PP2A Cα敲除小鼠心肌细胞模型的构建
两种基因敲除小鼠的培育
七周重
黑鼠 灰鼠
八周重
黑鼠 灰鼠
九周重
黑鼠 灰鼠
十周重
黑鼠 灰鼠
十一周重
黑鼠 灰鼠
十二周重
黑鼠
3
心电图
4
生理指标
HR
SBP
DBP
MBP
心率
收缩压
舒张压
平均动脉压
C-S
547.1
104.3
67.0
79.2
C-C
448.3
98.4
68.5
78.8
5
项目
血液常规
单位 C-S C-C C57BL/6
WBC
两种基因敲除小鼠的培育
摘要
从美国哈佛大学引进了两种基因敲除小鼠。
这两种品系小鼠的体内分别缺少Cystatin C （胱抑素C ）和 Cathepsin S（组织蛋白 酶 ），简称C-C 和 C-S。在三年的培育过程 中，我们对其生长繁殖、生理生化等一系列 指标作了测定，现将结果汇报如下。
一、材料和方法
#LUC %NEUT %LYMPH
白细胞计数
大未染色细胞计数 中性细胞比率 淋巴细胞比率
10^9/L
10^9/L % %
4.54
0 5.8 .4 76.2
5.89
14.2 81.2
%MONO
%EOS %BASO %LUC RBC HGB HCT MCV MCH MCHC
项目名称 血清总蛋白 血清白蛋白 血清球蛋白
项目代码 TP ALB GLOB
单位 g/L g/L g/L
C-S 50.4 35.1 15.4
C-C 50.8 34.1 16.6
血清白球比
血清丙氨酸氨基转移酶 血清天门冬氨酸氨基转移酶 血清总胆红素 血清碱性磷酸酶 血清甘油三酯 血清总胆固醇 血清肌酸激酶 血清肌酐 尿素 钠
血管紧张素Ⅱ诱导的新生小鼠心肌细胞肥大模型
血管紧张素Ⅱ诱导的新生小鼠心肌细胞肥大模型周恒;唐其柱;邓伟;卞洲艳;袁园;倪健【期刊名称】《医学研究杂志》【年(卷),期】2015(044)011【摘要】目的探索新生小鼠心肌细胞的原代培养方法,建立血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心肌细胞肥大模型.方法使用0.03％的胰酶+0.04％的2型胶原酶多次消化分离心肌细胞,差时贴壁法纯化心肌细胞.1μmol/L AngⅡ刺激心肌细胞肥大,α-actinin染色进行心肌细胞纯度鉴定及面积检测,实时定量RT-PCR检测心肌细胞肥大标志物的表达,Western blot法检测蛋白质磷酸化水平.结果培养得到的小鼠心肌细胞具有较高纯度及存活力;AngⅡ刺激后心肌细胞面积增大、蛋白合成增加,ANP、BNP、β-MHC等心肌细胞肥大标志物的mRNA表达水平较对照组明显升高(P＜0.05),而α-MHC表达则下降(P＜0.05);此外,AngⅡ刺激组ERK、JNK与p38的磷酸化水平较对照组明显上调(P＜0.05).结论使用改良的新生小鼠心肌细胞原代培养方法,成功培养了具有较高纯度及存活力的小鼠心肌细胞,并建立了AngⅡ诱导的小鼠心肌细胞肥大模型.【总页数】5页(P26-30)【作者】周恒;唐其柱;邓伟;卞洲艳;袁园;倪健【作者单位】430060 武汉大学人民医院心内科、武汉大学心血管病研究所;430060 武汉大学人民医院心内科、武汉大学心血管病研究所;430060 武汉大学人民医院心内科、武汉大学心血管病研究所;430060 武汉大学人民医院心内科、武汉大学心血管病研究所;430060 武汉大学人民医院心内科、武汉大学心血管病研究所;430060 武汉大学人民医院心内科、武汉大学心血管病研究所【正文语种】中文【中图分类】R5【相关文献】1.蓬乱蛋白2对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的影响 [J], 高小博;王译晗;朱海英;张辰;马旭;陆彩玲2.G蛋白偶联雌激素受体1对血管紧张素Ⅱ诱导心肌细胞肥大的影响及其机制 [J], 裴慧;王立启;王磊;王维;毕秀萍;才晓君;苏国海;赵卓3.Pyk2促进血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌细胞肥大 [J], 鄢雯; 刘立新; 孔祥照; 骆雨辰; 李中秋; 李囡4.下调miR-208b-5p对血管紧张素Ⅱ诱导的乳鼠心肌细胞肥大的影响 [J], 郑甲林;宋丽娟;郭涛;李建美5.血管紧张素Ⅱ联合缺氧诱导大鼠心肌细胞肥大的模型制备及应用 [J], 李芳;杜小换;王文静;朱增燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
apoa5基因敲除仓鼠模型的构建方法
apoa5基因敲除仓鼠模型的构建方法
ApoA5基因是人体中一个重要的脂质代谢相关基因，它编码的蛋白质可以调节血浆三酰甘油水平。
因此，研究ApoA5基因的功能和作用对于了解脂质代谢的机制以及相关疾病的发生发展具有重要意义。
