miR-495通过靶向Notch1信号调控高糖诱导的视神经节细胞凋亡
miRNA-338促进施万细胞成髓鞘
[文章编号]1006-2440(2021)03-0213-05[引文格式]周松林,刘畅,谢慧敏,等.miRNA-338促进施万细胞成髓鞘[J ].交通医学,2021,35(3):213-216,231.微小RNA (microRNA ,miRNA )是一类物种之间高度保守、长度为19~25个核苷酸、不编码蛋白质的单链RNA 分子。
miRNA 在RNA 聚合酶Ⅱ作用下形成初级miRNA ,经核糖核酸酶作用得到前体miRNA ,最后在Dicer 酶剪切下成为成熟miRNA 。
miRNA 可以通过抑制翻译或转录水平来调控靶基因的表达,参与细胞分化、生长、增殖调控等重要生命活动过程[1]。
已发现在周围神经损伤后大量miRNAs 存在差异表达,在调节施万细胞表型中发挥重要作用[2]。
施万细胞是周围神经系统主要的胶质细胞,在周围神经发育、功能和再生中起着重要作用,能沿神经突起形成髓鞘。
周围神经损伤后施万细胞发生一系列的表型变化,如脱髓鞘和去分化[3]。
神经再生过程中施万细胞先去分化为施万细胞祖细胞,祖细胞在短时间内分裂、分化、增殖,生成大量施万细胞,参与髓鞘碎屑吞噬和Bunger 带的形成,进而引导神经*[基金项目]国家自然科学基金面上项目(81870975)。
**[作者简介]周松林,男,汉族,湖北黄石人,生于1980年9月,博士研究生,副研究员。
研究方向:神经损伤与修复。
通信作者:于彬,E-mail :*************.cnmiRNA-338促进施万细胞成髓鞘*周松林1**,刘畅1,谢慧敏2,杜明智1,杨述海3,韩笑笑1,于彬1(1南通大学江苏省神经再生重点实验室,江苏226001;2南通大学附属医院口腔科;3南通大学医学院)[摘要]目的:探讨在周围神经损伤后miR-338对大鼠施万细胞髓鞘形成的调控作用及机制。
方法:采用实时荧光定量PCR 检测损伤后坐骨神经中miR-338的表达变化;采用体外背根节神经元与施万细胞共培养实验,MBP 染色检测miR-338模拟物对施万细胞再分化和成髓鞘的作用;芯片检测过表达miR-338对体外培养的施万细胞转录组的影响。
miR-145-5p靶向调控MRGBP基因表达对晶状体上皮细胞增殖和凋亡的影响
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｍｉＲ１４５５ｐｔａｒｇｅｔｅｄｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＭＲＧＢＰ ｇｅｎｅｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｌｅｎｓ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ ＨＵ Ｃｈａｏｑｉａｎ．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＴｈｉｒｄＰｅｏｐｌｅ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＺｉｇｏｎｇＣｉｔｙ，Ｓｉｃｈｕａｎ，Ｚｉｇｏｎｇ ６４３０２０，Ｃｈｉｎａ
【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】 ｍｉＲ１４５５ｐ；ＭＲＧＢＰ；ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ；ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ
白内障是一种晶状体混浊的疾病，可导致严重的 视力 损 害 或 致 盲［１］。白 内 障 约 占 所 有 致 盲 原 因 的
作者单位：６４３０２０ 四川省自贡市第三人民医院眼科
照射完成后，细胞于 ３７℃、５％ ＣＯ２的条件下继续培养 ４ｈ，同时将正常培养的细胞设为对照。 １．３ ｑＰＣＲ检测 ｍｉＲ１４５５ｐ、ＭＲＧＢＰｍＲＮＡ水平 在 ＳＲＡ０１／０４细胞中加入 ＴＲＩｚｏｌ试剂提取总 ＲＮＡ，通过 逆转录试剂盒制成 ｃＤＮＡ，以 ｃＤＮＡ为模板，利用 ｑＰＣＲ 检测试剂盒测定 ｍｉＲ１４５５ｐ、ＭＲＧＢＰｍＲＮＡ表达。引 物序列分别为 ｍｉＲ１４５５ｐ：５’ＧＴＣＣＡＧＴＴＴＴＣＣＣＡＧＧ ＡＡＴＣ３’（正向），５’ＡＧＡＡＣＡＧＴＡＴＴＴＣＣＡＧＧＡＡＴ３’ （反 向 ），ＭＲＧＢＰ：５’ＧＧＡＧＧＡＧＡＣＡＧＴＧＧＴＧＴＧＧ３’ （正向），５’ＣＡＴＧＴＧＧＡＡＧＴＧＴＣＧＧＴＴＣＡ３’（反 向）， 内参 Ｕ６：５’ＣＴＣＧＣＴＴＣＧＧＣＡＧＣＡＣＡ３’（正 向），５’ ＡＡＣＧＣＴＴＣＡＣＧＡＡＴＴＴＧＣＧＴ３’（反 向 ）。 反 应 结 束 后，由 ２ΔΔＣｔ法计算 ｍｉＲ１４５５ｐ、ＭＲＧＢＰｍＲＮＡ表达。 １．４ 蛋白质印迹法（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ）检测 ＭＲＧＢＰ蛋白 表达 使用 ＲＩＰＡ裂解液提取 ＳＲＡ０１／０４细胞中的蛋 白，ＢＣＡ 法 定 量 后 进 行 １０％ 的 十 二 烷 基 硫 酸 钠 （Ｓｏｄｉｕｍ ｄｏｄｅｃｙｌｓｕｌｆａｔｅ，ＳＤＳ）聚 丙 烯 酰 胺 凝 胶 （Ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ＰＡＧＥ）电 泳，转 膜， 加入 ５％脱脂奶粉封闭 １ｈ，将膜与 １∶１０００稀释的 ＭＲＧＢＰ一抗 ４℃孵育过夜，次日使用 ＴｒｉｓＨＣｌＴｗｅｅｎ 缓冲盐溶 液 （ＴｒｉｓｂｕｆｆｅｒｅｄｓａｌｉｎｅｗｉｔｈＴｗｅｅｎ，ＴＢＳＴ）充 分漂洗膜，与 １∶５０００稀释的二抗室温孵育 １ｈ，ＴＢＳＴ 漂洗膜，加入增强化学发光液显色，以 β肌动蛋白（β ａｃｔｉｎ）为参照，分析 ＭＲＧＢＰ蛋白条带。 １．５ 细胞转染 将 ５×１０５ 个 ／ｍｌ密度的 ＳＲＡ０１／０４ 细胞接 种 于 ６孔 板，细 胞 生 长 至 ７０％ 融 合 时，利 用 Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００试剂，在细胞中转染 ａｎｔｉｍｉＲ１４５ ５ｐ、ｐｃＤＮＡＭＲＧＢＰ、ｓｉＭＲＧＢＰ及 其 相 应 阴 性 对 照，并 且依照 １．２所述方法进行紫外线照射，转染 ４８ｈ后， 收集细胞，分别根据 １．３和 １．４中的方法检测 ｍｉＲ １４５５ｐ和 ＭＲＧＢＰ、ｃｙｃｌｉｎＤ１、Ｃｃａｓｐａｓｅ３蛋白表达。 １．６ 噻唑蓝（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）检测细 胞增殖 调整 ＳＲＡ０１／０４细胞密度为 １×１０５ 个 ／ｍｌ， 接种 于 ９６孔 板，培 养 ４８ｈ后，每 孔 细 胞 加 入 ２０μｌ ＭＴＴ溶液，反应 ４ｈ，之后加入 １５０μｌ二甲基亚砜，摇 床震荡反应 １０ｍｉｎ，于酶标仪读取细胞 ４９０ｎｍ处的吸 光度（ＯＤ）值，计 算 细 胞 增 殖 率 （％）。细 胞 增 殖 率 （％）＝实验组 ＯＤ值 ／对照组 ＯＤ值 ×１００％。 １．７ 流式细胞术检测细胞凋亡 ＳＲＡ０１／０４细胞凋 亡的检测依照 ＡｎｎｅｘｉｎⅤＦＩＴＣ／ＰＩ凋亡检测试剂盒说 明书的指示，在 １×１０６ 个 ／ｍｌ密度的 ＳＲＡ０１／０４细胞 中加入 ５００μｌ缓 冲 液，使 细 胞 重 悬，依 次 加 入 ５μｌ ＡｎｎｅｘｉｎＶＦＩＴＣ、５μｌＰＩ染色液，分别混匀后于黑暗中 反应 １５ｍｉｎ，置流式细胞仪进行细胞凋亡的检测。
