猪鲜精17℃保存剂效果对比试验
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法
一、冷冻保存
冷冻保存是猪精液最常见的保存方法之一。
在冷冻保存之前,需要对猪精液进行初步处理。
需要保持猪精液的干净和纯净,避免杂质的混入。
将处理好的猪精液放入专用的冷冻管中,然后将冷冻管放入冷冻盒中。
接着,将冷冻盒放入专用的冷冻机中,进行冷冻保存。
在冷冻保存的过程中,需要控制温度和湿度,避免冷冻温度过高或者过低,以免影响猪精液的质量。
冷冻保存方法能够长时间保存猪精液,并且保持猪精液的活力和质量,适用于长时间保存和远距离运输。
二、液氮保存
液氮保存方法能够更好地保持猪精液的质量和活力,可以长时间保存,并且适用于大规模的保存和长时间的保存需求。
液氮保存需要特殊的设备和条件,并且保存、运输和使用过程中需要更加小心谨慎,否则会影响猪精液的质量。
三、干冰保存
干冰保存是一种中等程度的低温保存方法。
在干冰保存之前,同样需要对猪精液进行初步处理。
然后将处理好的猪精液装入专用的干冰盒中,接着将干冰盒放入专用的冷冻设备中进行保存。
干冰保存方法能够较长时间地保存猪精液,并且适用于一般实验室的保存需求。
它比液氮保存更为便捷和易行,但是保存时间相对较短。
实验室常用猪精液的低温保存方法有冷冻保存、液氮保存和干冰保存等多种方式。
不同的保存方法适用于不同的实验需求和实际情况,实验室人员需要根据实际情况进行选择和使用。
在保存猪精液的过程中,需要注意保持猪精液的纯净和完整,控制保存温度和湿度,以及避免受到外界因素的影响,以确保保存的猪精液的质量和活力。
希望本文对实验室人员在猪精液保存方面有所帮助。
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法一、低温保存的原理猪精液的低温保存是利用低温来减缓其新陈代谢速度,延长其活力。
在常温下,精子的新陈代谢速度较快,容易受到环境因素的影响而丧失活力。
而在低温条件下,精子的新陈代谢速度减慢,能够有效地延长其存活时间。
低温保存是保持猪精液活力的有效方式。
二、常用的低温保存方法1. 液氮保存:液氮是目前应用最广泛的一种低温保存方法。
液氮的温度极低,能够有效地减缓精子的新陈代谢速度,延长其存活时间。
在保存猪精液时,首先需要将其置于专用的液氮保存罐中,随后将保存罐放置在液氮罐中保存。
液氮保存的优点是保存温度极低,能够有效地保持精子的活力,但由于操作需要液氮保存罐等设备,成本较高。
三、保存效果的分析对比上述三种低温保存方法,液氮保存的效果最为理想,能够保持猪精液的活力和质量。
但由于操作需要专用的液氮保存罐和液氮等设备,成本较高。
低温冰箱保存操作简单,适用于一般实验室的保存需求,但保存温度相对较高。
液氮罐保存介于两者之间,保存温度较低,设备成本相对较低。
在具体选择低温保存方法时,需要根据实验室的实际需求和条件进行综合考量。
四、保存注意事项1. 保持干燥:在进行猪精液的低温保存时,需要保持保存容器的内部干燥,避免水汽的凝结影响精子的存活。
2. 防止冻结:在进行液氮或液氮罐保存时,需要确保保存容器的密封性和抗冻性,避免因温度过低造成猪精液的冻结损伤。
3. 定期检查:无论采用何种低温保存方法,都需要定期检查保存容器的密封性和温度稳定性,确保猪精液的保存环境符合要求。
4. 合理标注:在进行猪精液的低温保存时,需要在保存容器上标注清晰的标识,包括保存日期、猪种和精液来源等信息,便于管理和使用。
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法实验室中常常需要使用猪精液进行一系列实验和研究,但是猪精液的保存非常关键。
低温保存是一种常用的方法,可以有效地延长猪精液的保存时间,保持其活力和质量。
本文将介绍实验室常用的猪精液低温保存方法,希望能对实验室工作人员有所帮助。
一、低温保存的原理猪精液在常温下易受到氧化、蛋白质降解、细菌感染等影响,导致精子质量下降,活力减弱。
而低温保存的原理主要是降低猪精液内部的化学反应速率,减缓精子的新陈代谢,从而延长其保存时间。
一般来说,对猪精液进行低温保存可分为冷冻保存和冷藏保存两种方法。
二、冷冻保存方法1. 猪精液的采集猪精液采集是冷冻保存的第一步,要在成熟健康的猪只进行采集。
采集前应先对猪进行清洁,确保采集的猪精液是干净的。
通常采集后的精液应在30分钟内使用,如不能马上使用则应迅速进行冷藏,避免影响后续的保存效果。
2. 筛选和稀释将采集到的猪精液进行筛选和稀释,可以通过离心或者过滤手段进行筛选,去除其中的不活跃精子和其他杂质。
稀释的目的是使猪精液的密度均匀,便于后续的保存和使用。
3. 冷冻冷冻保存是最常见的猪精液保存方法之一,一般是将稀释后的猪精液置于-196℃的液氮罐中进行冷冻保存。
在进行冷冻前,要将猪精液分装入冷冻管或其他容器中,避免因为一次性取用而导致冷冻-解冻多次,影响猪精液的活力。
4. 解冻和使用需要使用时,将冷冻的猪精液快速解冻,不要使其在室温下解冻,以免影响猪精液的质量。
解冻后的猪精液应在4-8℃的温度下保存,尽快使用,避免长时间存放造成精子活力的下降。
除了冷冻保存外,冷藏保存也是一种常用的猪精液保存方法。
相比于冷冻保存,冷藏保存更加简便,并且对设备要求不高。
