实验七-淀粉水解试验
淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解能力实验报告
淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解能力实验报告一、引言淀粉酶是一种能够催化淀粉水解的酶类，其在生物体内起着至关重要的作用。
了解淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解能力，有助于我们更深入地理解其生理功能和实际应用。
本实验旨在通过比较淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解程度，探究其催化特性，并为后续研究提供参考。
二、实验材料1. 淀粉酶溶液：提供淀粉酶活性的溶液，确保酶活性稳定且浓度适中。
2. 淀粉溶液：用于模拟淀粉酶的底物，采用纯净的淀粉配制成一定浓度的溶液。
3. 蔗糖溶液：作为对比底物，同样采用纯净的蔗糖配制成一定浓度的溶液。
4. 碘液：用于检测淀粉的水解程度，与淀粉反应产生蓝色。
5. 温箱：用于控制实验温度，保持实验条件的一致性。
三、实验溶液配置1. 淀粉酶溶液：按照实验要求，将适量的淀粉酶粉末溶解于蒸馏水中，配制成一定浓度的溶液。
2. 淀粉溶液：取适量纯净淀粉，加入蒸馏水搅拌成悬浊液，再经过一定时间的煮沸糊化，得到均匀透明的淀粉溶液。
3. 蔗糖溶液：将适量的蔗糖粉末溶解于蒸馏水中，配制成一定浓度的溶液。
四、温箱中预热将配置好的淀粉酶溶液、淀粉溶液和蔗糖溶液分别置于温箱中预热，保持实验温度恒定。
预热的目的是确保实验过程中酶活性的稳定性和实验条件的一致性。
五、实验操作1. 取若干试管，分别标记为淀粉组和蔗糖组，每组设置若干个时间点（如0min、5min、10min、15min等）。
2. 向每个试管中加入等量的预热后的淀粉酶溶液。
3. 向淀粉组试管中加入等量的预热后的淀粉溶液，向蔗糖组试管中加入等量的预热后的蔗糖溶液。
4. 将所有试管放入恒温的温箱中，开始计时。
5. 在设定的时间点，取出对应试管，立即加入碘液，观察溶液的颜色变化。
6. 记录每个时间点溶液的颜色变化，并拍照记录。
六、观察分析1. 颜色变化观察：随着水解反应的进行，淀粉溶液中的淀粉逐渐被淀粉酶分解，溶液中的淀粉含量逐渐降低。
通过加入碘液，可以观察到溶液颜色从蓝色逐渐变为无色或淡黄色。
火腿肠(高温蒸煮肠)中淀粉含量的测定酸水解法
实验七火腿肠（高温蒸煮肠）中淀粉含量的测定—酸水解法基本知识点1、掌握酸水解法测定淀粉的原理、基本过程和操作关键。
2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
3、淀粉水解、可溶性糖去除的方法和关键环节。
重点：1、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术2、酸水解法测定淀粉的原理及注意事项。
难点：酸水解法测定淀粉的原理和控制要点复习与提问：1、检查实验准备情况，（1）实验内容；（2）实验仪器与试剂有哪些？（3）酸水解法测定淀粉的程序。
2、酸水解法测定淀粉的原理和控制要点【引入新课】淀粉在食品工业中用途广泛常用于食品原料或辅料。
淀粉是以葡萄糖为基本单位通过糖苷键而构成的多糖类化合物。
淀粉是白色、无气味、无味道的粉末状物质，在热水里淀粉颗粒会膨胀破裂，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊，这一过程称为糊化作用。
糊化是淀粉食品加热烹制时的基本变化，也就是常说的食物由生变熟。
淀粉不溶于冷水，也不溶于乙醇、乙醚或石油醚等有机溶剂，故可用这些溶剂淋洗、浸泡除去淀粉的水溶性糖或脂肪等杂质。
淀粉不显还原性，但它在酶（或酸）存在和加热条件下可以逐步水解，生成一系列比淀粉分子小的化合物，最后生成还原性单糖——葡萄糖。
淀粉酶的专一性高，但只能将淀粉逐步水解至麦芽糖阶段；盐酸溶液对淀粉的专一性较差，但它能将淀粉水解至最终产物葡萄糖。
故在测定淀粉时，使酶——稀盐酸分解法。
GB 20712-2006《火腿肠（Ham sausage）》规定：火腿肠（高温蒸煮肠）Ham sausage(Autoclaved ham sauasge)以鲜或冻畜、禽、鱼肉为主要原料，经腌制、搅拌、斩拌（或乳化）、罐入塑料肠衣，经高温杀菌，制成的肉类灌肠制品。
感官要求应符合表1的规定。
表1.感官要求项目指标外观肠衣均匀饱满，无损伤，表面干净，良好，扎结牢固，肠衣的扎结部位无内容物渗出。
色泽具有产品固有的色泽。
质地组织紧密，有弹性，切片良好，无软骨及其它杂物，无气孔。
微生物鉴定中常用的生理生化试验
一、实验目的1.证明不同微生物对各种有极大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2.掌握微生物大分子物质水解实验的原理和方法。