miR-9-5p靶向leptin促进家兔前体脂肪细胞分化
摘要microRNA是一种内源性短链非编码小RNA，其长度一般在22-24 nt。
研究表明microRNA在脂肪细胞分化和脂肪代谢中发挥着重要作用。
miR-9-5p调控了多种癌细胞、肝细胞和纤维细胞的分化与增殖过程，但miR-9-5p对脂肪细胞分化的调控仍未见相关报道。
LEPTIN通过介导AMPK和JAK/STAT信号通路调控脂类代谢，且LEPTIN是miR-9-5p的一个潜在的靶基因，故推测miR-9-5p对前体脂肪细胞的分化有影响。
本实验以刚出生新西兰白兔的脂肪组织为材料分离培养前体脂肪细胞，通过人工合成miR-9-5P类似物转染前体脂肪细胞后诱导分化，然后检测相关基因mRNA的水平。
随后试验构建了pis-CHECH-LEPTIN-3'UTR 和pis-CHECH-Mut-LEPTIN-3'UTR重组质粒，检测荧光素酶活性。
为了进一步探索LEPTIN基因与家兔前体脂肪细胞分化的关系，通过siRNA转染细胞，然后检测相关基因mRNA的水平。
最后利用Western-blotting检测过表达和抑制表达后PP ARγ的蛋白水平。
主要结果如下：（1）miR-9-5P的表达量在前体脂肪细胞诱导分化的过程中持续上调且在0 d时表达量极显著低于9 d时（P<0.01）；（2）leptin基因在1-3月龄家兔肾周脂肪组织中的表达量持续上调，3月龄的表达量显著高于1月龄的（P<0.01）；（3）转染miR-9-5p模拟物mimic后，细胞内miR-9-5p的表达显著上调（P<0.01）。
诱导前体脂肪细胞分化，结果显示mimic可以促进前体脂肪细胞分化，脂肪细胞分化标志基因PP ARγ、C/EBPα和F ABP4基因的mRNA水平均显著上升（P<0.01），脂肪酸和甘油三酯的含量极显著增加（P<0.01）。
转染miR-9-5p 抑制剂，细胞内miR-9-5p的表达显著下调（P<0.01）。
microRNA-100诱导视网膜神经节细胞氧化应激损伤的机制研究
·１４８９·
因素作用的敏感性 。 ［１１］ Ｎｏｔｃｈ是进化高度保守的细胞 间信号传导系统，Ｎｏｔｃｈ信号通路的过度的活化与 ＲＧＣｓ 的凋亡水平密切相关。Ｎｏｔｃｈ１是 Ｎｏｔｃｈ信号通路的主 要受体之一，Ｎｏｔｃｈ１胞内区是 Ｎｏｔｃｈ信号通路的主要功 能执行单位，胞外区主要功能是与相应的配体结合后激 活 Ｎｏｔｃｈ１信号通路［１２］。Ｎｏｔｃｈ１介导的炎症反应在视神 经损伤后的早期继发性损害过程中发挥一定作用，也可 能是视神经损伤后介导炎症反应的一条重要通道 。 ［１３］ 当 前 也 有 研 究 显 示 Ｎｏｔｃｈ１在 ＲＧＣｓ中 少 量 表 达，对 ＲＧＣｓ存活及凋亡发挥重要调控作用［１４］。本研究显示， 转染后 ２４ｈ与 ３６ｈ，ｍｉＲ－４９５组的 Ｎｏｔｃｈ１蛋白相对表 达量显著低于 ｍｉＲ－ＮＣ组和空白组，空白组与 ｍｉＲ－ ＮＣ组比较差异无统计学意义（Ｐ ＞０．０５），表明 ｍｉＲ－ ４９５的高表达可抑制高糖诱导的 ＲＧＣｓ中 Ｎｏｔｃｈ１蛋白 表达下降，从而降低 ＲＧＣｓ凋亡。当前也有 研 究 显 示 ｍｉＲ－２１均能下调 Ｃａｓｐａｓｅ－３在 ＲＧＣｓ中的表达，减少 ＲＧＣｓ凋亡［１４，１５］。不 过 本 研 究 也 存 在 一 定 的 缺 陷，ｍｉＲ －４９５的具体作用机制还不太明确，对 Ｎｏｔｃｈ１信号通路 的影响阐述还不够深入，将在下一步的研究中进行深入 分析。 ４ 结论
［２］ 张诚，张殷建．青光 眼 视 神 经 节 细 胞 内 外 源 性 凋 亡 机 制 及 中 西 医
保护研究新进展［Ｊ］．西部中医药，２０１７，３０（１）：１３４－１３８． ［３］ ＤｏｎｇＮ，ＸｕＢ，ＳｈｉＨ，ｅｔａｌ．ＢａｉｃａｌｅｉｎＩｎｈｉｂｉｔｓＡｍａｄｏｒｉ－ＧｌｙｃａｔｅｄＡｌ
α7-烟碱型乙酰胆碱受体在肺腺癌细胞株A549增殖、迁移和凋亡的作用中期报告
α7-烟碱型乙酰胆碱受体在肺腺癌细胞株A549增殖、迁移和凋亡的作用中期报告
研究目的：本研究旨在探究α7-烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）在肺
腺癌细胞株A549增殖、迁移和凋亡中的作用及相关机制，为肺腺癌的治
疗提供新的靶点和思路。
材料与方法：本实验采用肺腺癌细胞株A549作为研究对象，通过Western blot和RT-PCR检测A549细胞内nAChR的表达情况，利用
MTT法、Transwell实验和Annexin V-FITC/PI双染法检测不同浓度的尼
古丁对A549增殖、迁移和凋亡的影响，同时观察nAChR的激动剂、抑
制剂对A549细胞生长、死亡和凋亡的影响。
结果：实验结果显示，A549细胞内nAChR的表达水平较高；尼古
丁可以明显促进A549细胞增殖和迁移，抑制细胞凋亡；而nAChR激动
剂可进一步增强这些效应，抑制剂则相反。
此外，我们还发现尼古丁和nAChR激动剂可以通过激活ERK1/2、Akt、PKC等信号通路来促进细胞
增殖和迁移，而抑制剂则相反。
结论：本研究表明，α7-nAChR在肺腺癌细胞株A549增殖、迁移和
凋亡中发挥重要作用，尼古丁可以通过激活ERK1/2、Akt和PKC等信号
通路来促进A549细胞增殖和迁移。
因此，α7-nAChR可能成为肺腺癌治
疗的新的靶点，相关药物的开发及应用也具有一定的前景。
miR-495的生物学功能及与肿瘤关系的研究进展
miR-495的生物学功能及与肿瘤关系的研究进展黄灵娟;徐颢【期刊名称】《临床医药实践》【年(卷),期】2022(31)11【摘要】微小RNA(miRNA/miR)在人类各种类型的癌症中均有异常表达,即许多miRNA参与了肿瘤的发生和发展。
基于miRNA及其可能调控的靶基因的治疗策略,显著提高了癌细胞对化疗药物的敏感性。
然而,众多miRNA在恶性肿瘤中的作用及发病机制并不明确。
人类基因组中14q32.31基因簇上包含许多编码miRNA 的基因,miR-495就是其中之一。
它与该基因簇上的miR-299-5p,miR-376a,miR-376c,miR-300,miR-380,miR-494,miR-1197等一样,具有相似的病理生理调节作用[1]。
miR-495分别从pre-miRNA-495的茎环结构的3'-和5'-链剪切形成miR-495-3p和miR-495-5p,但miR-495在各种肿瘤中的表达情况不尽相同。
本文对miR-495在机体正常发育、免疫和炎症中的作用及其在癌症中的调节功能作一综述。