为了更好地研究ApoA5基因的功能，科学家们利用基因敲除技术构建了ApoA5基因敲除仓鼠模型。
ApoA5基因敲除仓鼠模型的构建方法主要包括以下几个步骤：
1.设计ApoA5基因敲除的引物
首先，科学家们需要设计一对特异性引物，用于扩增ApoA5基因的外显子序列。
引物的设计需要考虑到引物的长度、GC含量、Tm值等因素，以确保引物的特异性和扩增效率。
2.构建ApoA5基因敲除载体
将引物扩增得到的ApoA5基因外显子序列克隆到敲除载体中，构建ApoA5基因敲除载体。
敲除载体通常包括两个同向的荧光蛋白基因，用于筛选敲除细胞株。
3.转染和筛选
将ApoA5基因敲除载体转染到仓鼠胚胎干细胞中，利用荧光蛋白筛选出ApoA5基因敲除细胞株。
筛选出的细胞株需要进行PCR验证和Southern blotting确认。
4.建立ApoA5基因敲除仓鼠模型
将ApoA5基因敲除细胞株注射到野生型仓鼠的受精卵中，通过胚胎移植技术建立ApoA5基因敲除仓鼠模型。
建立的仓鼠模型需要进行PCR验证和Southern blotting确认。
通过以上步骤，科学家们成功地构建了ApoA5基因敲除仓鼠模型。
这个模型可以用于研究ApoA5基因的功能和作用，以及与脂质代谢相关的疾病的发生发展机制。
同时，这个模型也为开发相关疾病的治疗方法提供了新的思路和途径。
胰岛细胞特异性敲除基因appl1小鼠模型的制备
尊敬的《上海医学》编辑老师：您好！首先非常感谢您及评审专家对我们文章的审修，目前已按照修改意见进行了修改，以下是对修改意见的具体答复，希望回答专家的问题，谢谢。
1.“胰岛细胞特异性敲除APPL1基因”和“β细胞APPL1特异性敲除APPL1基因”这两种表达方法应该统一；在文章中已做修改。
2.从图3可以看出，β细胞APPL1敲除小鼠脂肪组织APPL1的表达显著高于野生型，原因何在?正如文章所提及，我们收集APPL1flox/flox和β-APPL1KO两组小鼠多例样本，western结果并未发现APPL1蛋白水平表达的脂肪组织中有统计学差异，为了消除之前结果容易给人的误解，我们另外选择两组实验数据来作为结果图。
3.该研究目的是建立β细胞APPL1基因敲除小鼠模型，因此在表型分析方面应多关注β细胞功能，至少要提供血胰岛素水平方面的数据，而不是仅仅提供血糖数据。
这个意见提得很好，事实上我们研究组已经研究了APPL1flox/flox和β-APPL1KO小鼠的空腹血胰岛素水平差异，这部分内容我在文章的方法和结果中也已作了修改和补充。
4.如可以请引用《上海医学》杂志和《中国实用内科杂志》的参考文献各一条在文章中我已做补充。
此致敬礼李晓雯2015.1．30胰岛细胞特异性敲除基因APPL1小鼠模型的制备李晓雯1 李羚1林紫薇1 孙赟1 陈辰2王琛1* 贾伟平1【摘要】目的制备转接蛋白APPL1胰岛细胞特异性敲除小鼠模型。
方法采用基因剔除打靶技术，囊胚显微注射法制备嵌合小鼠，利用Cre-loxp系统繁育APPL1胰岛特异性敲除小鼠。
Western blot检测APPL1蛋白表达水平。
结果成功制备胰岛细胞特异性敲除基因APPL1小鼠模型，与APPL1flox/flox小鼠相比，胰岛细胞特异性敲除基因APPL1并不影响小鼠体重，空腹血糖以及空腹胰岛素水平，western blot从蛋白水平印证敲除小鼠胰岛中的APPL1蛋白无表达。
缺氧诱导因子2α基因敲除对小鼠动脉粥样硬化发生的影响
缺氧诱导因子2α基因敲除对小鼠动脉粥样硬化发生的影响陈倩;张明;王海军;丁宇【摘要】Objective To study the effect of hypoxia inducible factor 2α (HIF-2α) gene knockout on atherosclerosis in mice. Methods LoxP-labeled HIF-2αmice and Mx-Cre-labeled transgenic mice were enrolled in this study. A mouse model of conditional HIF-2αgene knockout was established with the Cre/LoxP system. Mx-Cre negative wild-type mice and ApoE gene deletion (ApoE-/-) mice served as controls. Atherosclerotic lesions of aorta were observed in the animals with HE staining 8 weeks after being fed with a high fat diet. Results Mx-Cre positive LoxP-labeled HIF-2αmice and Mx-Cre-labeled transgenic