2016年《步步高》高考生物新课标一轮复习第38讲细胞工程
2016届高考生物一轮复习 第2讲 细胞工程课件 新人教版选修3
第二讲
细胞工程
知识点一
[循着图示· 想一想] 植物细胞工程
知识点二
动物细胞培养和核移植技术
1．动物细胞培养
2．动物体细胞核移植技术
将动物一个体细胞的细胞核，移入一个已 动物
体细 胞核 移植 技术 概念 经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并 发育成一个新的胚胎，并最终发育为动物 个体 基础 动物体细胞核具有全能性
(5)动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育
(√ )
(2011· 江苏卷 T14D)
(6)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 (2010· 浙江卷 T4A)( × )
(7)克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 (2010· 浙江卷 T4B)( × )
(8)二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
解析：(1)新生营养芽的细胞分化程度低，细胞分裂旺盛，易培 养。PLBs 类似于愈伤组织，由新生营养芽培养到愈伤组织的 过程称为脱分化。(2)从坐标曲线可知，与黑暗条件下相比，光 照条件下的 PLBs 生长速度快，原因可能是光照有利于叶绿素 的形成， 有利于细胞进行光合作用制造有机物。 (3)①由于 ABA 受热易分解，故应将液体培养基先灭菌冷却后，再按一定的比 例加入 ABA 母液。②据题意可知，该实验共设置 4 个实验组 和 1 个对照组，共 5 组；实验 50 天完成，每 10 天取样，初始 数据已知，只需测 5 次，故 5 组样品重复 3 次，共需测定的样
(2)动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 (2013· 大纲卷 T2B)( × )
(3)动物细胞培养可用于检测有毒物质， 茎尖培养可用于植物脱 除病毒 (2013· 大纲卷 T2D)( √ )
2015届《优化方案》高考生物(苏教版)一轮随堂检测：第38讲 细胞工程
1．(2013·高考天津卷)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。
野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。
用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。
再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。
流程如下图。
据图回答下列问题：(1)过程①所需的酶是________________。
(2)过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的________存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
(3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是________________________。
原生质体经过________再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
(4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和________植株的根尖，通过________、________、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
(5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。
下图是用该引物对双亲及再生植株1～4进行PCR 扩增的结果。
据图判断，再生植株1～4中一定是杂种植株的有________。
(6)对杂种植株进行________接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
2．回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的________。
此时，瓶壁上形成的细胞层数是________。
要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是________。
(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现________________的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞，该种细胞的黏着性________，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量________。
高考生物总复习第11单元第38讲细胞工程学案
第38讲 细胞工程[考纲点击] 1.植物的组织培养(Ⅱ) 2.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ) 3.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)一、细胞工程的概念1．原理和方法：应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法。
