一种改良苏木素染液的配制方法
苏木素染色液配制流程
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苏木精、苏木素染色液溶液配制方法
华越洋苏木素(苏木精)染色液的配制各类溶液的配制方法如下：华越洋苏木素染色液：500ml1) Harry`s苏木素苏木素 1g 无水酒精 10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g 用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素 1g无水酒精 50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水 50ml冰醋酸 5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
B液： 29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水 95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。
苏木素配制
（1）明矾苏木素1．Harris氏苏木素（1990）∙苏木素 2.5g无水酒精 25ml硫酸铝钾（钾明矾） 50g或硫酸铝铵（铵明矾）蒸馏水 500ml黄*色氧化汞 1.25g冰醋酸 20ml该溶液为当前最广泛使用的染液，由于它染色时间短，效果好，很受使用者的欢迎。
配制时，先将苏木素溶于酒精（平时也可将苏木素以10%的浓度溶解好，贮存备用），取一2000ml的三角烧瓶，倾入钾明矾，加入蒸馏水，于电炉上加热，熔解钾明矾，完全熔解后，待温度至90℃左右时，加入预先溶解好的酒精苏木素，继续加热至沸腾，延续3-5min，此时溶液逐渐加深，变为紫红色，拔离电源，加入黄*色氧化汞，当充分氧化后，重新插上电源继续加热3-5min，此时溶液变深紫色，拔去电源，直接将三角烧瓶插入预先备好的冰水里，放于暗处，第二天过滤后加入冰醋酸，即可使用三个月，但据我们的实践及多年的经验认为，只要掌握好切片的“无水化”，该染液可反复使用达一年之久（天天使用）。
注意事项：∙①苏木素一定要预先溶解，否则较难彻底溶解。
②加入黄*色氧化汞后，可产生大量的气泡，因此，配制500ml的溶液，一定要选择2000ml以上的容器，否则液体便会溢出。
③当溶液变为深紫色后，应终止氧化，烧瓶应直接插入冰水中，不要担心玻璃瓶会爆裂，因三角烧瓶经特殊处理的，不会有爆裂的危险，如果有，那是属于产品质量问题。
迅速冷却的主要目的是不让溶液过度氧化，以免缩短溶液的使用寿命。
④溶液过滤后方加入冰醋酸，不要颠倒过来。
如果加入冰醋酸后再过滤，过滤速度将非常慢，这是因为醋酸会使滤纸中的纤维膨胀，增加了密度，使溶液不易通过，导致过滤时间延长。
⑤该苏木素在使用一段时间后，可以在表面产生金属膜。
当出现这种现象时，可用粗滤纸捞去，否则贴于切片上将较难除去。
⑥苏木素加入冰醋酸后，其PH值在2－2.28之间。
改良的苏木素配制法（1000ML）一、材料和方法：1、药品：苏木色精2G，硫酸铝5G，碘酸钾（钠）0.2G，乙醇（95%、100%）250ML，蒸馏水750ML，丙三醇50ML，柠檬酸0.3G。
苏木素配制
（1）明矾苏木素1．Harris氏苏木素（1990）∙苏木素 2.5g无水酒精 25ml硫酸铝钾（钾明矾） 50g或硫酸铝铵（铵明矾）蒸馏水 500ml黄*色氧化汞 1.25g冰醋酸 20ml该溶液为当前最广泛使用的染液，由于它染色时间短，效果好，很受使用者的欢迎。
