球蛋白标准操作规程
直抗人球蛋白试验操作规程
直抗人球蛋白试验操作规程1. 引言直抗人球蛋白试验是一种常用的实验方法，用于检测人体血液中球蛋白的含量。
这个操作规程旨在提供进行直抗人球蛋白试验的详细步骤和注意事项，以确保实验结果的准确性和可重复性。
2. 实验材料•直抗人球蛋白试剂盒：包括试剂A、试剂B、试剂C等。
•96孔酶标板：用于进行反应的载体。
•微量移液器和相应的移液头。
•20μL、200μL和1000μL的移液枪。
•酶标仪：用于测量光密度的仪器。
3. 实验步骤步骤一：样本预处理1.1 收集人体血液样本，并放置于无菌离心管中。
1.2 将血液样本离心10分钟，以分离血浆。
1.3 将血浆转移至新的离心管中，并离心10分钟，以去除细胞残渣。
步骤二：试剂准备2.1 打开直抗人球蛋白试剂盒，取出试剂A、试剂B和试剂C，并放置在实验台上。
2.2 适量的稀释试剂A，根据试剂盒中的说明书的建议稀释比例。
2.3 静置室温约1小时，使稀释后的试剂A达到室温。
步骤三：酶标板涂布3.1 打开96孔酶标板，用100μL稀释后的试剂A将每孔涂布。
3.2 将酶标板在4°C冰箱中静置过夜。
步骤四：反应孔操作4.1 准备一个新的96孔酶标板，并标记每个孔。
4.2 用吸管将25μL的血浆样本分别加入每个孔中。
4.3 加入100μL试剂B，并慢慢混合。
4.4 静置30分钟，在37°C恒温摇床上进行孵育。
步骤五：洗涤5.1 用洗板机将反应孔中的液体彻底清除。
5.2 使用洗涤缓冲液进行洗涤，每个孔洗涤3次。
步骤六：酶标反应6.1 加入100μL试剂C，并慢慢混合。
6.2 再次静置30分钟，在37°C恒温摇床上进行孵育。
步骤七：终止反应7.1 加入100μL终止液，停止反应。
步骤八：测量光密度8.1 将酶标板放入酶标仪中。
8.2 选择适当的检测波长，测量每个孔的光密度值。
4. 注意事项•所有实验操作必须在洁净无菌的环境下进行，以避免污染。
•严格按照试剂盒说明书中的稀释比例来制备试剂，避免试剂使用不当。
最新间接抗人球蛋白试验标准操作规程名师精编资料汇编
间接抗人球蛋白试验标准操作规程(微柱卡式法)一、目的为规范抗人球蛋白（Coombs 试验）的技术操作，保证试验的结果的准确性，为临床诊断及治疗提供依据，特制定本规程。
二、使用范围适用于输血科进行抗人球蛋白试验的操作。
三、职责输血科技术人员负责抗人球蛋白试验的操作。
四、原理利用抗人球蛋白血清可与体内已被不完全抗体或补体致敏红细胞产生凝集反应，可检查红细胞是否已被不完全抗体所致敏，如新生儿溶血病(胎儿红细胞被母亲血型抗体致敏)、溶血性输血反应(输入的不相合红细胞被受血者不完全抗体致敏)、自身免疫性溶血性贫血(患者红细胞被自身抗体致敏)以及药物诱导产生的自身抗体（由甲基多巴类药物、青霉素等所致）。
五、试剂及材料(一)试剂：抗人球蛋白检测卡（西班牙 Diagnostic Grifols,S.A公司生产）、IgG 抗D、正常人AB血清(二)设备：戴安娜专用离心机（型号：DG SPIN）、戴安娜专用孵育器（型号：DG THERM）、微量移液器、离心机、试管等六、标本要求：(一)抽取受血者抗凝（抗凝剂为EDTA.K2）静脉血2-3ml,在3000r/min条件下离心5分钟备用。
(二)标本保存：血液样本必须密封，2-8℃保存7天。
七、操作步骤(一)标本及其他试剂处理：1、实验前将未开的抗人球蛋白检测卡放置于戴安娜专用离心机离心9分钟左右，取出待用2、离心标本取血清备用（或准备已知抗体的血清）3、配制1%已知抗原红细胞悬液（或1%受检红细胞悬液）4、1%D阳性红细胞：任选3个O型D阳性红细胞混合，配成1%红细胞悬液(二) 在抗人球蛋白检测卡上标明患者姓名、病房床号、阴性和阳性对照，撕掉卡上的封条(三)按下表将各种反应物加入相应反应孔中。
