快速胶体免疫层析法检测临床应用
胶体金免疫层析法快速检测四种血源传播性疾病在临床中的应用
织,这就导致手术创伤较大。
来自于Guillonneau等的研究结果显示,前列腺癌应用腹腔镜技术根治具有安全、创伤小等优势[8],远较传统开放手术完美;故当前列腺癌具备手术指征时应当首先考虑行腹腔镜手术。
4.4 根治性膀胱切除腹腔镜技术:对于临床中膀胱肿瘤未突破膀胱肌层者应用腹腔镜技术效果良好。
由于该技术项目牵涉到尿流流出道的改变,故提高了其手术难度,使得其较前列腺腹腔镜切除技术更难掌握,手术技术含量要求较高,临床文献报道不多。
4.5 隐睾腹腔镜技术:大部分的隐睾不能通过体格检查和超声等影像学检查而被检出,往往需行手术探查;选择应用腹腔镜技术进行手术探测,可于定位的同时实施手术。
来自临床研究报道显示,隐睾腹腔镜手术成功率较高,术后睾丸不发生萎缩变化,且位置在阴囊内固定良好。
4.6 精索静脉曲张腹腔镜技术:对于双侧严重的精索静脉曲张或者术后复发精索静脉曲张者可以首选腹腔镜技术,而相对于单侧精索静脉曲张病例来说,实施腹腔镜技术不具备明显优势。
参考文献[1]罗波,孙立江.腹腔镜技术在泌尿外科的应用[J].青岛大学医学院学报,2007,43(2):34‐35.[2]梅骅,陈凌武.高新泌尿外科手术学[M].北京:人民卫生出版社,2008:862,875畅[3]马潞林,张树栋,邱敏,等.自制通道经脐单孔腹腔镜肾囊肿去顶术(附5例报告)[J].中国微创外科杂志,2010,10(11):395‐396.[4]彭发强,杨建华.后腹腔镜技术在肾脏切除中的应用[J].现代医药卫生,2010,26(16):213.[5]黄琪亮.腹腔镜在泌尿外科中的临床实践研究[J].亚太传统医药,2009,5(10):298‐299.[6]周水根,张征宇,葛京平,等.腹腔镜手术治疗精索静脉曲张169例临床总结[J].中国内镜杂志,2007,13(5):67‐68.[7]高新,方友强,周祥福,等.腹腔镜下上尿路解剖与腹膜后腹腔镜肾癌根治术[J].腹腔镜外科杂志,2009,14(2):115.[8]杨江根,张轶庠,方列奎.经腹腔镜肾癌根治术(附70例报告)[J].中国微创外科杂志,2008,8(1):214‐215.(收稿日期:2013‐09‐29) 作者单位:071000保定,中国人民解放军第252医院检验科胶体金免疫层析法快速检测四种血源传播性疾病在临床中的应用秦 雪 胶体金免疫层析法(GICA)是将胶体金标记、免疫检测和层析技术有机结合在一起的固相标记免疫检测技术,操作简便、快速,特异性强,并不易污染[1]。
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用发布时间:2021-02-02T15:38:57.237Z 来源:《基层建设》2020年第27期作者:陆春梅[导读] 摘要:胶体金免疫层析法(GICA)是一种以胶体金为示踪剂的新型免疫标记技术,在抗原和抗体方面有着广泛的应用。
茂名市食品药品检验所广东茂名 525000摘要:胶体金免疫层析法(GICA)是一种以胶体金为示踪剂的新型免疫标记技术,在抗原和抗体方面有着广泛的应用。
胶体金免疫层析法(GICA)具有快速、简便等优点,已广泛应用于食品检测、临床、环境污染等定性或半定性快速免疫分析。
本文介绍了胶体金免疫层析法在食品检测中的应用。
关键词:胶体金免疫层析技术;食品检测;应用食品安全已成为当今社会的热门话题。
为了提高食品卫生安全水平,保障人民群众的生活质量,开展食品卫生安全检查十分重要。
在此基础上,胶体金免疫层析技术应运而生,并应用于食品检测,取得了良好的效果。
因此,研究胶体金免疫层析法在食品检测中的应用具有重要意义。
一、胶体金免疫层析技术概述胶体金免疫层析技术是一种有效结合胶体金标记、免疫检测和层析分析等技术为一体的免疫检测固相标记技术,在20世纪80年代得到发展。
胶体金免疫层析技术作为一种应用形式,是利用抗原抗体反应和免疫金标记技术的相互结合,它是以条带状在膜上固定特异性的抗体或抗原,使在层析条上的样品溶液依靠毛细作用产生泳动,使样品中的待测物和待测物在层析材料上的抗原或抗体等受体发生亲和性与特性较高的免疫反应,在层析的过程中材料的检测带通过截留或富集免疫复合物,通过直接使用或酶促显色反应可对着色标记物进行目测,在5~10min内可直接获取试验结果[1]。
二、胶体金免疫层析技术的特点(一)具有较广的检测范围该技术既可以对食品中的农药、兽药残留及微生物和真菌毒素进行检测,还可快速诊断动物的疫病,在许多领域得到广泛的应用。
(二)操作过程相对简单该技术操作比较简单,不涉及大型的设备仪器,只用简单地对检测样品进行处理,便可直接观察到检测结果,不用具备较强的专业知识也可操作。
应用胶体金免疫层析技术 更好地进行食品快速检测
食品检测FOOD INSPECTION食品安全问题一直是国家和社会关注的重点问题,因此,相关部门一定要高度重视食品安全检测,并注重新技术的引入,比如胶体金免疫层析技术。
胶体金免疫层析技术可以有效发挥食品检测的作用,更好地保障食品安全,提高人们的生活质量,促进社会的稳定发展。
一、胶体金及免疫层析技术的含义1.胶体金技术。
胶体金技术是指氯金酸在某种环境下的一种变化反应而形成的胶体溶液。
其反应过程首先要用的是还原剂,通常有白磷和柠檬酸钠等,在其作用下将氯金酸按相关要求聚合成固定大小的金颗粒,然后再由静电作用将其凝聚成稳定的胶体溶液。
胶体状态下的金颗粒具有高电子密度的特性,其密度一般能达到107个/mm2,呈圆形的斑点,颜色一般为粉红色,其大小肉眼刚好可见,在检测中常用作一种标记物,对实验结果的影响十分重大。
2.免疫层析技术。
免疫层析技术是一种免疫分析技术,主要是根据抗原和抗体的反应来进行检测。
通常包括两大类,一类是非竞争性免疫层析,一类是竞争性免疫层析。
非竞争性免疫层析技术主要针对一些大分子蛋白质的检测。
首先,将采用胶体金标记后的样品与等待检测抗原中的特异性抗体进行结合,这两类物质结合后会出现沉淀现象,此时需要注意将其沉积物放到结合区域中。