一般采用4-8℃的冷藏温度进行保存。
采集和筛选步骤与冷冻保存相同,在采集后务必迅速进行冷藏,避免影响后续的保存效果。
稀释后的猪精液可以直接置于4-8℃的冰箱中进行保存,无需进行冷冻。
在保存时要注意避免温度的波动,尽量将猪精液置于冰盒或者恒温箱中进行保存。
26333060_影响猪精子冷冻保存效果的研究进展
遗传改良GENETIC IMPROVEMENT影响猪精子冷冻保存效果的研究进展张涵,王赫川,李天峰,张群,王骞,郭铭晖,李雁冰,魏国生,李井春*(黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆 163319)随着我国居民生活水平的提高,猪肉已经成为我国乃至世界上需求量最广泛的肉类。
为了满足人类的需求,就必须专注于用更少的种猪生产更多品质优异的猪肉。
目前精液保存方法主要有常温、低温和冷冻保存,常温保存精液技术操作简单,但精液保存时间超过48 h就会品质下降,而冷冻保存精液与常温保存精液相比,具有保存时间长、便于远距离运输和成本低等优点。
猪精液在冷冻-解冻过程中易遭受损伤,造成精子受精能力下降。
因此,人们开始不断探索在精液稀释液中加入一定量的抗氧化剂、保护剂、抗菌剂等物质来改善解冻后猪精子质量。
加快猪精液冷冻保存技术的改良研究,有助于推动畜牧业发展,提高人民生活品质。
1 猪精液冷冻原理及损伤机制猪精液冷冻主要是指新鲜采集的精液经过稀释等预处理后,利用液氮(-196℃)、干冰(-79℃)作为冷源,通过熏蒸或其他处理方式缓慢降温,然后在超低温状态下保存,使精子代谢速率降低或处于静止状态,便于长期保存,待解冻后精子仍具有活性和受精能力。
精子在冷冻保存过程中极易受到不同程度的物理损伤、氧化损伤和化学损伤。
物理损伤通常指在精液冷冻时因温度下降过快,细胞内液体形成冰晶体从而对精子细胞内部及细胞膜造成不可逆损伤。
通过控制温度下降速度可减少冰晶数量维持微晶状态,减少冷冻造成的物理损伤。
氧化损伤是精子在冷冻过程中温度下降过快,精子氧化应激产生过多活性氧,造成膜上不饱和脂肪酸被氧化,产生大量脂质过氧化物,打破原本的氧化还原平衡状态和精子的完整结构,对精子造成不可恢复的损伤,也是细胞凋亡的重要因素之一。
化学损伤是指精液在冷冻过程中,细胞外液最先形成冰晶,导致细胞内外渗透压不平衡,使细胞外液渗透压大于细胞内渗透压,水分从细胞内部流向细胞外液,造成精子脱水死亡。
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法【摘要】实验室常用猪精液的低温保存方法对于保障猪种质资源的保存和利用至关重要。
本文首先介绍了猪精液的重要性及保存方法的必要性。
在正文部分分别详细介绍了液氮、干冰和冷冻等常见的低温保存方法,包括保存步骤和注意事项。
还总结了低温保存猪精液的优点,如有效延长精液的保存时间和保持精液的生物活性等。
结论部分强调了猪精液低温保存方法的重要性,指出其对猪种质资源的长期保存和利用具有不可替代的作用。
同时展望了未来研究方向,希望通过技术创新和方法改进,进一步提高猪精液保存的效率和质量,为猪业发展提供更好的支持。
【关键词】实验室猪精液、低温保存方法、液氮保存、干冰保存、冷冻保存、注意事项、优点、重要性、发展方向。
1. 引言1.1 介绍实验室常用猪精液的重要性及保存方法在现代猪生产实验室中,猪精液是一种非常重要的生物材料,它包含着猪的遗传信息,可以通过人工授精的方式传递至下一代猪种。
有效地保存猪精液对于提高猪种质量和数量是至关重要的。
在实验室中,常见的猪精液保存方法有液氮保存、干冰保存和冷冻保存等。
这些方法能够有效延长猪精液的保存时间,保持其质量和活力。
液氮保存猪精液的步骤包括快速冷冻、贮存在液氮罐中等;干冰保存则需将猪精液置于干冰盒中,快速冷冻保存;冷冻保存则需将猪精液置于冷冻离心管中,通过冷冻保存。
在进行低温保存猪精液时,需注意避免冷冻过程中产生的结晶破坏猪精液细胞膜的情况,以及避免冷冻过程中的温度变化对猪精液造成的不利影响。
通过低温保存猪精液能够有效延长其保存时间,保持其质量和活力,为猪生产实验室的科研工作提供了重要支持。
未来,随着科技的发展,猪精液保存技术也将不断提升,为猪生产和繁育工作带来更多便利和效益。
2. 正文2.1 常见的猪精液低温保存方法常见的猪精液低温保存方法主要包括液氮保存、干冰保存和冷冻保存三种方式。
液氮保存是目前应用较广泛的方法,通过将猪精液置于液氮罐中进行保存,可以长期保持其生物活性。
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法随着养猪生产的发展和产业化进程的推进。
人们对猪人工授精重要性的认识越来越深刻,在现代养猪生产和育种工作中,人工授精正成为一种非常重要的生产途径。
在猪的生产方面,人工授精技术的应用低温保存与冷冻精液相比,具有更好的受胎率和产仔数,而且操作简单,取材方面,更利用推广应用。
现将总结的猪精液的低温保存方法介绍如下:1 精液的采集用38°C左右的热水预热集精杯,并将杯内套入食品级塑料袋,并将消毒好的四层滤纸罩在杯口上,用橡皮筋套住。
采用手握法采集精液,边采集边滤掉胶状物,精液采集后要立即丢掉滤纸,盖好杯盖,送往实验室检查。
2 精液品质的检查采集精液后,迅速置于30°C左右的恒温水浴中,然后取样进行品质检查,精子活力在70%以上,且无异味,乳白色,方可用于保存或输精。
