巨细胞病毒感染最新PPT课件

母亲血清阳性率 25 52 83 100 85
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母源性感染的特点
母亲CMV感染状态
原发感染CMV
复发感染：潜伏感染激活 感染新病株
与复发感染比较，原发感染更容易传播给胎儿
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原发性和非原发性母源性感染与 婴儿远期结局
原发性母源性感染
非原发性母源性感染
70%无传播 30%无传播
10%出生时 有症状，其 中60-80% 出现后遗症
• CMV感染的分类
• 先天性CMV感染的临床表现
• 实验室检查
• CMV感染的诊断
• 鉴别诊断
• 治疗
• 预防及预后
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巨细胞病毒是先天性病毒感染最常见的病原 体，是造成儿童听力丧失和神经发育残疾的 主要原因，也是引起免疫力低下人群中严重 疾病和死亡的重要病原体之一。
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病原学
• 巨细胞病毒（cytomegalovirus,CMV）， 是人类疱疹病毒家族中最大、结构最复杂 的一员，属β疱疹病毒。
• 巴西和印度母亲血清学阳性率几近100%， CMV先天性感染患病率约为1%
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人巨细胞病毒血清学阳性百分比图（乌干达）
Lisa Stockdale, Stephen Nash， Angela Nalwoga. et.Human cytomegalovirus epidemiology and relationship to tuberculosis and 21 cardiovascular disease risk factors in a rural Ugandan cohort.[J].PLoS One.
人疱疹病毒
α 疱疹病毒：单纯疱疹病毒１型（ＨＳＶ－１）、单纯疱 疹病毒２型（ＨＳＶ－２）与水痘带状疱疹病毒（ＶＺ Ｖ） β疱疹病毒：人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）、人疮疹病毒６ 型（ＨＨＶ－６）与人疱疹病毒７型（ＨＨＶ－７） γ疱疹病毒：ＥＢ病毒和人疱疹病毒８型（ＨＨＶ－８， 又名ＫＳＨＶ即卡西波肉瘤相关疮疹病毒）
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核衣壳 被膜
包膜
糖蛋白复合物
人巨细胞病毒结构示意图
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• HCMV在-4℃中可保存数日，在-70℃可保存数 月，在液氮（-196℃）中可保持其感染力。
• CMV可在体内感染各种类型细胞包括：上皮细胞、 内皮细胞、平滑肌细胞、神经细胞、中枢神经系 统的支持细胞、视网膜上皮细胞、真成纤维细胞、 单核/巨噬细胞等
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发病机制
• 在感染CMV后，免疫功能低下人群及其他 特定因素激活下CMV由潜伏状态进入裂解 复制，病毒持续复制、播散与持续性的炎 症导致多种器官功能损害。
发病机制涉及多个病毒基因调控与宿主的免 疫应答见下图：
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CMV感染影响机体免疫反应调节机制
先天性免疫反应 病毒感染固有细胞反应
病毒基因
UL82
细胞因子
UL111a
机制
细胞Daxx蛋白作用的抑制作 用下调
IRFs NF-kB PKR活力 MHC Ⅰ类分子诱导 HLA-E表达
Ⅰ类分子表达 HLA-DR下调 阻断TAP转运 病毒Fc受体 缺乏抗体结合
GPCR下调细胞外趋化因子
趋化因子受体诱导抑制
RANTES
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病毒IL-10
病理学
• 巨细胞、细胞核和细胞质包涵体 直径20-35mm的大细胞，有巨大细胞核，里 面含有圆形、椭圆形或肾形包涵体；巨大的 包涵体被核膜分隔成清晰的区域表现为猫头 鹰眼睛样外观。包涵体组化染色显示DNA阳 性。 中枢神经病理学特点：脑室周围钙化（非特 异性）
干扰素反应
NK细胞活力
适应性免疫反应 CD8+，MHC限制性CTL CD4+反应
抗体激活 抗原变异 细胞因子，趋化因子反应 趋化因子受体（GPCRs） 趋化因子
UL8（pp65） TRS1 UL18 UL40
US2，US3，US11 US2 US6 TRL11 UL73，UL55，UL75