配制时，先将苏木素溶于酒精（平时也可将苏木素以10%的浓度溶解好，贮存备用），取一2000ml的三角烧瓶，倾入钾明矾，加入蒸馏水，于电炉上加热，熔解钾明矾，完全熔解后，待温度至90℃左右时，加入预先溶解好的酒精苏木素，继续加热至沸腾，延续3-5min，此时溶液逐渐加深，变为紫红色，拔离电源，加入黄*色氧化汞，当充分氧化后，重新插上电源继续加热3-5min，此时溶液变深紫色，拔去电源，直接将三角烧瓶插入预先备好的冰水里，放于暗处，第二天过滤后加入冰醋酸，即可使用三个月，但据我们的实践及多年的经验认为，只要掌握好切片的“无水化”，该染液可反复使用达一年之久（天天使用）。
注意事项：∙①苏木素一定要预先溶解，否则较难彻底溶解。
②加入黄*色氧化汞后，可产生大量的气泡，因此，配制500ml的溶液，一定要选择2000ml以上的容器，否则液体便会溢出。
③当溶液变为深紫色后，应终止氧化，烧瓶应直接插入冰水中，不要担心玻璃瓶会爆裂，因三角烧瓶经特殊处理的，不会有爆裂的危险，如果有，那是属于产品质量问题。
迅速冷却的主要目的是不让溶液过度氧化，以免缩短溶液的使用寿命。
④溶液过滤后方加入冰醋酸，不要颠倒过来。
如果加入冰醋酸后再过滤，过滤速度将非常慢，这是因为醋酸会使滤纸中的纤维膨胀，增加了密度，使溶液不易通过，导致过滤时间延长。
⑤该苏木素在使用一段时间后，可以在表面产生金属膜。
当出现这种现象时，可用粗滤纸捞去，否则贴于切片上将较难除去。
⑥苏木素加入冰醋酸后，其PH值在2－2.28之间。
改良的苏木素配制法（1000ML）一、材料和方法：1、药品：苏木色精2G，硫酸铝5G，碘酸钾（钠）0.2G，乙醇（95%、100%）250ML，蒸馏水750ML，丙三醇50ML，柠檬酸0.3G。
HE染色操作流程
H E染色操作流程 The document was finally revised on 2021HE染色操作流程HE染色，即是苏木精-伊红染色法，是最常用的染色方法，在质量较佳的HE染色切片上，各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。
苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
[试剂材料]1.试剂：%醇溶性伊红染液，改良的哈瑞（Harris）苏木素，%盐酸酒精溶液伊红：配制方法：中性红 0.5g，80%酒精100ml,将伊红溶于酒精内搅拌，全部溶解后即可使用。
苏木精：配制方法：A液：苏木素1g，无水酒精10mlB液：硫酸铝钾20g，蒸馏水200ml两液分别溶解后混合，加热煮沸后，慢慢加入红色氧化汞，此时有大量气泡产生，故容器要大，以防液体溢出，然后将染液迅速冷却，冷却后过滤，并每100ml加入冰醋酸6ml，甘油10ml。
%盐酸酒精溶液配制方法：盐酸，70%酒精100ml2.材料：石蜡切片[操作流程]1.将石蜡切片置于烘箱中60℃烤1～2h；2.石蜡切片常规二甲苯，乙醇脱蜡至水，3.苏木素染10分钟，4.流水冲洗，去余色，5.0.7%盐酸乙醇分化数秒钟，6.流水冲洗，切片变蓝约15分钟，%乙醇30秒钟，8.酒精性伊红染30秒，95%乙醇30秒钟，95%乙醇30秒钟，100%乙醇30秒钟，%乙醇30秒钟，13.石碳酸二甲苯30秒钟，（1： 4石碳酸1-二甲苯4）二甲苯30秒钟，二甲苯30秒钟，16.中性树胶封片。
[实验结果]：镜下观察细胞核呈蓝色；细胞浆一般呈红色；胶原纤维呈不同程度的红色，红细胞呈亮红色；粘蛋白呈浅蓝色；钙化组织呈深蓝色等。
[。
巴氏染液配制