mice were produced after they mated by two passages and genotype identification. The mouse model of conditional HIF-2αgene knockout was successfully established by intra-abdominal injection with polycytidilic acid. Eight weeks after the animals were fed with a high fat diet, atherosclerotic lesions and mild intimal hyperplasia were detected in ApoE-/-mice and wild-type mice, respectively. However, no intimal hyperplasia was detected in HIF-2α-/-mice. Conclusion HIF-2αgene knockout can inhibit the formation of atherosclerotic lesions in mice, indicating that gene therapy for HIF-2αis a novel strategy for the prevention and treatment of atherosclerosis.% 目的明确缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor, HIF)-2α对动脉粥样硬化病变的影响。
Cre-LoxP技术构建肝脏特异性HIF-2α基因敲除小鼠模型
【Abstract】 Objective To investigate the feasibility of establishing a mouse model with liverspecific HIF-2α gene knockout using Cre-LoxP technique. Methods The loxP-labeled mice with HIF-2α gene were introduced from the Jackson Laboratory of the United States. A liver-specific HIF-2α gene knockout mouse model was established by using Cre/loxP recombinase system and Alb-Cre transgenic mice through multiple generations of hybridization. The genotypes of mouse were identified by PCR. The expression levels of HIF-2α mRNA in the liver, fat and muscular tissues were detected by RT-qPCR. The blood glucose, blood lipid and liver function levels in the wild-type mice and Alb-Cre+/HIF-2αfl/fl homozygous mice were detected. The levels of HIF-2α mRNA among three groups were statistically compared by one-way ANOVA and Turkey test. Results The genotypes of the 2nd generation mouse were successfully identified, including Alb-Cre+/HIF-2αfl/fl and Alb-Cre-/HIF-2αfl/fl homozygous mice. The expression level of HIF-2α mRNA in the liver tissues of HIF-2α gene knockout mice was 0.10±0.02, significantly lower than 1.00±0.10 of the wild-type mice (HSD=-1.87, P<0.05). Conclusion The mouse models with liver-specific HIF-2α gene knockout can be successfully established using Cre-LoxP technique.
