贝诺酯的全面质量检查

【含量测定】
取本品适量，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每1ml 中约含7.5μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A），在 240nm的波长处测定吸光度；另取贝诺酯对照品，精密称定，同 法测定，计算，即得。
供试品溶液：取本品3.75mg于500ml的容量瓶中，加无水乙醇适 量溶解后，加无水乙醇至刻度线，摇匀。
供试品溶液：取本品0.1g+乙醇5ml 加热溶解 加水适量，摇 匀，滤过至50ml比色管 加水 50ml+新制的稀硫酸铁铵溶 液1ml
对照品溶液：取水杨酸溶液1ml+乙醇5ml+水44ml+新制 的稀硫酸铁铵溶液1ml
结果判断：摇匀后，放置一段时间，同置于黑色背景上， 从上向下观察，比较产生的浑浊。供试品溶液所显浑浊浅 于对照品溶液的浑浊，则符合规定，反之，则不符合规定。
碱性亚硝基铁氰化钠：取亚硝基铁氰化钠与碳酸 钠各1g，加水使溶解成100ml,即得。
25%氯化钡溶液：将250克分析纯氯化钡溶解于 1000毫升蒸馏水中。
稀硫酸铁铵溶液：取溶液（9→100）1ml，加硫 酸铁铵指示液2ml后，再加水适量使成100ml。
亚硝酸钠试液：取亚硝酸钠1g，加水使溶解成 100ml，即得。
有关物质 取本品，加三氯甲烷-甲醇（9:1）制成每1ml中含40mg的溶 液，作为供试品溶液；另精密称取本品与对乙酰氨基酚适量，各加三氯 甲烷-甲醇（9:1）制成每1ml中含本品0.4mg、80μg，与对乙酰氨基酚 80μg的溶液，作为对照溶液（1）、（2）、（3）。照薄层色谱法（附 录Ⅴ B）试验，吸取上述四种溶液各10μL，分别点于同一硅胶GF254薄 层板上，以二氯甲烷-乙醚-冰醋酸（80:15:4）为展开剂，展开，晾干， 置紫外光灯（254nm）下检视。供试品溶液如显杂质斑点不得多于4个， 与对照溶液（3）相同位置上所显的斑点比较，不得更深；如显其他杂质 斑点，高于主斑点的杂质斑点，与对照溶液（1）所显的主斑点比较，其 他杂质斑点与对照溶液（2）所显的主斑点比较，均不得更深。
原理：重金属可能与芳环或杂环形成较牢固的价键，需先将供 试品炽灼破坏后，残渣加硝酸进一步破坏、处理，再按第一法 进行检查。
供试品溶液：取炽灼残渣项下的残渣，加硝酸0.5ml，蒸干， 至氧化蒸气除尽后，放冷，在500~600℃炽灼使完全灰化，放 冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，低价氨试液至对 酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液2ml，微热溶解后，移 至纳氏比色管中，加水稀释至25ml，加硫代乙酰胺2ml。
对氨基酚 取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2） 20ml，摇匀，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml， 摇匀，放置30分钟，不得显蓝绿色。
操作：取本品1.0g+甲醇溶液20ml+碱性亚硝 基铁氰化钠试液1ml 摇匀，放置30分钟 不得显蓝绿 色
结果判断：摇匀后，放置30分钟，不得显蓝绿 色，则符合规定，反之，不符合规定。
40ml+稀盐酸2ml+25%氯化钡溶液5ml 加水 50ml
对照品溶液：取标准硫酸钾溶液1ml 加水 40ml+ 稀盐酸2ml+25%氯化钡溶液5ml 加水 50ml
结果判断：摇匀后，在暗处放置10分钟，同置于 黑色背景上，从上向下观察，比较产生的浑浊。 供试品溶液所显浑浊浅于对照品溶液的浑浊，则 符合规定，反之，则不符合规定。
【鉴别】
（1）取本品约0.2g，加氢氧化钠试液5ml，煮沸， 放冷，滤过，滤液加盐酸适量至显微酸性，加三 氯化铁试液2滴。即显紫堇色。
（2）取含量测定项下的溶液，照紫外-可见分光 光度法（附录Ⅳ A）测定，在240nm的波长处有 最大吸收；在240nm的波长处测定吸光度，按干 燥品计算，吸收系数（E 1%1cm）为730~760。
对照品溶液：取贝诺酯对照品对乙酰氨基酚3.75mg于500ml的容 量瓶中，加无水乙醇适量溶解后，加无水乙醇至刻度线，摇匀。
计算：
Ax Cr V D
含量% Ar
100%
