原发性干燥综合征患者外周血B细胞瘦素表达水平及其临床意义

原发性干燥综合征患者外周血B细胞瘦素表达水平及其临床
意义
徐婷;吴敏;蔡明渊;马英淳;谢雯;张佩蓉;孙茹蓉;喻少波;徐正
【摘要】Objective:To investigate the expression and clinical significance of leptin (LP) and leptin receptor(LPR) in B cell in patients with primary
Sj?gren’s syndrome (pSS). Methods:The method of Flow Cytometry was used to measure the expression of LP and LPR in B cell in 56 patients with pSS and the test results were compared with those of 19 normal controls. The linear correlation analysis was adopted to evaluate the relationship between the expression of LP and LPRin B cell and clinical manifestations. Results:There was no significant difference in the expression of LP in
CD19+ B cell be-tween pSS patients(6.53±6.67) and the normal
controls(4.63±2.90)%as well as active pSS patients(7.17±9.19)%and in-active patients (5.98 ±3.28) (P>0.05). The expression of LPR in CD19+ B cell was significantly higher in pSS patients (25.21±18.33)% than in the normal controls (17.93±9.32)%, (P=0.029), and significantly higher in active pSS patients (30.65±20.45)%than inactive patients(20.49±15.08)%(P=0.037). The expression of LP was positively correlated with the expression of LPR in CD19+ B cell (r=0.332,P=0.004). The expression of LP in CD19+ B cell was negatively correlated with the serum level of Low density lipoprotein(r=-0.276,P=0.030)and creatinine(r=-0.256,P=0.034) significantly. The ex-pression of LPR in CD19+B cell was negatively correlated with weight(r=-0.294,P=0.010) andbody mass index(BMI) (r=-
0.296,P=0.010)significantly. The expression of LPR in CD19+ B cell in the group with oral ulcer was significantly higher than those without oral ulcer (P<0.01). Conclusion:There is LPR in CD19+ B cell imbalance in pSS patients, and this is correlated with pSS activity indexes. The expression of LPis positively correlated with the expression of LPR in CD19+ B cell.LP and LPR can regulate fat metabolism and body weight, which may be involved in renal injury and oral ulcers in pSS.It may provide new therapeutic targets for treatment of pSS.%目的：探讨原发性干燥综合征（ pSS）患者外周血B细胞瘦素（ LP）及瘦素受体（ LPR）的表达及临床意义。

方法：应用流式细胞仪（ FCM）检测56例pSS患者及19例正常对照者外周血B细胞LP及LPR的表达，分析LP及LPR表达与患者临床特点及疾病活动的相关性。

结果：pSS患者B 细胞LP表达与正常对照组差异无统计学意义（ P>0.05），而LPR表达高于正常对照组，差异有统计学意义（ P=0.029）。

活动期患者B细胞LP表达与稳定期差异无统计学意义（ P>0.05），而LPR表达高于稳定期，差异有统计学意义
（ P=0.037）。

患者B细胞LP表达与LPR表达呈正相关，具有统计学意义（ r＝0.332，P=0.004）。

患者B细胞LP表达与低密度脂蛋白（ r＝-0.276，
P=0.030）、肌酐（ r＝-0.256，P=0.034）呈负相关，具有统计学意义。

患者B 细胞LPR表达与体重（ r＝-0.294，P=0.010）、BMI（ r＝-0.296，P=0.010）呈负相关，具有统计学意义。

口腔溃疡组B细胞LPR表达高于无口腔溃疡组，差异有统计学意义（ P<0.01）。

结论：pSS患者B细胞LPR存在异常，与病情活动相关，B细胞上LP与LPR显著正相关，可以调节脂肪代谢及体重，可能参与到pSS疾病中肾脏损伤及口腔溃疡。

【期刊名称】《交通医学》
【年(卷),期】2016(030)005
【总页数】4页(P409-412)
【关键词】干燥综合征;B细胞;瘦素;受体
【作者】徐婷;吴敏;蔡明渊;马英淳;谢雯;张佩蓉;孙茹蓉;喻少波;徐正
【作者单位】常州第一人民医院免疫风湿科，江苏213003;常州第一人民医院免
疫风湿科，江苏213003;常州第一人民医院免疫风湿科，江苏213003;常州第一
人民医院免疫风湿科，江苏213003;常州第一人民医院免疫风湿科，江苏213003;常州第一人民医院免疫风湿科，江苏213003;常州第一人民医院免疫风湿科，江
苏213003;常州第一人民医院免疫风湿科，江苏213003;常州第一人民医院免疫
风湿科，江苏213003
【正文语种】中文
【中图分类】R593.2
原发性干燥综合征（pSS）是一种不仅侵犯全身外分泌腺器官，并且累及多脏器的慢性自身免疫性疾病。