间接抗人球蛋白试验操作步骤反应物待测孔阳性对照孔阴性对照孔血清（已知或受检）25ul －－1%红细胞悬液（受检或已知）50ul －－IgG抗D血清－25ul －1%D阳性O型红细胞悬液－50ul 50ulAB型血清－－25ul(四) 将卡放入37℃孵育箱15分钟，移出放入离心机9分钟，取出观察结果。
抗球蛋白试验标准操作规程(sop)
抗球蛋白试验标准操作规程一、目的规范抗球蛋白的技术操作，保证鉴定结果准确有效。
二、适用范围输血科日常抗球蛋白试验。
三、原理本试验是一种检测血清中不完全血型抗体的方法。
即用已知抗原的红细胞测定受检血清中相应的不完全抗体，或用已知抗血清测定受检红细胞上相应抗原。
此法可用于鉴定血型和检查血清中不完全抗体、输血前交叉配血试验及其他特殊研究。
四、设备与试剂试剂：（1）抗人球蛋白血清（2）受检血清（或已知抗体的血清）（3）5 ％已知抗原的红细胞悬液（或5 ％受检红细胞悬液）（4）不完全抗D 血清（5）AB 型血清（6）5 ％阳性红细胞悬液设备：普通离心机，血型血清学专用离心机，显微镜。
五、步骤和方法1．方法（1）取试管3 支，标明受检管、阳性对照及阴性对照。
（2）按下表将各反应物加入相应试管内。
（3）混匀，置37 ℃水浴1 小时，用生理盐水洗涤3 次。
末次洗涤后，将上清液除尽，并用滤纸将附着于管口的盐水吸去，每管各留红细胞悬液1 滴。
（4）每管各加适当浓度抗人球蛋白血清1 滴，混匀，以1000r／min 离心1min ，观察结果。
（5）结果判定。
阳性对照管凝集，阴性对照管不凝集，受检管出现凝集者为阳性，表示受检血清中有不完全抗体（或受检红细胞上有相应抗原），如阳性或阴性对照出现不规则结果应分析原因。
（6）效价滴定。
如受检血清中检出有不完全抗体，可将受检血清以盐水作倍量稀释后，按上法进行测定。
六、注意事项（1）血清与相应红细胞在37 ℃水浴中致敏的时间经研究发现，如致敏1 小时，75 ％的抗体吸附于红细胞上，如致敏时间延长达2 小时，抗体吸附达95 ％；如以低离子强度盐水溶液（LISS）代替生理盐水配制5 ％红细胞悬液，则致敏时间可减少，大多数抗体经致敏15 ～30min 即可，但抗Fy 和抗Jk 抗体需较长的孵育时间。
（2）红细胞洗涤应迅速，不应当中断停止，洗涤用盐水要足量，并用力冲入管底，使压积于管底的细胞分离。
抗人球蛋白试验标准操作规程
抗人球蛋白试验标准操作规程1.目的为规范抗人球蛋白试验（Cooms试验）的技术操作，保证试验结果的准确性，为临床诊断及治疗提供依据，特制定本规程。
2.适用范围适用于输血科（血库）进行抗人球蛋白试验。
3.职责输血科（血库）技术人员负责抗人球蛋白试验的操作。
4.原理利用抗人球蛋白试剂可与致敏在红细胞上的抗体和（或）补体结合，使红细胞出血肉眼可见的凝集的原理，检测红细胞是否被抗体和（或）补体致敏。
5.所需设备和试剂设备普通离心机，血型血清学专用离心机，电热恒温水浴箱，普通显微镜。
试剂抗人球蛋白试剂（多特异性或单特异性），IgG抗-D试剂，AB型血清（红细胞不规则抗体筛选阴性），10%O型、RhD阳性红细胞悬液。
6.检测环境条件室温应保持在18-27℃，湿度应保持30%-70%。
7.步骤与方法7.1抗人球蛋白试验阴、阳性对照及DAT阳性红细胞的制备7.1.1抗人球蛋白试验阴性对照：取3%O型、RhD阳性红细胞悬液50ｕl,加入AB型血清（红细胞不规则抗体筛选阴性）100ｕl，37℃孵育30min，用生理盐水充分洗涤3次，每次洗涤后将盐水倒尽，以滤纸将管口残余的盐水吸去，最后1次洗涤滤干后加入抗人球蛋白试剂100ｕl，混匀，以120g离心1min后镜检应无凝集。
7.1.2 抗人球蛋白试验阳性对照及DAT阳性红细胞的制备：取10%O型、RhD阳性红细胞悬液100ｕl，加入IgG抗-D试剂600ｕl，37℃孵育30min，用生理盐水充分洗涤3次，每次洗涤后将盐水倒尽，以滤纸将管口残余的盐水吸去，最后1次洗涤滤干后加入生理盐水500ｕl，配成浓度约为2%的红细胞悬浮液备用，取该红细胞悬液50ｕl加抗人球蛋白试剂100ｕl，混匀，以120g离心1min后肉眼观察红细胞应显凝集（阳性对照）。
