生物化学王镜岩第三版蛋讲义白质降解和氨基酸的分解代谢课件
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浙江大学王镜岩生物化学甲上第07章蛋白质降解及氨基酸代谢-PPT精品文档14页
一碳单位： FH4 “S”的同化
谢谢你的阅读
知识就是财富 丰富你的人生
c. 生成氨甲酰磷酸 d. 生成尿素排泄（鸟氨酸（尿素）循环）
三、 氨基酸的合成
1. 概述
-NH2 酮酸（碳架）
氨基化
2. 氨基化 （1）还原氨基化
（2）转氨基 （3）联合氨基化
3. 个别氨基酸合成 根据碳架来源分族
Glu族 Asp族 Ala族 （pyr） Ser族 （甘油3磷酸） 芳香族 (PPP途径) His (PRPP)
氨基酸脱氢酶（不需氧）
氨基酸氧化酶（需氧）
（2） 非氧化脱氨基
脱水 脱H2S …
2. 转氨基作用
3. 联合脱氨基作用 4.脱羧基作用
5. AA降解产物的进一步代谢
1).
CO2
放出 再羧化
2). R-CO-COOH
EMP TCAΒιβλιοθήκη 生糖/生酮 ATP3). NH2
a. 再合成AA
b. 成酰胺
消化道酶
果实酶
大多数正分解 有的细菌 真菌 放线菌
酶制剂
微生物来源蛋白酶制剂常按最适pH分类
碱性：pH10以上（2709枯草菌蛋白酶）
酸性：pH2-3以下
黑曲霉
中性：多
蛋白酶分类：
内肽酶 （蛋白酶） 外肽酶 羧肽酶、氨肽酶
二、 氨基酸分解的共同途径
1. 脱氨基作用
（1） 氧化脱氨基作用
第七章 蛋白质降解及氨基酸代谢
• 概述 • 氨基酸分解的共同途径 • 氨基酸的合成
一、 概 述
1.氮源与氨基酸库
NO3 N2 NO2
NH3
有机氮 （氨基酸） 肽/蛋白质
2. 蛋白质的酶促水解（消化吸收） （1）水解： 水解过程： protein 眎 胨 肽 AA
谢谢你的阅读
知识就是财富 丰富你的人生
c. 生成氨甲酰磷酸 d. 生成尿素排泄（鸟氨酸（尿素）循环）
三、 氨基酸的合成
1. 概述
-NH2 酮酸（碳架）
氨基化
2. 氨基化 （1）还原氨基化
（2）转氨基 （3）联合氨基化
3. 个别氨基酸合成 根据碳架来源分族
Glu族 Asp族 Ala族 （pyr） Ser族 （甘油3磷酸） 芳香族 (PPP途径) His (PRPP)
氨基酸脱氢酶（不需氧）
氨基酸氧化酶（需氧）
（2） 非氧化脱氨基
脱水 脱H2S …
2. 转氨基作用
3. 联合脱氨基作用 4.脱羧基作用
5. AA降解产物的进一步代谢
1).
