5-高血压动物模型的建立

5大鼠高血压模型的建立
1.1 任务和目的
掌握动脉血压的影响因素；
掌握大鼠高血压模型的基本原理；
掌握大鼠腹部无菌操作；
两肾一夹”肾性高血压大鼠模型的手术建模；
大鼠动脉血压的无创式测量与插管式测量技术的掌握与比较。

动脉血压是循环生理功能的重要指标之一，动脉血压过高或过低都会影响各器官的血液供应和心脏的负担。

高血压（hypertension）为常见、多发心血管疾病，是一种以动脉压升高为特征，可伴有心脏、血管、脑和肾脏等器官功能性或器质性改变的全身性疾病，它有原发性高血压和继发性高血压之分，是冠心病及脑卒中的重要危险因素，为全球范围内的重大公共卫生问题。

以高血压为原发病的各种心脑血管疾病已成为人类死因之首。

近年来，我国高血压的发病率逐年上升，普查资料显示我国的高血压患者已超过一亿，据统计，18岁以上人群高血压平均发病率为18.8%。

高血压是由多基因遗传和多种环境因素相互作用的结果，但其具体发病原因仍不明。

因此，对动脉血压影响因素的研究成为心血管研究领域中的热点问题。

1.2 原理—高血压及其危害
血压水平的分类、定义和危害*葛均波,徐永健.内科学.8版. 北京:人民卫生出版社,2014
为更好地研究人类高血压的发病机制及治疗方法，动物实验是其研究的重要手段。

不同类型高血压动物模型的建立将为高血压发病机制的研究和抗高血压的新药研发提供有效的方法。

遗传性高血压动物模型
自发性高血压大鼠及其亚型（自发性高血压大鼠，SHR，及其亚系是目前国际上公认的最接近人类原发性高血压的动物模型）。

此外还有转基因高血压大鼠和小鼠（血管紧张素原基因和肾素基因）。

环境性高血压动物模型
正常大鼠暴露于5℃的环境中3周即可形成高血压并且伴有心肌肥厚。

此外还有高温、电击、噪音、悬吊等刺激，形成高血压动物模型。

药物性高血压动物模型
通常给与大鼠辣椒素、高盐（4%NaC1）、醋酸脱氧皮质酮、L-NAME、腺嘌呤等形成大鼠高血压模型。

手术性高血压动物模型
肾血管性高血压动物模型
肾性高血压实验模型是研究高血压病及降压药物常用的实验手段，其制作方法中以狭窄肾动脉形成肾血管性高血压为最常用，且常以大鼠为实验动物。

建立稳定、实用、重复性好且与临床接近的肾性高血压病动物模型。

遗传性高血压动物模型
双肾单夹法（Two kidney one clip）
行单侧肾动脉套管结扎法，建立肾血管性高血压的动物模型。

一肾一夹法（One kidney one clip）
银夹或丝线狭窄一侧肾动脉，约10天后，切除另一侧肾，这种方法相对难度大，动物死亡率较高。

双肾双夹法（Two kidney two clip）
曾有人尝试从腹中线作切口，同时将两侧肾动脉狭窄。

腹主动脉缩窄性高血压大鼠模型
通过结扎腹主动脉致使其狭窄，建立了腹主动脉缩窄性高血压大鼠模型，此模型的制作方法基本同肾血管性高血压动物模型，只是狭窄的动脉是腹主动脉。

1.2 原理—肾性高血压实验模型原理
1.4 实验内容
A.两肾一夹肾性高血压大鼠模型的手术建模；
B.手术后动物，喂养三周；
C.三周后采用尾动脉无创的方法来测定大鼠整体血压。

麻醉与固定
腹腔注射麻醉Wistar大鼠，仰卧固定于手术台上，四肢和牙齿用橡皮筋固定。

分离暴露左肾动脉
用棉签蘸脱毛剂涂抹在Wistar大鼠腹部，碘伏消毒腹部，剃毛，75%酒精脱碘，盖上孔巾，按无菌操作，小心、钝性分离出左肾动脉，具体如下：沿腹正中线作手术切口打开腹腔，换止血钳\镊子钝性分离皮下筋膜及肌肉暴露左肾。

用眼科镊小心分离出左肾，在左肾与腹主动脉间用玻璃分针小心分离出左肾动脉。

狭窄肾动脉
在左肾动脉处穿一根2-0手术缝合线，打一活结，把直径为0.25mm 的针灸针与肾动脉血管长轴紧贴平行放置，用无菌丝线扎紧肾动脉和针灸针然后抽出针灸针，结果造成单侧肾动脉狭窄。

结扎完成后，用棉球轻轻推脏器进腹腔，并用适量青霉素滴注腹腔。

用小圆弯针、4-0号手术缝合线缝合腹壁肌肉层。

再用青霉素滴注皮下层，用三角针、4-0号手术缝合线缝合皮肤层。

术后观察
假手术组除不放置针灸针和不用丝线紧扎外，其余手术操作均同上。

术后3天内青霉素(3万U/天)腹腔注射预防感染。

结果鉴定
喂养四周，后用尾动脉无创的方法直接测定血压和心率，测定的血压值与假手术组的值作比较。

高血压的判定标准:血压在85～155mmHg 范围为正常血压大鼠，这种大鼠做正常对照组或进行造模处理。

造模处理后凡血压比处理前高20mmHg以上且高于115mmHg者确认为高血压模型形成。

分析结果撰写实验报告。

1.5 实验注意事项
a.动物麻醉；
b.无菌操作
c.肾动脉的判定、分离和结扎；
d.动物的喂养；
e.血压测定中的动脉插管；。