2．操作水平：细胞水平或细胞器水平。
3．目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品。
4．分类：根据操作对象的不同，分为植物细胞工程和动物细胞工程。
二、植物细胞工程1．原理：细胞的全能性。
(1)原因：生物的任何一个细胞都包含本物种的全部遗传信息。
(2)全能性表达的条件：处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。
2．植物组织培养技术离体的植物器官、组织或细胞――→脱分化激素、一定的营养、避光愈伤组织――→再分化激素、光根、芽→植物体 3．植物体细胞杂交技术(1)去壁：酶解法，所用酶为纤维素酶和果胶酶。
(2)诱导原生质体融合：物理法——离心、振动、电激等；化学法——常用聚乙二醇(PEG)作诱导剂。
(3)植物体细胞杂交成功的标志：杂种细胞再生出细胞壁。
(4)优点：克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍。
(5)变异类型：染色体变异。
4．植物细胞工程的实际应用错误!(2)作物新品种的培育：单倍体育种、突变体的利用。
(3)细胞产物的工厂化生产：培养到愈伤组织阶段。
三、动物细胞工程1．动物细胞培养：其他动物细胞工程技术的基础。
(1)过程(2)条件①无菌、无毒的环境——无菌处理、加抗生素杀菌、定期更换培养液。
②营养——糖、氨基酸、促生长因子、无机盐和微量元素＋血清或血浆等天然成分。
③适宜的温度(36.5±0.5 ℃)和pH(7.2～7.4)。
④气体环境——95%空气＋5%_CO2(维持培养液的pH)。
(3)应用：生产细胞产品，如干扰素、疫苗、单克隆抗体；检测并判断某毒性物质毒性的大小；临床医学研究。
2．动物体细胞核移植(1)原理：动物细胞核具有全能性。
(2)过程3．单克隆抗体制备(1)诱导动物细胞融合的方法：物理法——离心、振动、电激等；化学法——聚乙二醇；生物法——灭活的病毒。
高考生物一轮集训 真题与练出高分 10.38细胞工程 新人教版
【步步高】2014届高考生物一轮集训真题与练出高分 10.38细胞工程新人教版1．(2011·上海卷，22)下列关于植物组织培养的表述，错误的是( )A．外植体可以来自于植物的任何细胞B．培养应在无菌条件下进行C．以花粉作为外植体可得到单倍体植株D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同答案 A2．(2010·浙江卷，4)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( )A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养答案 D解析保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞；克隆培养法在培养细胞时由于所有子代细胞来自于一个亲代细胞，所以基因型一般都相同；二倍体细胞的传代培养一般传至10代后就不易传下去了；恶性细胞系的细胞具有不死性，可以进行传代培养。
3．(2011·天津卷，8)絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。
为进一步提高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。
其流程图如下。
据图回答：(1)溶菌酶的作用是_______________________________________________________。
(2)PEG的作用是________________________________________________________。
(3)经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B难以生长。
图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是_____________________________________________________________ ________________________________________________________________________。
【状元之路】(通用)高考生物一轮复习专题二细胞工程课件
• (6)植物组织培养的目的不同，培养阶段也不同：若是进 行植物微型繁殖，应培养成植株幼苗；若是生产人工种子， 应培养成具有生根发芽能力的胚状体；若是生产细胞产品， 则可培养到愈伤组织，从大量培养的愈伤组织中提取产品， 如紫草素、紫杉醇等。
• 3．培养条件
• (1)无菌、无毒的环境：对培养液和所有培 养用具进行灭菌处理；在培养液中添加一 定量的抗生素；定期更换培养液，以清除 代谢产物。
• (2)营养：合成培养基的成分包括糖、氨基 酸、促生长因子、无机盐、微量元素等， 在使用时，通常需加入血清、血浆等。
• (3)温度和pH：适宜温度为36.5±0.5 ℃， pH为7.2～7.4。
02 整合考点 破解疑难
考点分类抓基础 点点击破我能行
• 一、植物组织培养
• 1．植物组织培养技术
• (1)细胞的全能性是指具有某种生物全部遗 传信息的任何一个细胞，都具有发育成完 整生物体的潜能。
• (2)在生物的生长发育过程中，细胞未表现 出全能性的原因是细胞中的基因在特定的 时间和空间条件下选择性表达出各种蛋白 质。