巴氏染液配制1、苏木精：Harris苏木精：苏木精5g溶于无水乙醇50ml ，硫酸铝钾100g溶于蒸馏水1000ml ，混合后煮沸，待稍冷加入氧化汞2.5g，再煮沸2min，用前加冰醋酸20ml改良Gill氏半氧化苏木精：苏木精2g, 无水乙醇250ml, 硫酸铝17.6g,（可减半量）碘酸钠0.2g, 柠檬酸2g，甘油50ml, 蒸馏水750ml。
配制方法：将苏木精溶于无水乙醇，硫酸铝溶于蒸馏水，完全溶解后两液混合，依次加入碘酸钠，柠檬酸，甘油。
此配方特点：配制时勿须加温。
配后即可应用。
性能稳定，基本消除了过度氧化的苏木精结晶污染涂片的麻烦。
唯染色时间较长，须5～10min。
2、桔黄G6(orangeG6)：桔黄G 0.5g，溶于95%酒精100ml, 加磷钨15mg。
3、EA染液：EA36：由三种贮备液按比例混合而成：0.5%亮绿(light green)酒精溶液45ml，0.5%裨士麦褐(bismark brown)酒精溶液10ml，0.5%伊红Y(eosin yellowish)酒精溶液45ml，混合后，再加磷钨酸0.2g，饱和碳酸锂水溶液1滴。
EA50：3%亮绿水溶液10ml，纯甲醇250ml，20%伊红Y 水溶液20ml，冰醋酸20ml，磷钨酸2g (水溶后加入)，95%酒精700ml 。
染色方法1、经固定的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精分化、返兰同HE染色。
2、70%、80%、95%酒精逐级脱水各1min。
3桔黄G6 3～ 5 min 。
4、95%酒精二缸漂洗各 1 min 。
5、EA36或EA50 5 min 。
6、95%酒精二缸漂洗各 1 min 。
7、无水酒精二缸漂洗各 1 min 。
8、二甲苯二缸透明各 1 min 。
9、中性树胶封片。
染色结果核深蓝色, 鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞浆染绿色，表层不全角化细胞胞浆染粉红色, 完全角化细胞胞浆呈桔黄色, 红细胞染鲜红色，粘液染淡蓝色或粉红色。
苏木素染液的配制
苏木素染液的配制1) Harry`s苏木素苏木素 1g无水酒精10ml硫酸铝钾 20g蒸馏水 200ml氧化汞 0.5g冰醋酸 8ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，然后两液混合并煮沸，加入氧化汞，继续加热和搅拌至溶液为深紫色，立即冷却，恢复至室温后过滤备用。
(2) 改良Lillie-Mayer`s苏木素苏木素 2.5g无水酒精 20ml硫酸铝钾 5g蒸馏水330ml碘酸钠250mg甘油150ml冰醋酸 10ml分别用无水酒精溶解苏木素，蒸馏水溶解硫酸铝钾，然后两液混合后，依次加入碘酸钠、甘油和冰醋酸。
(3) Mayer`s苏木素苏木素100mg蒸馏水100ml碘酸钠 20mg硫酸铝铵 5g柠檬酸100ml水合氯醛 5g用蒸馏水溶解苏木素后，依次加入碘酸钠、硫酸铝铵和水合氯醛，过滤后备（4）Ehrlich氏苏木素（1886）苏木素1g无水酒精50ml甘油50ml硫酸铝钾 7.5g蒸馏水50ml冰醋酸5ml将苏木素溶于无水酒精里，硫酸铝钾溶于蒸馏水中，然后所有的试剂都加在一起，充分搅拌均匀后，放于窗台上阳光充足的地，让其慢慢氧化成熟，大约需四个星期，才可使用。
该液量种很好的细胞核染色液，用它染后，细胞核染色清晰，不易过染。
对于用酸脱钙组织细胞核的染色，该试剂优于其它各种苏木素。
这种自然氧化成熟的苏木素，可长期使用，不会变质。
但染色时间较长，需要20分钟以上。