【总页数】5页(P828-832)【作者】黄灵娟;徐颢【作者单位】西安医学院第一附属医院;西安医学院第一附属医院全科医学院;西安市第三医院【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.PRL的生物学功能及与肿瘤关系的研究进展2.NRP1生物学功能及其与肿瘤放射敏感性关系的研究进展3.SIRT7生物学功能及其与肿瘤发生发展关系的研究进展4.SIRT7生物学功能及其与肿瘤发生发展关系的研究进展5.miRNA-31生物学功能及其与肿瘤关系的研究进展因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
上调miR-495靶向Bmi-1抑制AML细胞增殖及促进凋亡
【 摘要 】 目的
检 测 ｍｉ Ｒ － ４ ９ ５与 Ｂ ｍ ｉ ． １在急性髓 系白血病 （ Ａ ＭＬ ） 患者骨髓细胞 中的相对表 达水平 ， 研 究上调
ｑ Ｒ Ｔ — Ｐ Ｃ Ｒ检测 Ａ Ｍ Ｌ患者骨髓样本 中
ｍｉ Ｒ － ４ ９ ５对 Ａ ＭＬ细胞 Ｈ Ｌ － ６ ０的作 用以及 ｍ ｉ Ｒ － ４ ９ ５与 Ｂ ｍ ｉ 一 １的靶 向关 系。方法
ｍ ｉ Ｒ － ４ ９ ５与 Ｂ ｍ ｉ ． １ ｍＲ Ｎ Ａ的相对表达量 ， Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ． ｂ ｌ ｏ ｔ 检测 Ｂ ｍ ｉ 一 １ 蛋 白的相对表达量 ； ｍ ｉ Ｒ － ４ ９ ５ ｍ ｉ ｍ ｉ ｃ ｓ 和ｍ ｉＲ － ４ ９ ５ ｓ ｃ ｒ ａ ｍ —
ｇ ｅ ｔ ｉ ｎ ｇ Ｂｍ ｉ － １
Ｚｈ ｅ ｎ ｇ Ｓ ｈ ｕ ａ ｉ ｋ ｕ ｉ ，Ｚｈ ａ ｏ Ｇ ｕ ｏ ｑ ｉ ａ ｎ ｇ，Ｙ ａ ｎ Ｂ ｅ ｉ ｚ ｈ ａ ｎ
Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｂ ａ ｓ ｉ ｃ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ，Ｚ ｈ ｅ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ，Ｚ ｈ ｅ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ ４ ５ ０ ０ ０ １ ，Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ（ Ｚ ｈ ｅ ｎ ｇ Ｓ Ｋ，Ｚ ｈ ａ ｏ
【 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】 Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｔ ｈ ｅ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｌ ｅ ｖ ｅ ｌ ｓ ｏ ｆ ｍ ｉ Ｒ － ４ ９ ５ ａ ｎ ｄ Ｂ ｍ ｉ 。 １ ｉ ｎ ｂ ｏ ｎ ｅ
miR-495在骨肉瘤组织中的表达变化及意义
ｎｅｋｉｎｇ 分期、淋巴结远处转移有关（Ｐ 均＜０． ０１），与患者性别、年龄、肿瘤直径及肿瘤部位均无关（Ｐ 均＞０． ０５）。骨
肉瘤组织ｍｉＲ４９５ 表达≤０． ４２ 与＞ ０． ４２ 者５ 年生存率分别为２６％ 、４８％ ；二者比较Ｐ ＜ ０． ４２ 是影响骨肉瘤患者预后的独立危险因素（ＨＲ ＝ ３． ， ６９９ ９５％ ：ＣＩ １． ９８５ ～ ６． ， ９４１ Ｐ ＜
方面取得了一定的进展，但在骨肉瘤发生、发展过程 数据处理采用ＳＰＳＳ１９． ０ 统计软件。计量资料
中起关键作用的基因尚不明确，临床上也缺乏有效 以ｘ珋± ｓ 表示，结果比较采用ｔ 检验；计数资料以率表
的靶向治疗药物及分子生物学标志物。微小核糖核 酸（ｍｉＲＮＡ）是一类高度保守的内源性非编码小 ＲＮＡ，参与调控众多关键的细胞通路及肿瘤的发生、 发展过程［４，５］。但目前有关ｍｉＲ４９５ 在骨肉瘤中的 作用研究甚少，为此，我们进行了如下研究。 １ 临床资料 选择２０１２ 年月 ２ ～ ２０１３ 年１ 月在潍坊医学院 附属益都中心医院行手术治疗的骨肉瘤患者５６ 例， 男３４ 例、女２２ 例，年龄＞ ２０ 岁１６ 例、≤２０ 岁４０ 例，肿瘤部位在四肢４９ 例、其他７ 例。排除合并严 重心脑血管疾病、肝肾功能不全及其他肿瘤患者。 患者术前均未行放化疗及生物免疫治疗。５６ 例均
１５％ ～ ２０ ％ 的骨肉瘤患者在初诊时影像学已发现 Ⅱｂ ～ 期 Ⅲ ４２ 例，淋巴结远处转移１８ 例、无远处转
肺转移，约５０ ％的骨肉瘤患者在晚期治疗期间发生 移３８ 例。本研究通过医院医学伦理委员会批准，患
肺转移，最终发生肺转移的患者可高达８０％ ［３］。近 者及家属均知情同意。
年来骨肉瘤在病因、发生发展机制、早期诊断和治疗 ２ 方法与结果
miR-638通过靶向调控Notch 4促进神经胶质瘤细胞的侵袭能力
平 探讨 ｍｉ Ｒ － ６ ３ ８在 胶质 瘤 中 的生 物学 功能及 可 能 的
分 子机 制 。 １ 材 料与 方法
相关性 ； 过 表达 ｍ ｉ Ｒ － ６ ３ ８使 Ｕ ２ ５ １ 细胞 的侵袭 细胞数 上升 （ Ｐ
＜ ０ ． ０ １ ） ， 而抑制 ｍｉ Ｒ － ６ ３ ８表达后 Ｕ ２ ５ １ 细胞 的侵袭细胞数 减 少（ Ｐ＜０ ． ０ １ ） ； ｍｉ Ｒ － ６ ３ ８在 Ｕ ２ ５ １细 胞 中 能 直 接 靶 向抑 制 Ｎ ｏ ｔ ｃ ｈ ４的表达 ， 提升 Ｎ ｏ ｔ ｃ ｈ ４在 Ｕ ２ ５ １细胞 中 的表达 能使侵 袭 细胞 数减少 （ Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） 。结论 侵袭 能力 。
文献标 志码 Ａ 文章编 号 １ ０ ０ ０—１ ４ ９ ２ （ ２ ０ １ ７ ） ０ １— ０ ０ ４ ７— ０ ５
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． １ ９ ４ ０ ５ ／ ｊ ． ｃ ｎ ｋ ｉ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ｌ ０ ０ ０—１ ４ ９ ２ ． ２ ０ １ ７ ． ０ １ ． ０ １ ０
院典 型培养 物保 藏 委 员 会 细胞 库 。１ ０例 胶 质 瘤 组
织 及正 常 脑 组 织 均 取 于 安 徽 医科 大 学 附 属 省 立 医
ｍｉ Ｒ 一 ６ ３ ８在胶质瘤 中高表
达， 其可能通过靶 向抑制 Ｎ ｏ ｔ ｃ ｈ ４的表 达促进胶 质瘤 细胞 的
院， 所 有 实 验 操 作 均 经 医 院伦 理 委 员 会 批 准 。
物 信 息 学 预 测 和验 证 ｍｉ Ｒ － ６ ３ ８对 Ｎ ｏ ｔ ｃ ｈ ４的靶 向调控关 系 ；
中起 着重 要 的促 侵 袭 作 用 ， 但 在 胶质 瘤 中 的功 能 性
miR-509-5p靶向ACLY调控人黑色素瘤细胞的增殖和凋亡
doi：10・3969/j・issn・1002-7396.2021.01.006-论著-miRC40Cp靶向ACLY调控人黑色素瘤细胞的增殖和凋亡李二龙张皓义韩成龙谢林伸【摘要】目的探讨miRCDCp靶向调控ACLY表达对人黑色素瘤细胞增殖和凋亡的影响。