AAV-SaCas9敲除MSTN基因病毒的构建及鉴定
河南农业科学，2018，47(1):118-121Journal of Henan Agricultural Sciences d〇i：10. 15933/ki. 1004-3268.2018.01.021 AAV- SaCas9敲除基因病毒的构建及鉴定汪新建，樊爽爽，翁少亭，杨国宇，褚贝，王(河南农业大学/农业部动物生化与营养重点开放实验室，河南郑州450002)摘要：为了研究肌肉生长抑制素（MSTN)的相关功能，应用分子生物学方法构建敲除K S T M的A A V- SaCas9载体，通过转染293T细胞提取基因组后进行T7酶切鉴定、T A克隆及测序确定该基因的敲 除效果；将鉴定正确的A A V-SaCas9重组质粒与p H elper质粒共转染A A V-293细胞3 d后，分离 纯化病毒并用实时荧光定量P C R法检测病毒滴度。
结果显示，成功构建了敲除K S T M基因的A A V-SaCas9重组载体，T7酶切和测序鉴定出sgRNA2位点可以对K S T M进行编辑，并成功将其包装成病毒，经荧光定量P C R鉴定病毒滴度为2.73 x1012v g/m L。
关键词：肌肉生长抑制素基因；CRISPR-C a9;腺相关病毒载体；293T细胞中图分类号：S852.23 文献标志码：A文章编号％ 1004 -3268(2018)01 -0118 -04 Construction and Identification of M STN Knockout AAV-SaCas^9WANG X in jia n，FAN Shuangshuang，WENG Shaoting，YANG Guoyu，CHU Beibei!，WANG Jiang(Key Lab of Regulation on Animal Growth and Development of Agricultural ChinaHenan Agricultural University，Zhengzhou 450002，China)A b stract%To study the function of myostatin(MSTN)，molecular biology method was applied to constructthe recombinant vector of M ST N knockout A A V-SaCas^9,the transfected 293T cells were extracted for the genome and identified by T7 endonuclease.Then the mutations were further confirmed sequencing.The A A V-293 cells were co-trnnsfected with A A V-SaCas9 and helper plasmids.V irusw as isolated and purified a fter three days，and its titer was determined by real-time fluorescence quantitative PCR.Our results showed t hat therecombinant vector of MSTN knockout A A V-SaCas9 was successfully constructed.MSTN could be edited by sgRNA2 identified by T7 digestion and sequencing，and A A V-SaCas9 was successfully packaged into virus.Finally the titer was 2. 73 X 1012v g/m L，which was identified by fluorescence quantitative PCR.K ey w o rd s：M ST N gene；CRISPR-Cas9 ；AAV vector； 293T cell肌肉生长抑制素（MSTN)是肌肉生长的负调控 因子，其主要功能是抑制肌肉细胞的增殖和分化[1]。
一种建立小鼠2型糖尿病心肌病模型的方法
一种建立小鼠2型糖尿病心肌病模型的方法王金鑫;段鹏;朱庆磊【摘要】AIM:To establish a mouse model of type 2 diabetic cardiomyopathy induced by sustained high-fat diet(HFD)feeding and single intraperitoneal injection of streptozotocin(STZ).METHODS: The 5~6-week-old C57BL/6J mice were randomly divided into 2 groups(n=20 per group): the mice in control group received a sustained regular diet;the mice in HFD+STZ group received a sustained HFD and were intraperitoneally injected with STZ(100 mg/kg)at the 5th week.The body weight and blood