紫外可见分光光度法测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量
紫外分光光度法测定植物黄酮含量的方法 (2)
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光 度 法 具 有 重 复 性 好 、准 确 、简 便 、易 掌 握 、不 需 要 复 杂 的仪器设备， 加之所需试剂便宜易得， 因此该方法应用
以 淫 羊 藿 苷 对 照 品 ， 用 ＡｌＣｌ３－ 甲 醇 体 系 ， 于 ４１３ ｎｍ 测 定淫羊藿中总黄酮含量， 该方法明显优于直接法在
于测定植物中黄酮含量最为广泛［５］。近年来， 紫外分光 ２７０ ｎｍ 处［１０］测定的结果。
［２２］ Ｇｒｉｇｅｌｍｏ－ Ｍｉｇｕｅｌ Ｎ， Ｇｏｒｉｎｓｔｅｉｎ Ｓ， Ｍａｒｔｉｎ － Ｂｅｌｌｏｓｏ Ｏ．Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａ－
山楂叶总黄酮分光光度法测定—科标检测
山楂叶总黄酮的测定—分光光度法—科标检测方法名称： 山楂叶—总黄酮的测定—分光光度法应用范围：本方法采用分光光度法测定山楂叶中总黄酮（以无水芦丁计算)的含量。
本方法适用于蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifidaBge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥叶。
方法原理： 本品细粉置于索氏提取器中，依次加入三氯甲烷和甲醇提取，蒸干，加稀乙醇溶解，滤过，续滤液中依次加入水、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液一定量，摇匀，放置，立即置紫外可见分光光度计, 于波长500nm 处测定吸光度，以无水芦丁（C27H30O16)计算总黄酮含量。
试剂：1. 三氯甲烷2 .5%亚硝酸钠溶液3 .10%硝酸铝溶液4.氢氧化钠试液仪器设备：1. 紫外-可见分光光度计2. 索氏提取器试样制备： 对照品溶液的制备精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品25mg ，置50mL 量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀。
精密量取20mL ，置50mL 量瓶中，加水至刻度，摇匀，制成每1 mL 中含无水芦丁0.2mg 的溶液。
操作步骤： 1. 标准曲线的绘制精密量取对照品溶液1 mL 、2 mL 、3 mL 、4 mL 、5 mL 、6 mL ，分别置25 mL 量瓶中，各加水至6 mL ，加5%亚硝酸钠溶液1 mL ，摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1 mL ，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10 mL ，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，立即照分光光度法，在500nm 波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 供试品的测定取本品细粉1g ，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加热回流提取至提取液无色，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇继续提取至无色（约4小时)，提取液蒸干，残渣加稀乙醇溶解，转移至50 mL 量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，作为供试品储备液。
紫外-可见分光光度法动态分析承德地区山楂叶总黄酮的含量
【 关键词】 山楂叶 ； 紫外一可见分光光度法； 采收期 ； 总黄酮
【 中图分类号】 Ｒ ２ ８ ５ 【 文献标ｉ Ｐ ， ｔ ｉ ￣ － ｌ Ａ 【 文章编号］ １ ０ ０ ４ － ． ６ ８ ７ ９ （ ２ ０ １ ４ ） ０ １ － ０ ０ ７ ８ － ０ ２
山楂 叶 为蔷薇 科植 物 山里红（ Ｃ ｒ ａ ｔ ａ ｅ ｇ ｕ ｓ ｐ ｉ ｎ ｎ ａ ｔ ｉ ｉ ｆ ｄ ａ Ｂ ｇ ｅ ． Ｖ ａ ｒ ． Ｍａ ｊ ｏ ｒ Ｎ ． Ｅ ． Ｂ ｒ ． ） 或 山楂（ ｃ ￣ ｔ ａ ｅ ｇ ｕ ｓ ｐ ｉ ｎ ｎ ａ ｉ ｆ ｉ ｆ ｄ ａ Ｂ ｇ ｅ ． ） 的干 燥 叶， 夏、 秋二季采收 。 山楂 叶中所含的黄酮类 成分具 有降 压、 降糖 、 降脂 、 强心等多种药理 作用 ， 尤其对缺血性心肌损 伤有明显的保护作用 。 山楂叶早在东晋时代就有入药治病 的记载 ， 本草纲 目谓山楂叶煮汁治漆疮， 现在 已经被２ ０ １ ０ 版 中华人 民共和 国药典》 收载 。 山楂叶主产于河北承德、 兴 隆以及辽宁、 山东和山西等地 。 不 同产地、 不 同采收期的中 药材， 所含有的化学组 分以及含量可能会有所不同， 因此， 考察 山楂叶的最佳采集期对提高 山楂叶的利用具有重要的
１仪器与试剂