配制的2%红细胞悬液即为DAT阳性红细胞悬液。
7.2 DAT步骤试验管取受检者3%红细胞悬液50ｕl，用生理盐水充分洗涤3次，每次洗涤后将盐水倒尽，以滤纸将管口残余的盐水吸去，最后1次洗涤滤干后加入抗人球蛋白试剂100ｕl，混匀，以120g离心1min，肉眼观察有无凝集，若不见凝集，以显微镜观察，并记录结果。
医院直接抗球蛋白试验(DAT)标准操作规程
直接抗球蛋白试验（DAT）标准操作规程
1.目的直接检测体内已被抗体或补体致敏的红细胞。
2.适用范围主要用于自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病和溶血性输血反应的检查。
3.所需仪器和材料离心机、水浴箱、抗球蛋白试剂等。
4.执行标准《临床检验操作规程》。
5.原理将抗球蛋白血清加入已经致敏的红细胞盐水悬液中，红细胞表面被结合的抗体球蛋白与抗球蛋白试剂的抗体发生特异性反应，使红细胞发生凝集而判出红细胞表面是否含有被致敏的抗体或补体。
6.操作程序取试管1支加患者红细胞标本0.05ml，用足量生理盐水洗涤红细胞3-4次，每次倾倒盐水沥干，然后加最适稀释度抗球蛋白血清0.05ml,-1ml,混匀，1000r/min离心，1分钟取出，立即轻轻摇动试管观察结果。
结果判断⑴红细胞凝集为阳性，表明体内红细胞已被抗体和(或)补体致敏；⑵红细胞不凝集为阴性，置室温5分钟，再离心观察结果，如红细胞凝集，是补体反应的结果；如红细胞不凝集，应在反应试管中加入0.05ml对照细胞（即被IgG或C3包被的标准O型红细胞），混匀后，立即离心观察结果，如对照细胞阳性，上述阴性结果可靠，如对照细胞阴性，阴性结果不可靠，可能是洗涤不成功，或抗球蛋白试剂失效。
直接抗人球蛋白试验操作规程
XXX医院直接抗人球蛋白试验操作规程1.目的保证试验结果的准确性，确保临床输血安全。
仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录合格证件的正品。
9.试剂保存和性能指标9.1.保存：直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d）应置于2~8℃冷藏保存，切勿反复冻融。
储存条件下有效期为24个月。
9.2.性能指标：直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d）为多特异性试剂。
外观：应澄清透明，无杂质；灵敏度试验：分别与强抗体[抗D(IgG)]，中等强度抗体(抗Jka)和弱抗体(抗Fya)致敏细胞反应，结果均为阳性。
/分③加入2滴抗IgG,C3d，以3400转/分钟（1000g）离心15秒。
④将取出的试管持一定角度并轻轻摇动直至松动所有的细胞，然后反复倾斜试管，直至呈现均匀的细胞悬液（阴性）或凝集物（阳性）为止。
⑤用肉眼或借助光学显微镜观察凝集情况，并按凝集程度进行初步判读结果并记录。
⑥若初步判读结果为阴性，则在室温中放置5~10分钟，再离心一次，重新判读结果并记录。
⑦阳性对照试验（IgG抗D致敏细胞）：将1滴阳性对照细胞加入干净的试管中；再加入2滴直接抗人球蛋白试剂（抗）1分红细胞不凝集为阴性反应，表示红细胞上没有相应抗体存在。
13.质量控制与注意事项①红细胞洗涤不充分，微量残留的未结合的球蛋白将中和抗人球蛋白试剂，影响试验结果的准确性。
②直接抗人球蛋白试验的试管在初读结果之后，应再放在室温中5~10分钟，这样孵育后，对C3d或IgA致敏红细胞有增强作用，重新离心后观察结果可使初判的阴性结果转变为阳性结果；而IgG致敏的红细胞在孵育后反应可能会更弱。
③试剂中含有0.1%W/V叠氮钠，若摄入人体会引起中毒。