US28，US27 UL21.5
• IUGR
• 间质性肺炎：部分可无明显临床症状，与普通呼吸道病毒 感染难以鉴别，需病原学检查（注意CMV经唾液分泌污 染痰液标本可能影响诊断）
• 牙齿缺损 26
• 感觉神经性耳聋
先天性CMV感染临床表现
• 对新生儿不明原因的黄疽、肝功能异常、 血小板减少、病原不明的肺炎等需考虑 CMV感染
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临床/实验室异常
末端的重复序列分别称为末端重复长序列（TRL）和末端重 复短序列（TRS），而ＵＬ和ＵＳ连接处重复序列被称为中 间重复长序列（IRL）和中间重复短序列（IRS）因此ＨＣＭ Ｖ病毒一般基因结构模式为：TRL-UL-IRL-IRS-US-TRS。其 中ＵＬ序列占基因组的７３％，ＵＳ约占１６％。UL两端的 TRL和IRL两个反向重复序列越占9%，US两端的IRS和TRS约 占2%。编码估计超过200多个病毒蛋白。核酸代谢、基因组 合成、病毒成熟包装的基因主要在UL区。
邵路瑶.人巨細胞病毒蛋白ＵＬ８０．５和ＵＬ８４与宿主细胞因子相互作用及ＥＧＳ
抑制ＨＳＶ－１病毒基因表达和增殖的研究.[D]武汉大学.2016年
及PUBMED部分文献
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学习内容
• 巨细胞病毒的病原学特点
• 感染途径
• 巨细胞病毒的免疫逃避和发病机制
• CMV感染的病理学表现
• CMV感染的流行病学特点
• 在绝大多数健康成人体内，ＨＣＭＶ表现为潜伏持续感染， 只有极少的病毒基因表达，在病毒裂解性复制被激活后， ＨＣＭＶ则通过多种策略逃避宿主的免疫监视，其中包括 阻止细胞调亡和干扰宿主免疫应答，同时ＨＣＭＶ病毒在 复制过程还会表达一些生长节制因子，调节ＨＣＭＶ在细 胞内的增殖，这些说明宿主与ＨＣＭＶ直接可能存在一种 彼此妥协的平衡关系，即ＨＣＭＶ并没有完全逃逸出宿主 的免疫监控体系，而宿主也很难将ＨＣＭＶ彻底清除。
Diseases of the fetus and Newborn Infant. 7th ed.
段泓宇,喻韬,万朝敏.巨细胞病毒感染诊断及治疗进展.[J]. Chin J Obstet Gynecol
Pediatr(Electron Ed),February 2010,Vol.6,No.1.
胡琼瑶.新生儿巨细胞病毒感染75例临床分析.[D]. 浙江大学.2011年
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流行病学
• 国内孕妇CMV-IgG阳性率90-96.3%， CMV-IgM 3.1-13.4%，宫颈分泌物病毒分 离阳性率5.9-17.6%，母乳排出CMV为1327%。
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流行病学
• 美国先天性感染CMV占新生儿的0.2-2.2% （平均1%）
• 象牙海岸国家先天性CMV感染的患病率 1.4%
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ＤＮＡ切割／包装酶 （诱导DNA入壳）
人巨细胞病毒核衣壳组装过程示意图
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感染途径
• 传播方式 人是HCMV（人巨细胞病毒）唯一宿主 垂直传播：母婴传播（胎盘传播、母乳喂养 等） 水平传播：接触含CMV的排泄物如：唾液、 尿液、眼泪、精液、阴道及宫颈分泌物等， 血液制品，器官移植等。
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免疫逃避成熟颗粒（ｖｉｒｉｏｎ）在人类疱疹病 毒中是最大最复杂的，直径约２３０ｍｍ，具有典型的疱 疹病毒粒子三层结构：中心为直径约１１０ｍｍ包裹线性 双链基因组ＤＮＡ的二十面体核衣壳；中间环绕由病毒基 质蛋白组成的无规则结构的病毒被膜；最外面为来源于细 胞脂质双分子层并含有病毒糖蛋白的包膜。其中，被膜结 构是疱疹病毒所特有的，大约含有２０－２５个病毒粒子 结构蛋白且功能多样。
流行病学
先天性CMV感染发生率与不同地区母亲的免疫之间的关系
地点、时间
婴儿数量
曼切斯特，英国， 6051 1978
奥胡斯-维堡，丹 3060 麦，1979
仙台，日本，
132
1970
阿比让，象牙海岸，2032 1978
伯明翰，阿拉巴马 1412 州（低SES），
1980
先天性CMV感染率 0.24 0.4 1.4 1.38 2.2
巨细胞病毒感染及诊治
Cytomegalovirus(CMV) infection，diagnosis and treatment
简阳市人民医院新生儿科 张林
本文内容源至:
李炜如.巨细胞病毒感染.[M].《实用新生儿学》4th ed.