3 精液的稀释和保存3.1 低温保存稀释液的配制准确称取如下药品:葡萄糖2.5克、蔗糖3.3克、青霉素0.06克、链霉素0.1克、0.05%EDTANa2(乙二胺四乙酸二钠),置入烧杯中。
量取去离子水80毫升将其溶解后,搅拌至少30分钟,分装于离心管内(规格50毫升)。
离心机以7276倍重力,离心30分钟后,取其上清液分装于5毫升的离心管内,置于4°C保存備用。
3.2 精液的第一次降温、离心和稀释把盛有符合要求的精液(存活率70%以上)塑料瓶用4层毛巾包裹好后,置于17°C的冰箱中进行1小时的降温。
精液经降温处理后,分装于50毫升的离心管中,以250倍重力离心8分钟。
收集上清液置于灭菌的塑料瓶内,再次置入冰箱内(17°C)内静置30分钟。
用离心管(规格5毫升)分装,每个离心管内装入精液1毫升,用低温保存稀释液1∶2进行同温稀释。
3.3 精液的二次降温和4°C低温保存用四层毛巾将精液离心管进行保温处理后,放入冰箱内(4°C)进行缓慢降温。
观察离心管中的精液温度降到4°C时,将上述处理的离心管置入到4°C的恒温水中保存。
生猪精液稀释保存注意事项
健康养殖·管理2021.05 畜牧业环境35摘 要:生猪人工授精是生猪生产中经济有效的技术措施之一,是将人工授精应用到猪的一种技术手段,最大的优点是增加优良公猪的利用机会。
随着生猪产业的发展,该技术得到了广泛的应用。
笔者作为响水县2011年至2017年度省级生猪良种补贴项目的县级执行专家,指导全县生猪人工授精工作,通过对生猪精液稀释保存的技术要点进行分析,探讨生猪稀释保存中的注意事项。
希望能给从事生猪人工授精工作的技术人员提供参考。
关键词:生猪精液;稀释;保存1 前言生猪人工授精技术能够克服生猪体格大小、时间和区域的差别,充分利用杂种优势,减少疾病传播、特别是生殖道传染病传播,提高优良公猪的配种效能和种用价值,促进生猪品种改良和提高商品猪质量及其整齐度。
生猪精液稀释与保存是生猪人工授精技术的一个核心环节,如果操作不严谨,影响精液质量,影响到生猪人工授精的成功率和受孕质量,从而影响生猪人工授精技术的应用效果。
2 生猪精液稀释技术要点生猪精液稀释的目的就是提高良种公猪利用率,扩大精液容量,增加输精头数,同时延长精子的保存时间及受精能力。
生猪精液稀释,有以下几项技术要点:2.1 采精前的准备2.1.1 人员的准备。
采精员和化验员需更换洁净工作衣、帽,戴口罩,穿长胶鞋。
先修剪手指甲,用消毒液洗手,再用清水(冬天用40℃温水)浸泡,擦干后,戴一次性无毒塑料手套。
2.1.2 器械的准备。
集精杯(内置无毒塑料袋并覆盖四层纱布或一层精液过滤纸)、载玻片、盖玻片、精液处理器皿、精液密度仪等器械杀菌消毒,确保无菌。
采精前1h,将消毒后的与精液接触的器械预热至37℃,显微镜载物台恒温板、精液密度仪预热至37℃。
2.1.3 稀释液的准备。
稀释液的温度应略低精液传入精液处理室时的精液温度。
2.1.4 采精室、精液处理室的准备。
采精前,需要开启空调,保证室内温度在22℃~28℃,空调的风向应避开精液采精和精液化验的方向。
猪新鲜精液运输储存方法对精子活率的影响
猪新鲜精液运输储存方法对精子活率的影响猪是我们日常生活中常见的家畜之一,也是我国重要的畜牧业品种之一。
在猪的繁殖过程中,猪新鲜精液的运输和储存是非常重要的环节,直接影响着繁育效率和猪的品种改良。
研究表明,猪新鲜精液的运输和储存方法对精子活率有着显著的影响。
本文将对猪新鲜精液运输储存方法对精子活率的影响进行深入探讨,为猪的繁育提供理论指导和技术支持。
一、猪新鲜精液的生理特点猪新鲜精液是指从种猪身上收集出来的未经处理的精液,在猪繁殖中扮演着重要的角色。
猪新鲜精液具有以下几个特点:1. 猪新鲜精液的精子密度高,精子总数多。
猪的生殖系统发育成熟早,精子的密度和总数比较高,这也是猪新鲜精液在猪的繁殖中的优势之一。
2. 猪新鲜精液中的精子活力强。
相比于其他动物的精子,猪新鲜精液中的精子活力更强,受精能力更高。
3. 猪新鲜精液中的精子存活时间短。
猪新鲜精液中的精子存活时间一般在24小时左右,所以需要在短时间内进行运输和储存。
二、猪新鲜精液的运输方法猪新鲜精液的运输是指将从猪身上采集的精液通过适当的方法运输到需要使用的地方。
猪新鲜精液的运输方法对精子活率有着直接的影响,主要有以下几种运输方法:1. 低温运输:低温运输是目前应用较广泛的一种猪新鲜精液运输方法,一般使用专门的猪精液运输盒或者冷藏车进行运输。
低温运输可以有效地延长精子的存活时间,保持精子的活力。
2. 冷冻运输:冷冻运输是将猪新鲜精液通过快速冷冻的方法保存起来,然后通过干冰或者液氮进行长途运输。
这种方法可以有效地延长精子的存活时间,但是对于精子活力的要求较高,需要精确的控制冷冻温度和速度。
3. 高温运输:高温运输是将猪新鲜精液通过恒温箱或者保温箱进行运输,一般适用于在短时间内需要运输的情况。
高温运输对精子的活力影响较大,不适合长途运输和长时间保存。
研究表明,不同的猪新鲜精液运输储存方法对精子活率有着显著的影响。
低温运输和冷藏储存是目前应用较广泛的方法,可以有效地延长精子的存活时间,保持精子的活力。
猪精液稀释种有哪些需要注意的关键点