ms
注：Ax为供试品溶液的吸光度；Cr为对照品溶液的浓度；Ar为对 照品溶液的吸光度；D为稀释倍数；ms为供试品取样量（g）。
实验仪器：纳氏比色管、漏斗、移液管、洗耳球
有关物质
试药：贝诺酯、对乙酰氨基酚 试液：三氯甲烷-甲醇、展开剂（二氯甲烷-
乙醚-冰醋酸）、显色剂 实验仪器：薄层板、点样器、展开器、显
色装置、检视装置
干燥失重
试药：贝诺酯 实验仪器：烘箱
炽灼残渣
试药：贝诺酯 试液：硫酸 实验仪器：坩埚
对照品溶液：另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后， 加醋酸盐缓冲液2ml与水15ml，微热溶解后，移至纳氏比色管 中，加标准铅溶液一定量，加水稀释至25ml ，加硫代乙酰胺 2ml 。
结果判断：摇匀后，放置2分钟，同置白色背景上，从上向下 观察，供试品溶液所显颜色浅于对照品溶液，则为符合规定； 反之，则不符合规定。
结果判断：计算出的含量≥98.5%，则符合规定；反之，则不符 合规定。
实验前准备
性状实验
试药：贝诺酯 试液：性状（2）：沸乙醇、沸甲醇、甲醇、
乙醇、水；性状（3）：传温液（硅油或液 体石蜡） 实验仪器：性状（2）烧杯、试管；性状 （3）：熔点测定仪、玻璃棒
鉴别实验
试药：贝诺酯 试液：鉴别（1）：氢氧化钠试液、盐酸、
耳球
硫酸盐检查
试药：贝诺酯 试液：标准硫酸钾溶液、稀盐酸、25%氯化钡溶
液 实验仪器：分析天平、纳氏比色管、移液管、洗
耳球
对乙酰氨基酚
试药：贝诺酯
试液：甲醇溶液、碱性亚硝基铁氰化钠试液
实验仪器：试管
游离水杨酸
试药：贝诺酯
试液：乙醇、蒸馏水、稀硫酸铁铵溶液、对照液 （精密称取水杨酸0.1g，置1000ml量瓶中，加水 溶解后，加冰醋酸1ml，摇匀，再加水适量至刻 度，摇匀，精密量取1ml，加乙醇5ml与水44ml， 再加上述新制的稀硫酸铁被溶液1ml，摇匀）
重金属
试药：贝诺酯 试液：硫酸溶液、硝酸溶液、盐酸溶液、
氨试液、酚酞指示液、醋酸缓冲液、标准 铅溶液、硫代乙酰胺试液 实验仪器：纳氏比色管、移液管、洗耳球
含量测定
试药：贝诺酯 试液：无水乙醇 实验仪器：紫外-可见分光光度仪
溶液的配制
硫代乙酰胺溶液：取硫代酰胺1ml，甘油混合液 5ml，在100℃水中，水浴20秒。
任务目标
技能目标
知识目标
拓展目标
熟练掌握本品外 掌握贝诺酯的杂 掌握药品质量检
观、鉴别、杂质 质来源、检查目 验的程序；掌握
检查及含量测定 的、方法与原理； 类似结构药品的
的操作，正确判 掌握贝诺酯的鉴 质量检验方法、
断检测结果；能 别与含量测定的 原理及操作技术；
合理选择仪器、 方法、原理及结 能科学合理地解
三氯化铁试液；鉴别（4）：稀盐酸、亚硝 酸钠试液、碱性β-萘酚试液 实验仪器：鉴别（1）：试管；鉴别（2） 紫外-可见分光光度仪；鉴别（3）：红外 光谱仪；鉴别（4）：试管
检查实验
氯化物检查
试药：贝诺酯 试液：标准氢氧化钠溶液、稀硝酸、硝酸银试液 实验仪器：分析天平、纳氏比色管、移液管、洗
全面质量检查
性状检查
鉴别检查
杂质检查
含量测定
【性状】
（1）本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭， 无味。
（2）本品在沸乙醇中易溶，在沸甲醇中溶解， 在甲醇或乙醇中微溶，在水中不溶。
（3）熔点 本品的熔点（附录Ⅵ C）为 177~181℃。
操作：用肉眼观察该药品的颜色、形状，闻 该药品的气味；测定该药品在不同溶剂中的 溶解度；测定其熔点。
结果判断：摇匀后，在暗处放置5分钟，同置于黑色背景上， 从上向下观察，比较产生的浑浊。供试品溶液所显浑浊浅于 对照品溶液的浑浊，则符合规定，反之，则不符合规定。
硫酸盐 取氯化物项下剩余的滤液25ml，依法检 查（附录Ⅷ B）。与标准硫酸钾溶液1ml制成的 对照液比较，不得更浓（0.02％）。
原理：Ba2++SO42- BaSO4 供试品溶液：取氯化物项下剩余的滤液25ml 加水
0g加甲醇溶液12摇匀放置30分钟不得显蓝绿色?游离水杨酸水适量摇匀滤入50ml比色管中加水使成50ml立即加新制的稀硫酸铁铵溶液取1moll盐酸溶液1ml加硫酸铁铵指示液2ml再加水适量使成100ml1ml摇匀30秒钟内如显色与对照液精密称取水杨酸0
贝诺酯的全面质量检查
——第八小组
检验任务
完成贝诺酯的质量检验操作 填写检验原始记录 撰写检验报告书