方法qRTCCR检测人表皮黑色素细胞HEM/CP和3种人黑色素瘤细胞(SK-MELC、UACC903和A377)中miRCDCp和ACLYmRNA的表达水平。
以A377细胞为研究对象，构建过表达miRCDCp的A377细胞株,MTT法检测细胞活力，流式细胞术检测细胞凋亡，Western b/d检测CpcCnDl、CDK2、CDK1、B/C、Bcp和cleaved ccpco-3蛋白的表达。
双荧光素酶报告基因实验和western blot验证miRCDCp和ACLY的靶向关系。
结果与人表皮黑色素细胞HEM/CP相比,3种人黑色素瘤细胞中miRCDCp的表达显著下调，ACLY mRNA的表达显著上调。
过表达miRCDCp可抑制CDK2、CDK1、Cyc/nD1和B/C蛋白的表达，促进Bcp和cleaved ccpcc-3蛋白的表达，抑制A377细胞增殖，促进细胞凋亡。
ACLY是miRCDCp的靶基因，miRCDCp可负性调控ACLY的表达。
过表达ACLY可部分逆转miRCDCp过表达对A377细胞增殖和凋亡的影响。
结论miRCDCp靶向下调ACLY表达可抑制人黑色素瘤细胞增殖，促进细胞凋亡。
【关键词】人黑色素瘤；miRCDCp；ATP柠檬酸裂解酶；细胞增殖；凋亡【中图分类号】R739.5【文献标识码】A【文章编号】1D2-7386(2021)01-0039-05Effects of miR-509-5p tarrehng ACLY on the proliferrhon and apoptosis of hrman melanoma celts LI Erlone，ZHANG Haoyi,HAN CUenglong，t aO Denartmeet of Derm,atosts sne Syphilolopy，Wess CUiea Hospital op Sichuae University，Sictae e CUengda610001.CUiea【Abshrct]Objechvv To i/vestipate the eXects of miRCDCp tarpeUng ACLY exp/ssiox ox the p/liferaPox andayoptosis of human melanoma ceXs.Methods The qRT-PCR was used to detect the expmss/x levels of miRC05Cp andACLY mRNA iu human epidermal melanoma cell HEM/-PP and three human melanoma cells(SK-MELC，UACC903andA377).A377cells were e/mlled as research suPje/s，and the A377cell Cue ove/xp/ssing miRC09Cp was0X0/0/00.The cell viaCility was detecmd bp MTT，cell ayoptosis was detecmd bp flow cytomemp，and expmss/x levels of Cp/mD1，CDK2，CDK1，Bcl-4，Bcp and cleaved caspase-3proteiu were detecmd bp Western Blot.The dual luciferase mpoOer ge/oexpe/meut and western blot were used to verify the tarpeUng mlatio/ship betmeeu miRC09Cp and ACLY.R esnlts As compared with those iu human epidermal melanoma cell HEM/-PP，the exp/ssiox levels of miRC05Cp iu the three human melanoma cells were signiPcantly dowo-regulamd,however,the exp/ssiox levels of ACLY mRNA were signiPcantly up-mgPamd.The ove/xp/ssiox of miRC05Cp covlC indibit the e xp/ssiox levels of CDK2，CDK1，Cyc/nD1and B/Cproteiu，however,which covlC promote the exp/ssiox levels of Bcx and cleaved caspase-3proteiu,and indibit the proliferayoxof A377cells,and promote the cell apoptosis.ACLY was the target ge/o of miRCDCp that covlC oegaOvely regulate theexp/ssiox of ACLY.Moreover the ove/xp/ssiox of ACLY covlC partially reverse the eXects of miR-C05-Cp ovemxp/ss/x oxthe proliferayox and a yoptosis of A377ceUs.Conclrsion The miRC09Cp can mhibit the p/liferaPox and promote theayoptosis of human melanoma cells bp tarpemdly dowo-regulaOng ACLY exp/ssiox.【Key words]human melanoma；miRC09Cp；ACLY；cell p/liferaPox；ayoptosis人黑色素瘤是一种最常见和最具侵袭性的皮肤肿瘤。
miR-29b通过靶向调节特异性蛋白1调控糖尿病性白内障晶状体上皮细胞间质转化的作用
欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉引文格式：牟琳，刘苹，李来，岳娅婷．ｍｉＲ ２９ｂ通过靶向调节特异性蛋白１调控糖尿病性白内障晶状体上皮细胞间质转化的作用［Ｊ］．眼科新进展，２０２１，４１（１２）：１１１６ １１２１．ｄｏｉ：１０．１３３８９／ｊ．ｃｎｋｉ．ｒａｏ．２０２１．０２３４【实验研究】ｍｉＲ ２９ｂ通过靶向调节特异性蛋白１调控糖尿病性白内障晶状体上皮细胞间质转化的作用△牟 琳 刘 苹 李 来 岳娅婷欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁欁氉氉氉氉作者简介：牟琳（ＯＲＣＩＤ：００００ ０００１６０３６ ８２１９），女，１９７３年１月出生，重庆人，硕士，主任医师。
研究方向：晶状体及其相关疾病。