其次,将待检测的样品材料放到样品区位置,再利用毛细管将样品与结合区进行完全融合,其中,带有胶体金标记的样品材料会由于受到张力的作用而不断地向前移动。
此时,样品中已经存在的抗原物质便会自动与带有胶体金标记的样品相互结合,形成一种结合体物质。
紧接着,样品溶液会进行固相化,并在通过固相化后的第一层防线时将含有结合体物质抗体材料进行捕获,然后形成新的结合体复合物材料。
那些没有结合体材料的物质不会被捕获,它们会继续向前移动,然后那些结合体在通过下一道防线时会与另一种抗体结合,形成第三种结合体复合材料。
竞争性免疫层析技术主要针对一些单一抗原的小分子抗原适用,比如兽药残留的检测等。
胶体金免疫层析法在食品快速检测中的应用研究进展
胶体金免疫层析法在食品快速检测中的应用研究进展谢桂芳,赖 飞,王艺蓉,周雪丽,王晓鹭,蔡 滔*(贵州省农产品质量安全监督检验测试中心,贵州贵阳 550001)摘 要:近年来,随着城市化进程加快,各类食品流通更为频繁,食品安全问题日益凸显,人们越来越关注食品安全,而准确、快速的检测方法是保证食品安全的重要手段。
本文介绍了胶体金免疫层析技术的基本原理和制备方法,并概述了其在检测食品中农药残留、霉菌毒素、食源性致病菌、重金属和非法添加剂等方面的应用及前景,为我国食品安全快速定量检测技术提供思路方法。
关键词:胶体金免疫层析技术;食品安全;快速检测The Progress of the Application of Colloidal GoldImmunochromatography in Rapid Food DetectionXIE Guifang, LAI Fei, WANG Yirong, ZHOU Xueli, WANG Xiaolu, CAI Tao* (Guizhou Agricultural Products Quality and Safety Supervision and Testing Center, Guiyang 550001, China) Abstract: In recent years, with the acceleration of urbanization, the circulation of various foods has become more frequent, and food safety issues have become increasingly prominent. People are paying more and more attention to food safety, and accurate and rapid detection methods are important means to ensure food safety. This paper introduces the basic principle and preparation method of colloidal gold immunochromatography technology, and outlines its application and prospects in the detection of pesticide residues, mycotoxins, foodborne pathogens, heavy metals, and illegal additives in food, providing ideas and methods for rapid quantitative detection of food safety in China.Keywords: colloidal gold immunochromatographic technology; food safety; rapidly detection近年来,食品安全事件频发,食品安全问题也受到了社会的高度关注。
胶体层析法筛查人类免疫缺陷病毒抗体在急诊检验中的应用
[ 6 ] 卫生部文件. 卫妇 社 发 E 2 o o 6 ] 5 1 号. 儿 童 高 血铅 症 和 铅 中
毒分级和处理原则 ̄ E B / OI ] [ 2 0 1 3 — 0 3 — 1 4 ] . h t t p : / / w ww .
硒标试剂基本原理是基于双抗原夹心法在硝酸醋纤维条上固相包被有hiv12多肽抗原重组抗原及亚型重组抗原硒结合的hiv1重组抗原hiv2多肽抗原hiv2重组抗原及亚型重组抗原采用通过膜片叠加技术和水平流液技术组合形成免疫层析的原理以及不同的抗原组合的方法56
检 验 医 学 与 临床 2 0 1 3年 7月 第 1 0卷 第 1 4期
1 9 7— 1 99 .
者 。一 旦 确 诊 为 高铅 血症 或铅 中 毒 的 儿 童 , 应 在 有 条件 的 医 疗 卫 生 机 构 进 行 相 应处 理 。 医务 人 员 应 在 处 理 过 程 中 遵 循 环 境 干预 、 健康教育和驱铅治疗 , 帮助寻找铅污染源 , 并 告 知 儿 童 监 护 人 尽 快 脱 离铅 污 染 源 ; 应 针 对 不 同情 况 进 行 卫 生 指 导 , 提出 营 养 干 预 意见 ; 对 铅 中毒 儿 童 及 时予 以恰 当 的 治疗 。 总之 , 儿童铅污染及危 害的 防治是一 个系统 工程 , 需 要 多 学科结合 、 综 合 研 究 及 全 社 会 共 同参 与 。 只 有 这 样 , 才 能 逐 步 降低铅对人类尤 其是儿童和青少年的危害 , 为 人类 创 制 一个 安
女童 , 表 明 男 童 对 铅 中毒 更 易 感 , 这与北京 、 天 津 儿 童 铅 暴 露 调
免疫胶体金技术在临床检验领域的应用
全新技术,摒弃了底物反应中酶的参与,实验过程更加简单,
并且结果具有明显的稳定性。 部分专家在研究中发现,在抗
人免疫球蛋白 G 筛选中应用斑点免疫金渗滤法技术更加稳
定,为试剂盒制作提供了重要参考依据。
免疫层析法是在多种技术基础上发展而来,融合了新材