猪精液稀释种有哪些需要注意的关键点利用现在人工授精对猪精液的利用达到了最大化,猪取出精液之后,一份精液可以利法尔多只母猪,须所以精液的保存成看必须的,而保存精液就少不了对精液的稀释,这样总算方便运输和保存,那么猪精液稀释种有哪些需要注意的关键点?1、温度1.1采精前的准备在精液采集前所有与精液接触的物品包括采精杯、精液分装瓶(如果有条件)等全部要在一般而言37℃预热(适季节变化,预热温度也将有变化),保证在采精的时候精液与其对视物品温度相差不不能高于0.5℃。
精液稀释也要提前预热,放在37℃水浴锅中,保证稀释液混合均匀。
实验室空调设置为25℃最为适宜。
1.2精液的稀释稀释液和原精的温差不得高于0.5℃,否则将严重影响稀释后的精子活力。
猪精液稀释种有哪些能够注意的关键点1.3精液的分装、保存与运输精液立即稀释后要立即进行贮存,从恒温箱中取出精液分装瓶,使稀释后精液和精液之后分装瓶的降雪不高于0.5℃。
精液分装后不宜将精液放进立即放入17℃保温箱中保存,让精液在室温25℃缓慢降温后,再将其放入保温箱。
精液运输整个过程中同时要应用恒温箱,影响以保证精子的青春活力不受到任何影响。
2、精液称重将电子天平清零,然后把预热好的保温杯称重,再以交由生产人员采精。
把装有精液的保温杯再次称重。
精液重量=采精后的保温杯重-预热后的杯重精液体积=精液重量保温杯中精液重量的准确性实验室负责预热保温杯以及精液称量稀释。
在每次保温杯预热和精液称重的过程中,都会有6至40g的误差。
造成误差的原因:在采精前,保温杯需要预热,方法使用37℃温水盛满保温杯,然后倒掉,放入集精袋和滤纸。
在这个过程中,保温杯的内外壁都沾有水,外壁可以擦去,而为了不影响保温杯内温度,内壁一般不擦。
万萨县这就影响了保温杯整体重量。
如果里面有过多的冰没有倒掉,就会有大的误差,即使杯中不具水分倒出,也会有10g的误差。
误差量的存在,科小剑可能影响生产中对个别猪的使役,以及对猪的饲喂行政管理。
公猪精液分析和稀释
公猪精液的分析和稀释现在有很多猪场把采精室和精液分析室建在一处,中间通过小窗口传递采精杯,这样不仅能有效保证公猪精液的活力,而且极大提高了工作效率。
在正式分析公猪精液前,我们还有一些工作需要做,先来熟悉一下精液分析室的基础设施和材料:空调、双蒸水器、恒温干燥箱、恒温水浴锅、密度仪、电子天平、显微镜、普通冰箱、恒温板、磁力搅拌器等;卫生纸、蒸馏水瓶、烧杯、玻璃棒、精液稀释粉、煤油温度计等。
进入精液分析室时就打开空调,使室内温度达到22-25℃。
在恒温水浴锅中加入适量清水,并打开水浴锅加热到35-40℃,根据当天配种母猪头数来准备今天的精液量,选择1升或者2升的烧杯配置稀释粉溶液。
将双蒸水器制备的蒸馏水倒入烧杯中,再加入精液稀释粉,将烧杯放在磁力搅拌器上充分搅拌,之后将烧杯放入恒温水浴锅内预热,使稀释液的温度达到36-38℃左右。
接下来就要分析精液:首先将采集的精液称重(假如200毫升),取一部分精液测算密度(假如2亿个/毫升),将恒温板加热至37℃左右,放在显微镜载物台上;再滴一滴精液于显微镜的载玻片上观察精液活力(原精活力值按0-5分的话不能低于2分)和畸形率(不能超过18%)如果都合格,那么进行下一项:计算稀释份数。
配种用的精液所含精子数要求为40亿个精子,假如用100ml的输精瓶或输精袋分装的话,那么需要稀释的份数是:200毫升X2亿个/毫升=400亿个,400亿40亿=10份,所以加入的稀释液的量为10X100毫升-200毫升=800毫升。
将原精带着集精袋放入烧杯中,用两支煤油温度计分别测量精液和稀释液的温度,两者的温差不超过1℃时再进行精液稀释。
将稀释液沿着玻璃棒缓缓倒入精液稀释杯中,轻轻搅动玻璃棒,使其充分融合稀释。
稀释后再检查精液活力,一般要求精液活力不能低于75%,否则不能分装。
精液稀释后若活力没有明显降低,则按照每头份100毫升分装精液。
在精液的稀释和分装过程中要求操作速度要快,尽量在半小时至一小时内完成整个步骤和操作,以免时间过长造成精液活力显著下降。
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法猪精液是猪生殖系统中的一种重要生殖细胞,它包含了猪的遗传信息,对于繁殖和遗传改良具有至关重要的作用。
在实验室研究和生产实践中,科研人员需要对猪精液进行保存和储存,以便在需要时使用。
而猪精液的保存方式有很多种,其中低温保存方法是比较常用的一种,下面就介绍一下实验室常用猪精液的低温保存方法。
一、液氮保存液氮保存是目前最为常用的一种猪精液低温保存方法。
液氮保存是指将猪精液储存于低温的液氮罐中,利用液氮的极低温度(-196摄氏度)将猪精液冷冻保存起来。
这种保存方法不仅可以长时间保存猪精液,而且保存后的猪精液质量稳定,保存时间长,一般可以保存5-10年之久。
而且在液氮保存的过程中,由于猪精液是在液氮中迅速冷冻,几乎不会出现冻结伤害的情况,因此保存后的猪精液质量保持得比较好。
二、冷冻保存冷冻干燥保存是一种相对比较新的猪精液低温保存方法。
这种方法是将猪精液在冷冻的条件下干燥,形成干燥的猪精液粉末,然后通过低温保存的方式来保存猪精液。
这种方法可以有效地避免冷冻过程中对猪精液造成的伤害,同时由于是将猪精液变成了粉末,保存更加方便。
而且在保存时间上也比冷冻保存长一些,一般可以保存3-5年左右。
但是由于冷冻干燥保存的技术要求相对较高,因此在实验室中使用的相对较少。