glucose were measured at 0,5,6,11 and 16 weeks.The mice in control group and HFD +STZ group were analyzed with echocardiography,HE staining,ELISA and immunohistochemistry at the11th and 16th weeks.RESULTS:The body weight of the mice in HFD +STZ group was higher than that in control group(P<0.05)during each modeling period,and was slightly decreased 1 week after STZ injection.The blood glucose of the mice in HFD+STZ group was higher than 13.89 mmol/L 1 week after STZ injection.The serum insulin of the mice in HFD+STZ group was lower than that in control group(P<0.05)at the 11th week and the 16th week.Echocardio-graphy, HE staining and immunohistochemistry analysis showed that the mice in HFD +STZ group had mild ventricular dysfunction and cardiomyocyte hypertrophy, and cardiomyocyte area and apoptosis rate were obvious higher than those in control group(P<0.05)at the 16th week,while these indicators were not obviously changed in HFD +STZgroup com-pared with control group at the 11th week.CONCLUSION:The sustained HFD feeding and single intraperitoneal injec-tion of STZ successfully establish a mouse model of type 2 diabetic cardiomyopathy.%目的:采用连续喂养高脂饮食(high-fat diet,HFD)结合单次腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)的方法建立小鼠2型糖尿病心肌病模型.方法:将40只5~6周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分成2组(每组各20只):对照(control)组,持续以普通饲料喂养;HFD+STZ组,持续以HFD喂养,并于造模第5周注射STZ(100 mg/kg).于造模实验开始(第0周)、第5周、第6周、第11周和第16周,测量体重和血糖,并于第11周和第16周分别对control组和HFD+STZ组小鼠进行心功能检测、胰岛素水平检测、组织学观察和心肌细胞凋亡分析.结果:造模过程中HFD+STZ组小鼠各时期的体重均大于control组(P<0.05),注射完STZ后小鼠体重略有下降,但仍高于control组.注射STZ 1周后,HFD+STZ组小鼠空腹血糖值均持续高于13.89 mmol/L.在造模第11周和16周时,HFD+STZ组小鼠胰岛素水平与control 组相比均有降低(P<0.05).心功能检测、组织学观察和心肌细胞凋亡分析显示,造模第11周时,HFD+STZ组小鼠的超声、心肌细胞面积和凋亡率等指标与control组相比变化不明显;造模第16周,HFD+STZ组小鼠出现心室功能障碍,心肌细胞肥大,心肌细胞的面积和心肌细胞凋亡率明显大于control组(P<0.05).结论:采用连续喂养HFD结合单次注射STZ可成功建立小鼠2型糖尿病心肌病模型.【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2018(034)004【总页数】5页(P764-768)【关键词】糖尿病心肌病;小鼠模型;高脂饮食;链脲佐菌素;细胞凋亡【作者】王金鑫;段鹏;朱庆磊【作者单位】解放军总医院心内科,北京100853;解放军371医院心内科,河南新乡453000;解放军总医院心内科,北京100853【正文语种】中文【中图分类】R363.2;R33-33糖尿病是导致糖尿病心肌病的重要原因，糖尿病心肌病严重威胁糖尿病患者的生命健康。
JPH2敲减抑制小鼠心肌细胞SK2蛋白的表达开题报告
JPH2敲减抑制小鼠心肌细胞SK2蛋白的表达开题
报告
题目：JPH2敲减抑制小鼠心肌细胞SK2蛋白的表达
背景：JPH2是钙离子调节蛋白，在心肌细胞中具有重要的功能。
最近的研究表明，JPH2和SK2蛋白的相互作用对心肌细胞的钙离子调节有着重要的作用。
然而，JPH2敲减对SK2蛋白表达的影响仍未被充分研究。
目的：本研究旨在探讨JPH2敲减对小鼠心肌细胞SK2蛋白表达的
影响，并进一步探究其对心肌细胞功能的影响。