到了突破性研究与进展,其中在检验领域中应用最为显著,
可以用于 HCG 等检测中。 其中胶体金属于标记技术,能够
用于免疫标记。 根据临床调查研究数据显示,在免疫、分子
生物学等多个需 要 运 用 到 免 疫 印 记 技 术 的 都 已 经 使 用 胶
体金。
免疫胶体金技术有效提升了临床检验领域工作效果,在
经验交流
免疫胶体金技术在临床检验领域的应用
唐巧凤
胶体作为特殊物质实在 20 世纪 70 年代被 Taytor 等人
引入到免疫学当中,发现了免疫胶体金技术,将其视为一种
新的免疫学方法。 免疫胶体金技术在医学的多个领域均得
病检验中,从重症急性呼吸综合征到新冠状病毒肺炎均应用
了免疫层析法技术,许多研究结论显示检测一致性高。
二、 免疫胶体金技术在定量检测中的应用
免疫胶体金技术主要来源于其胶体颗粒特征,该颗粒具
有高密度与高电子特征,将其与配体结合后,可以运用光传
感器发现其聚集物,甚至在肉眼下就可以发现粉色或者红色
物质。 此外,免疫胶体金技术能够增强定量检测灵敏性。 主
疫胶体金技术的免疫电镜应用效果显著。
第二,免疫胶体金技术在联合检测技术中的应用。 在免
疫胶体金技术应用过程中,不仅可以用于单一的实验检验,
并且能够与其他检验技术联合应用,降低检验成本,提升检
食品检测中胶体金免疫层析技术的运用
食品检测中胶体金免疫层析技术的运用摘要:免疫层析法是一红新型的快速免疫分析技术,其中融合了色谱层析技术与免疫技术,近年来随着胶体金免疫层析技术的发展,其在食品检测当中取得了广泛的应用,本文就主要结合胶体金免疫层析技术的特点,对免疫层析技术在食品检测中的应用予以分析。
关键词:食品检测;胶体金;免疫层析技术相对于其他类型的食品检测技术,胶体金免疫层析技术具有操作简便、快速、检测效果好等诸多的优点,这使得其在食品检测领域的应用越来越广泛,不仅仅能够提升检测准确率,还能够有效的提升检测特异性与敏感度。
一、免疫层析类型按照免疫层析中抗原与抗体结合方式的不同,可将免疫层析分为两类:非竞争性免疫层析和竞争性免疫层析。
非竞争性免疫层析即双抗体夹心法。
将着色标记物(一般采用胶体金)与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,并将其沉积在结合区上。
当样品(尿、血浆、饮料等)加到样品区后,由于毛细管作用,样品迅速浸透结合区,带有标记物的Ab1被溶解,并在上部材料吸水涨力的牵引下随着样品溶液沿膜条向前移动。
若样品中存在待测抗原,它就会和带有标记物的Ab1结合形成Ag-Ab1[1]。
随后,样品通过固相化有捕获抗体(一般是待测抗原的另一表位特异性抗体Ab2)的检测线(testline)区域时,Ag-Ab1复合物被捕获,形成Ab1-Ag-Ab2复合物。
一部分未与Ab1结合的样品继续前移,通过固相化有抗Ab1抗体(Ab3)的质控线(controlline)区域,形成Ab3-Ab1复合物。
这种方式通常用于检测带有多个抗原位点的分析,常用于致病细菌、大分子蛋白质等的检测等。
竞争性免疫层析:将着色标记物与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,沉积在结合区。
而检测区处固相化的是待测抗原或待测抗原的类似物。
若样品中含有待测抗原,则样品中的抗原和带有标记物的Ab1形成Ag-Ab1复合物。
随后在通过固相化有待测抗原或其类似物的检测区时,由于竞争抑制,不再发生反应,检测线处不显色;样品继续前移,Ag-Ab1复合物被固相化在质控线处的抗Ab1抗体(Ab2)所结合,形成Ab1-Ag-Ab2复合物,使质控线显色。
胶体金免疫层析竞争法
胶体金免疫层析竞争法1. 背景介绍胶体金免疫层析竞争法(Colloidal Gold Immunochromatographic Assay)是一种常见的免疫层析快速检测方法。
该方法基于免疫学原理,利用胶体金颗粒与样品中的目标分子相互作用,通过色素沉淀形成可见的测试结果。
这种检测方法具有检测快速、操作简单、结果直观等优点,在临床诊断、食品安全监测、环境污染监测等领域得到广泛应用。
2. 原理介绍2.1 免疫学原理免疫学原理是胶体金免疫层析竞争法的基础。
免疫层析法是一种通过抗原-抗体反应实现分离和检测的技术。
在该方法中,通过将抗原(目标分子)与抗体(特异性与抗原结合的蛋白质)结合,形成免疫复合物,从而实现目标分子的检测。
2.2 胶体金颗粒胶体金颗粒是胶体金免疫层析法的关键试剂。
胶体金颗粒具有良好的生物相容性、稳定性和可见性,广泛应用于免疫学和生物医学领域。
胶体金颗粒的颜色通常为红色或紫色,直径一般在10-100纳米之间。
在光学显微镜下观察,胶体金颗粒呈现明显的表面等离子共振吸收峰,即表现为红色。
2.3 竞争反应胶体金免疫层析竞争法通过竞争反应实现目标分子的检测。
竞争反应分为两个步骤:竞争体系构建和检测结果显示。
2.3.1 竞争体系构建竞争体系构建是胶体金免疫层析竞争法的关键步骤。
在这一步骤中,将胶体金颗粒与目标分子结合。
首先,将目标分子与胶体金颗粒中的抗体结合,形成免疫复合物。
然后,将样品中的目标分子与胶体金颗粒中的抗体竞争结合。
当样品中的目标分子存在时,会与胶体金颗粒中的抗体竞争结合,导致免疫复合物的形成减少。
而当样品中的目标分子不存在时,胶体金颗粒中的抗体能与胶体金颗粒自身上的抗原结合,免疫复合物形成量较多。
2.3.2 检测结果显示检测结果显示是胶体金免疫层析竞争法的关键步骤。
在这一步骤中,利用胶体金颗粒的可见性进行结果显示。
当竞争体系构建完成后,将样品滴在测试纸上,胶体金颗粒会经由纸质的吸收作用,沿纸张上升。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用随着食品工业的快速发展和全球贸易的加速,食品安全问题日益受到人们的关注。
食品安全检测是保障食品质量和保障公众健康的重要环节,快速、准确的检测技术对于食品安全已经成为不可或缺的一环。
胶体金免疫层析技术是一种迅速、敏感、特异性好,并且易于操作的检测技术。