④直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d）为体外诊断试剂。
15-间接抗人球蛋白试管法操作规程---作业指导书
操作人员
3.1.1负责对检测标本进行Rh(D)血型鉴定的具体操作和编写实验报告单
仪器管理人员
3.2.1负责相关仪器的日常保养
3.2.2负责相关仪器的维护
质量监督员
负责操作过程监督，仪器室内质量控制
科室主任或授权者负责检测报告审核
实验原理
间接抗人球蛋白实验是检测红细胞在体外致敏的方法。
可用已知抗原红细胞测定受检血清中相应的不完全抗体，或用已知抗体的抗血清测定受检红细胞上相应抗原，红细胞与血清在体外孵育后成为致敏红细胞，与抗球蛋白血清中的抗体发生特异性反应，使红细胞发生凝集。
常用于血型鉴定，抗体的检出和鉴定，输血前交叉配血实验以及其他的特殊研
不符合要求，外包装明显污染；标本有发生污染、溶血、脂血等情况。
试管法
6.2.1取小试管3支，分别标记被检者、阳性对照、阴性对照，按下表将各反应物加入相应试管中。
间接抗人球蛋白实验
反应物被检管阳性对照管阴性对照管
被检者血清1 2滴——
5%已知抗原的红细胞悬液2 1滴——
不完全抗D血清— 2滴—
5% Rh(D)阳性红细胞悬液— 1滴 1滴
AB型血清—— 2滴
注：如检查特殊红细胞抗原，则将1改为已知抗体的血清，将2改为5%被检者红细胞悬液。
6.2.2混匀，置37℃水浴30min
6.2.3取出试管，以1000g离心1min，弃去上清液，将管底红细胞摇匀，用生理盐水洗涤。
检验科本周蛋白检测标准操作规程
检验科本周蛋白检测标准操作规程1.【检验目的】为了规范本周蛋白定性检测方法，特制定本规程。
2.【职责】2.1实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.2本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【样本类型及实验前准备】3.1样本类型：新鲜尿液3.2患者准备：患者处于安静状态精神、体力、情绪等因素的影响较小。
3.3容器添加剂类型：配套小便试管3.5实验试剂：2g/L磺基水杨酸溶液。
2mol/L 醋酸盐缓冲溶液(PH4.9±0.1):取醋酸钠(CH3COONa-3H2O)17.5g,加冰醋酸4.1ml,再加蒸馏水至1ml,调PH至4.9.4.【测定原理】本-周氏蛋白又称凝溶蛋白，是一种免疫球蛋白的轻链或其聚合体。
此种蛋白在一定的PH条件下加热至40-60P时沉淀发生，温度升高至1P时，沉淀消失，再冷却时又可重现沉淀。
5.【操作步骤】5.1将尿液用磺基水杨酸法作蛋白定性检查，如呈阴性反应，也需对尿液标本中本-周氏蛋白进一步检测。
5.2取透明尿液4 ml于试管中，再加入乙酸缓冲液1 ml，混匀后放置56P水浴中15分钟，如有浑浊或出现沉淀，再将试管放沸水中煮沸3分钟，观察试管中浑浊或沉淀的变化。
如浑浊变清、减弱或沉淀减少均提示本-周氏蛋白阳性。
若煮沸后，浑浊增加或沉淀增加，表明此尿液中还有其他蛋白质，此时应将试管从沸水中取出，立即过滤，如滤液开始透明，温度下降后浑浊，再煮沸时又透明，提示本-周氏蛋白为阳性。
6.【结果计算与判断】如浑浊变清，浑浊减弱或沉淀减少，均提示本-周氏蛋白阳性。
若煮沸后，浑浊增加或沉淀增多，表明此尿液中还有其他蛋白质，此时应将试管从沸水中取出，立即过滤。
如过滤开始透明，温度下降后浑浊，再煮沸时透明，提示本-周氏蛋白为阳性。
7.【生物参考区间】8.【临床意义】8.1 一般认为当浆细胞增殖时，可能有过多的轻链产生或重链的合成被抑制，致使过多的轻链通过尿液排出。
抗人球蛋白试验操作规程
抗人球蛋白试验操作规程抗人球蛋白试验（又称Coombs试验）分为直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验，直接抗球蛋白试验是直接把抗球蛋白加入患者的红细胞悬液中，若红细胞已被抗体致敏便出现凝集，用以检测红细胞表面结合的抗体，如新生儿溶血病和自身免疫性溶血性贫血的检查。