如需急用而苏木素又未成熟时，该液可加入20-30mg的碘酸钠，以促使其迅速氧化成熟，但这试剂配成后，就不是原来的苏木素，不能长期使用，但起码可用半年左右。
（5）Weigert氏铁苏木素A液：苏木素 1g无水酒精100ml将苏木素溶于酒精，让其慢慢氧化成熟，约四周以后，便可以使用，或者用成熟的10%的苏木素酒精配制，即时可用。
B液：29%三氯化铁水溶液 4ml蒸馏水95ml盐酸1ml临用时，取A液和B液等份混合，即可使用，在4小时内使用完毕，如果超时，这种试剂便过分氧化而失效。
苏木素染色液说明书
苏木素染色液说明书【产品名称】通用名称：苏木素染色液英文名称：EnVision TM FLEX Hematoxylin (Link)【包装规格】3×45mL【预期用途】用于对组织细胞切片中的细胞核染色。
【主要组成成分】苏木素水溶液【储存条件及有效期】室温下避光保存。
有效期12个月。
【适用仪器】组织染色机（Autostainer Link 48）【检测方法】1.检测步骤1)将抗原修复液按照1：50比例配制好，放置在免疫组化预处理系统（PT Link）中2)运行免疫组化预处理系统（PT Link）至65度，将切片放置在抗原修复液中3)加热至95度，持续20分钟，降温至65度4)将切片取出放置在洗脱缓冲液工作液中，5分钟后，放置在自动染色系统上染色5)过氧化物酶阻断剂5分钟6)洗脱缓冲液工作液冲洗7)一抗20分钟8)洗脱缓冲液工作液冲洗9)二抗20分钟10)洗脱缓冲液工作液冲洗11)DAB显色10分钟12)自来水冲洗13)苏木素染色液复染5分钟14)自来水冲洗15)70%酒精，80%酒精，90%酒精，100%酒精，100%酒精各2分钟16)二甲苯透明5分钟17)二甲苯透明5分钟18)封片2.质量控制程序1) 每次染色过程中都应当同时对一份已知的阳性对照标本进行染色，以确定染色时所使用的全部试剂是否有效。
若阳性对照标本没有出现阳性染色结果，此次检测样本的标记过程应当视为无效。
2) 应当同时采用阴性对照试剂对每份标本进行染色，以排除发生非特异性染色的可能性。
如果不能明确区分非特异性染色和特异性染色，此次检测样本的标记过程应当视为无效。
更多信息及使用说明请参见DAB染色液试剂盒（代码K8002）使用说明书和Dako自动染色系统（Autostainer Link 48）仪器操作手册。
【检测结果的解释】含有DAB的底物缓冲液可以在一抗所识别的目标抗原部位产生褐色。
阳性对照样本应当在其目标抗原的预期部位出现褐色。
改良型Mayer's苏木素染液使用说明书
杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://
1 改良型Mayer's 苏木素染液
改良型Mayer's 苏木素染液
改良型Mayer's 苏木素染液是由氧化的苏木精和铝离子组成的复合体，可将细胞核染成蓝色。
染液无乙醇，无汞。
可清晰并锐利的对核进行染色，无背景染色。
可用于免疫组化DAB 或AEC 后的复染。
实验流程
1. 免疫组化常规操作完成后，DAB 或AEC 显色（HRP 系统）。
2. 显色强度合适时，用自来水冲洗终止显色。
•
3. 甩去样品上的自来水，滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织，复染 30sec~3min 。
4. 用自来水完全冲洗掉复染液，PBS 或去离子水浸泡切片3~5min ，使胞核返蓝。
5. 脱水、透明、封片。
•
注意事项
HE 染色是一个对经验要求非常高的染色，上述实验流程中所提供的染色时间都是参考时间，要根据实验原理，结合具体情况而定。
结果
细胞核：蓝色。
温馨提示