pSS血清中存在抗核抗体（ANA）、抗可溶性抗原（ENA）抗体（特别是抗SSA、抗SSB）、类风湿因子（RF）和一些器官特异性自身抗体
如抗线粒体抗体、抗甲状腺抗体、唾液腺导管细胞和抗细胞抗体、抗胃壁细胞抗体等。

pSS患者淋巴瘤（主要为B细胞性）的发病率显著升高，可能与单克隆球蛋
白血症有关，显示B细胞异常活化参与疾病的发生发展，但确切病因尚不清楚
［1-4］。

瘦素（leptin，LP）是由肥胖基因（ob）编码的mRNA表达产物，在
调节营养摄取和代谢中发挥关键作用［5］。

随着研究的进展，瘦素对免疫应答及造血功能等的调节作用越来越受到关注。

瘦素可通过激活Bcl-2和cyclin D1来抑
制凋亡和诱导细胞增殖［6］，激活PI3K/Akt信号通路，从而抑制B细胞凋亡。

本研究选择2014年12月—2015年5月在我院就诊的pSS患者56例，检测pSS中B细胞瘦素及瘦素受体（leptin receptor，LPR）的表达，分析其与临床
表现之间的关系，以此探讨瘦素对干燥综合征B细胞的免疫调节作用及机制，为
临床治疗pSS提供新的治疗靶点。

1.1 一般资料56例pSS患者，均为女性，年龄24～82岁，平均（5
2.0±11.9）岁。

诊断均符合美国风湿病学院2002年修订的SS分类标准［7］。

根据2009年欧洲风湿病联盟（EULAR）制定的SS病情评估指数ESSDAI，评分≥2分判为活
动期。

56例患者中活动期26例，稳定期30例。

选择年龄和性别匹配的健康志愿者（之前未患慢性疾病或3月内未服用任何药物）19例作为对照组，均为女性，
年龄31～72岁，平均（51.5±12.0）岁。

干燥综合征患者脏器损伤标准，血液系统受损：外周血白细胞（WBC）＜4×109/L，或血小板（Plt）＜100×109/L，或溶血性贫血、网织红细胞增多，或发展为淋巴瘤；呼吸系统损伤：患者肺部高分辨CT提示肺间质病变、肺间质纤维化，或动脉血氧分压、血氧饱和度下降，超声心
动图提示肺动脉高压；肾脏损伤：肾小管酸中毒出现周期性低血钾，严重出现肾钙化、肾结石、肾性尿崩症及肾性软骨病，或肾小球受损出现大量蛋白尿、低白蛋白血症甚至肾功能不全，或肾穿刺提示异常，为肾脏损伤；肝功能受损：转氨酶高出正常值2倍，或胆红素升高，或肝穿刺提示异常；内分泌系统受损：出现甲状腺
功能异常。

所有患者的人口统计和临床参数从医疗记录中进行回顾性收集。

本研究获得常州市第一人民医院医学伦理委员会批准，并遵循赫尔辛基宣言的宗旨。

1.2 外周血CD19+B细胞Leptin、Leptin R表达率检测抽取晨空腹静脉血3mL，乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，离心去除血浆后，各取50μL混悬液至各标记试管，分别加入鼠抗人CD19-FITC（美国BD Pharmingen公司）、兔抗人Leptin-PE
抗体（美国LSBio公司产品）、鼠抗人Leptin R-APC抗体（美国R&D公司），
混匀震荡，避光30min，加红细胞裂解液150μL（按1∶5比例）至各试管，离心去除红细胞，上流式细胞仪（美国BD公司）分析检测。

1.3 其他检测指标自身抗体包括抗核抗体(ANA)、抗可溶性抗原（ENA）抗体谱、类风湿因子（RF），免疫功能包括免疫球蛋白IgG、IgA、IgM、补体C3、C4，
血常规，尿常规，肾功能包括尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、肌酐（Cr），肝功能，红细胞沉降率（ESR），C反应蛋白（CRP），空腹血糖，血脂，体重、身高、体质指数。