干燥失重 取本品，在105℃干燥至恒重，减失 重量不得过0.5％（附录Ⅷ L）。
操作：取本品约1.0g，置与供试品同样条件下干 燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，除另有规 定外，在105℃干燥至恒重。
计算： 干燥失重%W1W2100% W1W0
注：W0为称量瓶恒重；W1为干燥前供试品与称 量瓶的重量；W2为干燥后供试品与称量瓶的恒 重。
试药与配制试液； 果处理方法。 释检验中出现的
规范书写检验原
现象，处理检验
始记录及检验报
中的异常情况。
告。
贝诺酯的化学结构
分子式：C17H15NO5 分子量：313.31 本品为4-乙酰胺苯基乙酰水杨酸酯。按干燥品计算， 含C17H15NO5不得少于98.5%。
检验依据：《中国药典》2005版第二部 第47页
操作：照薄层色谱法试验，展开，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。
结果判断（1）供试品溶液如显杂质斑点不得多于4个，与对照溶液③相 同位置上所显的斑点比较，不得更深；（2）如显其他杂质斑点，高于主 斑点的杂质斑点，与对照溶液①所显的主斑点比较，其他杂质斑点与对 照溶液②所显的主斑点比较，均不得更深。
（3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光 谱集42图）一致。
（4）取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，煮沸，放冷， 滤过，滤液显芳香第一胺类的鉴别反应（附录 Ⅲ）。
【检查】
氯化物 取本品2.0g，加水100ml，加热煮沸后，放冷，加 水至100ml，摇匀，滤过，取滤液25ml，依法检查（附录Ⅷ A），与标准氯化钠溶液5ml制成的对照液的比较，不得更 浓（0.01％）
任务分配
性状实验 性状（1）：六人共同观察 性状（2）：五人分别做一种溶液，检查贝
供试品溶液：取本品2.0g于50ml容量瓶中 加三氯甲烷-甲醇 50ml
对照品溶液①：取本品0.04g于100ml容量瓶中 加三氯甲烷-甲醇 100ml
对照品溶液②：取本品0.008g于100ml容量瓶中 加三氯甲烷-甲醇 100ml
对照品溶液③：取对乙酰氨基酚0.008g于100ml容量瓶中 加三氯甲烷-甲醇 100ml
结果判断：干燥失重的数值小于或等于限度，则 为法检查（附录Ⅷ N），遗留残 渣不得过0.1％。
操作：取本品1.0g，置已炽灼至恒重的坩埚中,精密称定, 缓缓炽灼至完全炭化，放冷；除另有规定外，加硫酸 0.5～1ml使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在700～ 800℃炽灼使完全灰化，移置干燥器内，放冷至室温，精 密称定后，再在700～800℃炽灼至恒重，即得。
原理：Cl-+Ag+ AgCl
供试品溶液：取本品2.0g+水100ml 加热煮沸后，放冷+水 100ml 摇匀，滤过 取滤液25ml+稀硝酸10ml 加水 40ml+硝酸银1ml 加 水 50ml（于比色管）
对照品溶液：取标准氯化钠溶液20ml +稀硝酸10ml 加水 40ml +硝酸银1ml 加水 50ml（于比色管）
游离水杨酸 取本品0.1g，加乙醇5ml，加热溶解后，加 水适量，摇匀，滤入50ml比色管中，加水使成50ml，立 即加新制的稀硫酸铁铵溶液（取1mol/L盐酸溶液1ml，加 硫酸铁铵指示液2ml，再加水适量使成100ml）1ml，摇 匀，30秒钟内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g， 置1000ml量瓶中，加水溶解后，加冰醋酸1ml，摇匀， 再加水适量至刻度，摇匀，精密量取1ml，加乙醇5ml与 水44ml，再加上述新制的稀硫酸铁被溶液1ml，摇匀）比 较，不得更深（0.1％）。
计算： 炽灼残渣% W 1 W 2 100% W1W 0
注：W0为坩埚的恒重；W1为炽灼前供试品与坩埚的重量； W2为炽灼后残渣与坩埚的恒重。
结果判断：炽灼残渣的数值小于或等于限度，则符合规定； 反之，则不符合规定。
重金属 取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（附录ⅧH第 二法），含重金属不得过百万分之十。