橘红片中橙皮苷含量测定方法研究

橘红片中橙皮苷含量测定方法研究
管大平;钱世兵;纪开明
【摘要】目的:建立HPLC法测定橘红片中橙皮苷含量的方法.方法:采用高效液相
色谱法对橘红片中橙皮苷进行含量测定；色谱柱为Waters VP-ODS-C18,流动相
为甲醇-水-冰醋酸(35∶61∶4)；流速为1.0 mL/min,检测波长283 nm.结果:橙皮
苷的进样量在0.3964～2.3784μg范国内呈良好的线性关系(r=0.99996),平均加样回收率为99.92％,RSD为0.3％(n=6).结论:该方法结果准确,重现性好,可用于测定橘红片中橙皮苷含量.
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2012(025)005
【总页数】2页(P665-666)
【关键词】橘红片;橙皮苷;液相色谱
【作者】管大平;钱世兵;纪开明
【作者单位】铜陵市食品药品检验所,安徽铜陵244000;铜陵市食品药品检验所,安
徽铜陵244000;铜陵市食品药品检验所,安徽铜陵244000
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
橘红片收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第四册，主要成分有化橘红、陈皮、半夏、茯苓、桔梗等15味［1］，用于清肺，化痰，止咳［2］。

该标准无含量测
定项目，且无陈皮鉴别试验。

但是陈皮是方中主要药物之一，具理气降逆、调中开胃、燥湿化痰之功［3］。

为了更好的控制本产品的质量，本试验建立HPLC法测定橘红片中橙皮苷含量的方法［4］。

1 仪器与试药
1.1 仪器
AB135－S电子天平(0.01mg)、GB－204电子天平(0.1mg)(梅特勒－托利多);普析通用TU－1901紫外－可见分光光度计;Waters e2695高效液相色谱仪;Waters VPODS－C18色谱柱(150mm×4.6mm);Waters 2489UV/visible Detector紫外检测器;Waters Millennium32工作站。

1.2 试药
橘红片(北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，批号:0126466、0126468、0126474);色谱甲醇、纯化水、冰醋酸(AR);橙皮苷(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号:110721－201014，含量95.1%)。

2 方法与结果
2.1 色谱条件［5］Waters VP－ODS－C18色谱柱(150mm×4.6mm)，甲醇－水－冰醋酸(35:61:4);流速为1.0 mL/min，检测波长283 nm。

2.2 供试品溶液的制备:取重量差异项下的本品，研细，取约1g，精密称定，置索氏提取器中，用甲醇回流提取5小时，提取液回收甲醇，浓缩至5ml，加甲醇溶解，转移至25ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 对照品溶液的制备:取橙皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇配制成每1ml含0.2mg的溶液。

2.4 阴性样品溶液的制备［6］:按处方制备不含陈皮挥发油的阴性样品，照“2.2”供试品溶液的制备方法制得阴性样品溶液。

2.5 线性关系的试验［7］精密称取黄芩苷对照品10.89mg，置25mL量瓶中，甲
醇溶解，甲醇稀释至刻度，摇匀。

精密吸取5mL，置10mL量瓶中，甲醇稀释至刻度，摇匀。

分别精密吸取黄芩苷对照品溶液 2、4、6、8、10、12μL 注入液相色谱仪中，以进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，经线性回归，回归方程:表明橙皮苷进样量在0.3964～2.3784μg范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验精密吸取2.3项下对照品溶液10μL重复进样5次，测得峰面积的RSD为0.7%(n=5)，结果表明仪器精密度良好。

2.7 样品测定取样品，按照供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，分别取供试品溶液及对照品溶液各10μL进样测定峰面积，用外标法(以峰面积)计算含量，结果见表1、图1－3:
表1 样品含量测定结果批号平均含量(mg/g)0126466 7.3 0126468 7.0 0126474 7.1
图1 对照品色谱图
图2 样品色谱图
图3 阴性样品色谱图
2.8 稳定性试验取供试品溶液［8］，分别在 0、2、4、6、8、10 h进样10μL，测得峰面积的RSD为1.0%(n=6)。

实验结果表明，供试品溶液在10 h内稳定性良好。

2.9 重复性试验［9］精密称取同一批样品5份，照“2．2”项下方法制备供试品溶液，进样10μL测定，橙皮苷含量平均为7.0mg/g，RSD为0.4%(n=5)。

表明分析方法重现性好。

2．10 加样回收率试验［10］［11］精密称取已知含量的同一批号样品6份，每份约0.145g，分别精密加入对照品溶液(橙皮苷对照品10.67mg，加甲醇至10m L量瓶中，稀释至刻度)1 mL，按“2．2”项下供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，进样10μL测定峰面积，计算回收率，结果见表2。

表2 加样回收率试验结果称样量(g)样品含量(mg)加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)0.1450 1.0150 1.015 2.0310 100.10 0.1451 1.0157
1.015
2.0281 99.74 0.1449 1.0143 1.015 2.0265 99.72 0.1449 1.0143 1.015
2.0244 99.52 99.92 0.3 0.1451 1.0157 1.015 2.0302 99.95 0.1450 1.0150 1.015 2.0324 100.24
3 讨论
橘红片标准简单，仅有定性，不足以控制其质量。

本试验采用HPLC法测定橘红片中橙皮苷含量，该法回收率高，分离效果好，操作简便，方法可行。

参考文献
［1］卫生部药典会.卫生部药品标准中药成方制剂第四册［S］.1992.
［2］刘汉清，倪健.中药药剂学［M］.北京:科学出版社.2005.
［3］中药学教材编委会.中药学［M］.北京:人民卫生出版社1997.
［4］国家药典委员会．中华人民共和国药典［S］.一部．北京:化学工业出版社.2005，附录36.
［5］王喜军.中药鉴定学［M］.北京:高等教育出版社.2009.
［6］国家药典委员会．中华人民共和国药典［S］.一部．北京:化学工业出版社.2005，附录130.
［7］国家药典委员会．中华人民共和国药典［S］.一部．北京:化学工业出版社.2005，附录30.
［8］杨雪萍，刘卫，孙昕，等.钩藤总碱中钩藤碱和异钩藤碱定量方法的建立及稳定性试验［J］.实用医药杂志.2012年29卷3期.
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年7卷4期.
［11］水彩红，曹红.HPLC法测定山茱萸药材及六味地黄胶囊中马钱苷的含量［J］.中国药品标准.2005年6卷4期.。