CO2
放出 再羧化
2). R-CO-COOH
EMP TCAΒιβλιοθήκη 生糖/生酮 ATP3). NH2
a. 再合成AA
b. 成酰胺
消化道酶
果实酶
大多数正分解 有的细菌 真菌 放线菌
酶制剂
微生物来源蛋白酶制剂常按最适pH分类
碱性：pH10以上（2709枯草菌蛋白酶）
酸性：pH2-3以下
黑曲霉
中性：多
蛋白酶分类：
内肽酶 （蛋白酶） 外肽酶 羧肽酶、氨肽酶
二、 氨基酸分解的共同途径
1. 脱氨基作用
（1） 氧化脱氨基作用
第七章 蛋白质降解及氨基酸代谢
• 概述 • 氨基酸分解的共同途径 • 氨基酸的合成
一、 概 述
1.氮源与氨基酸库
NO3 N2 NO2
NH3
有机氮 （氨基酸） 肽/蛋白质
2. 蛋白质的酶促水解（消化吸收） （1）水解： 水解过程： protein 眎 胨 肽 AA
生物化学王镜岩第三章氨基酸ppt课件
三. 氨基酸的分类
AA and classification
基本氨基酸:编码的蛋白质氨基酸 20种
蛋白质 AA
修饰（稀有）氨基酸：多肽合成后由基
本aa经酶促修饰而来。
Pr-AA
非蛋白质 A存A在于生物体内但不 Non-Pr A组A成蛋白质 (约150种)。
（一） .基本 20种氨基酸按照 R基的化学结构分类
什么是α-氨基酸？
COOH
----C-C-C-C-COOH γβα
α
H2N C H R
----C-C-C-C(NH2)-COOH α-氨基酸 ----C-C-C(NH2)-C-COOH β-氨基酸 ----C-C(NH2)-C-C-COOH γ-氨基酸
(2) 除甘氨酸 外,其它所有氨基酸分子中的 α-碳原子都为 不对称碳原子 ,所以： A.除甘氨酸外都具有旋光性 .除甘氨酸 外，都具有 D-型 和L-型两种立体异 构体。 B. 除胱氨酸和酪氨酸外，其余 AA都能 溶于水。
第二章 氨基酸
Chapter2 Amino acid
教学目标：
掌握氨基酸的结构特点与理化性质。
1.从氨基酸的结构特点上理解氨基酸的分 类和生物学特性。
2.掌握氨基酸的理化性质，重点掌握两性 解离与等电点的含义、氨基酸参加的化 学反应，特别是侧链的 acid,AA)
优点：色氨酸稳定
酶水解 ：水解位点特异，得到多肽片段和AA的
混合物，用于一级结构分析。
二. 氨基酸的结构 (Structure of Pr-AA)
1. 20种氨基酸的结构通式:
COOH
α
H2N C H
不变部分
R
可变部分
COOH
α
H2N C H
王镜岩版生化第八章 蛋白质的降解与氨基酸代谢 ppt
•
必需氨基酸：Lys、Trp、Phe、Met、 Thr、Leu、Ile、Val
二
氨基酸的 分解代谢
氨基酸的分解代谢
特殊分解代谢 → 特殊侧链的分解代谢
脱羧基作用 → CO2 + 胺 一般分解代谢→
脱氨基作用 → NH3 + α -酮酸
（1）氨基酸的脱氨基作用
• 氨基酸主要通过三种方式脱氨基，即氧 化脱氨基，联合脱氨基和非氧化脱氨基。
④ 精氨酸代琥珀酸 瓜氨酸 ③ AMP+PPi ATP+Asp
本章小结
• 1 蛋白质通过蛋白酶作用降解为氨基酸 • 2 氨基酸分解代谢包括脱氨基、脱羧基作 用
课外讨论
• 1 氨基酸脱氨基有几种方式代谢 • 2 白化病与氨基酸代谢
/.../mwking/nitrogen-metabolism.html
胞液 cytoplasm
线粒体 mitochondrion
2ATP+CO2+NH2+H2O ① 2ADP+Pi
尿素 鸟氨酸 延胡索酸 H2O 精氨酸 ⑤ ② 瓜氨酸 Pi 鸟氨酸 氨基甲酰磷酸
苹果酸 草酰乙酸