８ ４ ５ ３ 紫外一可见分光光度仪 ， 美 国惠普公司 ； Ａ Ｇ － ２ ４ ５ 电 子分析天平 ， 瑞士梅特勒公司 ； Ｋ Ｑ － ７ ０ ０ 型超声波清洗器 ， 昆
山市超声仪器有限公司。 芦丁对照品（ 批号： １ ｏ ｏ ｏ ８ ｏ － ２ ｏ ｏ ７ ｏ ７ ） ， 中国药品生物制 品检 定所 ； 供试 品山楂 叶采 自承德（ ５ － １ ｌ 月每月采集一次， 采摘后立即暴晒、 晾干） 由河北 民族师范
山楂中总黄酮的提取及含量测定
山楂中总黄酮的提取及含量测定（吕培银）一、实验目的1.掌握黄酮类物质的提取方法。
2.掌握分光光度法测定黄酮含量的原理。
二、实验原理山楂富含黄酮类化合物，具有重要的生理活性和药效。
黄酮化合物的母核由C6-C3-C6即A-C-B三个环组成，A环和B环具有芳香化合物的性质，C环具有黄酮化合物的独特性质。
母核中某些位置如C3和C5上含有羟基或具有邻二酚羟基时能与铝、铅等金属离子形成稳定的络合物，这些络合物在光谱上产生明显变化。
黄酮与金属离子的这种作用不仅可以用于鉴别这类成分中羟基的位置，还可以作为进行定量分析的基础。
本实验利用碱性条件下，在亚硝酸盐存在时，硝酸铝与黄酮进行络合反应，生成红色络合物，且在500 nm左右有最大吸收，可利用分光光度法进行测定。
因此，本实验采用索氏提取法提取山楂中的总黄酮，并采用分光光度法对其含量进行测定。
三、实验用品1、仪器：索氏提取器、平底烧瓶、电热套、量筒、试管、容量瓶、移液管、玻璃比色皿、可见分光光度计等。
2、药品：山楂粉末、无水乙醇、芦丁标准品、硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠等。
四、实验内容1、山楂总黄酮的提取精密称取山楂粉末6 g,滤纸包好后置于250 mL索氏提取器中，加60%乙醇150 mL，连续回流提取1-1.5h, 冷却，将提取液转移至250 mL的容量瓶中，将圆底烧瓶润洗3次，60%乙醇定容至刻度线，摇匀，过滤。
取1 mL滤液稀释至10mL,摇匀，即为样品待测溶液。
2、芦丁标准溶液的配制精密称取芦丁20 mg，加入60 mL无水乙醇超声使其溶解后，以蒸馏水定容至100mL，摇匀，即得0.2 mg/mL的芦丁标准液。
3、芦丁标准曲线的制定分别精密吸取芦丁标准液5mL、6mL、7mL、8mL、9mL至10mL容量瓶中，60%乙醇定容后得到浓度为0.10 mg/mL、0.12 mg/mL、0.14 mg/mL、0.16mg/mL 和0.18mg/mL的芦丁系列浓度梯度溶液。
可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量实验讨论
可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量实验讨论
大山楂丸中总黄酮的含量可以采用可见分光光度法来测定。
1. 实验目的：测定大山楂丸中总黄酮的含量。
2. 实验原理：可见分光光度法利用物质对可见光的吸收特性来测定物质的浓度。
总黄酮具有一定的吸收特性，可以通过测量吸光度来计算其浓度。
3. 实验步骤：
a. 准备样品：将大山楂丸样品粉碎并称取适量。
b. 提取黄酮：使用适合的溶剂（如乙醇）将黄酮提取出来。
c. 制备标准曲线：准备一系列不同浓度的黄酮标准溶液，然后使用分光光度计分别测量吸光度。
d. 测量样品吸光度：将提取的样品溶液使用分光光度计测量吸光度。
e. 计算黄酮含量：根据标准曲线的吸光度-浓度关系，计算出大山楂丸中总黄酮的含量。
4. 实验结果：根据测量得到的吸光度值和标准曲线，计算出大山楂丸中总黄酮的含量。
5. 实验讨论：
a. 实验方法的准确性和重复性：可以进行重复实验，计算相对标准偏差或百分相对标准偏差来评估方法的准确性和重复性。
b. 实验条件的选择：实验中需要选择合适的波长和溶剂，并对提取方法进行优化，以获得最佳的测量结果。
c. 样品处理的改进：可以尝试不同的提取方法，如其他溶剂或萃取工艺，以提高黄酮的提取效率。
d. 可行性和适用性分析：可以对其他样品进行类似实验，评估方法的适用性和可行性。
大山楂丸中总黄酮的含量测定
大山楂丸中总黄酮的含量测定【摘要】目的建立大山楂丸中总黄酮的含量测定方法。
方法采用分光光度法，以槲皮素为对照品，对其进行络合显色，在510 rnn波长处测定吸收度，从而测定大山楂丸中总黄酮的含量。
结果线性范围在0.020 004〜0.100 02mg • ml-1 (r=0. 999 3)之间，平均回收率为 96. 02%，RSD= 1.22% (n=5 )。
结论该法简便易行、重现性好、结果可靠，可用于该制剂的质量控制。