1. 为了您的自身安全，使用试剂前，请做好防护，如穿实验服，戴手套等。
2. 试剂应保存于阴凉、干燥、通风良好的环境中。
储存温度
避光储存于室温。
包装清单 货号
品名 包装 HCY108
改良型Mayer's 苏木素染液 100mL 说明书 1份。
苏木精等染料的配制
常用染料的性质和配制（1）代氏（Delafield's）苏木精苏木精4g95％酒精25ml苏木精溶解后，逐滴加入加热（80℃）溶化的10％钱明矾水溶液400ml中，瓶口用纱布封盖，放置光线充足处，3—4天后过滤后再加入：甘油100ml甲醇100ml数日后过滤，两月后成熟，溶液变为蓝紫色，方可使用。
放置时间愈长，染色力愈强。
此染液为动、植物最常用的细胞核染色剂。
染色时间一般为3—5分钟，染色后，细胞质亦稍染上颜色，需用0.1％盐酸水溶液褪去细胞质颜色，保存细胞核颜色，这种区别作用称为分色。
（2）爱氏（Ehrlich's）苏木精苏木精2g纯酒精100ml冰醋酸10ml甘油100ml蒸馏水100ml钾明矾2—3g先将苏木精溶于25ml酒精，再加甘油和醋酸。
然后将其余75ml酒精加入。
将钾明矾溶于水中，加热使其溶化，然后慢慢加入苏木精液中，随加随搅，混合后，应放在有光和通风处3星期使其成熟，成熟后为深红色，即可使用。
用法与代氏苏木精一样，染细胞核结果极好。
用稀释液慢染脊椎动物胚胎及无脊椎的幼虫，作整体染色效果颇佳。
（3）铁矾苏木精液（又名Heidenhain's苏木精液）苏木精0.5g95％酒精10ml重蒸馏水90ml将苏木精先溶于10ml酒精中，然后慢慢倒入重蒸馏水中，瓶口用纱布扎紧静置于有光处。
约1个月后，苏木精被氧化，溶液变为深琥珀色，即可用。
此时要将瓶塞塞好。
此液可以放置很久，是较好的染核结构的染色剂。
（4）伊红（Eosin）伊红又称曙红，为染胞浆、胶原纤维、肌纤维及嗜酸性颗粒等常用的染料，是一种酸性染料。
伊红的种类很多，一般分水溶和酒溶两种。
伊红配法很简单，水溶液一般用0.1—1％，酒精溶液用60—96％酒精溶化，浓度与水溶液相同。
（5）苏丹（Sudan）Ⅲ苏丹Ⅲ 0.3—0.5g70％酒精100ml（6）莱氏（Wright's）染料莱氏染料（粉末）0.1g甲醇（A．R）60ml先把染料放入研钵研细后，加入少量甲醇反复研磨，最后将全部甲醇加入研匀后，用吸管吸入棕色瓶保存备用。
苏木染色方法
苏木染色方法
苏木染色是一种常用的组织染色方法，广泛应用于生物学和医学领域。
它可以用于染色细胞核、细胞质、胶原纤维、肌纤维等，是一种简单易行、效果明显的染色方法。
下面将介绍苏木染色的方法和步骤。
首先，准备好实验材料和试剂。
所需材料包括玻璃片、玻璃片夹、显微镜载玻片、苏木精染液、脱水酒精、蜡烛或加热平台等。
苏木精染液的配制方法为将苏木精溶解于75%酒精中，制成0.1%的苏木精染液。
接着，取细胞组织标本，将其固定在玻璃片上。
固定方法可以采用甲醛固定或乙醇固定等方法。
固定后的组织标本要经过脱水、透明和浸蜡等步骤，以便组织切片。
然后，将组织切片放置在玻璃片上，用苏木精染液浸泡片上的组织。
浸泡时间一般为5-10分钟，可以根据需要适当延长。
浸泡后，将组织切片在脱水酒精中脱水，然后透明，最后在载玻片上封片。
最后，将封好的载玻片放置在显微镜下观察。
苏木染色后的组织细胞会呈现出深蓝色或紫色，细胞核染色明显，细胞质和胶原纤维也能清晰显示。
苏木染色方法简单易行，适用于各种类型的组织标本。
它不仅可以用于常规的生物组织染色，还可以用于病理组织学的研究。
在实际操作中，需要注意控制好染色时间和浓度，以保证染色效果的稳定性和一致性。
总之，苏木染色是一种重要的组织染色方法，具有操作简便、染色效果好的特点。