Ｅｍａｉｌ：ｙｉｓｈｅｎｇｚｑ＠ｙｅａｈ．ｎｅｔ收稿日期：２０２１ ０５ ３１修回日期：２０２１ ０９ ３１本文编辑：付中静△基金项目：四川省科技厅项目（编号：２０１８ＳＺ００６８）作者单位：６４６０００ 四川省泸州市，西南医科大学附属中医医院眼科【摘要】 目的 探究ｍｉＲ ２９ｂ通过靶向调节特异性蛋白１（ＳＰ １）调控糖尿病性白内障晶状体上皮细胞间质转化（ＥＭＴ）的作用机制。
方法 体外培养人晶状体上皮细胞（ＨＬＥ Ｂ３），分为正常组、高糖组、阴性组、ｍｉＲ ２９ｂｍｉｍｉｃｓ组和ｍｉＲ ２９ｂｍｉｍｉｃｓ＋ＳＰ １组。
除正常组细胞外，其余各组细胞于３５．５ｍｍｏｌ·Ｌ－１Ｄ 葡萄糖环境中培养。
阴性组、ｍｉＲ ２９ｂｍｉｍ ｉｃｓ组和ｍｉＲ ２９ｂｍｉｍｉｃｓ＋ＳＰ １组分别共转染ｍｉＲＮＡ模拟物ｓｃｒａｍｂｌｅ和阴性ｓｉＲＮＡ序列、转染ｍｉＲ ２９ｂ模拟物、共转染ｍｉＲ ２９ｂ模拟物和ＳＰ １基因序列。
采用实时荧光定量ＰＣＲ检测各组细胞ｍｉＲ ２９ｂ和ＳＰ １ｍＲＮＡ表达，采用Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ法和细胞划痕实验检测各组细胞迁移活性。
《2024年miR-486通过靶向PTEN调控高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的机制研究》范文
《miR-486通过靶向PTEN调控高糖诱导H9c2心肌细胞凋亡的机制研究》篇一摘要：本文探讨了miR-486在H9c2心肌细胞中通过靶向PTEN（磷酸酶和张力蛋白同源基因）调控高糖诱导细胞凋亡的机制。
通过实验研究，我们揭示了miR-486与PTEN之间的相互作用关系，并进一步探讨了这一过程对心肌细胞凋亡的影响。
一、引言近年来，糖尿病心肌病已成为心血管疾病领域的重要研究课题。
高糖环境对心肌细胞的损伤机制复杂，其中microRNA （miRNA）的异常表达在其中扮演了关键角色。
miR-486作为一种重要的调控分子，已被证实与多种细胞凋亡过程相关。
本研究旨在探讨miR-486如何通过靶向PTEN来调控高糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡。
二、材料与方法1. 材料：本实验采用H9c2心肌细胞系、高糖培养基、相关试剂和设备等。
2. 方法：（1）细胞培养与处理：H9c2细胞在特定条件下培养，并分别进行高糖处理和miR-486的转染处理。
（2）RNA提取与实时荧光定量PCR（RT-qPCR）：用于检测miR-486和PTEN的mRNA水平。
（3）Western blot：用于检测PTEN蛋白表达水平及磷酸化状态。
（4）细胞凋亡检测：采用流式细胞术等技术检测细胞凋亡情况。
三、实验结果1. miR-486和PTEN的表达变化：高糖处理后，H9c2细胞中miR-486表达水平显著升高，而PTEN的mRNA和蛋白表达水平则相应降低。
2. miR-486与PTEN的相互作用：通过生物信息学分析和双荧光素酶报告实验，证实了miR-486能够直接靶向PTEN的3'UTR区域，从而抑制其表达。
3. miR-486对H9c2细胞凋亡的影响：过表达miR-486后，H9c2细胞的凋亡率显著增加，而抑制miR-486的表达则可降低高糖诱导的细胞凋亡。
4. PTEN在miR-486诱导的细胞凋亡中的作用：当同时抑制PTEN的表达时，过表达miR-486所引起的细胞凋亡增加程度减弱，表明PTEN在miR-486诱导的凋亡过程中发挥关键作用。
《2024年MiR-140-5p靶定YES1基因影响A549细胞的凋亡与增殖》范文
《MiR-140-5p靶定YES1基因影响A549细胞的凋亡与增殖》篇一MiR-140-5p靶定YES1基因影响A549细胞凋亡与增殖的高质量范文摘要：本文研究了MiR-140-5p与YES1基因之间的相互作用，并探讨了其对A549细胞凋亡与增殖的影响。
通过实验发现，MiR-140-5p能够有效地靶定YES1基因，从而对A549细胞的生长和凋亡产生显著影响。
本文通过分子生物学和细胞生物学技术，深入探讨了这一过程的机制，为肺癌等肿瘤疾病的治疗提供了新的思路。
一、引言近年来，肺癌已成为全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一。
随着分子生物学和细胞生物学的发展，越来越多的研究表明，microRNA（miRNA）在肿瘤的发生、发展和转移过程中起着重要作用。
MiR-140-5p作为一种重要的miRNA，其在肿瘤细胞中的表达和功能逐渐受到关注。
而YES1基因作为肿瘤相关基因，其表达与肿瘤细胞的增殖和凋亡密切相关。
因此，研究MiR-140-5p与YES1基因之间的相互作用，对于揭示肿瘤发生发展的机制具有重要意义。
二、MiR-140-5p与YES1基因的相互作用MiR-140-5p是一种内源性非编码RNA，具有调控基因表达的功能。
而YES1基因是一种原癌基因，其表达与肿瘤细胞的增殖和凋亡密切相关。
通过生物信息学分析和实验验证，我们发现MiR-140-5p能够有效地靶定YES1基因的3'UTR区域，从而影响其表达。
三、MiR-140-5p对A549细胞凋亡与增殖的影响A549细胞是一种常见的肺癌细胞株。
为了研究MiR-140-5p 对A549细胞凋亡与增殖的影响，我们采用了细胞转染技术，将MiR-140-5p模拟物和抑制剂分别转染到A549细胞中。
通过流式细胞术、Western blot和实时荧光定量PCR等技术，我们发现MiR-140-5p能够显著抑制A549细胞的增殖，并促进其凋亡。
这一过程中，YES1基因的表达也发生了明显的变化。
miR495、miR551a靶向干扰SGC7901细胞PRL-3基因的表达的开题报告
miR495、miR551a靶向干扰SGC7901细胞PRL-3
基因的表达的开题报告
概述：
PRL-3是一种酪氨酸磷酸酶，其过度表达已经被证实与多种癌症相关。
因此，抑制PRL-3基因的表达已被认为是治疗癌症的一种潜在策略。
miRNAs是一类具有重要生物学功能的小RNA，在调节基因表达中发挥着重要的作用。
miR-495和miR-551a已被证明能够靶向抑制多种癌症相关基因的表达。
本文旨在通过miR-495和miR-551a对PRL-3基因的靶向抑制，研究其对肿瘤细胞SGC7901增殖和生长的影响。
研究方法：
1.构建miR-495和miR-551a的表达载体，并转染到SGC7901细胞中。
2.使用RT-qPCR验证miR-495和miR-551a的表达水平，并使用Western blot分析PRL-3的蛋白表达水平。
3.使用MTT和克隆形成试验评估细胞增殖和生长的抑制效应。
4.使用流式细胞术分析细胞周期和凋亡率。
预期结果：
预计miR-495和miR-551a的表达将显著抑制PRL-3的表达，从而
降低SGC7901细胞的增殖和生长能力。
同时，流式细胞术将显示细胞周
期停滞和凋亡增加。
研究意义：
该研究可以对miRNA在调节癌症相关基因表达中的作用进行深入探究，并为今后利用miRNA作为治疗癌症的新策略提供理论依据。
LINC00467通过靶向miR-495-3p调控视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡
LINC00467 通过靶向 miR-495-3p 调控视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡①
LINC00467 regulates proliferation and apoptosis of retinoblastoma cells by targeting miR-495-3p
LI Si-Ying，ZHOU Ping-Ping，QI Yan-Xiu，ZHANG Jian，WANG Yu-Qing. Department of Ophthalmology，the First Affiliated Hospital of Jiamusi University，Jiamusi 154002，China
李思莹 周萍萍 齐艳秀 张 剑 王玉清② （佳木斯大学附属第一医院眼科，佳木斯 154002）
中图分类号 R739. 7 文献标志码 A 文章编号 1000-484X（2021）12-1423-06 ［摘 要］ 目的：探讨 LINC00467 对视网膜母细胞瘤（Rb）细胞增殖、凋亡的影响和分子机制。方法：RT-qPCR 检测 Rb 组 织 和 正 常 视 网 膜 组 织 中 LINC00467 和 miR-495-3p 表 达 。 将 Y79 细 胞 分 为 si-NC、si-LINC00467、miR-NC、miR-495-3p、siLINC00467+anti-miR-NC、si-LINC00467+anti-miR-495-3p 组，MTT 法检测细胞增殖活力；流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot 检测细胞周期素 D1（CyclinD1）、p21、B 细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）和 Bcl 相关 X 蛋白（Bax）蛋白表达。双荧光素酶报告实验和 RT-qPCR 确定 LINC00467 对 miR-495-3p 的靶向调控作用。结果：抑制 LINC00467 表达，Y79 细胞活力、CyclinD1 和 Bcl-2 蛋白表 达显著降低，细胞凋亡率、p21 和 Bax 蛋白表达显著升高（P<0.05）。过表达 miR-495-3p 后 Y79 细胞活力、CyclinD1 和 Bcl-2 蛋白 表达显著降低，细胞凋亡率、p21 和 Bax 蛋白表达显著升高（P<0.05）。抑制 miR-495-3p 表达可逆转抑制 LINC00467 表达对 Y79 细胞增殖、凋亡以及相关蛋白表达的影响（P<0.05）。结论：Rb 中 LINC00467 表达升高，miR-495-3p 表达降低。抑制 LINC00467 通过靶向上调 miR-495-3p 抑制 Rb 细胞增殖，诱导其凋亡。 ［关键词］ LINC00467；miR-495-3p；视网膜母细胞瘤；细胞增殖；凋亡
MiR-495通过下调PCNA抑制人血管内皮细胞增殖的作用研究
MiR-495通过下调PCNA抑制人血管内皮细胞增殖的作用研究郑华峰;陶晶;张斌;王纯;吴淳【摘要】目的探讨microRNA-495(miR-495)对人血管内皮细胞增殖的作用及其分子作用机制.方法选择人脐静脉内皮细胞(HUVECs),利用lipofectamine2000转染试剂,将miR-495 mimics(模拟物)或miR-495 inhibitors(抑制物)转染HUVECs,分别以mimics control和inhibitors control作为对照.通过MTT实验分析过表达或干扰miR-495对HUVECs细胞增殖的影响,进而通过生物信息学软件预测,双荧光素酶报告基因系统,荧光定量PCR及Western blot,预测并验证miR-495靶基因,最后通过功能互补实验,观察提高或敲低增殖细胞核抗原(PCNA)表达对HUVECs细胞增殖的影响.结果体外细胞增殖实验发现,过表达miR-495可明显抑制HUVECs细胞的增殖,而干扰miR-495则可促进HUVECs细胞的增殖.PCNA是miR-495的靶基因,过表达miR-495可明显下调HUVECs细胞中PCNA mRNA 及蛋白表达水平.功能互补实验显示,敲低PCNA的表达亦可降低HUVECs细胞的增殖,反之促进HUVECs细胞的增殖.结论 MiR-495可抑制HUVECs细胞的增殖,其作用机制主要通过下调PCNA的表达而实现.【期刊名称】《中国心血管病研究》【年(卷),期】2016(014)004【总页数】6页(P374-379)【关键词】MiR-495;人脐静脉内皮细胞;增殖;增殖细胞核抗原【作者】郑华峰;陶晶;张斌;王纯;吴淳【作者单位】518036 广东省深圳市,北京大学深圳医院心内科;518036 广东省深圳市,北京大学深圳医院心内科;518036 广东省深圳市,北京大学深圳医院心内科;518036 广东省深圳市,北京大学深圳医院心内科;518036 广东省深圳市,北京大学深圳医院心内科【正文语种】中文【中图分类】R54缺血性疾病引起的组织缺血和功能障碍与供血不足密切相关，缺血刺激下的自然修复过程常常不足以对抗血管狭窄或闭塞引起的组织血流灌注不足。
miR-137靶向Notch1调控人视网膜微血管内皮细胞的增殖、周期和凋亡
miR-137靶向Notch1调控人视网膜微血管内皮细胞的增殖、周期和凋亡张亨闰;周春兰;陈红梅;张静;康海军【期刊名称】《四川医学》【年(卷),期】2022(43)11【摘要】目的探讨miR-137靶向Notch1调控对人视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)增殖、周期和凋亡的影响。
方法使用RT-qPCR检测我院20例高血压视网膜病变患者和20例高血压视网膜正常患者血清miR-137表达水平。
将miR-137阴性对照(miR-NC)和miR-137过表达组(mimics)转染至HRCEC中,转染24h后RT-qPCR检测miR-137和Notch1的RNA表达水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。
运用生物信息学预测和荧光素酶报告实验验证miR-137与Notch1存在靶向性。
Western Blot检测Notch1以及与周期和凋亡相关蛋白的表达。
结果RT-qPCR结果显示,高血压视网膜病变患者血清中的miR-137表达量显著高于高血压视网膜正常组患者(P<0.05)。
细胞增殖实验结果表明,miR-137mimics组细胞增殖指数显著低于miR-NC组(P<0.05)。
转染后24 h,miR-137mimics组过表达组的G0/G1期百分比(65.00±1.29)%相对于miR-NC组(56.52±0.81)%显著增加(P<0.05),G2期百分比(17.58±0.75)%则显著低于对照组(22.29±1.57)%(P<0.05);miR-137mimics组的凋亡率(12.67±0.31)%显著高于miR-NC组(2.16±0.12)%(P<0.05)。
生物信息学方法预测到miR-137与Notch1存在靶向性。