方法：本研究将应用基因敲除技术，采用CRISPR/Cas9技术敲除小
鼠心肌细胞中的JPH2基因。
通过Western blot、PCR等技术检测敲除效果。
使用荧光染料和显微镜检测心肌细胞内钙离子动态。
同时，应用细
胞增殖分析、细胞凋亡和细胞周期分析等技术，研究JPH2敲减对心肌细胞功能的影响。
最后，利用动物实验模型验证实验结果的有效性。
预期结果：本研究预计发现，JPH2敲减将抑制小鼠心肌细胞SK2蛋白的表达，并对心肌细胞的钙离子调节产生重要的影响。
同时，该敲减
还可能影响心肌细胞的增殖、凋亡和周期等功能，从而引起心肌细胞失
控和心脏功能障碍。
意义：本研究将有助于深入了解JPH2和SK2蛋白的相互作用机制，有助于探究心肌细胞钙离子调节的生物学基础，并为探索心肌病的治疗
策略提供理论参考。
PP2A调控心梗后L型钙离子通道对β肾上腺素敏感性纯化的机制研究的开题报告
PP2A调控心梗后L型钙离子通道对β肾上腺素敏感性纯化的机制研究的开题报告
题目：PP2A调控心梗后L型钙离子通道对β肾上腺素敏感性纯化的
机制研究
研究背景：心肌梗死是一种常见的心血管疾病，其主要原因是冠状
动脉阻塞，导致心肌缺血缺氧，最终导致心肌细胞坏死。
心肌细胞在心
肌梗死后，会出现一系列改变，其中之一是L型钙离子通道对β肾上腺素敏感性的改变。
PP2A是一种蛋白磷酸酶，可以调节细胞信号转导和基因表达，已经被证实在心肌梗死后的心血管病理生理过程中发挥重要作用。
因此，本研究旨在探究PP2A如何调节L型钙离子通道对β肾上腺素敏感
性的机制，为心肌梗死后的治疗提供新的思路和方法。
研究内容：本研究拟通过以下步骤进行：
1.制备心肌梗死小鼠心脏组织的膜蛋白质，并进行体外外泌体分离
和纯化。
2.利用Western blot和免疫共沉淀等方法鉴定和纯化PP2A和L型钙离子通道。
3.采用荧光染料Cerulean揭示L型钙离子通道的动态变化，并探究PP2A是否调控L型钙离子通道的密度和表面表达，以及β肾上腺素的作用。
4.利用ZM 241385，一个A2A受体选择性拮抗剂，和MRS1754，一个P2Y1受体选择性拮抗剂，来研究L型钙离子通道对β肾上腺素敏感性
的机制。
研究意义：本研究可以为心肌梗死后的治疗提供新的方向和思路。
通过揭示PP2A和L型钙离子通道对β肾上腺素敏感性的调控机制，可以
为寻找新的心血管疾病治疗策略提供理论依据。
一种繁育Sm22α基因敲除纯合子小鼠的方法
一种繁育Sm22α基因敲除纯合子小鼠的方法高亚坤;林燕玲;段志莉;李晓坤;宋昱;韩梅【摘要】目的建立一种繁育平滑肌22 alpha(smooth muscle 22 alpha,Sm22α)基因敲除纯合子(Sm22α-/-)小鼠的方法.方法采用纯合子繁育方式即雄性纯合子与雌性纯合子交配,对有分娩征兆的孕鼠实施剖腹产手术,剖出的仔鼠由ICR雌鼠代乳.同时用传统的杂合子繁育方式即雄性纯合子与雌性杂合子交配作为对照,比较2种繁育方式产生的仔鼠断乳后存活率,并提取仔鼠尾基因组DNA,利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术进行基因型鉴定.结果 2种繁育方式受孕率及仔鼠断乳后成活率差异均无统计学意义(P＞0.05);子代纯合率基本符合孟德尔遗传规律.结论纯合子繁育方式不仅增加了纯合子的数量,且无需基因型鉴定,为Sm22α蛋白功能的研究提供了充足的实验动物模型.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2015(036)011【总页数】3页(P1356-1358)【关键词】小鼠,基因敲除;繁殖;纯合子【作者】高亚坤;林燕玲;段志莉;李晓坤;宋昱;韩梅【作者单位】河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河北石家庄050017;河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河北石家庄050017;河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河北石家庄050017;河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河北石家庄050017;河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河北石家庄050017;河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,河北石家庄050017【正文语种】中文【中图分类】R332·技术方法·血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell，VSMC)是血管中膜的主要细胞成分，其表型转化、增殖与迁移是血管损伤性疾病如动脉粥样硬化、高血压、血管成形术后再狭窄等的共同病理生理学基础[1-2]。
蛋白磷酸酶2A催化亚基Cα基因(Ppp2ca)心脏特
蛋白磷酸酶2A催化亚基Cα基因（Ppp2ca）心脏特概述蛋白磷酸酶2A（PP2A）是一种重要的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶，对于心肌细胞的生存和功能至关重要。
PP2A由三个亚单位组成，其中催化亚基Cα是其中之一。
Ppp2ca基因编码催化亚基Cα多肽链，它在调节心肌细胞中的信号转导和基因表达中发挥着至关重要的作用。