掌握好苏木染色的方法和技巧，对于生物学和医学研究都具有重要意义。
希望本文介绍的苏木染色方法能对您有所帮助。
HE染色中(Harris)苏木素液的配制
B组在切片使用量和时间及降低成本方面均优于A组
3.讨论
HE染色是生物学和医学的细胞与组织学最为广泛应用的染色的方法。病理细结构。[1]苏木素液是HE染色中较关键的环节。经过改良的苏木素染液在切片使用量和使用时间及价格上均优于市场的苏木素染液。
4.结论
改良的苏木素染液在切片使用量和使用时间及价格上均优于市场的苏木素染液。在病理学技术中值得推广的一种方法。
5.参考文献
[1]病理学技术2009：290人民卫生出版社。
6.附注
苏木色精(上海伯奥生物科技有限公司)。
1.材料与方法
1.1材料
甲液：苏木色精4克无水乙醇40ml
乙液：硫酸铝钾80克蒸馏水800ml
黄色氧化汞2克
1.2方法
甲乙两液分别溶解后混合，加热煮沸后，徐徐加入氧化汞，（此时有大量气泡生成，故容器宜大，以防液体溢出），继续煮沸1～2分钟。然后置冰块缸中使溶液迅速冷却，过夜后过滤就可。使用时，每100ml加冰醋酸2～4ml。
HE染色中（Harris）苏木素液的配制
摘要】目的讨论HE染色（Harris）改良苏木素液配制。方法 用改良的苏木素配置液（B液）与市场买来的苏木素液（A液）在染色切片量和使用时间以及成本作比较。结果B液在染色切片用量和使用时间以及成本均优于A液。结论B液值得在病理学技术中值得推广。
【关键词】石蜡切片苏木色精硫酸铝钾氧化汞
2.结果
组织细胞中的细胞核经苏木素染成鲜明的蓝色。当溶液呈暗红色，如遇水即变蓝时，说明失效，不可再用。
改良苏木素染液（Harris）B液与市场买来苏木素染液(Harris)A液对比。
2组染色液的切片使用量与使用时间及价格作比较
使用切片量(张)使用时间（天）价格（元）
改良Harris苏木素染色液操作步骤及注意事项
改良Harris苏木素染色液操作步骤及注意事项货号:G1150规格:100ml/500ml产品说明：苏木素为碱性天然染料，可使细胞核着色。
细胞核内染色质的成分主要是DNA，在DNA双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
苏木素在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
操作步骤（仅供参考）：（一）石蜡切片染色1、切片脱蜡至水①二甲苯作用2次，每次5～10min。
②（可选）无水乙醇作用2次，每次3～5min。
③95%的乙醇3～5min④90%的乙醇3～5min⑤80%的乙醇3～5min⑥自来水或蒸馏水冲洗1～3min2、染色①改良Harris苏木素染色液5～8min②自来水或蒸馏水冲洗5～10s③（可选）1%盐酸乙醇分化2～5s④自来水冲洗20～30s⑤（可选）弱碱性水返蓝20～40s⑥自来水冲洗30～60s⑦伊红染色3～5min⑧自来水冲洗1～5s3、脱水、透明、封固①80%乙醇10～20s②90%乙醇10～20s③95%乙醇作用2次，每次1～2min。
④无水乙醇作用2次，每次2～3min。
⑤二甲苯透明3次，每次2～3min。
⑥中性树脂封片。
染色结果：细胞核呈蓝色；细胞质、肌纤维、胶原纤维、甲状腺胶质等呈深浅不一的红色；角蛋白、红细胞等呈明亮的橙红色。
（二）冰冻切片染色1、乙醚-乙醇混合固定液5～10s2、自来水冲洗2～5s3、改良苏木素染色液滴染1～2min(可加热至50℃)。
