蛋白C(PC)检测简介

蛋白C（PC）检测简介
【预期用途】
蛋白C试剂是一种凝血检测试剂，用于人体血浆中蛋白C活性的定量检测。

【检验原理】
加入蛋白C激活物试剂中所含有的特异性的蛇毒后，患者标本中的蛋白质C被活化。

在加入的乏蛋白C的血浆中含有因子V和因子VIII，活化的蛋白质C就抑制因子V和因子VIII。

这种抑制反应延长了随后的APTT实验。

APTT的延长时间因而就对应于测定的患者标本中蛋白质C的含量，将标准血浆逐渐稀释后，建立标准曲线；随后患者标本中的蛋白质C含量就能以标准值的百分数形式计算出来。

【样本要求】
取得血浆的操作过程：需仔细地混合1份枸橼酸钠溶液(0.11M)与9份新鲜静脉血标本，避免形成泡沫。

立即离心标本3000rpm(1500×g)至少10分钟，取出上清血浆。

在+15至+25℃下新鲜的血浆标本最长能保存4个小时。

标本的稳定性：
+15至+25℃4小时
≤-18℃1个月
在≤-18℃温度下保存的血浆必须在+37℃温度下，在10分钟内解冻。

解冻后，血浆标本在+15至+25℃温度下不能保存2个小时以上的时间。

不要重复冷冻。

【手工操作步骤】
将1份患者的血浆用9份咪唑缓冲液稀释。

预稀释过程必须在10分钟之内完成。

将下面的试剂转移到加温至+37℃的试管内：
患者的血浆(稀释1+9) 50µL
乏蛋白C血浆50µL
蛋白C激活剂50µL
蛋白C 的APTT试剂50µL
在+37℃下，准确地混合并孵育4分钟。

加入50µL氯化钙溶液，也加温至+37℃。

在凝血分析仪上打开定时器，定下凝血时间。

注意：不要打乱加试剂的顺序。

【定标】
定标曲线的建立是采用已指定蛋白C的水平数值的定标血浆(例如标准人体血浆，REF ORKL)进行的。

标准人体血浆的数值每批次都不一样，请参考指定的数值表。

为建立定标曲线，必须在一次性的塑料试管内手工稀释定标血浆，首先用乏蛋白C血浆稀释，然后用咪唑缓冲液稀释。

推荐的定标点：标准的蛋白C活性的150%、100%、75%、50%、33%、10%。

采用下面的方法进行稀释(假设定标血浆中含有100%的标准蛋白C活性)：
以指定的定标血浆的数值乘以倍增因数，得到每一定标点的蛋白C活性值(标准值的%)。

如“手工操作步骤”部分所描述的那样，各以50µL最终定标血浆稀释，而不要采用稀释前的患者的血浆，随后将定标血浆测定二次。

每当设备部件发生变化或者每新用一批次的蛋白质C试剂时，都必须建立新的定标曲线。

内部质量控制：
每天在检测过程中，每至少8个小时必须重新测定两种质量控制材料(一种正常范围的，另一种为病理范围的)。

质量控制材料应该与标本解释同样的处理。

每一个实验室都应该确立自己的质量控制范围：或者是通过控制品制造商提供的目标值和范围，或者是其实验室设立的质控值和范围。

如果检测得到的质控值处于预先确定的范围之外，那么就应该检查试剂、凝血分析仪或者参考曲线。

结果：
蛋白C试剂的检测结果是以标准蛋白C活性的百分比形式报告的。

这些结果应该与每个实验室的蛋白C检测的正常范围相关。

【参考值（参考范围）】
预期值范围为标准值的70至140%。

各实验室的参照区间由于所检测的健康人群，以及采用的技术不同而有所差别。

因此，每一个实验室都应该根据自己的技术和设备，针对特殊人群，设立自己的预期值。

【检验结果的解释】
蛋白C是一种维生素K-依赖性的凝血抑制剂，能调节凝血因子V和因子VIII的活性。

先天性杂合子蛋白C缺乏症能引起高发生率的、年龄-依赖性的静脉血栓形成。

获得性的蛋白C缺乏症可能是由于维生素K缺乏引起的，例如吸收紊乱或者口服抗凝血剂治疗造成的后果。

在维生素K缺乏症中，其它的维生素K-依赖性的凝血因子的活性也下降，因此在这些情况下，血栓形成的风险较小。

由于蛋白质C的半衰期很短，因此口服抗凝剂治疗能使得蛋白质C的活性变得很低，以及发生香豆素坏死的风险。

蛋白质C试剂能够检测活化的蛋白质C的重要功能，例如因子V和因子VIII的蛋白水解过程，以及与蛋白质S的相互作用。

在维生素K缺乏的情况下，不能检测到所合成的蛋白质C，因此得到的蛋白质C的活性结果就低于发色方法得到的结果。

本检测结果应该总是结合患者的病史、临床表现和其它检查结果进行综合分析。

【检验方法的局限性】
根据所采用的检测原理(改良的APTT)，凝血因子VIII活性升高后会引起蛋白质C的数值下降。

在引起蛋白Ca裂解的部位，因子V存在(因子V莱顿Leiden) 基因突变也可能导致蛋白C恢复下降。

肝素浓度达2U/mL时，不会对其产生影响。

据报道，狼疮抗凝血剂能造成干扰，并使凝血时间延长，因此会显示蛋白质C浓度显著升高。

发生溶血的标本不能用来进行蛋白质C的检测。

【注意事项】
1 仅用于体外诊断过程；
2 含有人体来源的物质。

按照EU或FDA批准的体外检测指导方法，我们对每一供者或者供者单位都进行了检测，没有发现人类免疫缺陷病毒(HIV)-1和2、乙肝病毒(HBV)和丙肝病毒(HCV)。

因为尚无已知的检测方法能够完全保证其中没有感染性的成分，因此在处理所有的人体来源的产品的时候，都应该予以足够的注意。