1.4 统计学处理应用SPSS19.0统计软件，计量数据以均数±标准差（±s）表示，
两组间比较采用单因素方差分析，相关性分析采用直线相关分析。

P＜0.05为差异有统计学意义。

2.1 pSS患者B细胞上LP、LPR表达pSS患者CD19+B细胞LP表达
（6.53%±6.67%）与正常对照组CD19+B细胞LP表达（4.63%±2.90%）差异
无统计学意义（P=0.232），而LPR表达（25.21%±18.33%）显著高于正常对照组（17.93%±9.32%），差异有统计学意义（P=0.029）。

见图1。

2.2 活动期pSS患者B细胞LP、LPR表达活动期患者CD19+B细胞上LP表达（7.17%±9.19%）与稳定期患者的表达（5.98%±
3.28%）差异无统计学意义
（P=0.537），而LPR表达（30.65%±20.45%）显著高于稳定期患者
（20.49%±15.08%），差异有统计学意义（P=0.037）。

见图2。

2.3 pSS患者B细胞LP与LPR表达的相关性pSS患者CD19+B细胞上LP表达
与LPR呈显著正相关，具有统计学意义（r＝0.332，P=0.004）。

见图3。

2.4 LP、LPR表达与其他检测指标的相关性pSS患者CD19+B细胞上LP表达与
低密度脂蛋白（r＝-0.276，P=0.030）、肌酐（r＝-0.256，P=0.034）呈负相关，与其他指标无相关性；pSS患者CD19+B细胞上LPR表达与体重（r＝-0.294，
P=0.010）、BMI（r＝-0.296，P= 0.010）呈负相关，与其他指标无相关性。

2.5 LP、LPR表达与临床症状的关系pSS患者口腔溃疡组B细胞LPR表达显著高于无口腔溃疡组，差异有统计学意义（P＜0.01）。

见表1。

2.6 LP、LPR表达与脏器损害的关系pSS患者有肺脏、肝脏、血液系统、甲状腺、肾脏损害组的B细胞上LP、LPR表达与无损害组差异均无统计学意义（P＞
0.05）。

见表2。

pSS是一种慢性自身免疫性疾病，特点是浸润外分泌腺体，具有局灶性淋巴细胞
浸润的病理学特征。

pSS腺体外表现十分广泛，包括疲劳、血管炎、周围神经病变、肾小管酸中毒、间质性肺疾病、淋巴增殖性疾病以及免疫学异常［8］。

大约5%pSS患者可合并淋巴瘤，存在较高的死亡风险。

目前批准治疗pSS新的生物靶向药物依然很有限［9］。

研究显示，B细胞免疫异常在pSS发病机制中发挥重要作用。

B细胞可产生抗体以及多种细胞因子，B细胞活化因子（BAFF）转基因小
鼠产生自身抗体，导致唾液腺的破坏，临床特征与pSS相似［10］。

最近研究表明，瘦素在炎症和免疫反应中起着至关重要的作用［11］。

瘦素通过
抗原提呈细胞（APC）影响非特异性免疫功能，包括自然杀伤细胞（NK细胞）和中性粒细胞等。

目前瘦素对B细胞的影响受到广泛的关注。

瘦素能刺激骨髓中B
细胞的增殖，不仅使B细胞数目恢复正常，而且使体液免疫功能也恢复正常，表
现为抗mBSA的IgG抗体水平不低于对照组。

凋亡在维持B细胞内环境中起了重要的作用［6］。

本研究发现pSS患者CD19+B细胞上LPR异常高表达，活动期显著高于稳定期，LP表达与LPR呈正相关，提示pSS患者B细胞上LPR存在异常，与疾病活动相关，LP与LPR相互作用参与pSS的发生和发展。

pSS患者CD19+B细胞上LP及其受体表达与低密度脂蛋白、体重及BMI负相关，提示LP及其受体在脂肪代谢及体重的调节中发挥重要作用。

pSS患者CD19+B
细胞LP表达与血浆肌酐水平呈负相关，口腔溃疡组LPR表达显著高于无口腔溃疡
组，提示LP/LPR可能在pSS肾脏损伤及口腔溃疡的发生中起到了一定的作用。

【相关文献】
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