4、自来水冲洗2～5s5、（可选）1%的盐酸乙醇分化液2～5s6、自来水冲洗2～5s7、（可选）弱碱性水返蓝2～5s8、自来水冲洗5～10s9、伊红染色液染色2～5s10、水洗1～2s11、80%的乙醇1～2s12、95%的乙醇1～2s13、无水乙醇2～5s14、苯酚二甲苯（1:3）2～5s15、二甲苯透明3次，每次2～5s。
常规HE染色苏木素液配制改良法
常规HE染色苏木素液配制改良法
袁苏娟;马恒辉
【期刊名称】《现代医药卫生》
【年(卷),期】2004(020)015
【摘要】Harris明矾苏木素液是病理技术室最常用、最重要的HE染液之一，也为一般实验室所采用，几乎所有的常规切片、冷冻切片、涂片以及免疫组化后的复染均使用这种染液，它有很多优点，但也有不尽人意的地方，如使用期短，染片量多时约一个月就得更换一次；氧化结晶多，每次使用必须过滤，否则有一种发光的结晶物沉淀在切片上，推测这种物质可能是氧化汞在氧
【总页数】1页(P1526-1526)
【作者】袁苏娟;马恒辉
【作者单位】盐城市第一人民医院病理科,江苏,盐城,224006;南京军区南京总医院病理科,江苏,南京,210002
【正文语种】中文
【中图分类】R446
【相关文献】
1.苏木素染色液配制方法的改进 [J], 熊正文;安赵栓;胡海霞;苏红
2.宫颈液基细胞学HE染色中三种配方苏木素的比较与选择 [J], 霍云龙;董芳
3.苏木素贮备液配制法 [J], 李进辉
4.苏木素的配制在病理常规HE制片中的应用 [J], 杨月红;袁静萍
5.Harris氏苏木素染色液配制的改良 [J], 王美娥;潘惠娟;钱峰
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更简便适用的苏木素染液配制法
更简便适用的苏木素染液配制法
梁光荣
【期刊名称】《山西医药杂志》
【年(卷),期】1990(000)001
【摘要】一、试剂: 甲液:无水乙醇 50ml 苏木素 5g 乙液:自来水 500ml 钾明矾40g 另加:碘酸钠 0.5g 二、配制与使用: 先将苏木素全部溶于无水乙醇中。
再把钾明矾与自来水混合。
也可加热使其迅速溶解。
稍凉后将甲液缓缓到入乙液内。
轻轻摇荡,使甲、乙两液完全混合。
这时,可将碘酸钠放入摇荡至溶解,火上煮沸。
自然冷却,过滤后即可使用。
染色时间3～5′即可。
三、体会:目前常用的Harris苏木素染液配
【总页数】1页(P56-56)
【作者】梁光荣
【作者单位】山西医学院第一附属医院病理科
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.改良的苏木素-伊红染液配制法及应用 [J], 赵红艳
2.苏木素贮备液配制法 [J], 李进辉
3.苏木素染液简易配制法及应用 [J], 梅立新;张旭晨
4.一种再改良的Harris苏木素染液的最新配制法 [J], 黎红;周伟;茹景顺
5.一种改良Gill苏木素染液配法 [J], 章良敏
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一种改良苏木素染液的配制方法
目的准确控制苏木素染液配制过程中所需试剂的量，提高染色能力，节约成本。
方法准确称取苏木素2g，量取无水酒精150ml，用无水酒精彻底溶解苏木素，再依次加入碘酸钠240mg、硫酸铝钾20g、柠檬酸1g。
结果新配苏木素染液着色能力明显提高且无氧化膜产生，使用时间周期长，无需过滤。
结论染液配制简单，细胞核染色鲜艳，苏木素用量少，减少浪费。
标签：苏木精；氧化；方法苏木素-伊红染色法，也就是我们常说的HE染色技术。
是各个医院实验室最常用的染色方法，也是各病理科最经典的染色技术。
然而苏木精染液的配制是HE染色技术的核心，它决定染色质量的优劣。