【关键词】大山楂丸总黄酮分光光度法Abstract：ObjectiveTo establish ultraviolet spectrophotometry for the content determination of Total Flavones in DashanzhaPill. MethodsQuercetin was selected as reference material, and the samples were determined at 510 nm. ResultsThe linear range for quercetin was 0.020 004 〜0.100 02 mg • ml-1 (r= 0.999 3). The recovery rate was 96.02%; RSD= 1.22% (n=5 ). ConclusionThis method is easy to handle with good accuracy and reproducibility, and issuitable for the quality control of Dashanzha Pill.Key words： Dashanzha Pills; Total Flavones; Spectrophotometry大山楂丸由山楂、神曲、麦芽组成，具有开胃消食的功能，用丁•食积内停所致的食欲不振、消化不良、脘腹胀闷。
紫外分光光度法测定山楂提取物中总黄酮的含量
紫外分光光度法测定山楂提取物中总黄酮的含量
王阳;吕晓丽;常福厚;刘超;白图雅;范蕾
【期刊名称】《内蒙古医科大学学报》
【年(卷),期】2011(000)0S1
【摘要】全球每年约有1200万人死于心血管病和脑中风,高脂血症引起的动脉粥样硬化是造成冠心病、高血压和脑血管疾病的主要原因。
2002年,降血脂药物阿托伐他汀(atorvastatin,Lipitor)以近80亿美元的年销售额列为当年世界最畅销药榜首。
因此,研究和发展新型降血脂药物具有重大的社会效益和经济效益[1]。
山楂是蔷薇科植物,含有多种
【总页数】3页(P572-574)
【作者】王阳;吕晓丽;常福厚;刘超;白图雅;范蕾
【作者单位】内蒙古医学院附属医院药房;内蒙古医学院药学院药理学教研室【正文语种】中文
【中图分类】R
【相关文献】
1.紫外分光光度法测定毛鸡骨草提取物中总黄酮含量
2.紫外分光光度法测定洋葱提取物中总黄酮的含量
3.紫外分光光度法测定山楂中的总黄酮含量
4.紫外分光光度法测定山楂中总黄酮的研究
5.紫外分光光度法测定复方山楂片总黄酮含量
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山楂黄酮的含量测定方法
山楂黄酮的含量测定方法一、引言山楂黄酮是一种常见的生物活性成分，具有多种药理作用，例如降脂、保护心脏、抗氧化等。
准确测定山楂黄酮的含量对研究其药理作用和开发药物具有重要意义。
本文将介绍几种常用的山楂黄酮含量测定方法，并从中挑选最适合的方法进行深入探讨。
本文按照从简单到复杂的顺序进行讲解，帮助读者更好地理解山楂黄酮的含量测定。
二、常用的测定方法1. 薄层色谱法薄层色谱法是一种简单、快速的分离和测定方法。
其基本原理是将样品溶液均匀涂在薄层色谱板上，放入含有适量溶剂的瓶中，让溶剂沿着色谱板向上移动，通过观察刻线上的斑点来确定山楂黄酮的含量。
这种方法操作简单、成本低廉，但缺点是分离效果较差，测定结果的准确性有限。
2. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种精确测定山楂黄酮含量的常用方法。
基本原理是将样品溶液注射到高效液相色谱仪中，通过不同溶剂的流动和固定相的作用，分离出山楂黄酮与其他成分，最后通过检测器对山楂黄酮进行定量。
这种方法具有分离效果好、准确性高等优点，但需要专用设备和较长的分析时间。
3. 比色法比色法是一种常用的快速测定山楂黄酮含量的方法，该方法通过测量山楂黄酮在特定波长下的吸光度来定量。
具体操作时，将山楂黄酮溶液和试剂混合后，根据试剂与山楂黄酮的反应产生的色素的吸光度变化来确定山楂黄酮的含量。
这种方法操作简便、快速，但需要选取合适的试剂和波长，并且对样品的前处理要求比较高。
三、选择最适合的方法进行探讨根据上述介绍，山楂黄酮的含量测定方法可以选择薄层色谱法、高效液相色谱法和比色法。
考虑到测定过程中的准确性和实用性，我们选择高效液相色谱法进行深入探讨。
高效液相色谱法是目前应用广泛的山楂黄酮含量测定方法之一。
其优势在于分离效果好、准确性高，并且可以同时测定多个成分，适用于复杂样品的分析。
高效液相色谱仪的使用越来越普及，使得该方法更加便捷和可行。
在使用高效液相色谱法测定山楂黄酮含量时，我们需要选择合适的柱和固定相，优化流动相的组成和流速，并确定适当的检测波长。
山楂中总黄酮的提取工艺的研究【开题报告】
毕业设计开题报告应用化学山楂中总黄酮的提取工艺的研究一、选题的背景和意义总黄酮是指黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。
在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇，其它包括双氢黄（醇）、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。
山楂为蔷薇科植物山里红或山楂干燥成熟果实。
主要功能为消食健胃，行气散瘀，用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻，心腹刺痛，高血脂症等。
对山楂的研究发现其具有丰富的化学成分而且具有重要的药理活性。
主要含有机酸和黄酮类化合物 , 随着药理学的发展,对山楂的药理活性研究发现其中有机酸为山楂消食化积的主要有效成份,黄酮类化合物能扩张冠状动脉,改善微循环,抗动脉粥样硬化,且可调节血脂、降低胆固醇,预防心血管疾病,临床试验证明其疗效显著且安全无毒副作用。