R’-COCOOH
R”-CH(NH2)COOH
• 转氨酶(transaminase)以磷酸吡哆醛(胺) 为辅酶。
138.192.68.68/.../AminoAcidDegradation.html
• 转氨基作用(transamination)可以在各种 氨基酸与α-酮酸之间普遍进行。除Gly， Lys，Thr，Pro外，均可参加转氨基作用。
①氧化脱氨基：
反应过程包括脱氢和水解两步。
-2H +H2O R-CH（NH2）COOH → R-C（=NH）COOH → R-COCOOH + NH3
最新[医学]王镜岩生化第三版考研课件 第7章 蛋白质的分离纯化和表征讲学课件
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商铺销售方式 鉴于目前剩余商铺产品均在西大门两侧的位置，为营造商业氛围，全部以免租 金方式招商，目前已形成一定的商业雏形，为保障客户投资利益，快速去化， 建议以：
售后返租方式销售（租户优选购铺）
以3年返租形式销售，以成交总价的年5%计算租金，3年共返租15%，可 以抵扣房款。业主三年内无商铺的经营权，可以在签订合同是在交房时间上体 现三年租期。商铺三年内由物业招商经营。（具体货值计算见附表）
1.等电点沉淀 调整溶液pH 不同蛋白在各自 pI处依次沉淀
2.盐溶和盐析 3.有机溶剂分级分离法
降低介电常数 争夺水化膜
（三)根据电荷不同的分离方法—电泳
原理： • 蛋白质在非等电点时所带总电荷不为0 • 分子大小不同，电场中移动速度也不同
等电聚焦电泳
双向电泳
离子交换层析
（四）利用蛋白质选择性吸附的性质
1.同种蛋白带同种电荷，相互排斥 2.水膜弹性
蛋白质溶液具有丁达尔效应、布朗 运动以及不能通过半透膜等性质
（二）蛋白质的沉淀
Pr从胶体溶液中析出 Ⅰ可逆沉淀：
– 温和条件，改变溶液pH或Pr所带电荷 – Pr结构和性质没有变化 – 适当条件下可重新溶解 ——非变性沉淀 • pI沉淀法、盐析法和有机溶剂沉淀法等
• 羟磷石灰层析 • 疏水作用层析
（五）利用对配体的特异生物学 亲和力的纯化方法
具有极强的专一性
亲和色谱颗粒
六、蛋白质含量测定和纯度鉴定 （略）
2016年商铺清盘营销细案
商铺销售目标：2016年6月底清盘
48套商铺，2618.19平米，共计0.42亿元；
2016年商铺推广策略
1、商铺海报（DM) 设计制作内容详实的商铺销售海报，详尽分析投资回报比及社区成长型商业性质，作为 项目的宣传资料，把客户资源扩展到全市。
王镜岩生物化学002氨基酸与蛋白质ppt课件
第三章
蛋白质
2019/11/22
1
第一节 蛋白质概论
一、 蛋白质的化学组成与分类
1、元素组成
碳 50% 氢7% 氧23% 氮16% 微量的磷、铁、铜、碘、锌、钼
硫 0-3%
凯氏定氮：粗蛋白质含量=蛋白氮×6.25
2、 氨基酸组成
蛋白质是由20种L-型α 氨基酸组成的长链分子。
2019/11/22
2
7
一、蛋白质的水解
酸水解：色氨酸破坏，天冬酰胺、谷胺酰胺脱酰胺基 碱水解：消旋，色氨酸稳定 酶水解：水解位点特异，用于一级结构分析，肽谱
2019/11/22
8
二、氨基酸的结构与分类
重点
基本氨基酸（编码的蛋白质氨基酸）：组成蛋白质，20种 稀有氨基酸：是多肽合成后由基本氨基酸经酶促修饰而来
非蛋白质氨基酸：存在于生物体内但不组成蛋白质 (约150种)
2 pI
pK
1
pK
2 log
[R ] [R ]
pI 1 ( pK 1 pK 2 ) 2
2019/11/22
45
氨基酸等电点的计算