3.了解糖发酵的原理和在肠细菌鉴定中重要作用。
4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
5.了解IMViC的原理。
二、实验原理由于各种微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。
具体的原理如下：1.淀粉水解试验：在淀粉固体培养基上接种两种细菌（枯草杆菌，大肠杆菌），培养两天以后，再往培养基中加碘液染色，若该细菌能分泌胞外淀粉酶，则能利用其周围的淀粉，淡然在染色后，其菌落周围不呈蓝色，而是无色透明圈。
2.糖发酵试验：不同的细菌分解糖的能力不同，有些细菌能利用糖发酵产酸和产气，有些则不能。
酸在加入溴甲酚指示剂后会使溶液呈黄色，且德汉氏小管中会收集到一部分气体。
若细菌不能使糖产酸产气，则最后溶液为指示剂的紫色，且德汉氏小管中无气体。
3.IMVC实验主要用于快速鉴别大肠杆菌和产气肠杆菌。
（1）吲哚试验：在蛋白胨培养基中，若细菌能产生色氨酸酶，则可将蛋白胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚，吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。
本次不做该试验。
（2）甲基红试验（MR）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸，后者进而被分解产生甲酸，乙酸和乳酸等多种有机酸，是培养液PH值降至4.2以下，加入甲基红后溶液呈红色。
三、实验材料1.菌种大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球(Staphyloccocus aureus Rosenbach)，铜绿假单胞菌（P.Aeruginosa），枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis Cohn），产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)，普通变形杆菌（Proteus.vulgaris)。
细菌生理生化实验
细菌的生理、生化实验简介微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。
因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下：一、糖酵解试验不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验。
试验方法：以无菌操作，用接种针或环移取纯培养物少许，接种于发酵液体培养基管中，若为半固体培养基，则用接种针作穿刺接种。
接种后，置36±°C培养，每天观察结果，检视培养基颜色有无改变（产酸），小倒管中有无气泡，微小气泡亦为产气阳性，若为半固体培养基，则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡，有时还可看出接种菌有无动力，若有动力，培养物可呈弥散生长。
本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力，从而进行各种细菌的鉴别，因而每次试验，常需同时接种多管。
一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫，溴百里蓝和An-drade指示剂。
二、淀粉水解试验某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
淀粉水解后，遇碘不再变蓝色。
试验方法：以18~24h的纯培养物，涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板（一个平板可分区接种，试验数种培养物）或直接移种于淀粉肉汤中，于36±1°C培养24~48h，或于20℃培育5天。
然后将碘试剂直接滴浸于培育表面，假设为液体培育物，那么加数滴碘试剂于试管中。
当即检视结果，阳性反映（淀粉被分解）为琼脂培育基呈深蓝色、菌落或培育物周围显现无色透明环、或肉汤颜色无转变。
阴性反映那么无透明环或肉汤呈深蓝色。
淀粉水解系逐步进行的过程，因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间，培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。
培养基pH必须为中性或微酸性，以最适。
淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱，因而以临用时制备为妥。