山楂果肉及山楂叶中含有丰富的黄酮类化合物，由于其对心脑血管疾病有显著疗效而被受人们的关注。
山楂在全国各地均有栽培,为药食同源植物。
其资源丰富,将其做为保健食品和治疗药品开发有着广阔的前景。
总黄酮的提取方法有很多，包括传统的乙醇提取方法和新型提取技术如超声提取、微波提取、超临界流体提取、酶法提取、半仿生提取法等。
不同的提取方法所提取的总黄酮的量会有所不同。
近年来国内外对茶多酚、银杏类黄酮等的药理和营养性的广泛深入的研究和临床试验，证实类黄酮既是药理因子，又是重要的营养因子为一种新发现的营养素，对人体具有重要的生理保健功效。
目前，很多著名的抗氧化剂和自由基清除剂都是类黄酮。
例如，茶叶提取物和银杏提取物。
葛根总黄酮在国内外研究和应用也已有多年，其防治动脉硬化、治偏瘫、防止大脑萎缩、降血脂、降血压、防治糖尿病、突发性耳聋乃至醒酒等不乏数例较多的临床报告。
随着对生物总黄酮与人类营养关系研究的深入，不远的将来可能证明黄酮类化合物是人类必需的微营养素或者是必需的食物因子。
二、研究目标与主要内容（含论文提纲）以总黄酮类化合物的提取率为指标，通过单因素试验和正交试验设计优化山楂中黄酮类化合物的提取工艺。
总黄酮含量测定
1 总黄酮含量测定1．1 紫外可见分光光度法严赞开［1］综述了紫外分光光度法测定植物中黄酮含量的方法．重点介绍了单波长法、差示法、双波长法、三波长法、导数法等紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理及分析特性。
1．1．1 紫外可见分光光度法: 是以分子吸收光谱为基础的紫外－可见分光光度法，利用某些物质的分子在峰带I( 300 ～400 nm) 和峰带Ⅱ( 220 ～280 nm) 光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。
具有简便、适用性广、准确度、精密度和重现性较好等特点，在总黄酮含量分析中发挥着重要作用。
1．1．2 比色法: 是一些药典最常用的总黄酮含量检测方法，它主要以Al( NO3 ) 3 为显色剂，在碱性条件下，利用其与总黄酮形成红色螯合物为特征。
常用于总黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al( NO3 ) 3、AlCl3 等。
1．1．3 差示分光光度法简称ΔA 法: 使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比，测量样品和参比间的相对吸光度。
而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系，借差示工作曲线而求出样品的含量。
1．1．4 双波长和导数分光光度法: 用于测定吸收光谱曲线重达的混合物的含量而不须用解联立方程，还可分析高浓度及混浊样品，其灵敏度和准确度比普通分光光度法好。
在选择波长时，原则上除了要干扰物有相等吸光度外，还要求两波长比较接近，被测组分在该两波长处的摩尔吸收系数相差大些，这样方法的灵敏度会更高。
如果将上述双波长分光光度计上两个波长尽可能指近，使只相差1 ～2 nm，并且同时进行扫瞄，能得到试样一阶导数吸收光谱-吸光度对波长的变化率曲线，即导数分光光度法。
2 药理作用2．1 镇痛作用赵铁华等［4］研究结果显示灌胃、腹腔注射、皮下注射适宜剂量的黄芩茎叶总黄酮，对实验动物经化学和热刺激导致的疼痛反应皆有一定的抑制作用，其镇痛作用机制与中枢作用相关。
银杏总黄酮( TFG) 腹腔内注射可显著抑制甲醛致小鼠疼痛反应，延长小鼠舔足潜伏期并减少小鼠扭体反应数。
紫外分光光度法测定复方山楂片总黄酮含量_滕晓弘
表 3 精密度结果
次数
1
2
3
4
5
R SD (% )
A
0. 631 0638 0. 644 0. 637 0. 652
1. 2
2. 7 重复性实验 取同一批号的样品 5份, 按供试 品溶液制备方法制备, 精密吸取 2m L, 照 / 标准曲线的 测定0中的方法测定吸收度, R SD 为 1. 8% , 表明该方 法测定总黄酮重复性良好。
紫外分光光度法测定复方山楂片总黄酮含量
紫外分光光度法测定复方山楂片总黄酮含量
滕晓弘;刘威
【期刊名称】《辽宁中医杂志》
【年(卷),期】2008(35)2
【摘要】目的：测定复方山楂片中总黄酮的含量,从而对本品质量进行控制。
方法：采用紫外分光光度法测定。
结果：芦丁的线性范围为0.008-0.040mg/mL,回归方程Y=18.8X-0.0364,相关系数r=0.9998,加样回收率为98.6%,RSD为1.8%。
结论：该法简便易行、快速、准确、可以用于本品的质量控制方法之一。
【总页数】2页(P261-262)
【关键词】总黄酮;紫外分光光度法;含量测定
【作者】滕晓弘;刘威
【作者单位】丹东市中心医院药剂科;辽宁中医药大学
【正文语种】中文
【中图分类】R284
【相关文献】
1.紫外分光光度法测定维吾尔药复方艾皮提蒙合剂中总黄酮含量 [J], 热孜亚·吾甫尔;艾尼瓦尔·塔力甫;买迪娜木·米吉提;热甫哈提·赛买提
2.紫外分光光度法测定复方银杏胶囊中总黄酮含量 [J], 吴瑛
3.紫外分光光度法测定复方银杏胶囊中总黄酮含量 [J], 李糜糜;李莹;丁青龙