中性氨基酸 pI pKa ( COOH ) pKa ( NH3 ) 2
酸性氨基酸 pI pKa ( COOH ) pKR 2
碱性氨基酸 pI pKa ( NH3 ) pKR 2
22
（1）非极性氨基酸 9种 在维持蛋白质的三维结构中起着重要
（蛋白质的疏水核心）。 （2） 不带电何的极性氨基酸 6种
这类氨基酸的侧链都能与水形成氢键，因此很容易溶于水 （3）带负电荷的氨基酸(酸性氨基酸) 2种
（4）带正电荷的氨基酸(碱性氨基酸) 3种
2019/11/22
蛋白质
2019/11/22
1
第一节 蛋白质概论
一、 蛋白质的化学组成与分类
1、元素组成
碳 50% 氢7% 氧23% 氮16% 微量的磷、铁、铜、碘、锌、钼
硫 0-3%
凯氏定氮：粗蛋白质含量=蛋白氮×6.25
2、 氨基酸组成
蛋白质是由20种L-型α 氨基酸组成的长链分子。
2019/11/22
2
7
一、蛋白质的水解
酸水解：色氨酸破坏，天冬酰胺、谷胺酰胺脱酰胺基 碱水解：消旋，色氨酸稳定 酶水解：水解位点特异，用于一级结构分析，肽谱
2019/11/22
8
二、氨基酸的结构与分类
重点
基本氨基酸（编码的蛋白质氨基酸）：组成蛋白质，20种 稀有氨基酸：是多肽合成后由基本氨基酸经酶促修饰而来
非蛋白质氨基酸：存在于生物体内但不组成蛋白质 (约150种)
2 pI
pK
1
pK
2 log
[R ] [R ]
pI 1 ( pK 1 pK 2 ) 2
2019/11/22
45
氨基酸等电点的计算
中性氨基酸 pI pKa ( COOH ) pKa ( NH3 ) 2
酸性氨基酸 pI pKa ( COOH ) pKR 2
碱性氨基酸 pI pKa ( NH3 ) pKR 2
22
（1）非极性氨基酸 9种 在维持蛋白质的三维结构中起着重要
（蛋白质的疏水核心）。 （2） 不带电何的极性氨基酸 6种
这类氨基酸的侧链都能与水形成氢键，因此很容易溶于水 （3）带负电荷的氨基酸(酸性氨基酸) 2种
（4）带正电荷的氨基酸(碱性氨基酸) 3种
2019/11/22
生物化学王镜岩第三版第八章蛋白质理化性质课件
浓硫酸加热降解蛋白质后测定NH3
• 双缩脲(biuret)法: CuSO4与肽链的氨基结合
• Folin-Phenol法: 芳香族氨基酸侧链发色
• BCA (bicinchoninic acid)法: FDA唯一认可
• 紫外法: 280纳米处的紫外吸收 (1 OD280 = 1 mg/ml)
• Bradford法: 考马斯亮兰 ( Coomassie
蛋白质稳定的因素
分散相质点带有同种电荷 分散相质点与溶剂形成溶剂化层
++
碱
碱
+
+
+
+
++ + +
酸
酸
- --
-
-
-
-
---
正电荷 的蛋白质
等电点 的蛋白质
负电荷 的蛋白质
蛋白质的沉淀作用
蛋白质分子相互聚 集从胶体溶液中析 出的现象称为沉淀。
蛋白质沉淀的原理
甲醇
乙醇
丙酮
高浓 度盐
有机 溶剂
沉淀 加热
什么是层析-chromatography
层析的种类
蛋白质分离纯化中常用的层析
• 分子筛层析 • 亲和层析 • 离子交换层析 • 疏水/反相层析 • 物理吸附层析
利用分子量差异 利用特异性亲和 利用电荷差异 利用亲疏性差异 利用非特异性吸附
分子筛层析的工作原理
分子筛层析的工作原理
分子筛层析， Molecularsieve chromatogra phy;
＋＋＋
蛋白质电荷数和亲水性差 异，沉淀所需盐浓度不同
··
※※
2 有机溶剂
必须低温操作和沉淀后快速水(或缓冲液)溶 解，降低有机溶剂浓度,防止蛋白质变性 加甲醇、乙醇、丙酮等