瞬时转染和稳定转染的比较

2.稳定转染（Stable transfected）：外源DNA既可以整合到宿主细胞中，也可能作为一种游离体（episome）存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源DNA整合到染色体中概率很小，大约1/104转染细胞能整合，通常需要通过一些选择性标记。如来氨丙基转移酶（APH；新霉素抗性基因），潮霉素磷酸转移酶（HPH），胸苷激酶（TK）等反复筛选，得到稳定转染的同源细胞系。
瞬时转染和稳定转染的比较
1.瞬时转染（transient transfection）：外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其他调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24~72h小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统和荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。
导入的遗传物质的高拷贝数导致高水平的蛋白质表达。
单拷贝数或低拷贝数的稳定整合的致较低水平的蛋白质表达。
通常在转染后24-96小时内收获细胞。
需要2-3周的时间筛选出稳定转染的细胞克隆。
通常不适合使用具有诱导型启动子的载体的研究。
适用于使用带有诱导型启动子的载体的研究。
瞬时转染和稳定转染的比较
瞬转
稳转
导入的DNA没有整合到基因组中，而是保留在细胞核上
导入的DNA整合到基因组中
导入的遗传物质不传递到子代， 遗传改变只是暂时的
导入的遗传物质能够代代相传；遗传改变是永久的
不需要选择性筛选
需要选择性筛选出稳定转染的细胞
DNA载体和RNA都可用于瞬时转染
只有DNA载体可用于稳定转染，RNA本身不能稳定地导入细胞中