无论是哪种保存方法,都需要注意一些常规的保存注意事项。
比如在保存之前,需要先对猪精液进行筛查和检测,确保猪精液的质量是符合保存要求的。
另外在保存的过程中,需要做好保存记录并进行定期的检查和维护。
只有在保存过程中做到这些细节,才能够确保猪精液的质量,在需要的时候可以顺利地使用。
猪精液的低温保存对于实验室研究和生产实践中的繁殖和遗传改良具有非常重要的作用。
而在实验室中,科研人员常用的猪精液低温保存方法主要有液氮保存、冷冻保存和冷冻干燥保存。
每种保存方法都有其特点和适用范围,实验室需要根据具体的情况选择合适的保存方法。
并且在保存过程中需要格外注意保存的细节,确保猪精液的质量和保存的有效性。
几种不同常温保存稀释液对猪精子呼吸强度的影响试验
几种不同常温保存稀释液对猪精子呼吸强度的影响试验摘要:本试验依据精液常温保存的原则设计了4种猪精液常温保存稀释液配方。
并将新鲜精液稀释后保存于37℃水浴锅中,并测定精子的呼吸强度。
从而筛选出可以在较长保存时间内维持精子较高活率的稀释剂配方。
结果表明,经稀释液Ⅰ和稀释液Ⅱ稀释的精子的呼吸强度分别为6.50min、8.75min(37℃),显著优于稀释液Ⅲ、稀释液Ⅳ和对照组(p<0.05)。
关键词:猪精液;常温保存稀释液;精子呼吸强度精子的代谢情况反映精子的品质,而精子的耗氧量是其代谢强度的重要指标。
精子在呼吸过程中,要消耗溶解在精液中的氧。
由于氧的耗尽,美兰褪色,美兰遇氧时又恢复其颜色(蓝色),其反应机制是由于精子脱氢酶的作用,脱去糖原上的氢原子,在无氧条件下,氢原子与蓝色的甲烯蓝(美兰)结合变成甲烯白(白色)。
因此,实际上也是测定精子脱氢酶活性的一种方法。
精子呼吸强度与美兰褪色在时间上呈反比,精子密度越大,活率越高,则精子的耗氧量也越大,美兰褪色的时间也就越短。
以上过程一般要求在37℃条件下进行测定。
本试验中将稀释好的精液与美兰试剂各一滴于载玻片上混匀,然后吸入到两段毛细管中约2-3cm,再将毛细管置于37℃的条件下观察美兰褪色所需要的时间。
1.材料与方法1.1 稀释液的配制本试验所用稀释液在试验开始前一天配制分装并保存在4℃的冰箱中待用。
其配方如表1所示。
表1 猪精液常温保存稀释液配方注:青霉素在精液稀释前单独添加。
1.2 新鲜精液的稀释与处理采集杜洛克猪的精液60ml,用毛巾包裹后浸入盛有41℃温水的保温瓶中并迅速运回实验室,以减少温度变化对精液品质的影响。
在精液稀释前将分装的稀释液放入37℃水浴锅中升温备用,稀释精液前分别加入青霉素并使之溶解。
通过对原精液的精子活率和精子密度进行测定以判定是否达到试验要求。
具体过程为将一滴原精液滴在一张预热的显微镜载玻片上,制作压片进行观察。
精子活力应在80%以上,才能进行下一步稀释。
猪新鲜精液运输储存方法对精子活率的影响
猪新鲜精液运输储存方法对精子活率的影响
猪新鲜精液的运输方式对精子活率有直接影响。
一般来说,采用冷藏运输的方式可以保持精子的生存时间较长,从而提高精子活率。
在冷藏运输过程中,猪新鲜精液通常存放在4℃温度下,这种温度对精子的新陈代谢和活力有利。
冷藏运输还可以减少精液中的有害菌群生长,保持精液的质量。
猪新鲜精液的储存温度和时间也对精子活率有重要影响。
一般来说,较低的储存温度可以延长精子的存活时间,提高精子活率。
猪新鲜精液的储存温度通常在15℃以下,而较高的温度会导致精子过早死亡。
猪新鲜精液的储存时间也应尽量控制在适当范围内。
长时间的储存可能导致精子质量的下降,降低精子活率。
猪新鲜精液的储存容器也对精子活率有影响。
常见的储存容器包括塑料瓶和玻璃瓶。
玻璃瓶能够更好地保持精液的温度和湿度稳定,有利于维持精液的质量和精子活率。
而塑料瓶则易受温度变化和氧气透入影响,从而降低了精子的存活能力。
猪新鲜精液的储存条件和储存过程中的其他因素也对精子活率有潜在影响。
储存容器的密封性、储存环境的湿度和光照等因素都会对精液质量产生一定影响。
在储存过程中应注意这些因素,以保证精子活率的最大化。
实验室检测猪精液品质的新技术
猪人工授精新技术与操作安全朱士恩(中国农业大学动物科技学院北京 100193)摘要:人工授精的效果与精液质量、输精方法及输精剂量等方面均具有重要相关性。
精液的质量检测是人工授精过程中必不可少的程序。
精液检测的主要目的就是快速、准确地鉴定精子质量,以提高受精能力。
精液常规检测方法虽然已被广泛应用,但其在预测精子受精能力方面仍存在着主观性、误差高等缺点。
因此,客观、准确的评价精子的状态及其受精潜能,对于科研和生产实践具有重要的意义。
本文主要从精液质量的快速检测、检测指标与受精能力的相关性、人工输精方法的改进及操作安全等方面进行介绍,为实验室研究及生产安全操作提供理论与技术参考。
关键词:精液;精液检测;人工授精;操作安全;猪国际上猪人工授精技术始于20世纪30年代,迄今为止其应用已有70多年的历史,我国在上世纪50年代初期也在生产中推广应用。
人工授精不仅可以充分发挥优秀公猪的遗传潜力,也是选种选育的不可或缺的重要手段,同时还可以减少性传播疾病,加快繁殖速度,提高生产效率,获得更高的经济效益。
但随着精液保存技术的发展,尤其是冷冻保存、低温保存及性控精液技术的发展,传统的输精方法及精液品质评价方法已不能够满足人工授精的需要,急需进行更新与改进,以进一步提高人工授精技术在养猪生产中所发挥的重要作用。