4.紫外分光光度法测定复方补骨质缓释片中补骨脂总黄酮的含量 [J], 杨荣平;寿清
耀;王宾豪;张小梅
5.紫外分光光度法测定复方银杏叶胶囊总黄酮含量 [J], 王严国;许勇;凌娟
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紫外分光光度法检测山楂总黄酮方法的建立_张雪
称取以上样品各数份， 分别添加适量标准， 按前 述操作进行处理， 测定， 以加样测得量减去原样含 量， 除以加样量， 计算回收率， 结果见析
２．１ 最佳检测波长的选择及标准曲线线性关系考察
紫外扫描结果表明， 芦丁在 ５１０ｎｍ 处的吸收值 最大， 即 ５１０ｎｍ 为芦丁的特征吸收峰值， 故检测波长 确定为 ５１０ｎｍ。经线性回归表明， 芦丁在 ０～０．６１８ｍｇ 范围内呈良好的线性关系， 达到显著水平。典型的标 准曲线如图 １ 所示。回归方程为 Ｙ＝１．２３８９Ｘ＋０．００３９
Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ：ｒｕｔｉｎ； ｆｌａ ｖｏｎｅ ｏｆ ｈａ ｗｔｈｏｒｎ； ｓ ｐ ｅ ｃ ｔｒｏｐ ｈｏｔｏｍｅ ｔｒｙ
中图分类号： ＴＳ２０７．３ 文献标识码： Ａ 文 章 编 号 ： １００２－ ０３０６（ ２００７） ０７－ ０２００－ ０３
山 楂 中 含 有 多 种 黄 酮 类 化 合 物［１］。近 年 来 的 许 多 研究证明， 山楂对心血管系统有降压、增加冠脉血流 量、改善心肌供血供氧等功效 ， 对高血压、高血脂、冠 心病、心绞痛等症均有较好的疗效 ， 是防治心血管疾 病较好的天然植物资源 ， 其重要有 效 成 分— ——山 楂 总 黄 酮 ， 据 分 析 主 要 为 牡 荆 碱 鼠 李 糖 苷 （ ｖｉｔｅｘｉｎ ｒｈａｍｎｏｓｉｄｅ） 、 单 乙 酰 牡 荆 碱 鼠 李 糖 苷 （ｍｏｎｏａｃｅｔｙｌ ｖｉｔｅｘｉｎ ｒｈａｍｎｏｓｉｄｅ）、金 丝 桃 苷 （ ｈｙｐｅｒｓｉｄｅ） 及 山 楂 酸 （ ｃｒａｔａｅｇｉｃ ａｃｉｄ） 等［２］。山楂中黄酮类化合物是防 治 心 血管疾病及降血脂的有效成分， 由于各类黄酮物质 的理化性质差别很大， 因而检测手段也不可能统一。 有关总黄酮的测定方法有 ： 戴维斯法［３］、薄层层析－ 比 色法［４］、微分脉冲极谱 法［５］、硝 酸 铝 显 色 法［６］、紫 外 分 光 光度法［７］等。鲜山楂果胶含量达 ３．０％以上， 但上述方 法均忽略了山楂果胶对总黄酮含量的影响。本实验 针对上述检测方法存在的问题， 根据现有条件对硝 酸铝显色－ 分光光度法进行改进， 以芦丁为标准品， 利用果胶酶将山楂果肉中的果胶分解后， 再进行黄 酮的含量分析， 减少果胶对检测黄酮的影响， 建立起
山楂叶中总黄酮含量的测定
山楂叶中总黄酮含量的测定(2) 山楂叶是一种常见的中药材，具有多种药用价值。
其中，总黄酮是山楂叶中的主要活性成分之一，具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物活性，对人体健康具有重要作用。
因此，准确测定山楂叶中总黄酮的含量对于其质量控制具有重要意义。
下面将介绍一种常用的测定山楂叶中总黄酮含量的方法。
实验仪器与试剂准备：1. 超声波萃取仪2. 高效液相色谱仪（HPLC）3. 山楂叶样品4. 乙醇（优级纯）5. 甲醇（色谱纯）6. 乙酸乙酯（色谱纯）7. 乙酸乙酯-甲醇（10:90，体积比）8. 乙酸乙酯-甲醇（30:70，体积比）9. 乙酸乙酯-甲醇（50:50，体积比）10. 水实验步骤：1. 将山楂叶样品晒干，研磨成粉末备用。
2. 取一定量的山楂叶粉末，放入超声波萃取仪中，加入适量的乙醇，超声提取30分钟。
3. 将提取液过滤，取上清液，用甲醇稀释至一定体积。
4. 准备好浓度梯度的乙酸乙酯-甲醇溶液（10:90、30:70、50:50）。
5. 在HPLC中设置好流速、柱温等参数，使用梯度洗脱法进行测定。
6. 取一定量的提取液，经过色谱柱进行分离，使用紫外检测器检测吸光度。
7. 根据峰面积与标准曲线的对照，计算出山楂叶中总黄酮的含量。
实验注意事项：1. 实验室操作时要注意安全，佩戴实验手套、眼镜等防护设备。
2. 实验过程中要保持操作环境干净，避免样品受到外界污染。
3. 在实验过程中，要严格按照测定步骤进行操作，确保实验结果的准确性。
4. 实验过程中应注意仪器的正确操作，避免对仪器造成损坏。
总结：通过以上的实验步骤，我们可以准确测定山楂叶中总黄酮的含量。
这种方法简便易行，结果准确可靠，适用于山楂叶中总黄酮含量的测定。
但是，需要注意的是，实验结果可能会受到多种因素的影响，如山楂叶样品的质量、提取液的浓度等，因此在实际操作中需要进行多次实验，取平均值以提高结果的可靠性。
[最新]可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量
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实验五可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量一、目的要求1、掌握用分光光度法测定中药制剂中总黄酮含量。
2、掌握可见分光光度计的使用方法。
二、基本原理大山楂丸由山楂、神曲和麦芽组成，主要功能为开胃消食，其中山楂主要成分为有机酸、黄酮类及多种维生素。
