一种稳定表达NS1蛋白细胞株的构建方法[发明专利]
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专利名称:一种稳定表达NS1蛋白细胞株的构建方法专利类型:发明专利
发明人:刘宏生,陈思瑶,朱俊丰,李雪
申请号:CN201710421832.4
申请日:20170607
公开号:CN107190024A
公开日:
20170922
专利内容由知识产权出版社提供
摘要:本发明涉及一种稳定表达NS1蛋白细胞株的构建方法。
在
pLenti‑CMV‑EGFP‑3Flag‑PGK‑Puro载体的EcoR I多克隆位点处插入NS1基因,用构建好的pLenti‑CMV‑NS1‑EGFP‑3Flag‑PGK‑Puro重组质粒与病毒包装质粒共转染293T细胞,培养、出毒、收取病毒上清、过滤得重组慢病毒液。
将包装好的重组慢病毒感染A549细胞,通过嘌呤霉素筛选,免疫荧光及Western blot鉴定,得稳定表达NS1蛋白细胞株。
本发明利用重组慢病毒系统制备一种融合标签蛋白并能稳定表达NS1蛋白的细胞株,该细胞株为研究NS1蛋白的生物学功能提供一个很好的工具。
申请人:辽宁大学
地址:110000 辽宁省沈阳市沈北新区道义南大街58号
国籍:CN
代理机构:沈阳杰克知识产权代理有限公司
代理人:金春华
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