• (4)植物组织培养的概念：在无菌和人工控 制的条件下，将离体的植物器官、组织、 细胞，培养在人工配制的培养基上，给予 适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、 丛芽，最终形成完整植株。
• 特别提醒 细胞具有全能性与脱分化和再 分化
• (1)细胞全能性的原因：生物体的每个细胞 都具有发育成完整个体所必需的全部基因。
• 3．应用：可突破生殖隔离，克服远缘杂交 不亲和的障碍，实现不同物种间的遗传物 质重组，从而获得异源多倍体。
• 三、动物细胞培养
【优化方案】高考生物一轮复习 第十二单元 第38讲 细胞工程课件 苏教版
胞全能性受限制，但细胞核具有全能性)
2．植物组织培养 名称 脱分化 过程 由外殖体成为 愈伤组织 由愈伤组织成 为幼苗或胚状 结构 发育成完整的 植物体 形成体特点 排列疏松、高度 液泡化的薄壁细 胞团 有根、芽或有生 根发芽的能力 由根、茎、叶、 花、果实、种子 组成 需要的激素 生长素与细胞分 裂素的比例大 生长素与细胞分 裂素的比例小 自身产生各种植 物激素
1．细胞的全能性 (1)原理：细胞内含有本物种全部的遗传信息。 (2)体内细胞全能性不表达的原因：基因在特定的时间和空间 条件下选择性表达。 (3)植物细胞全能性表现的条件。
①离体：在植物体内因为基因选择性表达，其全能性不能表
达。 ②无菌：培养基灭菌，外殖体(接种到培养基上的组织细胞)、
所用操作工具及操作环境必须严格消毒。
解析：消毒主要是为了杀死材料表面的微生物，同时要注意 减少消毒剂对植物细胞的伤害，A项正确；植物细胞融合前 必须先去除细胞壁才能诱导融合，直接在愈伤组织培养中加 入细胞融合的诱导剂，不能得到融合细胞，B项错误；出芽 从细胞水平上看，是细胞分化的结果，从分子水平上看，是
基因选择性表达的结果，C项正确；生长素类调节剂可促进
第十二单元
现代生物科技专题
第38讲
细胞工程
2015高考导航 考纲点击 考情示例
2013四川1、江苏11、新课标 植物组织培养Ⅱ 全国40、天津9、重庆2、5、 动物的细胞培养与体细胞克隆 海南31、浙江6 Ⅰ 2012广东2、江苏22 2011江 细胞融合与单克隆抗体Ⅱ 苏14、16、广东3
1．理论上，每个正常活细胞都具有全能性( √ )
水平
个体水平
联系
都属无性繁殖；产生的新个体、新组织遗传 信息相同
高考生物总复习三十三天二基因工程与细胞工程讲课文档
结果 杂种植株
杂交细胞
克服了远缘杂交 意义 的不亲和性，获
得杂种植株
突破了有性杂交方法的局 限，使远缘杂交成为可能
第七页，共25页。
4.准确记忆单克隆抗体的一过程两特点 (1)制备过程：
(2)单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高。
第八页，共25页。
几个易错的地方 1．原代培养与传代培养的区别：是否进行了分瓶培养。 2．动植物的体细胞进行离体培养都需要在无菌条件下进行。 3．核移植技术获得的动物与供核动物的性状并不完全相同。 4．正确认识 3 类细胞的来源： (1)杂种细胞：植物体细胞杂交。 (2)重组细胞：核移植。 (3)杂交细胞：动物细胞融合。
第十五页，共25页。
答案：(1)纤维素 果胶 原生质体 愈伤 再分化(或分化) 植物体细胞杂交技术 (2)体细胞中含有三个或三个以上染色体组的 个体 在减数分裂过程中，前者染色体联会异常，而后者染色体联 会正常
(3)胚状体、不定芽、顶芽、腋芽
第十六页，共25页。
2．(2017·高考全国卷Ⅲ) 编码蛋白甲的 DNA 序列(序 列甲)由 A、B、C、D、E 五 个片段组成，编码蛋白乙和 丙的序列由序列甲的部分 片段组成，如图 1 所示。
第九页，共25页。
5．关注制备单克隆抗体的3种细胞2次筛选 (1)3种细胞特点不同。 ①免疫后的B淋巴细胞：能分泌抗体，不能大量增殖。 ②骨髓瘤细胞：能大量增殖，不能分泌抗体。 ③杂交瘤细胞：既能分泌抗体，又能大量增殖。 (2)2次筛选目的不同。 ①第1次：获得杂种细胞。 ②第2次：获得能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞。
第十二页，共25页。
(3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植 物组织培养得到的____等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
2025版高考生物一轮总复习第10单元生物技术与工程第38课动物细胞工程教师用书
第38课 动物细胞工程►学业质量水平要求◄1．结合详细实例，说出动物细胞工程的技术原理。
(生命观念、科学思维)2．针对生产生活中的实际问题，从动物细胞工程动身，尝试提出解决方案并进行设计。
(生命观念、科学探究)考点一 动物细胞培育1．动物细胞培育及其条件(1)动物细胞培育：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在相宜的培育条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
(2)动物细胞培育的条件 ①养分：除糖类、氨基酸、无机盐、维生素之外，通常还需加入血清等一些自然成分。
②无菌、无毒环境⎩⎪⎨⎪⎧培育液和培育用具进行灭菌处理及在无菌环境下操作定期更换培育液，清除代谢物③温度、pH 和渗透压相宜的温度：36.5±0.5 ℃；相宜的pH ：7.2～7.4；渗透压也是须要考虑的一个重要环境参数。
④气体环境⎩⎪⎨⎪⎧95%的空气：其中O 2为细胞代谢必需的5%的CO 2：维持培育液的pH 2．动物细胞培育的过程(1)过程(2)体外培育的动物细胞类型①一类细胞能够悬浮于培育液中生长增殖。