在心脏中，PP2A的功能主要与以下方面有关：心肌收缩、离子通道功能、细胞凋亡、氧化应激反应、代谢调节以及病毒感染等。
在这篇文章中，我们将讨论Ppp2ca基因在心脏生理和病理过程中的作用。
Ppp2ca基因的基因结构和表达PP2A催化亚基Cα是由Ppp2ca基因编码的一条多肽链。
Ppp2ca基因位于第5号染色体上，其全长为大约14.2 kb。
该基因包括14个外显子和13个内含子，其中仅制定产物的第一外显子是非翻译区。
通过剪接Ppp2ca基因可以产生几种不同的异构体，它们具有略微不同的结构和功能。
这些异构体在多种细胞类型中均有表达，尤其是在心肌细胞中表达量较高。
Ppp2ca基因的表达受到多种因素的调节，包括应激反应、神经递质、代谢状态和发育等因素。
这些调节机制通过转录调节、翻译后修饰和蛋白质稳定性等多个方面发挥作用。
Ppp2ca基因的表达量和稳定性对于心肌细胞的生存和功能具有重要的影响。
PP2A在心肌收缩中的作用心肌收缩是心脏的主要功能之一。
该过程受到多种信号调节机制的控制，其中PP2A是一个关键因素。
PP2A通过调节肌肉肌纤维中的Ca2+反应和钙钳蛋白的磷酸化状态来实现这一过程。
PP2A也参与了调节心肌细胞的肌原纤维形态和分布的作用。
PP2A在钙离子信号转导途径中的作用心肌细胞中钙离子的运动和调控主要发生在肌浆网和肌纤维之间的交界处。
PP2A能够通过其多个亚基对肌纤维中的离子通道和转运体进行直接磷酸化。
此外， PP2A还能够通过磷酸化肌钙蛋白和肌钙蛋白激酶调节钙离子信号的传导。
PP2A的这些调节作用具有关键意义，能够保持心脏稳定地工作。
蛋白磷酸酶2A 的 Cβ亚基在胚胎成纤维细胞凋亡过程中的作用
蛋白磷酸酶2A 的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞凋亡过程中的作用王庆华;王生存;李斌;刘春;吴刘成;王旭;彭晓清;邵义祥【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2016(000)002【摘要】To investigate the effects of catalytic subunit βof protein phosphatase 2A (PP2A)on cell cycle and cell apoptosis in mouse embryo fibroblasts (MEFs),the mouse embryos at E12.5 by mating the heter-ozygotes of Cβ subunit conventional knockout male and female mice at the ratio of 1 ∶ 2 were obtained. MEFs were prepared by trypsin digestion and genotyped by PCR,RT-PCR and Western blot to identify the genetic basis of each embryo.FACs was carried out to determine the cell apoptosis and cell cycle, meanwhile,the anti-apoptosis protein Bcl-2 was checked by Western blot.Genotyping by PCR,RT-PCR and Western blot showed that both knockout and wildtype MEFs were isolated by trypsin digestion at the ratio of 3∶3.The MEFs at M1 stage was 46.94%±4.17 and53.95%±2.81,respectively and M2 stage was 29.83%±3.25 and21.14%±2.53.There is no significant difference in cell apoptosis between wildtype and Cβknockout MEFs and slight significant difference between wildtype and knockout MEFs in cell cycle.%为探究蛋白磷酸酶2A 的Cβ亚基在胚胎成纤维细胞(MEFs)凋亡过程中的作用,用Cβ＋/－的杂合子雄鼠与雌鼠1∶2配对,取胚胎期12．5 d(E12．5)的胚胎制备 MEFs,用 PCR、RT-PCR 和 Westernblot方法进行基因型鉴定。
敲除心脏肌球蛋白结合蛋白C加速小鼠蜕膜心肌细胞的牵张激活
敲除心脏肌球蛋白结合蛋白C加速小鼠蜕膜心肌细胞的牵张激活王晓健【期刊名称】《中国分子心脏病学杂志》【年(卷),期】2006(6)3【摘要】心脏肌球蛋白结合蛋白C(cMyBP-C)是与肌球蛋白紧密结合的粗肌丝元件蛋白,尽管有证据显示 cMyBP-C基因突变常常导致肥厚型心肌病,但cMyBP-c 在心肌中的作用相对所知甚少。
早期研究表明,牵张激活在心脏收缩中可能有重要作用,基于此,我们在野生型小鼠和我实验室培育的cMyBP-C基因敲除小鼠纯合子(cMyBP-C-／-)的蜕膜心室中,检测了cMyBP-C在牵张激活反应中的作用。