本文将介绍胶体金免疫层析技术的原理、特点及在食品安全现场快速检测中的应用。
一、胶体金免疫层析技术原理胶体金免疫层析技术是基于抗原与抗体之间的特异性结合原理。
首先将目标分子作为抗原,与特异性的抗体反应形成抗原-抗体复合物,然后将其与胶体金颗粒结合。
当抗原-抗体复合物与胶体金颗粒结合时,会发生颗粒聚集,产生可见的颜色变化。
通过颜色的变化可以判断样品中是否存在所需检测的目标分子,从而实现快速检测。
1. 快速性:胶体金免疫层析技术无需复杂的操作步骤,通常能在几分钟内完成检测。
对于食品安全现场快速检测来说,时间就是金钱,因此快速性是其最大的优势之一。
2. 敏感性:胶体金免疫层析技术对目标分子的检测灵敏度高,可以检测到极低浓度的目标分子。
这使得其在食品安全检测中能够及时发现微量的有害物质,保障公众健康。
3. 特异性:胶体金免疫层析技术对目标分子的检测特异性好,能够区分目标分子和其他干扰物质,减少误判的可能性。
4. 易操作性:胶体金免疫层析技术不需要复杂的仪器设备,操作简单,适用于各种现场检测环境。
5. 成本低廉:胶体金免疫层析技术的试剂成本低廉,相对于传统的检测方法,可以大大降低检测成本。
1. 残留农药检测:农药残留是食品安全的一个重要问题,特别是对于农产品出口国家来说,农药残留的限量标准要求更加严格。
胶体金免疫层析技术可以快速检测食品中的农药残留情况,为食品出口提供可靠的检测数据。
2. 食品中毒素检测:食品中的毒素是一种常见的食品安全隐患,例如黄曲霉素、赭曲霉素等。
采用胶体金免疫层析技术可以对食品中的毒素进行快速检测,及时发现食品中的毒素污染问题。
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品检测中的应用摘要:在社会经济迅速发展的条件下,人们生活水平在不断提升的同时,食品的质量安全也日益受到社会各界的重视。
胶体金免疫层析技术是一种将层析与免疫分析技术融合在一起的现代化科学技术,它可以对现场的食品进行快速的免疫检测,可以有效地确定食品的质量和安全,保障人民的日常饮食的健康和安全。
本文对胶体金免疫层析技术进行了研究,并对其在食品检验方面的应用进行了探讨。
关键词:胶体金免疫层析技术;食品检测技术;食品安全策略引言随着人民生活质量水平的提升,食品卫生与安全受到了人们的关注。
为了提高食品的质量与卫生安全,我们必须对食品进行有效和精确的检测,以保证人的生命安全与生活品质。
在目前已有的快速检测技术中,最具有代表意义的是胶体金免疫层析技术,它可以被用于对食品品质和安全性进行检测,为了充分地发挥它的优点,文章对胶体金免疫层析技术的使用重点进行了研究,希望为后期食品安全的检测提供保障。
一、胶体金免疫层析技术的内涵胶体金指的是一种氯金酸水溶液,在白磷、柠檬酸钠、还原剂的影响下会产生一种特定尺寸的胶体,并在静电的影响下会产生一种可以用眼睛看到的、具有较高电子密度的胶体溶液。
该特性满足了免疫色谱法测定样品中蛋白质含量的需要,可以用来测定样品中蛋白质含量。
根据各种还原剂的类型,制备出的胶体粒子也会有所不同,因此可以在多种条件下,实现对食品样品的高灵敏探测。
相关研究人员利用中毒胶体金条形码,以抗氟喹诺酮类单克隆中毒抗体为材料,研制出了一种能在乳制品中对11种类抗氟喹诺酮类的抗体残留进行免疫检测的纸条,一般检测反应的时间为5分钟,若该试纸的温度检测结果与其它试纸的温度检测结果一致,检测的重复性相对高,那么该试纸在4℃下能可以保存12个月以上。
而且这种方法对样本进行简单的预处理、快速的检测、高的敏感性、高的专一性、高的假阳性率和假阴性率都为0,并且经过了液相第二质谱的方法的测试和验证,这胶体金免疫层析技术在试剂和纸条的品质检测方面,具有很好的稳定性和可靠性。
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用胶体金免疫层析技术是一种利用抗体对特定抗原的专一性识别来快速检测待检样品中是否含有目标成分的技术。
它的原理是利用胶体金颗粒的特性,在试剂纸上形成一条稀释液前进的前沿,当待检样品中含有目标成分时,会与胶体金颗粒上的抗体结合发生凝聚,导致胶体金颗粒的前进受阻,从而形成一条明显的测试线。
通过观察测试线的形成情况,就能够判断待检样品中是否含有目标成分。
这种技术具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性好等特点,因此在食品安全现场快速检测中得到了广泛应用。
胶体金免疫层析技术在食品中毒事件的现场快速检测中发挥了重要作用。
食品中毒事件往往发生突然,而且影响范围广泛,如果不能及时准确地检测出问题食品,后果将不堪设想。
胶体金免疫层析技术可以在现场迅速检测出食品中是否含有有毒物质,为食品安全问题的迅速处理提供了技术支持。
其敏感度高、操作简单的特点,使得它可以在最短的时间内完成检测,为食品安全事件的应急处理提供了重要的技术手段。
胶体金免疫层析技术在食品添加剂和农药残留快速检测中发挥了重要作用。
食品添加剂和农药残留一直是食品安全领域的一个难题,传统的检测方法往往需要耗时耗力,不能满足快速检测的需求。
而胶体金免疫层析技术可以在现场快速检测食品中是否含有添加剂和农药残留,为食品安全监管提供了一种快速、有效的手段。
通过这种技术,可以在生产现场、市场和餐饮场所等地方对食品进行快速检测,保障了广大消费者的食品安全。
胶体金免疫层析技术在食品质量追溯中也具有重要意义。
食品质量追溯是保障食品安全的一项重要工作,通过对食品的原料、生产过程、流通环节等进行追溯,可以找出食品质量问题的来源,防范和控制食品安全风险。
而胶体金免疫层析技术可以在食品的生产环节和流通环节进行快速检测,及时发现和排除问题食品,保障食品质量和食品安全。
这对于食品质量追溯和食品安全管理具有重大的意义。
胶体金免疫层析法检测丙型肝炎病毒抗体的临床应用评估
728 临床检验
陕西医学杂志 2008 年 6 月第 37 卷第 6 期
胶体金免疫层析法检测丙型肝炎病毒抗体的临床应用评估