客观、准确的评价精子的状态与受精潜能,对于科研和生产实践具有重要的意义。
精子检测的主要目的是快速、准确地确定其受精能力。
常规检测指标有:精液的颜色、气味、pH、精液量、精子的密度、精子的运动能力、形态和活率等,虽然这些指标的检测很重要,但其在预测精子受精能力方面受主观和客观因素的影响,误差很大。
近年来,随着新的技术应用于精液品质检测,可以更加细致地对精子的特征进行评估。
利用荧光染色技术可以对精子的微观功能进行检测,包括质膜完整性、获能状态和顶体状态等。
而联合使用荧光染料,则可以同时检测精子几种功能指标。
而流式细胞仪(flow cytometry,FCM)的应用,可以在短时间内分析大量的经荧光标记的精子,促进了荧光染色技术在精子质量评估中的应用。
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法猪精液是猪生殖系统中的重要物质之一,常用于人工授精、遗传改良和繁殖等方面。
在实验室进行猪精液保存时,其质量的高低直接影响繁殖的成败。
因此,如何选择适宜的保存方法非常重要。
本文将介绍实验室常用猪精液的低温保存方法。
一、液氮低温保存法液氮低温保存法在实验室保存猪精液中被广泛应用。
其基本原理是通过将猪精液置于液氮中,使精子处于极低温度下,保持其活力和生理状态。
操作步骤如下:1.准备合适的保存容器首先需要选择合适的保存容器。
要求密封性好,不易破裂,可以耐受极低温度的液体。
常用的保存容器有液氮罐、冷藏盒等。
2.调制保存液保存液的质量也是影响保存效果的重要因素。
一般使用的保存液需要保护精子细胞膜,并延缓精子代谢过程。
目前常用的保存液有冷冻保护剂液、液氮冻干保护剂液等。
3.制备猪精液在进行低温保存前,需要制备好猪精液。
一般情况下我们可以用人工授精的方式进行采集,然后过滤掉其中的颗粒或污物等。
4.保存将调制好的保存液与精液按比例混合后,放入合适的保存容器中,再将保存容器放入液氮罐中。
5.取出保存当需要使用猪精液时,可以用冷藏盒或温水将猪精液从低温中解冻,然后进行包装、配制等操作。
二、冷藏法冷藏法是将精液存放在所需的低温下,一般为-4℃至+4℃,通过控制环境温度来达到保存的目的。
虽然冷藏法相对简单易行,但仅适用于短期保存和小规模保存。
操作步骤如下:1. 准备冷藏设备冰箱和冷藏室都可以作为冷藏设备使用。
与液氮低温保存法一样,保存液的质量在冷藏法中也非常重要。
与液氮保存法一样,制备猪精液也需要注意采集、过滤等步骤,以保证精液的纯净度和质量。
将猪精液与保存液按比例混合后,放入冷藏设备中进行保存。
总体来说,液氮低温保存法的保存效果更加稳定,适用于长期保存和大规模保存。
而冷藏法则更适合短期保存和小规模保存。
在实验室进行猪精液保存时,应根据实验需要和设备条件进行合理选择。
猪冷冻精液研究应用进展及问题分析与展望
主题策划F E A T U R E1 了解猪冷冻精液1.1 猪冷冻精液应用的优点猪精液冷冻保存的最大优势是可以延长猪精液的使用期限。
常温下新鲜精液使用时间有限,只能在1 d 内使用。
在17℃下用常温稀释液处理的精液,猪精子的存活时间可达2周以上。
利用液氮等为冷源,保存用冷冻稀释液处理的精液,只要精液处于液氮内,理论上可以无限期保存。
从经济效益方面考虑,猪精液冷冻保存可以降低引种及饲养管理成本。
以2022年末为例,全年能繁母猪4 400万头,按年产2.2窝,受胎率80%计算,如果采用本交(公母比例1:30),大约需要150万头的公猪,如果全部使用冷冻精液,按每头公猪年提供4 000头份计算,只需要约3万头公猪,与本交相比,可减少98%的公猪饲养量,极大降低了公猪养殖成本,增加了经济效益。
使用猪冷冻精液精的另外一个优点是提高了优秀种公猪的利用率。
采用本交的配种方式,优秀种公猪的利用率极低,满负荷配种每年可配母猪数仅为100余头,而使猪冷冻精液研究应用进展及问题分析与展望张志彬,于永生,钱芙蓉,李兆华 *(吉林省农业科学院,吉林 长春 130000)项目基金:猪安全高效繁殖技术研发与应用,项目编号:CXGC2021TD009作者简介:张志彬(1982—),男,助理研究员,研究方向为猪遗传育种与繁殖技术*通信作者:李兆华(1973—),男,博士,研究员,研究方向为猪遗传育种与繁殖技术,E-mail:********************用冷冻精液每头优秀种公猪每年可配4 000头以上的母猪。
高性能的种公猪与更多数量的母猪配种,可迅速提高优质基因的覆盖面,再加上冷冻精液便于储存、便于运输、便于使用,不受地域、时间的限制,便于跨区域、跨国引入优秀的种质资源,辐射区域可全球化,打破了鲜精使用区域辐射小的限制,促进品种改良,提高生产性能。
另外,公猪冷冻精液可以在后裔测定或疾病检测后再开始大量供应,为稳定的遗传进展和严格的生物安全提供保障。
实验室常用猪精液的低温保存方法
实验室常用猪精液的低温保存方法1. 引言1.1 猪精液的重要性猪精液作为实验室常用的生物样本,在生物研究领域具有非常重要的作用。
猪精液中含有丰富的生物活性成分,包括蛋白质、酶类、激素等,这些成分对于研究猪的生殖生理、繁殖特性、遗传传递等方面具有重要意义。
通过对猪精液的分析和研究,可以帮助科研人员更好地了解猪的生殖机制,指导猪的繁殖管理,提高猪的生产性能和遗传质量。