在最大或次于最大的 Ca2+活性期对蜕膜心肌细胞的突然牵张,导致收缩力的瞬时升高,该力迅速降为最小,延迟后,力量回复(牵张活化)到大于牵张前力量水平。
敲除cMyBP-C显著改变了牵张激活反应,例如,与野生型小鼠心肌相比, 力衰减和延迟性力瞬变速率加快。
这些结果提示,cMyBP-C正常抑制了肌球蛋白横桥的空间位置,并轮流限制了横桥与肌动蛋白间的相互作用速率和范围。
我们假设敲除cMyBP-C 移除了这些约束,增加了横桥与肌动蛋白结合的可能性,提高了牵张后延迟性力回复的速率。
不考虑特殊的机制,cMyBP-C-／-心肌细胞中横桥周期的加快可以将这种小鼠中收缩射血的减少解释为心室心肌不成熟牵张激活的一个直接结果。
【总页数】1页(P148-148)【关键词】肌球蛋白结合蛋白C;基因敲除小鼠;心脏肌球蛋白;心肌细胞;激活反应;牵张;蜕膜;Ca^2+活性;加速;肥厚型心肌病【作者】王晓健【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】R542.2;R363.1【相关文献】1.脂肪酸结合蛋白4在小鼠子宫蜕膜中的表达 [J], 姜成国;罗晓彤;于永生2.β肌球蛋白重链及心脏型肌球蛋白结合蛋白C基因突变的肥厚型心肌病患者生存分析 [J], 王曙霞;邹玉宝;王虎;王继征;薛浩;陈敬洲;惠汝太3.机械牵张对缺血缺氧心肌细胞肌球蛋白重链mRNA表达的影响 [J], 李晓东;黄跃生;张家平4.原肌球蛋白调节蛋白1对ApoE敲除小鼠糖脂代谢的影响 [J], 文京晶; 崔雨萌; 雷霆雯; 姚伟娟; 曾柱; 吴宁5.肌球蛋白轻链—2v基因表达调控的新机制——Nished,NFATc4及其共激活因子p300所形成的转录因子三聚体与内含子序列IRE的结合是肌球蛋白轻链-2v在心肌肥厚过程中上调的关键 [J], 谌琛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
成纤维细胞特异敲除转录因子ATF3基因的小鼠模型构建
成纤维细胞特异敲除转录因子ATF3基因的小鼠模型构建陈博雅;张聪聪;李玉琳;王绿娅;杜杰【期刊名称】《心肺血管病杂志》【年(卷),期】2018(37)5【摘要】目的:构建成纤维细胞特异敲除转录因子ATF3基因的小鼠模型.方法:利用胚胎显微注射法构建在ATF3基因携带loxP位点的小鼠(ATF3fl/fl),以成纤维细胞细胞特异性表达的Col1 a2-Cre介导ATF3条件性敲除,筛选出成纤维细胞条件性敲除ATF3的小鼠(Col1 a2-ERCre:ATF3fl/fl);取鼠尾DNA进行PCR鉴定基因型,腹腔注射他莫昔芬诱导该基因敲除;12只敲除小鼠和12只同窝野生型小鼠各分为心脏缺血再灌注(I/R)组和假手术(sham)组,术后2h取心脏组织研磨后流式细胞分选成纤维细胞,进而提取mRNA并反转为cDNA,采用实时荧光定量PCR检测ATF3的表达;另取4只敲除小鼠和4只同窝野生型小鼠复制I/R模型,术后6h取心脏组织进行免疫荧光染色,观察成纤维细胞ATF3表达.结果:鼠尾DNA PCR鉴定基因型结果显示Cre基因型为阳性,ATF3 loxP基因型为纯合阳性;与假手术组相比,野生型小鼠术后心脏成纤维细胞ATF3表达明显升高[(0.02534±0.002654)vs.(0.5982±0.03495),P＜0.0001],与术后野生型小鼠相比,术后条件性敲除组心脏成纤维细胞ATF3表达明显降低[(0.5982±0.03495)vs.(0.06456±0.005704),P＜0.0001];免疫荧光共定位染色显示野生型小鼠心脏成纤维细胞ATF3蛋白表达,条件性敲除小鼠ATF3蛋白未见表达.结论:成纤维细胞特异敲除ATF3小鼠构建成功,为进一步实验奠定基础.【总页数】5页(P469-473)【作者】陈博雅;张聪聪;李玉琳;王绿娅;杜杰【作者单位】100029 首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所血管生物研究室;100029 首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所血管生物研究室;100029 首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所血管生物研究室;100029 首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所血管生物研究室;100029 首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所血管生物研究室【正文语种】中文【中图分类】R54【相关文献】1.Cre-LoxP技术构建肝脏特异性HIF-2α基因敲除小鼠模型 [J], 赵安竹;付辉蓉;李昀;陈坚娣;鲁红云2.利用Cre/lox P系统构建胰岛β细胞特异性敲除PDHA1基因的小鼠模型 [J], 王肖; 赖舒畅; 叶艳诗; 许雪娟; 白晓春; 沈洁3.利用Cre/loxP系统构建胰岛β细胞特异性敲除PDHA1基因的小鼠模型 [J], 王肖; 赖舒畅; 叶艳诗; 许雪娟; 白晓春; 沈洁4.利用Cre/loxP系统构建乳腺细胞特异性敲除SENP7基因的小鼠模型 [J], 孙红;侯佳林;蔡加琴;庄捷;魏晓霞5.平滑肌细胞特异性MLK3基因敲除小鼠模型的构建 [J], 张燕红;黄山;高诗娟;李玉琳;杜杰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。