荧光素酶报告实验说明miR-137可以靶向结合Notch1。
miR-137mimics组的Notch1 mRNA和蛋白的相对表达量均显著低于miR-NC组(P<0.05),miR-137mimics组的周期相关蛋白CDK2相比miR-NC组表达量显著下降(P<0.05),miR-137mimics组抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量相比miR-NC组显著降低(P<0.05),而miR-137mimics组的促凋亡蛋Bax表达量相比miR-NC组则显著增加(P<0.05)。
miRNA-495及其成熟体调控恶性肿瘤生物学行为研究进展
miRNA-495及其成熟体调控恶性肿瘤生物学行为研究进展刘瑞明;张帅;衣鹏程;魏巍;于涛
【期刊名称】《中国现代医药杂志》
【年(卷),期】2024(26)3
【摘要】近年来许多学者对微小RNA(miRNA)作用于肿瘤细胞的效应进行了研究,其中,许多研究表明多种肿瘤细胞中miR-495及其成熟体miR-495-3p或miR-495-5p异常表达,通过调控下游信使RNA、受竞争内源性RNA调控、影响胞内信号通路等多种方式调控肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等多种生物学行为以及影响肿瘤细胞耐受放化疗能力。
此外,部分学者表明miR-495及其成熟体与疾病诊断以及预后具有密切关系。
因此,本研究对miR-495及其成熟体调控不同肿瘤研究进展作一综述。
【总页数】6页(P100-105)
【作者】刘瑞明;张帅;衣鹏程;魏巍;于涛
【作者单位】佳木斯大学附属第一医院骨科;山东第一医科大学附属省立医院骨科【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.Sox2参与恶性肿瘤生物学行为调控的研究进展
2.恶性肿瘤DNA倍体异质性和临床生物学行为的关系
3.乙烯调控果实成熟的分子生物学研究进展
4.lncRNA
MT1JP调控恶性肿瘤生物学行为研究进展5.1-磷酸鞘氨醇对恶性肿瘤生物学行为调控的研究进展
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《2024年脑缺血大鼠神经干细胞移植后神经再生的Notch信号通路机制研究》范文
《脑缺血大鼠神经干细胞移植后神经再生的Notch信号通路机制研究》篇一一、引言脑缺血是一种常见的神经系统疾病，其发病机制复杂，涉及多种细胞和分子间的相互作用。
近年来，神经干细胞移植技术为脑缺血治疗提供了新的可能。
在移植过程中，Notch信号通路起着关键作用，能够调控神经再生和神经细胞分化。
本研究旨在探讨脑缺血大鼠接受神经干细胞移植后，Notch信号通路在神经再生过程中的机制和作用。
二、材料与方法1. 实验材料本实验所使用的动物为成年SD大鼠，选用C57小鼠来源的神经干细胞进行移植。
实验所需试剂、仪器等均经过严格筛选和质量控制。
2. 实验方法（1）建立脑缺血模型：采用线栓法建立大鼠脑缺血模型。
（2）神经干细胞移植：将C57小鼠来源的神经干细胞移植至缺血区。
（3）Notch信号通路检测：通过免疫组化、Western Blot等方法检测Notch信号通路相关蛋白的表达情况。
（4）行为学评估：通过神经功能评分等方法评估大鼠神经功能恢复情况。
三、实验结果1. Notch信号通路相关蛋白表达变化通过免疫组化和Western Blot等方法检测发现，移植神经干细胞后，缺血区Notch1、Jagged1等关键蛋白表达水平显著提高，表明Notch信号通路被激活。
2. 神经再生情况移植后的神经干细胞参与了缺血区域的神经再生过程，表现为新生神经元和突触的生成增多。
同时，大鼠的神经功能评分也得到了显著提高，表明神经功能得到了恢复。
3. Notch信号通路在神经再生中的作用研究发现，Notch信号通路在神经再生过程中起着重要的调控作用。
通过激活Notch信号通路，可以促进神经干细胞的增殖、迁移和分化，从而加速神经再生。
此外，Notch信号通路还能够抑制神经元凋亡，保护缺血区域的神经元。
四、讨论本研究表明，在脑缺血大鼠接受神经干细胞移植后，Notch 信号通路被激活，参与了神经再生的过程。
Notch信号通路通过调控神经干细胞的增殖、迁移和分化，促进了缺血区域的神经再生。
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ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１－４６９５．２０１９．１４．００９ 文章编号：１６７１－４６９５（２０１９）１４－１４８６－０４
ｍｉＲ－４９５通过靶向 Ｎｏｔｃｈ１信号
调控高糖诱导的视神经节细胞凋亡
杨晓１ 张胜利１ 赵俊宏２ 张秀丽３ 刘钊３ （１渭南市第一医院眼科 陕西 渭南 ７１４０００； ２西安市第一医院眼科 陕西 西安 ７１０００２；３西安交通大学第一附属医院眼科 陕西 西安 ７１００６１）
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Ｊｏｕｒｎａቤተ መጻሕፍቲ ባይዱｏｆＣｌｉｎｉｃａｌａｎｄＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＶｏｌ．１８，Ｎｏ．１４ Ｊｕｌ．２０１９
ｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎａｎｄｂｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｙｒｅｇｕｌａｔｅｄ［Ｊ］．ＢＭＣＣａｎｃｅｒ，２０１８， １８（１）：７１７． ［９］ ＺｈａｎｇＹ，ＬｉａｎｇＢ，ＤｏｎｇＨ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｆａｓｃｉｎ１ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｃａｎｃｅｒｔｉｓ ｓｕｅｓｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｎｏｎｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒａｎｄｉｔｓｒｅｌｅｖａｎｃｅｔｏｐａ ｔｉｅｎｔｓ＇ｃｌｉｎｉｃｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｐｒｏｇｎｏｓｉｓ［Ｊ］．ＪＣａｎｃｅｒＲｅｓＴｈｅｒ， ２０１８，１４（４）：８５６－８５９． ［１０］ ＺａｍｏｒａＣ，ＣａｎｔｏＥ，ＮｉｅｔｏＪＣ，ｅｔａｌ．Ｉｎｖｅｒｓｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｃｉｒｃｕ ｌａｔｉｎｇｍｏｎｏｃｙｔｅ－ｐｌａｔｅｌｅｔｃｏｍｐｌｅｘｅｓａｎｄｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎｉｎｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉ ｔｉｓｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｉｎｆｌａｍｍ ＢｏｗｅｌＤｉｓ，２０１８，２４（４）：８１８－８２８． ［１１］ ＡｎｇｅｌｉｄｏｕＩ，ＣｈｒｙｓａｎｔｈｏｐｏｕｌｏｕＡ，ＭｉｔｓｉｏｓＡ，ｅｔａｌ．ＲＥＤＤ１／ａｕｔｏｐｈａｇｙ ｐａｔｈｗａｙｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ－ｄｒｉｖｅｎＩＬ－１βｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｒｅ ｓｐｏｎｓｅｉｎａｃｔｉｖｅｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓ［Ｊ］．ＪＩｍｍｕｎｏｌ，２０１８，２００（１２）： ３９５０－３９６１． ［１２］ ＷｄｒｙｃｈｏｗｉｃｚＡ，ＴｏｍａｓｉｋＰ，ＺａｊｃＡ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｏｆａｓ ｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｓｔｏｏｌａｎｄｓｅｒｕｍＩＬ－１β，ＩＬ－１ｒａａｎｄＩＬ－６ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎｃｈｉｌｄｒｅｎｗｉｔｈａｃｔｉｖｅａｎｄｉｎａｃｔｉｖｅｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓ［Ｊ］．ＡｒｃｈＭｅｄ Ｓｃｉ，２０１８，１４（１）：１０７－１１４． ［１３］ 马海芹，赵小静，张红杰．血清炎性活动指标、Ｔｈ１７／Ｔｒｅｇ细胞在溃 疡性结肠炎患者中的改变及其临床意义［Ｊ］．胃肠病学和肝病学杂 志，２０１８，２７（８）：８８５－８９０． ［１４］ ＺｈｕＱ，ＺｈｅｎｇＰ，ＣｈｅｎＸ，ｅｔａｌ．Ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅｐｒｅｓｅｎｔｓｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｏｎｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＩＬ－２３／ＩＬ－１７ａｘｉｓ ［Ｊ］．Ａｍ ＪＴｒａｎｓｌＲｅｓ，２０１８，１０（２）：４６５－４７３． ［１５］ ＺｈａｎｇＴ，ＣｕｉＢ，ＬｉＰ，ｅｔａｌ．Ｓｈｏｒｔ－ｔｅｒｍｓｕｒｖｅｉｌｌａｎｃｅｏｆｃｙｔｏｋｉｎｅｓａｎｄ
Ｃ－ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎｃａｎｎｏｔｐｒｅｄｉｃｔｅｆｆｉｃａｃｙｏｆｆｅｃａｌｍｉｃｒｏｂｉｏｔａｔｒａｎｓｐｌａｎ ｔａｔｉｏｎｆｏｒｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１６，１１（６）：ｅ０１５８２２７． ［１６］ ＶｏｉｏｓｕＴ，Ｂｅｎｇｕ爧Ａ，ＢｌｎｅｓｃｕＰ，ｅｔａｌ．Ｒａｐｉｄｆｅｃａｌｃａｌｐｒｏｔｅｃｔｉｎｔｅｓ ｔｉｎｇｐｒｅｄｉｃｔｓｍｕｃｏｓａｌｈｅａｌｉｎｇｂｅｔｔｅｒｔｈａｎＣ－ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｓｅｒｕｍ ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒαｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｕｌｃｅｒａｔｉｖｅｃｏｌｉｔｉｓ［Ｊ］．ＲｏｍＪＩｎ ｔｅｒｎＭｅｄ，２０１５，５３（３）：２５３－２６０． ［１７］ 赵新跃．美沙拉嗪联合双歧杆菌三联活菌对溃疡性结肠炎患者肠 黏膜及机 体 氧 化 应 激 因 子 的 影 响 ［Ｊ］．河 南 医 学 研 究，２０１８，２７ （１２）：２２０１－２２０２． ［１８］ 朱娟．刘志峰．溃疡性结肠炎患儿血清炎症因子及氧化应激水平 变化及意 义 ［Ｊ］．现 代 中 西 医 结 合 杂 志，２０１６，２５（１４）：１４９２－ １４９４． ［１９］ ＫａｎｇＪＥ，Ｋｉｍ ＨＤ，ＰａｒｋＳＹ，ｅｔａｌ．ＤｉｅｔａｒｙＳｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎＷｉｔｈａ ＢａｃｉｌｌｕｓＳｕｐｅｒｏｘｉｄｅＤｉｓｍｕｔａｓｅＰｒｏｔｅｃｔｓＡｇａｉｎｓｔγ－Ｒａｄｉａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ＯｘｉｄａｔｉｖｅＳｔｒｅｓｓａｎｄＡｍｅｌｉｏｒａｔｅｓＤｅｘｔｒａｎＳｕｌｐｈａｔｅＳｏｄｉｕｍ－ｉｎｄｕｃｅｄＵｌ ｃｅｒａｔｉｖｅＣｏｌｉｔｉｓｉｎＭｉｃｅ［Ｊ］．ＪＣｒｏｈｎｓＣｏｌｉｔｉｓ，２０１８，１２（７）：８６０－ ８６９． ［２０］ 张雅，马英，左进．溃愈汤治疗溃疡性结肠炎的疗效及对血清免疫 球蛋白表达的影响［Ｊ］．中国肛肠病杂志，２０１７，３７（２）：１２－１４． ［２１］ 侯炜炜，吴志美，许亮亮．隔药灸结合美沙拉嗪治疗溃疡性结肠炎 的临床疗效及对血清免疫球蛋白、白细胞介素 －１７和血栓素 Ｂ２的 影响［Ｊ］．临床和实验医学杂志，２０１８，１７（１９）：２０９７－２１０１．
【摘要】 目的 探讨 ｍｉＲ－４９５通过靶向 Ｎｏｔｃｈ１信号调控高糖诱导的视神经节细胞（ＲＧＣｓ）凋亡的效果与机制。 方法 将高糖培养的 ＲＧＣ－５细胞系随机分为三组：空白组、ｍｉＲ－４９５阴性对照（ｍｉＲＮＣ）和 ｍｉＲ－４９５组。ｍｉＲ－ＮＣ 组与 ｍｉＲ－４９５组分别转染 ｍｉＲ－４９５模拟物阴性对照（ｍｉＲＮＣ）与 ｍｉＲ－４９５模拟物（ｍｉｍｉｃ），空白组不进行转染。采 用 ｑＲＴ－ＰＣＲ检测 ｍｉＲ－４９５表达，ＣＣＫ－８法检测细胞增殖指数，流式细胞术检测检测细胞周期，流式细胞术检测细胞 凋亡指数，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测 Ｎｏｔｃｈ１蛋白表达。结果 转染后 ２４ｈ与 ３６ｈ，细胞增殖指数显著高于空白组与 ｍｉＲ－ＮＣ 组（Ｐ ＜０．０５）；细胞凋亡指数显著低于空白组与 ｍｉＲ－ＮＣ组（Ｐ ＜０．０５）；转染后 ３６ｈ，ｍｉＲ－４９５组的 Ｇ１期比率相对 于 ｍｉＲ－ＮＣ组和空白组显著降低（Ｐ ＜０．０５），Ｓ期 ＋Ｇ２期比率则显著增加（Ｐ ＜０．０５）。转染后 ２４ｈ与 ３６ｈ，ｍｉＲ－ ４９５组的 Ｎｏｔｃｈ１蛋白相对表达量显著低于 ｍｉＲ－ＮＣ组和空白组，空白组与 ｍｉＲ－ＮＣ组比较差异无统计学意义（Ｐ ＞ ０．０５）。结论 ｍｉＲ－４９５能减轻高糖诱导的 ＲＧＣｓ损伤，促进 ＲＧＣｓ增殖，抑制 Ｎｏｔｃｈ１信号通路，从而调节细胞周期，抑 制 ＲＧＣｓ凋亡。