粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮测量不确定度评定

粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮测量不
确定度评定
摘要采用高效液相色谱法测定粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮测量不确定度
进行分析。

根据《测量不确定度评定与表示》，参考《化学分析中不确定度评定
的评估指南》，分析粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮含量测定的不确定度因素，
确定不确定度来源，最后根据各分量计算出合成不确定度并进行了扩展（k＝2），粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮的扩展不确定度为：X=4.39ug/kg；U=8.78ug/kg；k=2。

关键词粮食和粮食制品；玉米赤霉烯酮；不确定度
依据GB 5009.209-2016《食品安全国家标准食品中玉米赤霉烯酮的测定》[1]和JJF 1135—2005 国家计量技术规范《测量不确定度评定与表示》[2]，样品
经乙腈溶液提取,经免疫亲和柱净化后,采用液相色谱分离、荧光检测器测定,外
标法定量,测定粮食和粮食制品中玉米赤霉烯酮。

本文分析了粮食和粮食制品中
玉米赤霉烯酮测量不确定的来源，利用测量获得的结果及其他相关资料，评定该
测量结果的不确定度。

1.测定步骤（粮食和粮食制品）
1.1提取
准确称取约40g粉碎试样 (精确到0.1g )试样于均质杯中 ,加入4g氯化钠
和100ml提取液 ,以均质器高速搅拌提取2min,定量滤纸过滤。

移取10.0ml 滤
液加入40ml水稀释混匀，经玻璃纤维滤纸过滤至滤液澄清，滤液备用。

1.2净化
将免疫亲和柱连接于玻璃注射器下，准确移取10.0ml（相当于0.8g样品）1.1中的滤液注入玻璃注射器中。

将空气压力泵与玻璃注射器连接，调节压力使
溶液以1滴/s-2滴/s的流速缓慢通过免疫亲和柱，直至有部分空气进入亲和柱中。

用5ml水淋洗柱子1次，流速为1滴/s-2滴/s，直至有部分空气进入亲和柱中，弃去全部流出液。

准确加入1.5ml甲醇洗脱，流速约为1滴/s。

收集洗脱液于玻璃试管中，于55℃以下氮气吹干后，用1.0ml流动相溶解残渣，供液相色谱测定。

2．空白实验
不称取试样，按1.1和1.2的步骤做空白实验。

应确认不含有干扰待测组分的物质。

3.测量模型
X1=C×V/m×1000×f
式中： X1---样品中玉米赤霉烯酮含量，单位为微克每千克（ ug/kg)；
C--- 由标准曲线得出的试样液中待测物的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L)
V---样品最终定容体积，单位为毫升（ mL）
m---样品质量，单位为克（ g）
f---稀释倍数
4.测量不定度来源
由测量模型，测量不确定度来源主要有
（1）天平称取试样质量m引入的标准不确定度 u（m1）；
(2)试料溶液中c的质量浓度C的标准不确定度u（C）主要包括天平称取标准品质量m引入的标准不确定度u（m2）；标准溶液配制时引入的标准不确定u1 （C）、工作曲线拟合时所引入的标准不确定度u2 （y）；
（3）溶液定容体积V的标准不确定度u（v）；
（4）试验重复性引入的不确定度 u0；
（5）测量时由高效液相色谱仪产生的不确定度 u1
5.各标准确定度分量的评定
5.1天平称取试样质量m引入的标准不确定度 u（m）的评定
称取约40.0018g。

根据证书，天平的最大允许误差为±0.5mg，称量两次，
一次空盘、一次是盘加试样，按均匀分布考虑。

称取试样质量的标准不确定度为
u（m）==0.41mg
u rel(m)=0.41/40001.8=1.0×10-5
5.2试料溶液中玉米赤霉烯酮的质量浓度C的标准不确定度u（C）
5.2.1平称取标准品质量m引入的标准不确定度u（m2）
称取标准品20.6mg。

根据证书，天平的最大允许误差为±0.5mg，称量两次，一次空盘、一次是盘加试样，按均匀分布考虑。

称取标准品质量的标准不确定度为
u（m2）==0.41mg
u rel(m2)=0.41/20.6=0.020
标准溶液配制时引入的标准不确定u1 （C）
定量总体积为 50mL，采用 50mLA 级容量瓶定容，允许差为±0.05mL, 按
照均匀分布换算成标准偏差u1 （C1）；按照均匀分布换算成标准偏差为
=0.029mL
可调移液器相对标准不确定度u1 （C2）的分析
由校准证书上可知，1000uL可调移液器容量相对误差容量相对误差为0.4%，按均匀分布计=0.0023；100uL可调移液器容量相对误差容量相对误差为-2.9%，按均匀分布计=0.017，以上两项合成得出：
u1 （C2）==0.017
工作曲线拟合时所引入的标准不确定度u2 （y）
表1 建立工作曲线用玉米赤霉烯酮标准溶液质量浓度与相应的峰面积
拟合的回归工作曲线方程为y=mx+b=8.00598x+0.0792176
u2 （y）=
式中的s为工作曲线的标准差
s=
两式中
x i-建立工作曲线用标准系列溶液中玉米赤霉烯酮的质量浓度；
y i-建立工作曲线用标准系列溶液中玉米赤霉烯酮的质量浓度所对应的峰面积；
a-工作曲线的截距；
b-工作曲线的斜率；
p-平行测量次数，p=6;
N-建立工作曲线用标准溶液测量总次数，每个标准溶液测量1次，N=6；
x-根据测得峰面积平均值，利用工作曲线求得的试料溶液中玉米赤霉烯酮的
质量浓度；
x p-标准系列溶液中玉米赤霉烯酮的平均质量浓度；
根据以上数据计算求得
s=5.46×102 ; x=86.1ng/mL; x p=0.28ng/mL
u2 （y）=0.99
u2rrl （y）=0.99/86.1=0.011
u（C）=
（3）溶液定容体积V的标准不确定度u（v）；
试料溶液定容于50mL容量瓶中。

因试料进行多次测定时，容量瓶都是随机取用，其体积误差引入的标准不确定度，已包含在重复性实验引入的标准不确定度中，所以不再另行评定。

（4）试验重复性引入的不确定度 u0；
称取6份试样，按测定方法测定，结果见表2
表2 玉米赤霉烯酮重复测定结果
由表2，重复性实验引入的标准不确定度为
重复性实验相对不确定度为
u0rel=1.92/107=0.018
（5）测量时由高效液相色谱仪产生的不确定度 u1
由校准证书上可知，高效液相色谱仪的定量重复性为0.1%,按均匀分布计算，则液相色谱仪的相对不确定度为u1==5.8×10-4。

5.相对标准不确定度分量一览表3
表3 各相对标准不确定度分量
相对合成标准不确定度为
合成标准不确定度为
u=107×0.041=4.39(ug/kg)
取包含因子k=2，玉米赤霉烯酮含量的扩展不确定度为U=4.39×2=8.78(ug/kg)
样品中玉米赤霉烯酮含量
X=4.39ug/kg；U=8.78ug/kg；k=2。

（通讯作者：杨科秀）。