三：V-P试验某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸缩合，脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨中的胍基生成红色化合物，称V－P（+）反应。
细菌鉴定中常用的生理生化反应
细菌生化试验1、实验原理（1）细菌生化试验各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物或多或少地各有区别，可供鉴别细菌之用。
用生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生化反应。
（2）糖（醇）类发酵试验不同的细菌含有发酵不同糖（醇）的酶，因而发酵糖（醇）的能力各不相同。
其产生的代谢产物亦不相同，如有的产酸产气，有的产酸不产气。
酸的产生可利用指示剂来判定。
在配制培养基时预先加入溟甲酚紫［P HS . 2 （黄色）一6 . 8 （紫色）] ，当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色。
气体产生可由发酵管中倒置的杜氏小管中有无气泡来证明。
（3）甲基红（Methylred ）试验（该试验简称MR 试验）很多细菌，如大肠杆菌等分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸再被分解，产生甲酸、乙酸、乳酸等，使培养基的pH 降低到4 . 2 以下，这时若加甲基红指示剂呈现红色。
因甲基红指示剂变色范围是pH4 . 4 （红色）一pH6 . 2 （黄色）。
若某些细菌如产气杆菌，分解葡萄糖产生丙酮酸，但很快将丙酮酸脱梭，转化成醇等物，则培养基的pH 仍在6 . 2 以上，故此时加入甲基红指示剂，呈现黄色。
（4）大分子物质代谢实验．靛基质（口引睬）试验某些细菌，如大肠杆菌，能分解蛋白质中的色氨酸，产生靛基质（叫睬），靛基质与对二甲基氨基苯甲醛结合，形成玫瑰色靛基质（红色化合物）。
硫化氢试验某些细菌能分解含硫的氨基酸（肌氨酸、半肌氨酸等），产生硫化氢，硫化氢与培养基中的铅盐或铁盐，形成黑色沉淀硫化铅或硫化铁。
为硫化氢试验阳性，可借以鉴别细菌。
明胶液化实验某些细菌具有胶原酶，使明胶被分解，失去凝固能力，呈现液体状态，是为阳性。
淀粉水解试验（在紫外诱变中做，本实验不做）细菌对大分子的淀粉不能直接利用，须靠产生的胞外酶（淀粉酶）将淀粉水解为小分子糊精或进一步水解为葡萄糖（或麦芽糖），再被细菌吸收利用，细菌水解淀粉的过程可通过底物的变化来证明，即用碘测定不再产生蓝色。
淀粉验证实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握淀粉的检测方法。
2. 熟悉淀粉在不同物质中的存在形式。
3. 了解淀粉的物理和化学性质。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子碳水化合物，广泛存在于植物中。
淀粉分子由大量的葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键连接而成。
淀粉的检测通常基于其与特定试剂反应产生特征颜色变化。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 土豆- 玉米- 面粉- 淀粉酶- 碘液- 水浴锅- 研钵- 玻璃棒- 试管- 移液管- 滴管2. 实验仪器：- 电子天平- 恒温水浴锅- 显微镜- 紫外可见分光光度计四、实验步骤1. 淀粉提取（1）将土豆、玉米和面粉分别称取适量，分别研磨成粉末。
（2）取适量粉末放入试管中，加入蒸馏水，充分搅拌，使淀粉溶解。
（3）将溶液煮沸，冷却后过滤，得到淀粉提取液。
2. 淀粉检测（1）取适量淀粉提取液放入试管中，加入碘液，观察颜色变化。
（2）取适量淀粉酶溶液，加入淀粉提取液中，观察颜色变化。
（3）将淀粉提取液置于显微镜下观察淀粉颗粒形态。
（4）利用紫外可见分光光度计测定淀粉提取液的吸光度。
3. 结果分析（1）观察淀粉提取液与碘液反应后的颜色变化，若呈蓝色或紫色，则说明淀粉存在。
（2）观察淀粉酶溶液加入后颜色变化，若颜色逐渐变浅，则说明淀粉被水解。
（3）显微镜下观察淀粉颗粒形态，可判断淀粉的存在。
（4）紫外可见分光光度计测定淀粉提取液的吸光度，可进一步确定淀粉含量。
五、实验结果1. 土豆提取液与碘液反应后呈蓝色，说明土豆中含有淀粉。
2. 玉米提取液与碘液反应后呈淡蓝色，说明玉米中含有淀粉。
3. 面粉提取液与碘液反应后呈淡蓝色，说明面粉中含有淀粉。
4. 淀粉酶溶液加入后，土豆、玉米和面粉提取液颜色逐渐变浅，说明淀粉被水解。
5. 显微镜下观察淀粉颗粒形态，可确定淀粉的存在。
6. 紫外可见分光光度计测定淀粉提取液的吸光度，可确定淀粉含量。
六、实验讨论1. 淀粉在不同物质中的存在形式及提取方法。
实验七 淀粉酶动力学分析