河南科技大学第一附属医院中心实验室 (洛阳 471003) 孙宗立 谷 雷 李武威 任利群 白腊梅 摘 要 目的: 对胶体金免疫层析法 ( G ICA ) 检测丙型肝炎病毒抗体 ( 抗 2 HCV ) 的特异 性、 灵敏度、 重复性、 试条渗透性、 固相膜均匀性等参数进行试验比较和评价 , 为该技术的应用提 供依据。方法: 采用 G ICA 和酶联免疫吸附试验法 ( EL ISA ) 对定值的抗2 HCV 质控品和 672 份血 清标本同时测定 , 再结合物理试验, 并对结果进行评价。结果: G ICA 和 EL ISA 均可检测出抗2 HCV 1N CU � m l, 以 EL ISA 为参照, G ICA 1、 G ICA 2 的灵敏度均为 99. 44% , 特异性均为 99. 68% ; G ICA 3 灵敏度为 94. 93% , 特异性为 97. 83% 。 假阴性均在弱阳性标本中, 假阳性均显弱阳性带。 渗透速度和均一性试验结果良好。 结论: 选用 G ICA 前需做比对试验 , 对其弱阳性结果须 EL ISA 方法确认。 选择质量好 G ICA 是一种较好的快速初筛方法。 主题词 胶体金 免疫化学 肝炎抗体, 丙型 丙型肝炎抗体采用胶体金免疫层析法 (G ICA ) 具 有快速、 操作简便、 不需特殊设备、 且可单份测定 , 在急 诊及临床应用中, 具有较强的优势。 我们对酶联免疫吸 ( ) 附试验法 EL ISA 和 G I CA 两种方法检测抗 2 HCV 作 比较 , 并对 G ICA 的技术参数进行试验比较和评价, 以 便为临床应用提供可靠依据。 材料和方法 1 一般资料 672 份血清标本, 均为 2006 年本 院门诊及住院患者。丙型肝炎病毒携带者356 例 , 其中 男 211 例 , 平均年龄 31± 9. 8 岁; 女 145 例 , 平均年龄 26 ± 10. 3 岁。对照组 316 例, 其中男 203 例 , 平均年龄 33 ±6. 1 岁; 女 113 例 , 平均年龄 30±7. 7 岁。 2 试 剂 (1) 检测 抗2 HCV 的 G I CA 试条 3 种: G I CA 1 英 科 新 创 ( 厦 门 ) 科 技 有 限 公 司 ( 批 号 2006060703 ) ; G ICA 2 广 东万 孚 ( 批 号 W 0560502S ) ; G ICA 3 艾康生物技术有限公司 ( 批号 0608165) 。 ( 2 ) 检测抗 2 HCV 的 EL ISA 试剂 盒两 种: EL ISA 1 上海实 业科华生物技术 有限公司 ( 批号 20060617) ; EL ISA 2 上海荣盛生物技术有限公司 ( 批号 20060615) 。 ( 3) 抗 2 HCV 定值 质 控 品: 购 于 北 京 全国 临 床 检 验 中心 , 1N CU �m l ( 批号 0609) 、 2N CU �m l ( 批号 0607) 。 (4 ) 酶 标仪: 美国B io 2R ad550 型。 3 方 法 ( 1) 敏 感 性试 验: 对 定值 为 1、 2N CU � m l 的 2 种抗 2 HCV 质控品和 672 份血清标本 , 采用 3 种 G ICA 试条和 2 种 EL ISA 试剂盒同时测定。 G ICA 法测定血清抗 2 HCV 是将各试条的加样区直接 浸入血清中 3 0 s, 取出后平放静置 , 在 15m in 内间断观 察并记录结果; 对每个定值样品测定 10 次。 EL ISA 法 按说明书操作 , 结果酶标仪测定A 值; 对每个定值样 品 加样 10 孔 测 定。 (2) 特 异 性试 验: 收 集 30 份 经 EL ISA 测定抗 2 HCV 为阴性的血清标本, 分别从 3 种 G ICA 试条中随意抽取 10 条进行复检。 ( 3) 重复性试 验: 收集经 EL ISA 测定抗 2 HCV 为弱阳性和阳性各 10 份血清标本 , 对每份标本分别从 3 种 G ICA 试条中任 意抽取 10 条进行复检 , 观察 G ICA 测定抗2HCV 的重 复性。 ( 4) G ICA 试条的渗透速度和均一性试验: 在 3 种GI CA 中分别 从每一种中任意抽取 20 条 G ICA 试 条, 以 10 条为一组, 分别浸入同一份混合血清中 , 以试 条加样区接触血清开始记时, 30s 后取出, 平放静置观 察, 待血清渗透至对照线出现肉眼可见颜色时, 记录时 间, 并以每组的平均时间作为渗透速度的指标。 均一性 观 察是 在测定 受检标本 时, 连 带观察 100 条每一 种 G ICA 试条, 以标本在滤膜上渗透时出现明显的未浸 湿的斑块, 或浸液后 15m in 以上不能到达对照线的试 条判为不均一 , 计算各自百分率为试条 的均一性指 标。 4 结果判断 G ICA : 试纸条在检测线和对 照 线位置各出现一条红色反应线, 判为阳性。 EL ISA : 操 作步骤严格按说明书进行 , 以酶标仪判读标本的 OD 值, 以 C utoff 值为界判断结果。 结 果 1 采用 3 种 G ICA 试条和两种 EL ISA 试剂盒, 对 两种抗2 HCV 定值的质控品和 672 份受检血清标本测 定抗 2 HCV 的结果 见表 1, 2 。EL ISA 法测定 30 份抗 2 HCV 阴性的血清标本 , 以每种 10 条 G ICA 试条复检, 结 果 GI CA 1 和 G I CA 2 均 为 阴 6 月第 37 卷第 6 期 弱阳性, 余均阴性。 2 重复 性 试验 收集 10 份 EL ISA 测 定抗 2 HCV 为阳性血清标本 (A ≥1. 36) 每份标本均用 3 种各
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用
胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用随着社会快速发展,人们对食品安全的关注度也越来越高。