间接抗球蛋白试验是将已知（未知）抗原的红细胞和未知（已知）抗体的血清混合，然后加入抗球蛋白血清，若抗原抗体相对应，即出现可见的红细胞凝集。
用以检测游离于血清中的抗体，亦可用已知抗原的红细胞检测血清中的相应抗体效价，输血前的交叉配血或不相容输血后的抗体测定。
抗球蛋白血清除了可以测定红细胞上IgG抗体外，还可以测定IgM和IgA，也可以测定补体组分（C3、C4）。
9.1目的规范抗球蛋白试验的技术操作，保证试验结果的准确性，为临床进行诊断及治疗提供依据。
9.2职责输血科(血库)技术人员负责抗球蛋白试验。
9.3适用范围适用于临床须进行抗球蛋白试验的各种血标本。
9.4原理9.5所需材料和设备9.5.1材料抗球蛋白试剂、IgG抗-D抗体、AB型血清、3%Rh（D）阳性红细胞悬液、患者血标本。
9.5.2 设备普通离心机、血型血清学专用离心机、电热恒温水浴箱。
9.6检测环境条件室温应保持在18～27℃，湿度应保持30%～70%。
9.7操作步骤9.7.1 直接抗球蛋白试验9.7.1.1取受检者红细胞，以生理盐水充分洗涤3次，末次洗涤后将上清液倒尽，用滤纸将管口残余的盐水吸去，再配成3%红细胞盐水悬液。
9.7.1.2取试管3支，分别标记好受检者、阳性对照、阴性对照。
其中受检者试管中加入3%受检红细胞盐水悬液1滴，再加入抗球蛋白血清1滴，混匀。
9.7.1.3阳性对照管抗球蛋白血清1滴，IgG抗-D致敏的3% RhD阳性红细胞盐水悬液1滴，混匀。
9.7.1.4阴性对照管抗球蛋白血清1滴，AB型血清致敏的正常人3% Rh（D）阳性红细胞悬液1滴，混匀。
9.7.1.51300g离心15s，肉眼观察有无凝集，若肉眼不见凝集，以显微镜检查，记录结果。
抗甲状腺球蛋白(Anti Tg)标准操作规程
抗甲状腺球蛋白（Anti Tg）标准操作规程1.【实验目的】为了保证抗甲状腺球蛋白（Anti Tg）测定结果的准确性，以及可靠性。
2.【职责】2.1 实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.2 本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【样品类型及实验前准备】3.1 样本类型：血清和血浆：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA、肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本，无黄疸、无溶血、无脂血，已分离出的样本应立即分析。
稳定性： 2－8℃可稳定3天。
样品贮存于－10℃或更低温度下30天没有表现出性能方面的差异。
3.2 患者准备：实验前正常饮食，晨起空腹，安静状态下抽取静脉血，条件特殊情况下可非空腹抽血检测。
3.3 容器，添加剂类型：血清（包括在血清分离器管中采集的血清），血浆（EDTA三钾、肝素锂、肝素钠），使用玻璃管或塑料管分离样本。
3.4 仪器设备:雅培ARCHITECT i1000SR, 低速离心机3.5 实验试剂：3.5.1.1 ARCHITECT Anti Tg试剂盒（2K52）人甲状腺球蛋白包被的磁性微粒子吖啶酯标记的抗人IgG(鼠单克隆)MES缓冲液中3.5.1.2其他试剂：激发液、预激发液、清洗缓冲液（需另行配置）3.5.2 校准品：Anti Tg校准品 LIST NO：2K46-01名称：美国雅培i1000SR规格浓度 (IU/mL) 体积(ml)校准品A 0.0 4.0校准品 B 5.0 4.0校准品 C 62.5 4.0校准品 D 125.0 4.0校准品 E 500.0 4.0 校准品 F 1000.0 4.03.5.3质控品名称：美国雅培i1000Anti Tg质控品 LIST NO：2K46-10SR水平浓度 (IU/mL) 范围 (IU/mL) 体积(ml)质控— 0.5 ≤2.154.0质控＋ 150 90 - 210 4.04.【实验原理】ARCHITECT Anti Tg是采用化学发光微粒子免疫分析（ChemiluminesentMicroparticle ImmunoAssay, CMIA）技术，夹心两步法对待测样品中的抗甲状腺球蛋白（Anti Tg）进行定量检测。