黄酮类化合物具有邻二酚羟基，或3，5位羟基结构，可与铝盐、铅盐、镁盐等金属盐类试剂反应，生成有色配合物，可用可见分光光度法测定其含量。
本实验利用黄酮类化合物在亚硝酸钠的碱性溶液中，与Al3+产生高灵敏度的橙红色配合物（λmax=510nm），从而用可见分光光度法（比色法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。
三、仪器与试药1、可见分光光度计、分析天平、索氏提取器。
2、乙醇（A.R）、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
3、槲皮素（中国药品生物制品检定所）。
4、大山楂丸（市售品）。
四、操作步骤1、标准液的配制：精密称取槲皮素对照品20mg，置100ml容量瓶中，加95%乙醇50ml使溶解，然后加50%乙醇稀释至刻度，即得0.2mg/ml的对照品溶液。
2、标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，各加50%乙醇溶液使成5ml，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6分钟，加入10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，再放置6分钟，加入1%氢氧化钠溶液4ml，分别用50%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。
以第一瓶作空白，用可见分光光度计在510nm处测其吸收度，作A-C标准曲线（或计算其回归方程）。
3、样品液的制备：精密称取120℃干燥2小时的大山楂丸6.5g，置索氏提取器中，用95%乙醇125ml回流提取1.5小时，将提取液移至250ml容量瓶中，补加蒸馏水至刻度，摇匀即得。
4、含量测定：精密量取提取液1ml，按上述标准曲线制备方法进行测定，并由标准曲线或回归方程计算样品中总黄酮的含量。
五可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量
实验五可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量一、目的要求1、掌握用分光光度法测定中药制剂中总黄酮含量。
2、掌握可见分光光度计的使用方法。
二、基本原理大山楂丸由山楂、神曲和麦芽组成，主要功能为开胃消食，其中山楂主要成分为有机酸、黄酮类及多种维生素。
黄酮类化合物具有邻二酚羟基，或3，5位羟基结构，可与铝盐、铅盐、镁盐等金属盐类试剂反应，生成有色配合物，可用可见分光光度法测定其含量。
本实验利用黄酮类化合物在亚硝酸钠的碱性溶液中，与Al3+产生高灵敏度的橙红色配合物（λmax=510nm），从而用可见分光光度法（比色法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。
三、仪器与试药1、可见分光光度计、分析天平、索氏提取器。
2、乙醇（A.R）、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
3、槲皮素（中国药品生物制品检定所）。
4、大山楂丸（市售品）。
四、操作步骤1、标准液的配制：精密称取槲皮素对照品20mg，置100ml容量瓶中，加95%乙醇50ml使溶解，然后加50%乙醇稀释至刻度，即得0.2mg/ml的对照品溶液。
2、标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，各加50%乙醇溶液使成5ml，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6分钟，加入10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，再放置6分钟，加入1%氢氧化钠溶液4ml，分别用50%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。
以第一瓶作空白，用可见分光光度计在510nm处测其吸收度，作A-C标准曲线（或计算其回归方程）。
3、样品液的制备：精密称取120℃干燥2小时的大山楂丸6.5g，置索氏提取器中，用95%乙醇125ml回流提取1.5小时，将提取液移至250ml容量瓶中，补加蒸馏水至刻度，摇匀即得。
4、含量测定：精密量取提取液1ml，按上述标准曲线制备方法进行测定，并由标准曲线或回归方程计算样品中总黄酮的含量。
部份省区市售山楂饮片总黄酮含量分析
部份省区市售山楂饮片总黄酮含量分析
杨志雄;江海燕;卢忠朋;蔡少芳
【期刊名称】《中国民族民间医药》
【年(卷),期】2011(020)011
【摘要】目的:比较不同产地山楂饮片的质量.方法:采用紫外分光光度法测定山楂中总黄酮含量.结果:各地样品中总黄酮的含量在0.187～0.707mg/g之间,槲皮素标准品的线性范围为0.00176～0.00800mg/ml,回归方程Y=66.0744X+0.0171,相关系数r=0.9994,加样回收率为99.11%,RSD为1.23%.结论:该方法简便易行,为广山楂的质量控制提供了实验依据.