猪精液还是一种重要的生物材料,用于人工授精、胚胎移植、繁殖技术等方面。
通过对猪精液的保存和利用,可以推动猪繁殖技术的发展,促进畜禽生产的提高。
研究者需要深入了解如何有效保存猪精液,并确保其质量和活力,以满足实验室和生产的需求。
在接下来的内容中,我们将介绍实验室常用的猪精液低温保存方法,以及保存过程中需要注意的关键问题。
【字数:238】1.2 低温保存的必要性低温保存可以有效延长猪精液的保存时间。
猪精液中的活性成分和细胞在常温下容易受到氧化和降解的影响,导致其活力下降甚至失活。
而通过低温保存,可以有效减缓这种氧化和降解的速度,延长猪精液的有效保存时间,保证其在长期保存过程中的质量和活力。
低温保存可以有效降低猪精液的代谢速率。
在低温环境下,细胞和活性成分的代谢速率会显著降低,从而减少其对营养和氧气的需求,延缓细胞死亡和活性成分降解的过程,有利于猪精液的长期保存和使用。
低温保存对于猪精液的保存质量和有效性具有至关重要的作用,是实验室中必不可少的保存方法之一。
对于实验室常用猪精液来说,低温保存不仅可以保证其质量和活力,还可以有效延长其保存时间,为实验研究和生产提供可靠的生物样本支持。
1.3 实验室常用猪精液的意义实验室常用猪精液的意义在于为研究和生产提供了重要的资源。
猪精液中含有丰富的遗传信息,通过对其进行分析和研究,可以帮助科研人员了解猪的遗传特性、生殖生理等方面的知识。
猪精液也是生猪人工授精和繁殖的重要材料,对于提高猪的遗传育种水平具有重要意义。
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国畜禽业中种2019.02作者简介:刘鑫(1992-),山东省枣庄市人,硕士研究生,研究方向:家畜繁殖生物技术。
通信作者:李千军(1964-),陕西省汉中市人,博士,硕士生导师,天津市生猪产业技术体系首席。
资助项目:现代产业技术体系-生猪-联合育种岗位(ITTPRS2017001)。
猪鲜精17℃保存剂效果对比试验刘鑫1,2崔茂盛1张丹3唐佩娟4付永利4张学炜2李千军1*(1,天津市畜牧兽医研究所300381;2,天津农学院300380;3,天津市动物疾病预防控制中心300402;4,天津市畜牧总站300402)摘要:选择2种著名品牌猪精液常温保存稀释剂为对照组(对照一、对照二),试验组为本课题组经大量试验开发的猪精液常温保存稀释剂,旨在探讨研发的稀释剂对猪鲜精保存效果。
试验结果表明,课题组研发的猪精液17℃常温保存稀释剂在有效保存时间和精子总存活时间方面均显著高于对照一组,而相对于对照二组,显著提高了大白种猪精液有效保存时间和精子总存活时间(<0.05),其余各组差异均不显著(>0.05)。
试验中的3种不同稀释剂在前3d 对精子质膜完整性均有较好保护作用,3组间差异不显著(>0.05);保存到第5天,试验组和对照二组中精子质膜完整性显著高于对照一组(<0.05),但前2组之间质膜完整性无显著性差异(>0.05);保存至第7天,对照一组、对照二组和试验组中精子质膜完整性分别为49.94±3.08,58.83±2.22,72.86±2.62,精子质膜完整性在该3组之间均存在差异显著性(<0.05)。
结果显示,在相同储存条件下,本课题组研制的精液常温保存剂对精液保存时间,质膜完整率等指标优于国内市场上著名品牌,且保存效果稳定。
关键词:猪精液;保存剂;常温保存;对比试验7.3补充营养、恢复体力霉菌毒素污染过程中破坏饲料中的营养物质,造成饲料营养水平下降,引起猪营养不良。
通过补充优质维生素、氨基酸、电解质来提高母猪肠道对营养物质的吸收,改善机体的免疫系统,对猪群的繁殖性能具有提升作用。
8结语霉菌毒素是猪场饲料原料中最常见的毒素,普遍存在于原料和成品中。
作为养殖企业一定要长期添加,防止饲料霉变,提高饲料产品利用率和母猪生产性能。
参考文献:[1]刘伯承,邱美珍,王慧,等.猪饲料中霉菌毒素的危害及防控方法分析[J].饲料博览,2018(6):24-28.[2]王晓林.霉菌毒素对养猪业的危害[J].中国猪业,2017(10):41-45.随着我国养猪业发展与种猪联合育种工作的需要,人工授精的普及,猪精液品质的控制及精液保存稀释剂日趋成为猪人工授精技术的核心[1]。
就鲜精保存而言,我国大、中型养猪企业人工输精所用精液大多来自当天采集,或来自17℃存储1~2d 的精液,如此短的精液存储时间必将给企业增加人力、物力和财力负担,而且猪场用的17℃恒温箱的温度极不稳定,给精液存储质量造成较大影响。
随着我国生猪市场集约化和规模化发展,猪精液高效、长期保存技术越发重要。
目前市场上价格稍低的猪鲜精17℃保存稀释剂,保存效果大都不稳定(2~5d 不等),而质量稍高的17℃保存稀释剂价格都偏高(14~20元不等),给生猪养殖企业带来较重运行成本。
因此,探索和研发成本低的高倍长效精液17℃保存稀释剂对生猪产业健康、快速发展具有重要意义。
1材料与方法1.1试剂与仪器主要试剂:海藻多糖、果糖(上海源叶生物科技有限公司)、葡萄糖(天津市光复精细化工研究所)、青霉素、链霉素(山东鲁抗舍里乐药品有限公司)、碳酸氢钠、EDTA 等(sigma 中国有限公司)、精子快速染液(南京建成生物科技有限公司)。
主要仪器设备:CASA 计算机自动辅助分析系统,相差显微镜(英国)、冰箱(河南新飞电器有限公司)、电热恒温水槽(上海精宏实验设备有限公司)、电子天平(上海菁海仪器有限公司)。