食品安全问题直接关系到每个人的健康,而快速有效的食品安全检测技术就显得尤为重要。
胶体金免疫层析技术是一种先进的生物分析技术,具有快速、灵敏度高、操作简便等优点,因此在食品安全现场快速检测中得到了广泛的应用。
一、胶体金免疫层析技术原理及优势胶体金免疫层析技术是一种基于免疫反应的快速检测技术,其原理是将标记了胶体金颗粒的抗体与待测样品中的靶分子发生特异性识别结合,形成抗原-抗体-胶体金复合物。
随后将复合物加载到免疫层析膜上,待样品在膜上流动时,复合物将随之流动,并在免疫层析膜上形成一个特定的条带,最终通过观察胶体金颗粒在免疫层析膜上的聚集情况来判断待测物质的存在与浓度。
(1)快速性:该技术检测时间短,通常在30分钟以内即可得到结果,适用于快速现场检测。
(2)灵敏度高:胶体金颗粒作为标记物质,具有良好的散射光学性能,检测灵敏度高,可达到ppb或ppm级别。
(3)特异性强:抗体的高特异性保证了该技术对靶物质的特异性识别能力,可准确判断待测样品中目标分子的存在与浓度。
(4)操作简便:仪器设备简单,不需要复杂的实验步骤和条件,操作简便,适合于现场快速检测。
1. 农药残留检测:2. 食品中有害物质检测:食品中有害物质如重金属、致癌物质等对人体健康造成严重威胁,通过胶体金免疫层析技术,可以对食品中的这些有害物质进行快速准确的检测,及时发现并处理食品安全隐患。
3. 食品真伪鉴别:胶体金免疫层析技术还可以用于食品的真伪鉴别,通过对食品成分中的特定分子进行快速检测,判断食品原料的真实性,避免假冒伪劣产品对消费者健康造成危害。
4. 生物毒素检测:食品中的生物毒素是一种常见的食品安全隐患,而胶体金免疫层析技术可以用于生物毒素的快速检测,保障食品安全,防止食品中毒事件的发生。
随着人们对食品安全意识的提高和食品安全检测技术的不断进步,胶体金免疫层析技术将在食品安全现场快速检测中发挥越来越重要的作用。
胶体金法免疫层析法
胶体金法免疫层析法胶体金法免疫层析法是一种现代生物医学研究中常用的实验技术,它具有简单、快速、灵敏和特异性高的特点。
下面将详细介绍这一技术的原理、实验步骤以及在医学研究中的应用。
胶体金法免疫层析法原理简单易懂,利用胶体金颗粒的特殊性质与生物分子相互作用,实现对特定生物分子的检测。
胶体金颗粒表面覆有一层稳定的染色剂,当与目标生物分子结合后,会发生凝集现象,形成可见的颜色变化。
这种颜色变化与样品中目标分子的含量成正比,从而可以定量检测目标物质的浓度。
这种特性使得胶体金法免疫层析法成为医学研究中常用的无标记检测技术。
在实验中,胶体金法免疫层析法通常包含以下步骤:制备胶体金溶液、制备抗体与胶体金的复合物、准备免疫层析纸条和进行样品检测。
首先,制备胶体金溶液是实验的关键步骤之一。
胶体金溶液是由金纳米颗粒悬浮于溶液中形成的,具有特定的粒径和稳定性。
制备胶体金溶液需要精确控制金纳米颗粒的粒径和浓度,遵循特定的实验条件。
接下来,制备抗体与胶体金的复合物。
这一步骤是为了将目标分子的抗体与胶体金颗粒结合,形成一种稳定的复合物。
复合物的制备需要考虑抗体的浓度、胶体金的浓度以及反应时间等参数,以保证复合物的稳定性和活性。
准备免疫层析纸条是实验中的重要步骤之一。
免疫层析纸条是一种特殊的纸条,具有高吸附性和分离性。
在纸条上,可以固定目标分子的抗体,并与胶体金复合物相互作用。
纸条的制备需要准备特定尺寸的纸条,将抗体吸附于纸条上,并进行固定,确保纸条的功能和稳定性。
最后,进行样品检测。
将待测样品滴加在准备好的免疫层析纸条上,允许样品与固定的抗体发生反应。
当样品中存在目标分子时,胶体金和目标分子的抗体会结合并形成可见的颜色变化。
利用专业的检测设备或者目视检测,可以定量检测样品中目标分子的含量。
胶体金法免疫层析法在医学研究中具有广泛的应用。
例如,它可以用于检测临床样品中的蛋白质标记物,如肿瘤标志物,用于早期癌症的诊断和监测。
此外,该技术还可以用于检测传染病病原体,如流感病毒和结核杆菌,为疾病的诊断和流行病学调查提供重要的信息。
免疫层析法和胶体金
免疫层析法和胶体金
免疫层析法(Immunoassay)和胶体金(Colloidal Gold)是生物医学领域中常用的两种技术,它们常常结合使用。
以下是对这两个概念的简要解释:
1.免疫层析法:
定义:免疫层析法是一种生物化学分析技术,用于检测和定量测量样品中的生物分子,例如蛋白质、抗体、抗原等。
原理:这种方法基于抗体和抗原之间的特异性结合。
样品通过一张包含抗体或抗原的固定相,通过毛细作用或其他物理过程,目标生物分子与标记的生物分子结合,形成一个复合物。
这个复合物在固定相上移动,然后通过检测设备进行分析。
应用:免疫层析法在医学、生命科学研究和临床诊断中被广泛应用,例如用于妊娠检测、感染疾病的检测、药物检测等。
2.胶体金:
定义:胶体金是金纳米颗粒的悬浮液,通常具有球形形状。
这些颗粒的直径在1到100纳米之间,呈现出特殊的光学性质,如表面等离子共振。
原理:胶体金的颜色可以调节,当颗粒聚集时,溶液呈现不同的颜色。
这一特性可用于指示生物分子的存在或浓度变化。
胶体金也可以作为标记物,通过将其与特定抗体或抗原结合,用于标记并检测免疫层析法中的生物分子。
应用:胶体金在生物医学领域中有广泛的应用,特别是在免疫层析法中作为标记物。
由于其独特的光学性质,胶体金标记通常能够提供灵敏度高、可视化检测的优势。
在免疫层析法中,胶体金通常被用作标记物,以帮助检测目标生物分子。
这样的组合可以提供简便、快速、敏感的检测方法,因此在临床诊断和实验室研究中得到了广泛应用。
胶体金免疫层析间接法测抗体
胶体金免疫层析间接法测抗体概述在免疫学研究中,测定抗体的含量和活性是非常重要的。
胶体金免疫层析间接法是一种常用且高效的方法,用于测定抗体的存在和浓度。
本文将详细介绍胶体金免疫层析间接法的原理、步骤和应用。
胶体金免疫层析间接法原理胶体金免疫层析间接法是一种基于免疫层析的定性和定量分析方法。
其原理基于抗原-抗体反应和胶体金颗粒的特性。
胶体金颗粒具有良好的稳定性和生物相容性,在免疫层析中具有较强的敏感性和特异性。