实验七 淀粉酶动力学分析（Ⅱ）——淀粉酶解米氏常数测定与阿卡波糖竞争性抑制动力学计算（4学时）第四部分 α-淀粉酶K m 值的测定一、实验目的了解并掌握米氏常数的意义和测定方法。
二、实验原理当底物浓度在较低浓度增加时，酶促反应速度随着底物浓度的增加而迅速增加。
当底物增至一定浓度后，即使再增加其浓度，反应速度也不会增加很快。
这是由于酶浓度限制了所形成的中间络合物浓度的缘故。
Michaelis 和Menten 推导得出底物浓度和酶促反应速度的关系式为：][][max S K S V m +=υ此式称为米氏方程，式中：υ为反应速度，即每升反应体系中每分钟形成葡萄糖的摩尔数（mol/（L·min ））；m ax V 为最大反应速度（mol/（L·min ））；][S 为底物浓度，此实验以反应体中淀粉中葡萄糖残基的摩尔浓度表示（mol/L ），注意！应以反应体系总体积计算底物浓度，如淀粉溶液浓度为1%，反应体系中有3 mL 淀粉溶液和1 mL 淀粉酶液，则淀粉底物浓度应为：[]=+⨯=13316210S 0.0463 mol/L 10——1%的淀粉溶液浓度为10 g/L 180——淀粉中的葡萄糖残基的分子量 3——反应体系中1%淀粉溶液的体积（mL ） 1——反应体系中α-淀粉酶的体积（mL ）m K 为米氏常数，单位与底物浓度相同（mol/L ）。
按此方程，可用作图法求出m K ，常用的方法为双倒数作图法。
取米氏方程的倒数，以υ1对][1S 作图：maxmax 1][11V S V K m +=υ得一直线，其斜率为m ax V K m ，截距为m ax1V ，求出m K 。
三、实验器材与试剂实验器材1-16. 见实验七第一部分17. 化学试剂：见实验七第二部分 实验试剂1. pH5.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液2. 1%淀粉溶液：称取1 g 可溶性淀粉的200 mL 烧杯中，用5 mL pH5.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液调成糊状。
淀粉水解实验报告大学(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解淀粉水解的原理和过程。
2. 掌握淀粉水解实验的基本操作步骤。
3. 学习使用碘液检测淀粉的存在与水解程度。
4. 探究不同条件（如温度、pH值、酶浓度等）对淀粉水解的影响。
二、实验原理淀粉是一种由葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键连接而成的多糖，广泛存在于植物中。
淀粉水解是将淀粉分解为更简单的糖类的过程，如麦芽糖、葡萄糖等。
淀粉水解可以通过酸水解、酶水解等方法实现。
本实验采用酶水解法，利用淀粉酶催化淀粉水解。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 淀粉溶液- 淀粉酶- 碘液- 盐酸- 氢氧化钠- 水浴锅- 试管- 烧杯- 移液管- 滴定管- pH计- 研钵- 研杵2. 实验仪器：四、实验步骤1. 淀粉溶液的制备：- 称取一定量的淀粉，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀，形成淀粉溶液。
2. 淀粉酶的添加：- 将淀粉溶液置于水浴锅中，加热至预定温度（如60℃）。
- 按照一定比例加入淀粉酶，搅拌均匀。
3. 水解反应：- 保持预定温度，让淀粉溶液在淀粉酶的作用下进行水解反应。
4. 碘液检测：- 在水解反应结束后，取出少量水解液，加入几滴碘液。
- 观察溶液颜色的变化，判断淀粉的水解程度。
5. pH值调节：- 使用盐酸和氢氧化钠调节淀粉溶液的pH值，观察pH值变化对淀粉水解的影响。
6. 温度对淀粉水解的影响：- 分别在不同温度下进行淀粉水解实验，观察温度对淀粉水解的影响。
7. 酶浓度对淀粉水解的影响：- 分别使用不同浓度的淀粉酶进行淀粉水解实验，观察酶浓度对淀粉水解的影响。
五、实验结果与分析1. 碘液检测：- 在淀粉水解过程中，随着水解时间的延长，碘液与淀粉的反应逐渐减弱，溶液颜色由蓝黑色变为淡黄色，表明淀粉已逐渐水解。
2. pH值调节：- 当淀粉溶液的pH值过高或过低时，淀粉酶的活性会受到影响，导致淀粉水解程度降低。
3. 温度对淀粉水解的影响：- 随着温度的升高，淀粉酶的活性逐渐增强，淀粉水解程度逐渐提高。
细菌鉴定用生理生化试验2015
细菌生理生化鉴定技术讲义实验一糖（醇、苷）类发酵试验(安排至少六种糖的发酵实验，包括单糖、双糖、三糖、醇类和非糖类各一种)（1）原理：不同种类细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，因而对各种糖（醇、苷）类的代谢能力也有所不同，即使能分解某种糖（醇、苷）类，其代谢产物可因菌种而异。