【总页数】2页(P26-27)
【作者】杨志雄;江海燕;卢忠朋;蔡少芳
【作者单位】广西区人民医院,广西,南宁,530023;广西中医学院,广西,南宁,530001;广西中医学院,广西,南宁,530001;广西中医学院,广西,南宁,530001
【正文语种】中文
【中图分类】R286.0
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紫外可见分光光度法在黄酮测定中的应用
紫外可见分光光度法在黄酮测定中的应用摘要】黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，种类繁多，大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷，部分为游离态或与鞣质结合存在。
近年来，黄酮类化合物以其广谱的药理作用倍受青睐，人们对含有黄酮的化合物进行大量研究，以期获得黄酮含量较高的中草药，黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。
【关键词】紫外可见分光光度法黄酮测定黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，种类繁多，大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷，部分为游离态或与鞣质结合存在。
黄酮化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物，一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构。
近年来，黄酮类化合物以其广谱的药理作用倍受青睐，人们对含有黄酮的化合物进行大量研究，以期获得黄酮含量较高的中草药。
因此黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。
1 紫外—可见分光光度法在药物分析中的应用紫外可见分光光度法以其设备简单、适用性广、准确度和精密度较好等特点，已在中药总黄酮含量分析中发挥着重要作用，并已经成为应用最广泛的分析手段之一[1]。
据统计，在药物分析中，分光光度法占29.1% ，色谱法占25.5% ，荧光、化学发光法占2.4% ，与光度法有关的方法共计占31.5% ，由此可见，光度法是药物分析最常用的方法之一[2]。
研究结果表明，光度法在药物分析中的可靠性可以和色谱法相媲美，但其设备简单、操作方便、价格低廉、易于普及等特点是色谱法难于做到的[3]。
2 紫外—可见分光光度法在黄酮类化合物中的应用紫外可见分光光度法是利用某些物质的分子在200～800 nm光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。
一般以中草药、中药制剂自身所含的黄酮类化合物作为对照品，在紫外区或经显色后在可见光区，选择对照品的最大吸收波长处进行测定[4]。
中草药的成分十分复杂，在进行黄酮含量测定时要根据具体条件选择适当方法。
2.1 直接扫描测定尽管黄酮类化合物种类繁多，但其基本母核为2—苯基色原酮，都具有C6-C3-C6的结构，因此，多数黄酮类化合物存在两个特征吸收，即在300～400nm区间由B环桂皮酰基系统电子跃迁引起的带I和在240～285nm之间由A环苯甲酰基系统电子跃迁引起的带Ⅱ。
测定山楂总黄酮含量的方法学考察
测定山楂总黄酮含量的方法学考察发表时间：2017-02-08T15:00:07.220Z 来源：《医药前沿》2017年1月第1期作者：陈尚鑫[导读] 试验表明，方法可靠，数据准确，操作简便易行。
(乌鲁木齐市中医院药学部新疆乌鲁木齐 830000)【摘要】目的：建立分光光度法测定山楂中总黄酮含量。
方法：以芦丁为标准品，硝酸铝-亚硝酸钠为显色剂，于碱性条件下500nm波长处测定吸光度。
结果：通过方法学考察，芦丁在所试的8～48μg/ml范围内有良好的线性关系，其回归方程为C=0.0936A+0.0012(r=0.9989)平均回收率为102.09%。
结论：试验表明，方法可靠，数据准确，操作简便易行。
【关键词】山楂；含量测定；方法学考察【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）01-0354-02 山楂为蔷薇科植物山里红、山楂或野山楂的干燥成熟果实[1]。
山里红和山楂习称“北山楂”，野山楂习称“南山楂”。
全国各地均有栽培，为药食同源植物。
山楂性酸、甘、微温，归脾、胃肝经，具有消食化滞，行气散淤的功效，临床用于食滞不化及产后淤阻腹痛等证。
近年来临床常以生山楂用于高血压、冠心病及高血脂症的治疗[2]。
山楂化学成分复杂，南山楂富含苷类、黄酮类、山楂酸、齐墩果酸、胡萝卜素、鞣质、蛋白质、果糖、脂肪油、熊果酸等。
北山楂含酒石酸、枸橼酸、山楂酸、黄酮类、解脂酶、齐墩果酸、熊果酸等[3-4]。
据文献报道山楂起消导作用的有效成分主要是有机酸[5]，而黄酮类成分有降血脂、扩张冠状动脉及缓解心绞痛等功效[6]。
1.仪器与试剂1.1 实验仪器：澳大利亚Cintra—20紫外分光光度仪，梅特勒—托利多仪器厂产十万分之一电子分析天平，浙江产XYJ80—1电动离心机。
1.2 药材由新疆自治区中医医院提供；芦丁标准品(0080-9705)由中国药品生物制品鉴定所提供；实验中其他试剂均为分析纯。
紫外可见分光光度法测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量
紫外可见分光光度法测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量【摘要】目的建立测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量的方法。
方法采用紫外可见分光光度法，检测波长为500nm，无水芦丁为对照品。
结果芦丁在8.12～48.72μg/ml范围内呈良好的线性关系，r=0.9998（n=6），平均回收率为100.0%，RSD=0.13%（n=6）。
结论所用方法灵敏、准确、重现性好、结果可靠，可用于注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量测定。
【关键词】注射用山楂总黄酮；总黄酮；紫外可见分光光度法；含量测定山楂总黄酮即山楂叶总黄酮，是从山楂叶中提取的黄酮类化合物的总称，目前从山楂总黄酮中分离出的单体有三十多种，有牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、金丝桃苷、槲皮素等。
山楂叶中的黄酮类化合物的药理作用有很多方面，例如对心、脑血管疾病有确切明显的疗效，山楂总黄酮对心绞痛、冠心病、心律失常、脑供血不足、脑动脉硬化症、脑血栓、老年性痴呆及各种脑损伤后遗症可产生积极的预防和治疗作用。
1.仪器与试药TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；AE240电子天平（瑞士梅特勒公司）；所用试剂均为色谱纯。
2.方法与结果2.1线性关系考察对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品约10.08mg，置50ml容量瓶中，加乙醇适量使溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
（每1ml含无水芦丁0.2030mg）[1]。
标准曲线的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置25ml容量瓶中，各加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，使摇匀放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置20分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版一部附录V A），在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、测试溶液中对照品浓度为横坐标绘制标准曲线。
