移液器使用标准规程
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移液器使用标准规程
一、目的
建立一个移液器使用、维护保养标准操作程序,使操作过程标准化。
二、范围
本标准适用于移液器使用、维护和保养。
三、内容
一个完整的移液循环,包括吸头安装——容量设定——预洗吸头——吸液——放液——卸去吸头等六个步骤。每一个步骤都有需要遵循的操作规范。
1. 吸头安装:
正确的安装方法叫旋转安装法,具体的做法是,把白套筒顶端插入吸头(无论是散装吸头还是盒装吸头都一样),在轻轻用力下压的同时,把手中的移液器按逆时针方向旋转180度。切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头的方法来进行安装,因为那样做会对您手中的移液器造成不必要的损伤。
2. 容量设定:
正确的容量设定分为两个步骤,一是粗调,即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;二是细调,当容量值接近自己的预想值以后,应将移液器横置,水平放至自己的眼前,通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响。
在容量设定时,还有一个需要特别注意的地方。当我们从大值调整到小值时,刚好就行;但从小值调整到大值时,就需要调超三分之一圈后再返回,这是因为计数器里面有一定的空隙,需要弥补。
3. 预洗吸头:
在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使整个移液过程具有极高的重现性。其次,在吸取有机溶剂或高挥发液体时,挥发性气体会在白套筒室内形成负压,从而产生漏液的情况,这时就需要我们预洗四到六次,让白套筒室内的气体达到饱和,负压就会自动消失。
4. 吸液:
先将移液器排放按钮按至第一停点,再将吸头垂直浸入液面,浸入的深度为:P2、P10小于或等于1毫米,P20、P100、P200小于或等于2毫米,P1000小于或等于3毫米,
P5ML、P10ML小于或等于4毫米(浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然,具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握),平稳松开按钮,切记不能过快。
5. 放液:
放液时,吸头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,略作停顿以后,再按至第二停点,这样做可以确保吸头内无残留液体。如果这样操作还有残留液体存在的话,您就应该考虑更换吸头了。
6. 卸掉吸头:
卸掉的吸头一定不能和新吸头混放,以免产生交叉污染。
仪器状态检查
1、测漏:
移液器又叫空气排代式移液器,如果出现漏气的情况,取样结果就肯定不会准确,这将直接影响到实验的最终结果,后果是比较比较严重的。那么,如何判断移液器是否漏气呢?首先,取一个透明的容器,装上水,将需要测试的移液器装上吸头,吸上水,如果是P2、P10、P20、P100、P200的移液器,请将吸头浸入液面1—2毫米,静待20秒,观察吸头内部液面是否下降,如果下降了,就说明移液器出现了漏气的情况;如果是P1000、P5000、P10ML的移液器,请将吸头朝下悬垂20秒,观察是否有液体下滴,如果有,说明移液器也出现了漏气的情况。
故障原因:首先,检查吸头安装是否到位,换掉吸头再次测试,以排除因吸头的关系产生的漏气情况;接着,检查白套筒的端口部份(即白套筒与吸头接触的部份)是否有刮痕;然后,再检查白套筒与手柄之间的连接螺帽是否松动。如果这些情况都没有,就说明密封圈或活塞组件有损坏,应及时报告实验管理员,由其作出解决方案。
2、检查外观:
按动排放按钮,感觉是否顺畅,听是否有噪音,观察排放杆是否有弯曲;旋转调节按钮,观察计数器的读数是否有偏差。
日常使用注意事项:
1.在指定范围内设定体积,不要超过移液器的最小和最大量程。
2.确定溶液和吸头同温,太热和太冷的液体都会造成体积误差。
3.使用配套高质量吸头。
4.确保整个移液过程移液器垂直。
5.移液器不使用时竖直放置。
6.移液器长时间不使用,应调至最大量程。
7.定期维护保养、校准,以保证准确。
维护保养:
1、定期清洁移液器,用酒精棉即可,主要擦拭手柄、弹射器及白套筒外部,既可以保持美观,又降低了对样品产生污染的可能性。
2、在吸取过高挥发、高腐蚀液体后,应将整支移液器拆开,用蒸馏水冲洗活塞杆及白套筒内壁,并在晾干后安装使用。以免挥发性气体长时间吸附于活塞杆表面,对活塞杆产生腐蚀,损坏移液器。
附:移液器的拆卸安装步骤:
1、拨掉吸头弹射器放入盛放盘内;
2、将容量值调至最大,拧开白套筒与手柄之间的连接螺帽;
3、白套筒端口向下,轻轻提起手柄放入盛放盘内,按住活塞尾部,将白套筒端口向上,置于盛放盘上部,小心取出活塞组件,以免弄掉零件;
4、从活塞杆上或白套筒内取出密封圈,放入盛放盘内。
5、安装,其步骤与拆卸正好相反。需要注意的是,密封圈的黑色部份朝向白套筒,白色部份朝向手柄。
移液器校准
1.校准时使用天平的要求
移液器量程天平分辨率mg 天平重复性和线性mg 天平不确定性mg 1μL≤V≤10μL 0.001 0.002 0.0002
10μL≤V≤100μL 0.01 0.02 0.002
100μL≤V≤1000μL 0.1 0.2 0.2
1mL≤V≤10mL 0.1 0.2 0.2
2.校准液体
水、蒸馏水或去离子水,要达到三级水的标准。
3.实验室或天平室条件
应在无通风的房间,水温变化不超过±0.5℃,移液器和空气温度在20-25℃之间,相对湿度在55%以上,特别是量程小于50μL时,空气湿度越大越好,以减少蒸发损失带来的影响。天平台面防震、防尘。
附;最新版ISO8655标准对单道可调移液器的系统误差和随机误差的误差限度规定