检查细菌对培养基中所含糖（醇、苷）降解后产酸或产酸产气的能力，可用以鉴定细菌种类。
(2)方法：在基础培养基中（如肉汤基础培养基pH7.4）加入0.5~1.0％（w/v）的特定糖（醇、苷）类。
所使用的糖（醇、苷）类有很多种，根据不同需要可选择单糖、多糖或低聚糖、多元醇和环醇等，将待鉴定的纯培养细菌接种入试验培养基中，置35℃孵育箱内孵育数小时到两周（视方法及菌种而定）后，观察结果。
若用微量发酵管（杜氏管），或要求培养时间较长时，应注意保持其周围的湿度，以免培养基干燥。
(3)结果：能分解糖（醇、苷）产酸的细菌，使培养基中的指示剂发生变色反应，产气的细菌可在小倒管（Durham小管）中产生气泡，固体培养基则产生裂隙。
不分解糖则无变化。
溴百里香酚蓝的变色范围为pH6.7(黄)~7.5(蓝)，通过指示剂颜色变化可以判断是否产酸，从杜氏管中是否又气泡可以判断利用各种糖时是否产气。
(4)应用：糖（醇、苷）类发酵试验，细菌对各种糖的分解能力及代谢产物不同，可借以鉴别细菌，是鉴定细菌的生化反应试验中最主要的试验，不同细菌可发酵不同的糖（醇、苷）类，如沙门菌可发酵葡萄糖，但不能发酵乳糖，大肠埃希菌则可发酵葡萄糖和乳糖。
即便是两种细菌均可发酵同一种糖类，其发酵结果也不尽相同，如志贺菌和大肠埃希菌均可发酵葡萄糖，但前者仅产酸，而后者则产酸、产气，故可利用此试验鉴别细菌。
一般非致病菌能发酵多种糖，产生多种有机酸和各种气体如CO2、、H2和CH4。
如大肠杆菌能分解葡萄糖有乳糖，产生甲酸等产物，并有甲酸解氢酶，可将其分解为CO2和H2，故生化反应结果为产酸产气，以“⊕”表示。
食品化学实验教案
食品化学实验教案一、实验目的1. 了解食品中常见的化学成分及其作用。
2. 学习食品化学实验的基本操作技能。
3. 培养学生的实验观察能力和科学思维。
二、实验原理1. 食品中的主要化学成分：碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、矿物质等。
2. 食品化学反应：淀粉的水解、蛋白质的变性、脂肪的氧化等。
3. 食品添加剂的作用及安全性：防腐剂、色素、调味剂等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：小麦面粉、鸡蛋、牛奶、食盐、糖、食用油等。
2. 实验仪器：天平、烧杯、试管、量筒、滴定管、显微镜等。
四、实验内容与步骤1. 实验一：淀粉的水解a. 取一定量的小麦面粉，加入适量水，搅拌均匀。
b. 加热搅拌后的混合物，观察其糊化现象。
c. 用滴定管滴加碘液，观察颜色变化，判断淀粉的水解程度。
2. 实验二：蛋白质的变性a. 取一定量的鸡蛋清，加入适量的食盐，搅拌均匀。
b. 加热搅拌后的混合物，观察其变性现象。
c. 用显微镜观察蛋白质颗粒的变化。
3. 实验三：脂肪的氧化a. 取一定量的食用油，加入适量的抗氧化剂。
b. 加热食用油，观察其氧化程度。
c. 品尝实验前后的食用油，评价其风味变化。
4. 实验四：食品添加剂的应用a. 制作饼干或蛋糕，添加适量的防腐剂、色素、调味剂等。
b. 观察添加不同食品添加剂的食品在储存过程中的变化。
c. 品尝实验前后的食品，评价其口感、色泽等变化。
5. 实验五：矿物质的检测a. 取一定量的食品样品，加入适量的酸溶液，加热。
b. 用滴定管滴加指示剂，观察颜色变化，判断矿物质的存在。
c. 计算样品中矿物质的含量。
五、实验结果与分析1. 实验一：淀粉的水解观察到加热后混合物糊化，滴定管滴加碘液后颜色变深，说明淀粉发生了水解。
分析：淀粉在加热过程中发生糊化，滴定管滴加碘液后颜色变深，说明淀粉被水解成了糖类。
2. 实验二：蛋白质的变性观察到加热后混合物出现白色固体，显微镜下观察到蛋白质颗粒变大。
分析：蛋白质在加热过程中发生变性，形成了白色固体，显微镜下观察到蛋白质颗粒变大。
实验七探索影响淀粉酶活性的条件
实验七(2) 探索影响淀粉酶活性的条件执笔：审阅：审批：一．实验原理：淀粉遇碘后，形成色的复合物。
淀粉酶可以使淀粉逐步，它们遇碘后，不形成的复合物，但能够与斐林试剂发生氧化还原反应，生成砖红色的沉淀。
二．目的要求：1．初步学会探索影响的方法。
2．探索淀粉酶在水解的情况。
三．材料用具：质量分数为新鲜淀粉酶溶液，质量分数为淀粉溶液，质量分数为的盐酸，质量分数为的氢氧化钠溶液，热水，蒸馏水，冰块，碘液，斐林试剂。
四．方法步骤：（一）温度对酶活性的影响1．取3支洁净的试管，编上号，并且分别注入2mL 淀粉溶液。
2．将3支试管分别放入、沸水和中，维持各自的温度。
3．在3支试管中各注入1mL新鲜的溶液，摇匀后，维持。
4．在3支试管中各滴入1滴，然后摇匀。
5．观察这3支试管中溶液颜色的变化是。
（二）PH对酶活性的影响1．取3支洁净的试管，编上号，并且分别按下表中序号l至序号5的要求操作。
2．这3支试管，使试管内的液体混合均匀。
然后，将3支试管的下半部浸到的热水中，保温。