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紫外可见分光光度法测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量
【摘要】目的建立测定注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量的方法。
方法采用紫外可见分光光度法，检测波长为500nm，无水芦丁为对照品。
结果芦丁在8.12～48.72μg/ml范围内呈良好的线性关系，r=0.9998（n=6），平均回收率为100.0%，RSD=0.13%（n=6）。
结论所用方法灵敏、准确、重现性好、结果可靠，可用于注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量测定。
【关键词】注射用山楂总黄酮；总黄酮；紫外可见分光光度法；含量测定
山楂总黄酮即山楂叶总黄酮，是从山楂叶中提取的黄酮类化合物的总称，目前从山楂总黄酮中分离出的单体有三十多种，有牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、金丝桃苷、槲皮素等。
山楂叶中的黄酮类化合物的药理作用有很多方面，例如对心、脑血管疾病有确切明显的疗效，山楂总黄酮对心绞痛、冠心病、心律失常、脑供血不足、脑动脉硬化症、脑血栓、老年性痴呆及各种脑损伤后遗症可产生积极的预防和治疗作用。
1.仪器与试药
TU-1901双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；AE240电子天平（瑞士梅特勒公司）；所用试剂均为色谱纯。
2.方法与结果
2.1线性关系考察
对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品约10.08mg，置50ml容量瓶中，加乙醇适量使溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
（每1ml含无水芦丁0.2030mg）[1]。
标准曲线的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置25ml容量瓶中，各加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，使摇匀放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置20分钟，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版一部附录V A），在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、测试溶液中对照品浓度为横坐标绘制标准曲线。
回归方程为：y=0.0135x+0.0089 r=0.9998（n=6），表明对照品浓度在8.12～48.72μg/ml范围内呈良好的线性关系，符合含量分析测试要求。
图1 芦丁对照品标准曲线
2.2显色后测试溶液稳定性试验
取显色后的对照品测试溶液及供试品测试溶液，在60分钟内于500 nm波长处进行连续扫描，评价显色后测试溶液的稳定性。
对照品溶液的制备：精密称取芦丁对照品约10.26mg，置50ml容量瓶中，加乙醇适量使溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
（每 1 ml含无水芦丁0.2052mg）。
供试品溶液的制备：取注射用山楂总黄酮0.1512g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇25ml，密塞，摇匀，超声处理5分钟，放置3小时以上，滤过，精密量取续滤液2ml，置25ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
试验方法：精密量取上述对照品溶液及供试品溶液各2ml，分别置25ml容量瓶中，各加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，使摇匀放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典2010年版一部附录V A），在500nm的波长处分别取显色后0、5、10、15、20、25、30、40、50、60分钟的测试溶液测定吸光度。
结论：对照品溶液及供试品溶液显色后的测试溶液在20分钟后达到较稳定状态，在显色后20～60分钟内稳定性良好，符合含量分析测试要求。
因此，确定本含量测定方法显色时间为20分钟。
2.3重复性试验
供试品溶液的制备：取注射用山楂总黄酮0.1522g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇25ml，密塞，摇匀，超声处理5分钟，放置3小时以上，滤过，精密量取续滤液2ml，置25ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
结论：该含量测定方法的重复性良好，符合含量分析测试要求。
2.4供试品溶液稳定性试验
供试品溶液的制备：取注射用山楂总黄酮0.1530g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇25ml，密塞，摇匀，超声处理5分钟，放置3小时以上，滤过，精密量取续滤液2ml，置25ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
试验方法：取供试品溶液，室温、密闭放置，于12小时内测定，评价供试品溶液的稳定性。
分别于0、3、6、9、12小时取供试品溶液2ml，置25ml容量瓶中，照总黄酮含量测定方法进行测定，计算RSD值。
结论：供试品溶液置室温、密闭条件下放置12小时，稳定性较好，符合含量分析测试要求。
2.5加样回收试验
对照品溶液的制备：精密称取芦丁对照品约10.15mg，置50ml容量瓶中，加乙醇适量使溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。
（每1ml含无水芦丁0.2030mg）。
供试品溶液的制备：取注射用山楂总黄酮0.1501g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇25ml，密塞，摇匀，超声处理5分钟，放置3小时以上，滤过，精密量取续滤液2ml，置25ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，取供试品溶液，照总黄酮含量测定方法进行测定，注射用山楂总黄酮成品总黄酮含量为90.7mg/支（显色后供试品溶液总黄酮含量为34.8μg/ml）。
试验方法：精密量取6份供试品溶液各6ml，分别加入对照品溶液0.8ml、0.8ml、1.0ml、1.0ml、1.2ml、1.2ml，照总黄酮含量测定方法进行测定，计算RSD 值。
2.7样品测定
供试品溶液的制备分别取10批注射用山楂总黄酮0.15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇25ml，密塞，摇匀，超声处理5分钟，放置3小时以上，滤过，精密量取续滤液2ml，置25ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
试验方法：取供试品溶液，照总黄酮含量测定方法进行测定。
3.讨论
采用紫外可见分光光度法建立了总黄酮含量测定的方法，经方法学研究证实，该方法灵敏、准确、重现性好、结果可靠，可用于注射用山楂总黄酮中总黄酮的含量测定。
[科]
【参考文献】
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版（一部）[M].中国医药科技出版社，2010：30.。