胶体金免疫层析间接法步骤1.样品处理–收集样品并加工处理,确保样品的纯度和完整性。
–根据需求,可以对样品进行预处理,如稀释、去除干扰物等。
2.抗原固定–在固相载体(如纸张、膜等)上固定抗原。
–抗原可以直接固定在固相载体上,也可以通过其他方法间接固定,如沉淀、共价结合等。
3.样品添加–将处理好的样品加到固相载体上,与固定的抗原发生反应。
–反应时间和温度根据具体实验需求进行调整。
4.胶体金标记抗体–将特异性抗体与胶体金颗粒结合。
–通常通过物理吸附或共价结合方法将抗体与胶体金颗粒结合。
5.胶体金标记抗体添加–将胶体金标记的抗体加到固相载体上,与样品中的抗原结合形成免疫复合物。
–免疫复合物的形成会导致固相载体上的颜色变化,形成可见的测试线。
6.结果分析–根据形成的可见测试线的数量和强度,可以定性和定量地分析抗体的存在和浓度。
–通过对照样品和标准曲线,可以计算出样品中的抗体浓度。
胶体金免疫层析间接法应用胶体金免疫层析间接法在临床诊断、药物开发和基础研究等领域具有广泛的应用前景。
临床诊断胶体金免疫层析间接法可以用于诊断某些疾病和感染,如艾滋病、流感等。
通过检测人体产生的特定抗体,可以判断是否存在疾病或感染。
药物开发胶体金免疫层析间接法可以用于药物的筛选和评估。
通过检测药物对特定抗体的影响,可以评估药物的活性、特异性和毒副作用。
基础研究胶体金免疫层析间接法在免疫学和生物学研究中也有广泛的应用。
可以用于分析细胞表面标记物的表达和变化,研究免疫反应的机制和调控因子。
免疫胶体金技术在临床检验领域的应用进展
免疫胶体金技术在临床检验领域的应用进展发布时间:2022-11-13T12:20:04.033Z 来源:《中国医学人文》2022年5月5期作者:徐平华[导读]徐平华(四川省遂宁市安居区拦江镇中心卫生院;四川遂宁629009)摘要:免疫胶体金技术属于新型免疫标识技术,采用胶体金作为示踪标识物完成抗原抗体检测,操作简单,无需特殊仪器或试剂就能够快速完成检验,能够直观判断结果,应用前景广阔、临床价值极高,可用于定量检测与定性检测,随着研究的深入,其效果受到更多医疗检验人员认可,广泛应用于医学检验领域。
本文将介绍免疫胶体金技术优势,深入分析免疫胶体金技术方案,为医学检验工作开展提供技术参考,推动医疗事业持续发展。
关键词:免疫胶体金;临床检验领域;应用;进展目前,胶体金标识技术开始在液相免疫测定法、免疫层析法等多个领域取得新突破,金标记抗体技术在推动医学研究上发挥出了重要作用。
免疫胶体金技术主要是采用胶体金作为示踪剂,如果在硝酸纤维素膜载体上放置胶体金,能够让滤膜具备微孔过滤作用,之后被标识的抗原和抗体就能够与滤膜上特殊的受体结合在一起,再通过毛细血管作用,得到阳性信号,这样就可以有效完成定性检验或定量检验。
随着对免疫胶体金技术优化拓展,依据胶体金的性质完成相关检验技术拓展,这些技术被广泛应用到不同类型的生物学领域。
一、免疫胶体金在定性测量中的应用(一)DIGFA检测方案DIGFA技术形成及发展较早,随着研究深入及技术革新,其诊断价值非常高,应用前景非常广阔。
DIGFA属于初筛检验法,能够高效完成现场初期诊断与筛查工作。
资料显示,在粪便隐血检测实验中,DIGFA方法与传统方法相比,灵敏度更高、抗干扰能力更强。
除此之外,还有专家将其应用到血清梅毒抗体检验中,并与ELISA和流式微球载体技术形成对比实验,发现其特异性高达100%,但灵敏度相对于其他两项偏低,约为94%。
(二)GICA检测方案CICA检测最早研发于20世纪90年代,是以单克隆抗体技术及DIGFA技术作为前提构建的新型免疫层析检验法。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
2015-10大兴区质控中心专项
17
案例一
术前或孕期12周检查或创伤输血: 艾梅乙检查已纳入必检项目,择期手术或正常孕
检标本可采用EIA或MEIA或ECL方法上机检测 急诊情况,快速筛查使用试条检测,如筛查结果
(colloidal gold immunochromatography assay,
GICA ) 是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体检 测的一种新型的免疫标记技术
有三种反应模式:夹心法,间接法,竞争抑制法 见下面图示3-5
2015-10大兴区质控中心专项
7
胶体金颗粒对蛋白质有很强的吸附 功能,而不被坏其生物活性,可以与蛋白 质等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等 非共价结合,形成胶体金标记物。
2015-10大兴区质控中心专项
20
案例二
某公司便潜血检测试条
HGB检测浓度: 试剂标定灵敏 度0.2ug/ml(检测范围 0.2~2000ug/ml=0.0002~0.2g/L)
• 换算公式: • 1ug/ml=0.000001g/0.001L=0.001g/L
判定: 预试验0.2ug/ml根本肉 眼看不出。所以科室要求只要 看见检测线就报阳性
快速胶体免疫层析法检测临床 应用
2015-10大兴区质控中心专项
1
发展历史
免疫标记学可追溯到60年代。随着新理论涌现、 单克隆技术与纳米工艺开发,70年代以胶体金为代 表的标记免疫分析技术突起,迅速进入实验室常规 工作中,成为继酶免放免荧光免疫三大技术之后, 又一个庞大的试验技术应用体系,其产品广泛用于 健康体检,流行病学调查,临床疾病快筛筛查,酒 驾测试,毒品检测,食品安全检测等方面,,,,
2015-10大兴区质控中心专项
2
使用现状
★ 基层医院实验室或者大型医院门诊部为满足临床患者急迫 诊疗需要,采用胶体(金/硒)免疫层析法检测
★ 基于胶体金免疫层析法属于定性实验(无室内质控,有些 用仪器半定量结果表达)范畴,灵敏度无法与定量实验比 较,检测低水平抗原或抗体有时会发生漏检,目测方法会 受到实验室光线影响等干扰,容易产生一些假阴性或假阳 性结果 如何做好技术防范?