3．在3支试管中各加入2mL ，边加边试管，以便使试管内的物质。
4．将3支试管的放进盛有热水的大烧杯中，用酒精灯加热，煮沸。
5．观察这3支试管中溶液颜色的变化情况，观察结果。
结论：讨论：1．在温度对酶活性影响的实验中，为什么要在加入淀粉酶溶液之前控制好各自的温度?2．在pH对酶活性影响的实验中，能不能按照表格中序号1、5、2、3、4的步骤操作?为什么?例题解析：[例题1]为验证pH对唾液淀粉酶活性的影响，实验如下：1)操作步骤：①在1—5号试管中分别加入0．5％淀粉液2mL。
②加完淀粉液后，向各试管中加入相应的缓冲液3mL，使各试管中反应液的pH依次稳定在5.00、6.20、6.80、7.40、8.00。
③分别向1—5号试管中加入0．5％唾液1 mL，然后进行37℃恒温水浴。
④反应过程中，每隔1min从第3号试管中取出一滴反应液，滴在比色板上，加1滴碘液显色，待呈橙黄色时，立即取出5支试管，加碘液显色并比色，记录结果。
微生物鉴定常用的生理生化试验实验报告
山东大学实验报告2017年12月4 日___________________________ 科目：微生物学实验题目：微生物鉴定常用的生理生化试验姓名：丁志康一、目的要求1.证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。
2.掌握进行微生物大分子水解试验的原理和方法。
3.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。
4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
5.了解IMViC反应的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。
二、基本原理1、生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。
胞外酶只要为水解酶，通过加水裂解大的物质为较小的化合物，使其能被运输至细胞内。
如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖；脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸；蛋白酶水解蛋白质为氨基酸等。
这些过程均可通过观察细菌菌落周围的物质变化来证实；淀粉遇碘液会产生蓝色，但细菌水解淀粉的区域，用碘测定不在产生蓝色，表明细菌产生淀粉酶。
脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的pH，使pH降低，加入培养基的中性红指示剂会使培养基从淡红色变成深红色，说明胞外存在着脂肪酶。
2、糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要。
绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异。
有些细菌能分解某种糖产生有机酸（如乳糖、醋酸、丙酸等）和气体（如氢气、甲烷、二氧化碳的等）；有些细菌只产酸不产气。
例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖。
发酵培养基含有蛋白胨，指示剂（溴甲酚紫），倒置的德汉氏小管和不同的糖类。
当发酵产酸时，溴甲酚紫指示剂可由紫色（pH6.8）变为黄色（pH5.2）。
气体的产生可由倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明。
3、IMViC反应是吲哚试验、甲基红试验、伏-普试验和柠檬酸试验4个试验的首字母缩写。
细菌的分离纯化生化试验以及保种
观察。
2、染色观察
• 固定的目的：
• 杀死细菌并使菌体粘附于坡片上。 • 增加细菌对染料的亲和力。
• 常用的方法有酒精灯火焰加热和化学固定二种。
染色观察
简单染色法 正染色 鉴别染色法 死菌 细菌染色法 革兰氏染色法 抗酸性染色法 芽孢染色法 姬姆萨染色法
负染色：荚膜染色法等 活菌: 用美蓝或TTC（氯化三苯基四氮唑）等 作活菌染色
项目总览
1、细菌的分离 2、生化试验 3、药敏试验 4、保存
制作: 宋云杰 指导: 薛永康
原理：在固体平板培养基上，用划线的方法或 用稀释涂布的方法将混杂菌群的微生物各个分 开，通过挑选单菌落而分离微生物。
特点： 快速、方便。 分区划线： 适用于浓度 较大的样品； 连续划线： 适用于浓度 较小的样品；
药敏片的制作