②另一类则须要贴附于某些基质表面才能生长繁殖，而且还会发生接触抑制现象，从而使细胞停止分裂增殖。
(3)生长特点①细胞贴壁：将细胞悬液放入培育瓶内，置于相宜环境中培育，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。
②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象称为细胞的接触抑制。
(4)原代培育和传代培育①原代培育：通常指分瓶之前的细胞培育，即动物组织经处理后的初次培育。
②传代培育：指分瓶之后的细胞培育。
3．干细胞培育及其应用(1)分布：存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中。
(2)类型：胚胎干细胞和成体干细胞等。
(3)胚胎干细胞：简称ES细胞，存在于早期胚胎中，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的全部组织和器官甚至个体的潜能。
(4)成体干细胞①分布：成体组织或器官内。
[高考生物]一轮复习人教版 细胞工程 教案.doc
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专题38 细胞工程讲考纲讲考点考点一 植物细胞工程1．植物细胞的全能性（1）概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。
（2）原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。
（3）全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。
2．植物组织培养技术（1）原理：植物细胞具有全能性。
（2）过程3．植物体细胞杂交技术（1）概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
（2）过程4．植物细胞工程的应用（1）微型繁殖：优点是能够保持亲本的优良性状。
（2）作物脱毒：利用茎尖、根尖等无毒组织进行微型繁殖。
（3）培育人工种子：可以解决某些植物结实率低、繁殖困难的问题。
（4）作物新品种的培育：单倍体育种和突变体的利用。
（5）细胞产物的工厂化生产：即利用植物组织培养技术生产蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料和生物碱等。
【例1】（2017年海南卷，31）甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。
回答下列问题：（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是____________________。
（2）甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到__________。
若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是____________（填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”）。
（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是________。
A中的愈伤组织是叶肉细胞经_______形成的。
（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，___________（填“能”或“不能”）采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是____________。
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第38讲细胞工程[考纲要求] 1.植物的组织培养(Ⅱ)。
2.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)。
3.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。
考点一植物细胞工程1．细胞工程(1)操作水平：细胞水平或细胞器水平。
(2)目的：按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产物。
2．植物细胞的全能性(1)概念：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。
(2)原理：细胞内含有本物种的全部遗传信息。
(3)全能性表达条件：具有完整的细胞结构，处于离体状态，提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。
3．植物组织培养技术(1)原理：植物细胞具有全能性。
(2)过程：4．植物体细胞杂交技术(1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。
(2)操作流程(3)流程分析①过程a为去除细胞壁获得具有活力的原生质体，用到的酶是纤维素酶和果胶酶。
②过程b是原生质体的融合，其原理是细胞膜具有一定的流动性。
③诱导b融合的两种方法：物理法包括离心、振动、电激等；化学法一般用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。
④过程c是原生质体融合后再生出细胞壁。
⑤过程d是植物组织培养技术，其原理是细胞的全能性。