医院检验中心α1微球蛋白测定标准操作规程
高浓度缓冲液1瓶，加水135ml稀释。
4)PR 1瓶，使用前充分摇匀。
（4）曲线范围：
25—800ug/L灵敏度：1.6ug/L
（5）分析步骤：
首先将尿液41倍稀释。(2ml应用缓冲液加入50ul尿样，混匀)
T管NSB零管标准管样品管
缓冲液50 50
医院检验中心α1-微球蛋白测定标准操作规程
（1）产地：
中国原子能科学研究院，北京
（2）用途：
定量测定尿液中的α1-微球蛋白含量。临床肾脏疾病，肾小管功能鉴别诊断。
（3）试剂：
1)标准6瓶，每瓶加水0.5ml溶解。25,50,100,200,400,800ug/L。
2)抗体1瓶，加缓冲液22ml溶解。
（7）正常参考值：
5.86±4.50mg/L
标准50
样品50
125I-α1-MG 100 100 100 100 100
NSB 200
α1-MG抗体200 200 200
摇匀，37℃3小时
PR 500 500 500 500
摇匀，室温15分钟，离心3500rpm15分钟。弃上清液后测沉淀计数。结果乘以41。
（6）标准曲线：
NSB<3%,B0/T=40%,ED50=90-100ug/L。
免疫球蛋白(IgM)定量测定试剂盒标准操作程序
免疫球蛋白（IgM）测定标准操作程序1.摘要本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中免疫球蛋白IgM的含量。
IgM的主要功能是与抗原结合，并进一步触发抗原的分解。
IgM是初次接触新抗原后首先合成的免疫球蛋白。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中IgM的浓度。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定IgM浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的免疫球蛋白（IgM）试剂盒采用的是免疫透射比浊法。
5.原理样本中的IgM与试剂中相应的抗体相遇，立即形成抗原抗体免疫复合物，在特定的缓冲环境中形成浊度，其浊度在合适的抗体浓度存在时与抗原含量成正比，与相同条件下操作的校准品比较，即可求出样品中IgM的含量。
6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：磷酸缓冲液（PH7.2）、Tween20、PEG、NaN3、羊抗人IgM抗体。
7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
R1、R2：打开后冷藏于分析仪中可稳定28天。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用上海科华生物工程股份有限公司试剂盒内提供的标准品对自动分析仪进行校准。
由a、b、c、d、e五只组成，浓度见瓶签。
校准品可溯源至国际参考物质ERM470。
8.2质控品使用某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控结果进行转换，对质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。
直接抗人球蛋白试验操作规程