一般Harris苏木精染液的配制[1]时所需苏木素多，配制较为繁琐，也具有一定的危险。
为了节约成本，减少浪费，我们摸索一套自己的配制方法。
1 资料与方法
1.1一般资料苏木素2g，无水酒精150ml，碘酸钠240mg，硫酸铝钾20g，柠檬酸1g，蒸馏水800ml。
1.2方法取一只2000ml烧杯，苏木素2g，无水酒精150ml，将酒精和苏木素倒入烧杯中，将烧杯置于磁力搅拌器进行搅拌10min，苏木素完全溶解后，加入800ml蒸馏水，搅拌5min后，加入碘酸钠240mg搅拌5min，再加入20g硫酸铝钾，搅拌40min。
待苏木红也硫酸铝钾完全结合后，最后加入1g柠檬酸终止氧化，搅拌5min后加入甘油120ml，搅拌2h。
棕色瓶盛装，放入阴暗地方室温保存2w后直接使用。
2 结果
苏木素染液无需过滤，无沉渣和氧化膜形成。
染液着色能力强，切片染色蓝化后，细胞核着色清晰，細胞质清晰可见，呈鲜艳的蓝色。
大大减少了试剂的消耗。
3 讨论
苏木精为一种无色或谈灰黄色粉末，分子式为C16H14O6，分子量302.288。
它是一种天然染料，是由中南美洲等地产的一种称”洋苏木素树”（hematoxylon campechianum）的树芯中提取出来的。
苏木素的配方很多，其原理是一样的，都是先氧化，使苏木素的分子结构失去两个氢原子，并使其中的一个苯环转化成具有醌型结构的苯环而成为苏木红（hematein）[2],并在媒染剂的作用下，与细胞核染色质结合。
常用的氧化苏木素的方法有两种：一是自然氧化。
但是氧化时间周期过长，而氧化的程度也难以掌握；所以现在实验室一般采用的是第二种方法，即人工氧化的方法，人工氧化就是在染液中加入氧化剂，达到快速氧化苏木素的目的。
氧化剂的种类很多，如高锰酸钾、过氧化氢、氧化汞、碘酸钠等，现在大
多数实验室都基本选择氧化汞和碘酸钠。
因为采用氧化汞氧化苏木素，存在以下问题：①需要煮沸；②苏木素用量大且易产生大量的氧化物漂浮在染液的表面，污染切片，不易洗净，以致影响镜检；③使用氧化汞对环境和人体都有一定的危害；④配制复杂，不易掌握氧化程度[3]，所以我们科室选用碘酸钠。
它的优点是室温就可以氧化苏木素，氧化后产生的碘化钠也是无害的，染液的稳定性好。
我们选用半氧化苏木素，这样染液中同时有苏木素、苏木红、苏木红的活性氧化产物和非活性的超氧化产物的存在，染液效果稳定，且使用时间长。
通过四次配制，连续半年的使用，我们发现新配的苏木素在37℃染色更佳。
并且染色时不需要分化，也不需要额外地加入冰醋酸。
新配的苏木素经滴染滤纸法检测，色层环宽，呈深蓝色，色环内为大片暗橘黄色，染色力强、效果好[4]。
在各种苏木素染液配制中，1g苏木素所使用的媒染剂极为悬殊，我们这里1g苏木素，使用媒染剂为10g，减少了染液在染色过程中硫酸铝钾结晶的析出，防止结晶析出，污染切片。
无水乙醇能较快溶解苏木精。
配制过程中加入2g柠檬酸，可抵消氧化剂的氧化，是苏木精和苏木红在溶液中保持平衡，同时又增加了细胞核的选择性，使细胞核染色清晰、细致，还可防止霉菌生长。
甘油延缓了苏木精染液蒸发，防止苏木精过度氧化，延长了苏木精染液的使用时间。
参考文献：
[1]王伯沄，李玉松，黄高昇，等.编著.病理学技术[M].北京：人民卫生出版社，2000.133.
[2]梁英杰，凌启波，张威，编著.临床病理学技术[M].北京：人民卫生出版社，2011.68.
[3]李纪理《改良Harris苏木素液染色效果的观察[J].临床和实验医学杂志，2008，7（9）：151.
[4]王颖，薛世泉，张泽兵，等.测试苏木精和VG染液的滴染滤纸法[J].诊断病理学杂志2010.8：308.。