(4)意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。
5．植物细胞工程的应用(1)微型繁殖：优点是能够保持亲本的优良性状。
(2)作物脱毒：利用茎尖、根尖等无毒组织进行微型繁殖。
(3)培育人工种子：可以解决某些植物结实率低、繁殖困难的问题。
(4)作物新品种的培育：单倍体育种和突变体的利用。
(5)细胞产物的工厂化生产：即利用植物组织培养技术生产蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料和生物碱等。
[思维诊断](1)棉花根尖细胞经诱导形成幼苗能体现细胞全能性(√)(2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性(×)(3)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化(×)(4)愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的(×)(5)利用物理法或化学法，可以直接将两个植物细胞进行诱导融合(×)(6)用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性(×)(7)再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志(√)题组一植物组织培养过程分析1．下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程，据图分析错误的是()A．①过程需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理B．②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变C．③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能D．④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理答案 B解析植物细胞壁主要是由纤维素和果胶组成的，常选用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体。
紫外线照射诱变育种所依据的原理是基因突变，这种突变是不定向的。
③过程是脱分化，指已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行离体(也受到创伤)培养时，已停止分裂的细胞，又重新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构和功能，成为具有未分化特性的细胞。
④是再分化，需用适宜配比的生长素和细胞分裂素诱导。
2．人工种子是人们模仿天然种子的结构制造出来的生命有机体，它能像种子一样萌发生长，长成植物。
人工种子的核心部件是一个被外层物包埋的具有类似于胚功能的胚状体。
将胚状体包埋在一个能提供营养的胶质中，便成了所谓的“人工种子”。
(1)人工种子依据的原理是________________________，培育胚状体利用了________________________技术。
(2)包埋胚状体的胶质可看作自然种子的哪部分结构？________________________________________________________________________。
(3)如果外植体是植物的茎尖，通过①的处理可使细胞彼此分离，①过程中可加入() A．蛋白酶B．淀粉酶C．果胶酶D．胰蛋白酶(4)②过程表示脱分化过程，其实质是______________；③表示再分化过程，其实质是________________。
(5)由人工种子萌发成的植株是否可育？________。
答案(1)植物细胞的全能性植物组织培养(2)种皮及提供营养的胚乳或子叶(3)C(4)使细胞恢复分裂能力基因的选择性表达(5)不一定解析(1)人工种子能发育成完整植株，说明其细胞内含有个体发育所需要的全部遗传物质，因此依据的原理是细胞的全能性，人工种子是经过植物组织培养技术得到的。
(2)包裹胚状体的胶质有保护胚状体的作用，同时又可以为胚状体提供营养物质，所以可看成种皮及胚乳或子叶。
(3)使植物细胞彼此分离可以使用果胶酶，因为植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶。
(4)脱分化的实质是使细胞恢复分裂能力，而再分化的实质是基因的选择性表达。
(5)人工种子是否可育取决于培育胚状体所选用的材料。
归纳提升植物组织培养和植物体细胞杂交的比较题组二 植物体细胞杂交过程分析3．“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。
下图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图。
以下说法正确的是( )A ．除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶B ．通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG 和灭活的病毒诱导C ．杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁D ．愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程答案 C解析 除去细胞壁的酶有纤维素酶和果胶酶；诱导植物原生质体融合不能用灭活的病毒；杂种细胞形成的标志是诱导产生了新的细胞壁；愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体属于再分化过程。