直接抗人球蛋白试验操作规程(总3页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除XXX医院直接抗人球蛋白试验操作规程1.目的保证试验结果的准确性，确保临床输血安全。
2.适用范围 XXX医院输血科。
3.职责输血科具有专业技术的工作人员负责本院患者直接抗人球蛋白检测，但只对该单份标本负责。
4.相关文件试剂采购、保存和使用管理程序设备采购、使用管理程序消毒与清洁管理程序标本采集、运输、保存和报废管理程序5.相关记录仪器设备的采购、使用和维护记录仪器的温度记录恒温水温箱的换水和消毒记录消毒液的配置记录清洁消毒记录试剂采购、使用记录标本交接和报废记录6.实验原理抗球蛋白试验（Coombs试验）是测定结合在红细胞上的抗体和/或补体的主要方法。
直接Coombs试验是检测体内已被抗体和/或补体致敏的红细胞。
间接Coombs试验时通过血清与细胞的孵育，证实抗体和/或补体在体外的结合。
抗体分子和补体成分都是球蛋白。
用人球蛋白免疫动物使其产生抗体即抗人球蛋白。
抗人球蛋白试剂可凝集被人球蛋白致敏的红细胞。
抗人球蛋白试剂可以和致敏在红细胞上的人球蛋白反应，通过桥梁作用使致敏红细胞出现凝集，呈现阳性反应。
7.仪器设备玻璃试管(75X12mm)、玻片、记号笔、一次性塑料滴管、显微镜、交叉配血专用离心机、试管架、恒温水温箱、试剂保存冰箱、标本保存冰箱。
8.试剂生理盐水、抗D(IgG)试剂(效价≧1:8)，直接抗人球蛋白试剂(抗IgG,C3d)，均为有合格证件的正品。
9.试剂保存和性能指标.保存：直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d）应置于2~8℃冷藏保存，切勿反复冻融。
储存条件下有效期为24个月。
.性能指标：直接抗人球蛋白试剂（抗IgG,C3d）为多特异性试剂。
外观：应澄清透明，无杂质；灵敏度试验：分别与强抗体[抗D(IgG)]，中等强度抗体(抗Jka)和弱抗体(抗Fya)致敏细胞反应，结果均为阳性。
直接抗人球蛋白试验(DAT)操作规程
直接抗人球蛋白试验（DAT）操作规程 SXYJ-GZ-02101目的用于检测体内致敏的红细胞。
2适用范围研究药物致敏的红细胞、免疫性溶血性贫血的诊断、新生儿溶血病的诊断、输血反应等鉴定。
3职责检测者依据此程序进行直接抗人球蛋白试验操作。
4材料与设备抗人球蛋白试剂（-IgG/-C3d、-IgG、-C3d）、阴性对照细胞（试剂红细胞）；一次性使用滴管、试管、玻片；KUBOTA KA-2200型离心机；CH20BIMF200型电子显微镜等。
Biovue工作站（包括微柱凝胶卡、低离子增强液、孵育器、离心机）。
5操作方法5.1试管法5.1.1待检标本应为EDTA抗凝血，吸出部分红细胞，用0.9%生理盐水充分洗涤四遍，配制成2%红细胞盐水悬液。
5.1.2取待检红细胞盐水悬液1滴，移入加有2滴抗人球蛋白血清的小试管内，混匀。
5.1.3阴性对照抗人球蛋白血清2滴，加2％试剂红细胞悬液1滴，混匀。
5.1.4待检管以及阴性对照管同时以3400转/分，离心15秒（KA-2200型离心机Ⅱ档），轻轻揺动，肉眼及显微镜下观察结果。
5.2微柱凝胶法方法参见微柱凝胶技术操作规程（SXYJ-GZ-0228）。
6结果判定原则如阴性对照管不凝集，受检红细胞凝集者为直接抗人球蛋白试验阳性，不凝集者为阴性。
凝集强度可参见SXYJ-GZ-0202: 5.2.1.6对结果进行判断。
7注意事项7.1标本采取后应立即进行试验，延迟或中途停止试验可使抗体从细胞上丢失。
7.2抗人球蛋白血清应按说明书使用最适稀释度，否则，可产生前带或后带现象而误为阴性结果。
7.3也有将浓的抗人球蛋白血清在白瓷板上做倍量系列稀释，再各加受检者10％洗涤红细胞悬液1滴，不断转动瓷板，肉眼观察凝集反应。
凡出现凝集的最高稀释倍数的倒数即为直接抗人球蛋白试验效价。