取定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸 片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中， 瓶口以单层牛皮纸包扎。经15-20分钟高压消毒后， 放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。 抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素 瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片 充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同 时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜， 干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮， 置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。 药液的制备（用于商品药的试验）：按商品药的 使用治疗量的比例配制药液。
生化试验指导方案
生化试验结果记录
• • • •
1、注意无菌操作 2、防止杂菌的污染 3、配试剂时要准确精准 4、注意留取空白对照
通过药敏试验可以得到所检测细菌敏感 的药物，用于疾病的准确治疗。在选择 合适的药物后，还要注意轮换用药，减 少同一种药物使用的频率，从而减少细 菌耐药性产生的机率。 注意事项： 1.药敏纸片的制作。 2.《药敏试验的操作执行标准》美国临 床试验协会。2008年版
食品生物化学实验指导
食品生物化学实验指导书实验一淀粉的显色、水解和老化一、实验目的和要求1、了解淀粉的性质及淀粉水解的原理和方法。
2、掌握淀粉水解的条件和产物的实验方法。
3、淀粉的老化原理和方法二、实验原理1、淀粉与碘的反应直链淀粉遇碘呈蓝色，支链淀粉遇碘呈紫红色，糊精遇碘呈蓝紫、紫、橙等颜色。
这些显色反应的灵敏度很高，可以用作鉴别淀粉的定量和定性的方法，也可以用它来分析碘的含量。
纺织工业上用它来衡量布匹退浆的完全度，它还可以用来测定水果果实（如苹果等）的淀粉含量。
近年来用先进的分析技术（如X射线、红外光谱等）研究碘跟淀粉生成的蓝色物，证明碘和淀粉的显色除吸附原因外，主要是由于生成包合物的缘故。
直链淀粉是由α-葡萄糖分子缩合而成螺旋状的长长的螺旋体，每个葡萄糖单元都仍有羟基暴露在螺旋外。
碘分子跟这些羟基作用，使碘分子嵌入淀粉螺旋体的轴心部位。
碘跟淀粉的这种作用叫做包合作用，生成物叫做包合物。
在淀粉跟碘生成的包合物中，每个碘分子跟6个葡萄糖单元配合，淀粉链以直径0.13 pm绕成螺旋状，碘分子处在螺旋的轴心部位。
淀粉跟碘生成的包合物的颜色，跟淀粉的聚合度或相对分子质量有关。
在一定的聚合度或相对分子质量范围内，随聚合度或相对分子质量的增加，包合物的颜色的变化由无色、橙色、淡红、紫色到蓝色。
例如，直链淀粉的聚合度是200～980或相对分子质量范围是32 000～160 000时，包合物的颜色是蓝色。
分支很多的支链淀粉，在支链上的直链平均聚合度20～28，这样形成的包合物是紫色的。
糊精的聚合度更低，显棕红色、红色、淡红色等。
下表就是淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色。
表 2-1 淀粉的聚合度和生成碘包合物的颜色淀粉跟碘生成的包合物在pH=4时最稳定，所以它的显色反应在微酸性溶液里最明显。
2、淀粉的水解淀粉是一种重要的多糖，是一种相对分子量很大的天然高分子化合物。
虽属糖类，但本身没有甜味，是一种白色粉末，不溶于冷水。
在热水里淀粉颗粒会膨胀，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊。
淀粉水解实验报告
淀粉水解实验报告篇一：淀粉水解糖的制备淀粉水解糖的制备一实验目的：（1）通过实验，了解淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆的基本原理；（2）掌握淀粉酶解法制备淀粉糖浆的实验方法。
二实验原理水解淀粉为葡萄糖的方法有三种，即酸解法，酶解法，酶酸法及双酶法。
本实验采用的是双酶法将淀粉水解成葡萄糖。
首先利用的是α-淀粉酶将淀粉液化，转化为糊精及低聚糖，使淀粉可溶性增加；接着利用糖化酶将糊精及低聚糖进一步水解，转化为葡萄糖。
三实验器材1，实验材料玉米粉α—淀粉酶（2000u／g）糖化酶（50000 u／g）2，仪器设备恒温水浴槽真空泵抽滤纸及布氏漏斗四操作步骤50克淀粉置于400毫升烧杯中，加水100毫升，搅拌均匀，配成淀粉浆，用5% Na2CO3调节pH=—，加入1毫升5%CaCL2溶液，于90-95℃水浴上加热，并不断搅拌，淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。
加入液化型α---淀粉酶1克，不断搅拌使其液化，并使温度保持在70℃。