1.2精液保存剂的配制试验组的药品为本课题组配制,两个对照组(对照一和对照二)均为国内著名品牌,按照产品要求进行配制猪精液鲜精保存液。
1.3精液处理方法1.3.1精液采集采用手握法采集精液,将预热好的集精杯(35~37℃)用灭菌滤纸盖好,收集中间段精液,边采集边过滤去除胶状物。
在37℃下用显微镜检查常规品质,精子活力在0.7以上、无异味、色泽为乳白色的精液,放入保温瓶采精室备用[2]。
畜业技术|资源育繁86国畜禽种业中2019.021.3.2精液稀释与平衡精液取回采精室(室温25℃左右),暗处静置,测量精液和稀释液的温度,确保二者的温差为0.1~0.3℃。
将自制常温精液保存剂(提前配好)与对照组均按(保存剂:原精)2:1的比例缓慢加入到猪精液中,轻轻上下摇晃,使精液与稀释液充分接触,室温23~25℃下暗处静置平衡1h;然后置于l7℃恒温箱中保存,每12h 轻轻摇动1次,防止精子沉淀[3]。
1.3.3精子质量检测精子质量检测指为有效保存时间、总存活时间和质膜完整性[4],具体操作参考文献4,有效保存时间采用计算机辅助系统进行检测,总存活时间通过目测法进行观察,质膜完整性参考文献4进行。
1.4试验设计本试验分为3组,试验组的稀释液为课题组研发,对照组均采用国内著名品牌配制稀释液。
每组试验重复3次,本试验中精子活率大于0.7保存时间为有效保存时间,精子无活性时保存总时长为总存活时间。
1.5数据处理试验数据先用Excel 进行前期处理,然后用SPSS17.0进行方差分析和多重比较,数据以“平均值±标准差”表示。
2结果分析2.1猪鲜精17℃常温保存不同稀释剂的保存效果由表1数据可知,课题组研发的猪精液17℃常温保存稀释剂在有效保存时间和精子总存活时间方面均显著高于对照一组稀释剂,而相对于对照二组,试验组显著提高了大白种猪精液有效保存时间和精子总存活时间(<0.05),其余各组差异均不显著(>0.05)。
2.2不同稀释剂对保存过程中精子质膜完整性的影响由表2可知,在常温保存过程中,3种不同稀释剂在前3d 对精子质膜完整性均有较好保护作用,3组间差异不显著(>0.05);保存到第5天,课题组研发的保存剂和对照二组中精子质膜完整性显著高于对照一组(<0.05),但前2组之间质膜完整性无显著性差异(>0.05);保存至第7天,对照一、对照二和试验组中精子质膜完整性分别为49.94±3.08,58.83±2.22,72.86±2.62,精子质膜完整性在该3组之间均存在差异显著性(<0.05)。
3讨论对照二组的稀释剂是我国17℃常温保存稀释剂市场上知名高端品牌,精液保存效果稳定,基本在5~10d,市场占有率较高,但价格也较昂贵,每升稀释剂18~22元。
对照一组选择了中长期稀释粉,一般保存时间在5~7d,也具有较高的市场占有率。
因此,本试验选用该2种市场率占有率较高的猪精液17℃常温保存稀释剂作为对照组,试验结果更加客观。
研究表明,课题组自制猪精液常温保存剂,在精液17℃常温保存过程中精子有效保存时间,精子总存活时间和质膜完整性等指标,部分显著高于对照二组,均显著高于对照一组。
在有效保存时间方面,稳定在7~10d,甚至更长,表明本课题研发的稀释剂对精子有较好的保护作用,这可能与本稀释剂中含有特殊质膜稳定性成分、较强的缓冲能力物质和适当的能量类物质组合有关。
在质膜完整性方面,本课题组研发的稀释剂对精子质膜也具有显著的稳定作用,这可能与本稀释剂中缓冲物质和渗透压稳定性高有关,避免精子在保存过程中损伤质膜,进一步提高精子的有效保存时间和总存活时间。
参考文献:[1]赵爱云.新型天然抗氧化剂茶多酚的研究进展[J].中国食品添加剂,2005(5):78-80,86.[2]胡建宏,刘玉,慕勇.稀释液成分对猪精液常温保存效果的影响[J].黑龙江畜牧兽医,2013(10):38-40.[3]林峰,杨婷,陈玉霞.温度与稀释液pH 对猪精液常温保存效果的影响[J].家畜生态学报,2012,33(4):66-68.[4]王彦芳,张洲,寇卉.Dif-Quik 与改良巴氏染色法对精子形态染色效果比较[J].吉林医学,2012,33(24):5155-5156.表1不同保存剂对猪精液保存时间的影响有效保存时间总存活时间保存剂长白杜洛克 大白长白杜洛克大白对照一 4.4±0.87a 4.5±0.76a4.3±0.57a6.1±0.46a6.5±0.44a5.3±0.88a自制配方 7.5±1.12b 7.45±0.55b10.5±0.66b9.45±0.99b9.5±0.58b14.2±0.72b对照二6.3±1.08b7.5±0.62b 7.5±0.34c9.21±0.86b10.2±0.73b8.1±1.15c注:每列不同上标字母a-c 表示差异显著(<0.05),相同上标字母表示差异不显著(>0.05),下表同。
表2不同保存剂对精子质膜完整率的影响质膜完整率保存剂第一天第三天 第五天 第七天 对照一 86.10±2.24 84.84±3.12 51.05±1.75a49.94±3.08a配方(自制)83.28±0.62 82.97±2.10 79.80±1.11b 72.86±2.62b 对照二81.93±1.4682.48±1.4877.24±2.60b58.83±2.22c资源育繁|畜业技术87。