这种效价并不表示受检者红细胞被不完全抗体致敏的强度。
7.4受检红细胞一定要用盐水洗涤4次，除去红细胞悬液中混杂的血清蛋白，以防止假阴性结果。
抗人球蛋白试验(直接法)
抗人球蛋白试验（直接法）简介抗人球蛋白试验（直接法）是一种常见的免疫学实验方法，用于检测机体内特定抗体（抗人球蛋白抗体）的水平和活性。
通过这一试验可以评估机体对人球蛋白的免疫反应情况，是许多研究和临床诊断工作中重要的实验手段之一。
实验原理抗人球蛋白试验（直接法）基于抗原-抗体相互作用的原理。
人球蛋白是一种外源蛋白，当人体受到人球蛋白的免疫刺激后，机体会产生抗人球蛋白抗体。
通过将待测血清与标准人球蛋白溶液混合反应，通过测定溶液中抗体与抗原结合的程度，进而评价该血清中抗人球蛋白抗体的水平。
实验步骤1.准备试剂：标准人球蛋白溶液、待测血清、辅助试剂等。
2.取等量的标准人球蛋白溶液和待测血清，混合均匀。
3.将混合溶液孵育一段时间，促使抗体与抗原结合。
4.添加特定试剂，使未结合的物质沉淀或产生其他特定反应。
5.通过光密度仪或其他检测仪器测定光密度值，计算出抗体水平。
实验结果分析实验结果以光密度值或其他测量指标呈现，一般抗体水平较高的样本对应较高的光密度值。
通过比较待测样本的结果与标准曲线或对照组的结果，可以判断该样本中抗人球蛋白抗体的水平及活性。
应用领域抗人球蛋白试验（直接法）在免疫学研究、临床诊断以及药物疗效评价等领域有着广泛的应用。
例如，在自身免疫性疾病的诊断中，该试验可帮助医生评估患者的免疫系统功能状态；在药物疗效评价方面，可用于监测药物对患者免疫功能的影响。
结论抗人球蛋白试验（直接法）是一种重要的实验技术，可以用于评估机体对人球蛋白的免疫反应水平。
通过本实验，我们可以深入了解机体免疫系统的功能状态，为研究和临床诊断提供有力的支持。
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球蛋白测定标准操作规程
1 检验申请
由于球蛋白是由总蛋白减去白蛋白计算而出，一般为组合项目申请：血生化中肝功能测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理
2.1标本采集
2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本
2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存
2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：血液胆红素见光易分解，标本注意避光保存。
室温（15～25℃）下可稳定2h，普通冰箱中（2～8℃）稳定12h。
-15～-25℃度可以稳定3～4个月。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项
2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。
2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。
3. 结果计算
球蛋白 = 总蛋白–白蛋白
4参考范围
20-40g/L
5临床意义
球蛋白升高常见于肝脏疾病（肝炎、肝肿瘤、肝硬化等）、血液病和自身免疫性疾病等。
白球蛋白比（A/G）标准操作规程
1 检验申请
由于A/G是计算而出，一般为组合项目申请：血生化中肝功能测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理（同总蛋白）
3. 结果计算
A/G =白蛋白÷球蛋白
4参考范围
(1.2-2.4):1
5临床意义
白球比降低提示有慢性肝实质性损害。
球蛋白增高，如肝脏疾病（肝炎、肝肿瘤、肝硬化等）、血液病和自身免疫性疾病等。
白蛋白丢失过多，如肾病，严重营养不良等。