然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸，灭活10分钟。
过滤，滤液冷却到55℃，加入糖化酶1克，调节pH=，于60-65℃恒温水浴中糖化3-4小时，即为淀粉糖浆，若要浓浆，可进一步浓缩。
称重篇二：实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定一、试验目的①掌握酸法制糖的工艺与方法；②掌握还原糖的测定方法。
二、酸水解制糖原理在淀粉酸水解过程中，有如下三种反应：在水解过程中，淀粉的颗粒结构被破坏，α－－糖苷键及α－－糖苷键在酸的催化下被切断，示踪同位素原子O18研究证明，H＋先与H2O结合生成H3O ＋，H3O＋能与糖苷键的氧原子结合生成不稳定化合物Ⅰ，随后C1－O键断裂生成C1正碳离子Ⅱ，H2O与具有正电荷的C1结合，再使C1失去H＋，完成糖苷键的水解过程。
三、实验仪器7230型分光光度计、水浴锅或电炉、100mL量筒、100mL或50mL容量瓶9个、10mL与2mL移液管各1支、250mL 烧杯、250mL锥形瓶2个、布氏漏斗、真空泵、牛皮纸。
火腿肠中淀粉含量测定酸水解法(完整)
实验七火腿肠（高温蒸煮肠）中淀粉含量的测定一酸水解法教学目的要求：基本知识点1、掌握酸水解法测定淀粉的原理、基本过程和操作关键。
2、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术。
3、淀粉水解、可溶性糖去除的方法和关键环节。
重点：1、熟练称量、过滤、定容、滴定等基本操技术2、酸水解法测定淀粉的原理及注意事项。
难点：酸水解法测定淀粉的原理和控制要点课时教学方案：复习与提问：1、检查实验准备情况，（1）实验内容；（2）实验仪器与试剂有哪些？（3）酸水解法测定淀粉的程序。
2、酸水解法测定淀粉的原理和控制要点【引入新课】淀粉在食品工业中用途广泛常用于食品原料或辅料。
淀粉是以葡萄糖为基本单位通过糖苷键而构成的多糖类化合物。
淀粉是白色、无气味、无味道的粉末状物质，在热水里淀粉颗粒会膨胀破裂，有一部分淀粉溶解在水里，另一部分悬浮在水里，形成胶状淀粉糊，这一过程称为糊化作用。
糊化是淀粉食品加热烹制时的基本变化，也就是常说的食物由生变熟。
淀粉不溶于冷水，也不溶于乙醇、乙醚或石油醚等有机溶剂，故可用这些溶剂淋洗、浸泡除去淀粉的水溶性糖或脂肪等杂质。
淀粉不显还原性，但它在酶（或酸）存在和加热条件下可以逐步水解，生成一系列比淀粉分子小的化合物，最后生成还原性单糖一一葡萄糖。
淀粉酶的专一性高，但只能将淀粉逐步水解至麦芽糖阶段；盐酸溶液对淀粉的专一性较差，但它能将淀粉水解至最终产物葡萄糖。
故在测定淀粉时, 使酶一一稀盐酸分解法。
GB 20712-2006《火腿肠（Ham sausage）》规定：火腿肠（高温蒸煮肠）Ham sausage（Autoclaved ham sauasge）以鲜或冻畜、禽、鱼肉为主要原料，经腌制、搅拌、斩拌（或乳化）、罐入塑料肠衣，经高温杀菌，制成的肉类灌肠制品。
理化要求应符合表的规定表2.熏煮火腿(Cooked cured ham):以畜、禽肉为主要原料，经精选、切块、盐水注射(或盐水浸渍)腌制后，加入辅料，再经滚揉、充填(或不充填) 、蒸煮、烟熏(或不烟熏)、冷却、包装等工艺制作的火腿类熟肉制品。
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6
2、接种:用记号笔在平板底 部划成两部分,在每部分分别 写上菌名,用接种环取少量的 待测菌,点接在培养基表面的 相对应部分的中心,其中一个 菌种应是枯草杆菌做对照菌。
7
3、培养:将接种后的平皿置于37 ℃恒温箱培养24h。
8
4、检测:取出平板,打开平皿盖, 滴加少量的碘液于平板上,轻轻 旋转,使碘液均匀铺满整个平板. 菌落周围如出现无色透明圈,则 说明淀粉已经被水解,表示该细 菌具有分解淀粉的能力。可以用 透明圈大小说明测试菌株水解淀 粉能力的强弱。
9
五、作业 题
绘图表示淀粉水解试验的实验结果
10
实验七 淀粉水解试验
1
一、目的要求 1、检测细菌能否产生淀粉酶和 利用淀粉的能力。 2、学习点接法接种。
2
二、实验原理 有些细菌具有合成淀粉酶的能力， 可以分泌胞外淀粉酶.淀粉酶可以 使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,淀 粉水解后遇碘不再变蓝色。
3
三、仪器和材料
1、活材料:大肠杆菌(E. coli),枯草杆 菌(Bacillus subtilis),
2、培养基:淀粉培养基:牛肉膏蛋白胨 培养基加0.2%的可溶性淀粉。
3、试剂:卢哥氏碘液。 4、实验用品：平皿,接种环,酒精灯,
试管,接种针等。
4
淀粉培养基（pH7.2）
蛋白胨
10g
NaCl
5g
牛肉膏
5g
可溶性淀粉
10g
琼脂
15g
H2O
1000ml
应用少量水先将可溶性淀粉溶解
5
四、实验步骤