Jacks S.Remington，Jerome O.Klein，Christopher B.wilson.[M].Infectious
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病原学
CMV感染状态
• CMV侵入人体后表现为潜伏和裂解复制两 种状态。
机体免疫力正常
潜伏
免疫功能低下 裂解复制
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病原学
裂解复制中的基因表达
根据时序分为：立即早期、早期、晚期
立即早期基因（细胞感染后4小时内表达）：ＵＬ１２２/1２３和辅助因 子，编码IE72（IE1）和IE86（IE2）蛋白—立即早期抗原（immediate early antigen，IEA），启动DNA复制。 早期基因（细胞感染后4-24小时表达）：编码非结构蛋白，参与病毒复 制的ＤＮＡ聚合酶或修复酶的转录，及调节病毒免疫应答的蛋白等—早 期抗原。 晚期基因（细胞感染24小时以后）：编码结构蛋白，在病毒的装配和成 熟中起作用—晚期抗原。
改良方法有：CMV负荷定量法或微量培养法
后者患者受检标本接种在载玻片的成纤维细胞,12 h后用抗早期抗原P72 的单克隆抗体与CMV抗原结合,用荧光免疫法显示结果。
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• 病毒抗原检测：pp65（晚期抗原） Bhatia等研究结果显示,对PP 65抗原检测的 灵敏度为89.18%,特异性为100%
90%出生时 无症状，其 中8-15%出 现后遗症
98-99% 无传播
0.22.0% 传播
90%出生 时无症状
10%出生 时有症状
5-15%出现后遗症
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CMV感染的分类
• 先天性CMV感染：生后14天内明确的CMV 感染。
• 围产期CMV感染：生后3-12周证实的CMV 感染。
• 生后CMV感染：生后超过12周证实的感染。
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先天性CMV感染临床表现
• 瘀点、肝（脾）大、黄疸、小头畸形最常见
• 血液系统损害：血小板减少，贫血，凝血因子生成不足， 单核细胞增多症
• 中枢神经系统：脑坏死、钙化（脑室周围钙化常见）、脑 发育迟缓
• 眼睛的损害：脉络膜视网膜炎（表现为：斜视、视神经萎 缩、小眼球、白内障、视网膜坏死及钙化、失明、前房及 视神经盘畸形、瞳孔膜痕迹）
阳性/总检出数（%）
早产
36/106（34）
SGA
53/106（50）
瘀斑
80/106（76）
黄疸
69/103（67）
肝脾大
63/105（60）
紫癜
14/105（13）
神经系统发现异常（一下一项或多项） 72/106（68）
小头畸形
51/102（53）
嗜睡/肌张力低下
28/104（27）
食欲下降
20/103（19）
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立即早期抗原 早期抗原
启动病毒复制 的关键基因
晚期抗原
人巨细胞病毒复制感染周期及相关蛋白
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核衣壳的组装
• 三联体及ＵＬ８０．５－ＵＬ８６复合体 在胞质中的提前组装可保证正确的衣壳成 分组合并转运入核，很可能是为了提高前 衣壳形成的效率和准确度
• 支架蛋白的消失和病毒ＤＮＡ的入壳 其中ＨＣＭＶ的所有组装支架成分都消除， 这很可能是因为ＨＣＭＶ衣壳要多包装更长 的ＤＮＡ基因组。
惊厥
7/105（7）
谷丙转氨酶升高（＞80U/L）
46/58（83）
血小板减少
＜100×103/mm3
62/81（77）
＜50×103/mm3
43/81（53）
高结合胆红素
直接胆红素＞4mg/dl
47/68（69）
溶血
37/72（51）
脑脊液蛋白增高（＞120mg/dl）
24/52（46）
临 床 及例 实症 验状 室性 表先 现天
• HCMV对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感；20%乙醚处 理2小时、PH<5或37℃1小时（应该是体外）、 56℃半小时、紫外线下5分钟可失去病毒活性。
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CMV基因组成
CMV基因组结构由单一长序列（ｕｎｉｑｕｅｌｏｎｇ，Ｕ Ｌ）、单一短序列（ｕｎｉｑｕｅ ｓｈｏｒｔ，ＵＳ）和重 复序列区域（ｒｅｐｅａｔｒｅｇｉｏｎｓ）共同构成。
性 感 染 婴 儿 在 新 生 儿 期 28的
CMV
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实验室检查
• 病毒分离 • 病毒抗原检测 • CMV-mRNA检测 • CMV-DNA检测 • 血清学检测
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• 病毒分离：传统方法是从血、尿、唾液、 脐血等受检标本中培养CMV,若呈阳性即可 确诊,但阳性率和敏感性很低,且需时长达1 个月以上,目前已少用。
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• CMV-mRNA 病毒复制需经mRNA-DNA蛋白质过程。潜伏性CMV感染病毒复制水 平很低,仅少量细胞转录CMV-mRNA。当 CMV感染处于活动期,病毒复制增加,CMVRNA增加。