、、、、、、、、达百种
2015-10大兴区质控中心专项
4
产品种类之一
2015-10大兴区质控中心专项
5
检测原理
认真阅读产品说明书,了解方法学种类 熟知产品检测灵敏度 及时告知临床方法局限性:限于初步筛查;
限于操作人员判断经验;限于单一项目检测
2015-10大兴区质控中心专项
6
方法学图示
快速诊断技术之一:免疫胶体金免疫层析分析检测
2015-10大兴区质控中心专项
3
临床实验室胶体金检测条(卡) 常用种类
1、乙型肝炎表面抗原检测试纸卡 2、HIV(1/2)抗体检测试纸卡 3、潜血(Hb)检测试纸卡 4、轮状病毒(F-RV, A群)抗原检测试纸卡 5、HCG检测试纸卡 6、降钙素原(PCT)检测试纸卡 7、甲/乙型流感病毒抗原检测试纸卡
2015-10大兴区质控中心专项
8
➢胶体金免疫层析试纸条的构成
样品垫
金标垫
膜
图示1
吸收垫
衬板
2015-10大兴区质控中心专项
9
标本处理后, 加样行进方
向
图示2
2015-10大兴区质控中心专项
10
夹心法反应原理
图示3
2015-10大兴区质B控阳中心性专项
C 阴性
11
间接法反应原理
图示4
2015-10大兴区B质阳控中性心专项
C 阴性12Fra bibliotek竞争抑制法反应原理
图示5
阳性
弱阳性
阴性
检201测5-1线0大颜兴区色质强控度中心与专S项D(磺胺嘧啶)浓度负相关13
结果判定
抗原/抗体检测试纸卡
两条(红或紫或绿)线, 阳性
一条线,
阴性
无线,
实验失败或试纸失效
2015-10大兴区质控中心专项
14
GICA优势
GICA确实是一种便捷检测方法,具 有简单快速、通过肉眼或小型台式仪判 定结果、无需复杂操作技巧和特殊设备、 无污染、携带方便等优点
是阴性,血清学仪器复检结果是阳性结果,临床大 夫问:是否存在实验室检测方法学问题 回答:肯定会这种情况,方法学自身局限性问题
2015-10大兴区质控中心专项
18
HIV(1/2)抗体检测试条
1513-1514阳性?(胶体硒法) 1513-1514阳性(胶体金法)
2015-10大兴区质控中心专项
19
仔细观察后!
阳性均为A群轮状病毒血清型,感 染人群中主要血清型
甲型/乙型流感病毒 抗原检测试条
市场上最常用产品标注: 甲型流感病毒:Flu A (A2/Aichi/2/68,H3N2) 乙型流感病毒:Flu B (Hong Kong5/72) 事实上,流行毒株 Flu A有16个亚型; Flu B 有5个亚型;检测阳检率与流行株 紧密相关
2015-10大兴区质控中心专项
15
GICA技术问题
限于初步筛查 限于操作人员判断经验 限于单一项目检测,目前已有组合项目
试条出现,如甲/乙型流感病毒检测
2015-10大兴区质控中心专项
16
室内/室间质控
最大问题:没有室内质控,其结果解释只作筛查, 不作疾病诊断依据, IQC质控豁免试验。提醒临床多 结果核对,例如血常规,CRP,PCT,,,
2015-10大兴区质控中心专项
22
解决对策(1-1)
方法学互相补充
多种方法(厂家)验证 必要时复查(尤其遇到临
床对阴性结果质疑)或多 次不同批号试条核查 HIV抗体检测流程为典范
以CDC结果 报告临床
2015-10大兴区质控中心专项
23
解决对策(1-2)
质疑时, 双法验证
2015-10大兴区质控中心专项
24
解决对策(2)
产品选购目标
改良最好结果是用仪器测定,去除 人为干扰。例如PCT,用血清50ul或 全血75ul;
HBsAg检测试条
曾验证4家市场上最常用试 条检测灵敏度
实验发现,仅美国雅培试条 能检出说明书标定检测灵敏 度,其他试条均捡不出
2015-10大兴区质控中心专项
21
案例三
轮状病毒抗原检测试条
曾收集150例婴幼儿腹泻便标本, 进口试条快筛获得阳性与阴性结 果,再经过聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)法检测轮状病毒基因组 RNA,发现阴性标本中有3例C群 轮状病毒血清型