4．下面为“番茄－马铃薯”的培育过程示意图，请据图回答下列问题：(1)若运用传统有性杂交(即用番茄、马铃薯杂交)能否得到可育的杂种植株？为什么？________________________________________________________________________。
(2)在利用杂种细胞培育杂种植株的过程中，运用的技术手段是______________，依据的原理是______________，其中过程②称为____________技术，与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为__________，过程④相当于________，过程⑤涉及的细胞分裂方式为________。
(3)已知番茄、马铃薯分别为四倍体、二倍体，则“番茄－马铃薯”属于________倍体植株。
(4)柴油树种子含有的柴油是植物细胞的代谢产物，可用植物组织培养来实现柴油的工业化生产。
若利用此技术，将柴油树细胞培养进行到________(填字母编号)阶段即可。
答案(1)不能。
不同种的植物存在生殖隔离(2)植物组织培养植物细胞的全能性原生质体融合高尔基体脱分化有丝分裂(3)六(4)e解析(1)番茄和马铃薯属于两种植物，存在生殖隔离，不能通过有性杂交产生后代。
(2)过程②是把a、b两个原生质体融合在一起，所以称为原生质体融合。
过程③是在融合的原生质体外再生一层细胞壁，而细胞壁的形成与高尔基体有关。
过程④的结果是形成了愈伤组织，所以④为脱分化。
(3)“番茄－马铃薯”属于异源多倍体中的异源六倍体。
(4)柴油是植物细胞的代谢产物，要实现其工业化生产需将柴油树细胞培养到愈伤组织，然后进行提取。
技法提炼植物体细胞杂交过程中杂种细胞类型及检测方法(1)诱导产物(假设用于杂交的两种植物细胞分别为A、B)：①未融合的细胞：A和B。
②两两融合的细胞：AA、BB和AB。
③多细胞融合体。
(2)检测方法：对诱导产物中的细胞进行植物组织培养，然后根据得到的植物性状进行判断。
①若只表现出一种植物的性状，说明是未融合细胞。
②若得到的是具有两种亲本性状的植物，说明是杂种植株。
③若得到的是两种亲本性状的植物，且一种植物的性状得到加强，则是多细胞融合体。
④若得到的是一种植物的性状，但是效果得到加强，则是同种细胞融合的结果。
考点二动物细胞培养与体细胞克隆1．动物细胞培养(1)动物细胞的培养过程(2)培养条件①无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理，添加抗生素，定期更换培养液以清除代谢产物。
②营养：除正常的有机和无机营养外，需加入血清、血浆等一些天然成分。
③适宜的温度和pH：温度为36.5±0.5_℃(哺乳动物)，pH为7.2～7.4。
④气体环境：含95%空气加5%CO2的混合气体，其中后者的作用是维持培养液的pH。
(3)应用：生物制品的生产、检测有毒物质、医学研究。
2．动物体细胞核移植技术和克隆动物(1)动物体细胞核移植技术的过程(2)原理：动物体细胞核具有全能性。
(3)结果：产生新个体。
(4)应用：①加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。
②保护濒危物种。
③生产医用蛋白。
④作为异种移植的供体。
⑤用于组织器官的移植。
[思维诊断](1)连续细胞系的细胞大多具有二倍体核型(2014·浙江，3A)(×)(2)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理(×)(3)肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸(×)(4)与“多利”羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、细胞培养和核移植(√)(5)植物原生质体融合和动物细胞融合原理是相同的(√)(6)动物细胞培养中两次使用胰蛋白酶的作用相同(×)题组一动物细胞培养与细胞核移植的过程分析1.如图所示为哺乳动物生殖的过程。
其中b为卵细胞，c为体细胞。
下列叙述不正确的是()A．形成动物①②的过程分别属于有性生殖和无性生殖B．产生动物②的过程中可发生基因突变、基因重组等C．动物②的产生表明动物细胞的细胞核具有全能性D．a、b、c细胞的形成过程，仅c细胞为有丝分裂答案 B解析动物①通过受精作用形成，属于有性生殖，动物②通过细胞核移植技术形成，利用的原理是动物细胞的细胞核具有全能性，形成动物②的过程属于无性生殖，A、C正确。
a、b 细胞分别由精原细胞和卵原细胞通过减数分裂形成，c细胞是体细胞，通过有丝分裂形成，D正确。
产生动物②的过程中并没有发生基因重组，故B错误。
2．某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。
供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。
请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。
一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量________。
(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是________________________________________________________________________。