一 生物技术实践选修一-3

2．凝胶色谱法分离蛋白质的原理 项目 相对分子质量大的蛋白质 相对分子质量小的蛋白质 凝胶内部 不能进入 能进入 运动方式 垂直向下 垂直向下和无规则扩张运动 经过路程 较短 较长 洗脱次序 先流出 后流出
模拟题组——预趋势 预测 血红蛋白的提取和分离 (2017· 河南鹤壁高三期末 ) 以下关于血红蛋白提取和分离的 过程及原理叙述正确的是( ) A．红细胞洗涤过程中要加入 5 倍体积的蒸馏水，重复洗涤 3 次 B．将血红蛋白溶液放在质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液中透析 12 小时 C．凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在 D．蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢
[归纳比较] 1．比较琼脂糖凝胶电泳和 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳 (1)从载体上看，利用琼脂糖凝胶作为载体的是琼脂糖凝胶电 泳， 利用 SDS—聚丙烯酰胺凝胶作为载体的是 SDS—聚丙烯酰胺凝 胶电泳。 (2)从依据上看， 利用了分子带电性质差异和分子大小的是琼脂 糖凝胶电泳，仅利用了分子大小的是 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。 (3)从优点上看，琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品 不需处理，电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好；SDS—聚丙烯酰 胺凝胶电泳消除了静电荷对迁移率的影响，使电泳迁移率完全取决 于分子的大小。
[考纲要求] 1.微生物在其它方面的应用。 2.蛋白质的提取和分离。 3.从生物材料中提取某些特定的成分。
考点突破 素养达成 考点一 蛋白质的提取和分离(国考 5 年未考) (2015 江苏) 血红蛋白的提取和分离实验 (1)常用的分离方法：凝胶色谱法、凝胶电泳法等。 (2)基本原理 ①凝胶色谱法：是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效 方法。 ②电泳：利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子 本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度。
4．三种植物提取成分的比较 提取成分 玫瑰精油 比较项目
橘皮精油
胡萝卜素
性质
提取方法
橘黄色结晶，化 化学性质稳定、 学性质比较稳 难溶于水、易溶 无色透明、具有 定，不溶于水， 于有机溶剂、能 橘香味；重要成 微溶于乙醇，易 随水蒸气一同 分为柠檬烯 溶于石油醚等 蒸馏 有机溶剂 蒸馏 压榨 萃取
(4)层析液没及样品原点， 色素溶解于层析液中， 造成实验失败。 层析液不可没及样品原点， 以免色素溶解于层析液中， 使鉴定失败。 (5)设置标准样品作对照：层析液中是否提取到胡萝卜素，可通 过与标准样品中的 β－胡萝卜素作对比予以确认。
3.三种提取方法的比较 提取方 水蒸气蒸馏法 压榨法 有机溶剂萃取法 法 利用水蒸气将挥 通过机械加压，压 使芳香油溶解在 实验原 发性较强的植物 榨出果皮中的芳 有机溶剂中，蒸发 理 芳香油携带出来 香油 溶剂获得芳香油 ①石灰水浸泡、漂 ①水蒸气蒸馏 洗 ①粉碎、干燥 方法步 ②分离油层 ②压榨、过滤、静 ②萃取、过滤 骤 ③除水过滤 置 ③浓缩 ③再次过滤
适用范围广，要求 适用于提取玫瑰 适用于柑橘、柠檬 原料的颗粒要尽 适用范 油、薄荷油等挥发 等易焦糊原料的 可能细小，能充分 围 性强的芳香油 提取 浸泡在有机溶液 中 生产成本低，易保 简单易行，便于分 优点 持原料原有的结 出油率高，易分离 离 构和功能 水中蒸馏会导致 使用的有机溶剂 分离较为困难，出 局限性 原料焦糊和有效 处理不当会影响 油率相对较低 成分水解等问题 芳香油的质量
(3)血红蛋白的分ຫໍສະໝຸດ 过程高考题组——研考向 考向 血红蛋白提取和分离过程的考查 ( 经典高考 ) 以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是 ( ) A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂 B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少 C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋 白移动慢
考点二 植物有效成分的提取(国考 5 年 2 考) (全国卷：2017 年新课标Ⅲ卷；2015 新课标Ⅱ；地方卷：2017 年海南卷；2014 年山东、海南卷；2013 年山东卷)
1．植物芳香油的提取 (1)提取玫瑰精油实验 ①方法：水蒸气蒸馏法。 ②实验流程
(2)提取橘皮精油的实验 ①方法：一般用压榨法。 ②实验流程
解析：猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较 少，是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步：红细胞的 洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析，其中洗涤红细 胞时，要用生理盐水反复洗涤，既要将红细胞洗涤干净，又要不破 坏红细胞， 然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂， 释放出血红蛋白。 分离提纯血红蛋白时用凝胶色谱法，是根据相对分子质量的大小来 分离蛋白质，相对分子质量大的蛋白质移动速度较快；血红蛋白的 颜色可用于观察红色区带的移动情况，并据此判断分离效果。故 D 不正确。 答案：D
2．胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素性质：不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有 机溶剂。 (2)实验设计 ①方法：萃取法，石油醚最适宜作萃取剂。 ②实验流程
(3)鉴定方法：纸层析法。
易错警示 胡萝卜素粗品鉴定过程中的 5 个易错点 (1)层析时没有选择干净的滤纸，导致实验现象不明显。为了防 止操作时对滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以戴手 套进行操作。 (2)点样时点样圆点太大(直径大于 2 mm)，导致最终在滤纸上 形成一条线，无法辨认被提取的色素；点样圆点的直径应为 2 mm。 (3)将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时不能将滤纸两边相互接 触：以避免由于毛细现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，溶剂前 沿不齐，影响结果。
解析：低渗溶液中细胞会吸水涨破，所以红细胞的洗涤过程应 该用生理盐水洗涤，不能用蒸馏水洗涤，A 错误；将血红蛋白溶液 通过透析进行粗分离时应该选用磷酸缓冲液，B 错误；装填色谱柱 时，凝胶填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在，因为气泡会影响 蛋白质的洗脱次序，C 正确；蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较 大的移动速度快，D 错误。 答案：C