细菌胞外多糖提取分离技术研究进展

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白灵菇胞外多糖的分离纯化及其抗氧化活性的研究

ＡｂｔａｔＩｈｓｅｐｒｍｅｔｈｘｐｌｓｃｈｒｅｗａｘｒｃｅｒｍｅｒｔｓｎｂｏｅｓＺＦ６，ｔｅｔｃ — ｓｒｃ：ｎｔｉｘｅｉｎ，ｔｅｅｏｏｙａｃａｉｓｅｔａｔｄｆｏＰｌｕｏｕｅｒｄｎｉＪ－Ｈ１ｄｓｈｅｈ
（．ＳｈｏＦｏｃｎｅｎｅｈｏｇ，ＪｎｎｎＵｉｒｔ，Ｗｘ１１２，ｈｎ；．ｅａｔｅｔＦｏｃｎｅ，ｉｏｈｎｎｖｓｙＬａｃｅｇ１ｃｏｌｏｄＳｉｃｄＴｃｎｌｙｉｇａｎｖｓｙｕｉ４２Ｃｉａ２ＤｐｒｎｏｄＳｉｅａｏａｅｉ２ｍｅｃＬａｅｅｇＵｉｒｉ，ｉｏｈｎｅｔ
ａｎｕｒｌｐｌｓｃｈｒｅｃｎａｎｎｎｏｅａｄ一ｇｕｏｅｅｃＮＥ－ａｅｒａｌｎｉｘｄｔｅａｔｉｎｓａ — ｅｔａｏｙａｃａｉｏｔｉｉｇｍａｎｓｎＤｌｃｓｔ．ＰＰＩａｈｄｒｍａｋｂｅａｔｏｉａｉｃｉｔｉｃＶｄ — ｖｖｙ
沈阳１０６）１１１
摘要：从白灵菇菌株Ｊ —Ｈ６发酵液中提取胞外多糖，ＺＦ１并对该多糖的分离纯化技术、构和抗氧化活性进行结了研究。结果表明，白灵菇胞外粗多糖经ＤＡ —ｅｕｓ５ＥＥＣｌｌｅ２和Ｓｐａｅ一０柱层析后得到主要组成成分ＰＥｌｏｅｈｄｘＧ２０ＮＰＩ－ａ采用ＨＰＣ、ｅｈｄｘＧ２０柱层析、；ＬＳｐａｅ．０琼脂糖凝胶电泳、红外光谱以及化学反应等方法证明ＰＥ－ＮＰＩａ是一种含有ＱＤ葡萄糖、．甘露糖等特征基团的中性纯多糖，对・Ｈ和０一其Ｏ；清除率分别为４．０９５％和４．４，有显著的抗７２％具

细菌胞外多糖生物活性的研究进展_赵霞

网络出版时间：2016-03-22 16:00:27网络出版地址：/kcms/detail/62.1120.R.20160322.1600.002.html细菌胞外多糖生物活性的研究进展赵霞综述，王若愚审校中国科学院寒区旱区环境与工程研究所生态与农业研究室，甘肃兰州 730000摘要：细菌胞外多糖（Exopolysaccharides，EPS）是细菌产生的一类重要的生物大分子，在许多重要生命过程中起着非常关键的作用，由于其具有多种生物活性成为近年来研究的热点。

目前，细菌EPS作为天然产物，可大量发酵提取，且可降低成本，特别是一些乳酸杆菌和海洋细菌的新型EPS被证实具有多样化结构多糖的、潜在的有益生物活性，如抗肿瘤、免疫调节和抗氧化等，其在食品、医学等领域被广泛应用。

本文就细菌EPS在生物材料和药品方面的应用、免疫调节功能、抗肿瘤活性及抗氧化活性作一综述。

关键字：细菌；胞外多糖；抗肿瘤；抗氧化；免疫调节中图分类号：Q936文献标识码：A 文章编号： DOI：Progress of bioactivities for bacterial exopolysaccharidesZHAO Xia, WANG Ruo-yuKeyLaboratory of Ecological and Agricultural Research, Cold and Arid Regions Environmental and Engineering ResearchInstitute, Chinese Academy of Sciences, Lanzhou730000，Gansu Province, ChinaCorresponding author: WANG Ruo-yu, E-mail: wangruoyu@Abstract：Bacrerial exopolysaccharides (EPS）were produced from bacteria, which is a type of large biological moleculeand takes a cruicial effect in many process of life, and becomes a hot focus in recent years because it has a variety ofbiological activities. At present the bacterial EPS as a natural product may be extracted in large quanties by thefermentation process with a reduced cost, particularly some new types EPS from Lactobacillaceae and ocean bacteria havebeen identified to having polysaccharides with multiple-structure and potential biological benefitactivities,such asanti-tumor, anti-oxidationand immuno-modulatory effects. The bacterial EPS hasbeen found an outstanding prospect infood industry and medicine.. In this paper,applications of bacteria EPSare reviewed, including in biomedicinematerials,pharmaceiticals and health preparation, .andanti-tumor, anti-oxidationand immuno-modulatory effects.Key word：Bacteria; Exopolysaccharide(EPS); Anti-tumor; Anti-oxidation; Immuno-modulation多糖是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子聚合物，广泛存在于植物、真菌、藻类和细菌中。

《2024年蒙古口蘑胞外多糖提取、纯化及生物活性研究》范文

《蒙古口蘑胞外多糖提取、纯化及生物活性研究》篇一一、引言蒙古口蘑作为一种具有重要经济价值的食用菌，其胞外多糖在医疗、保健及食品工业中具有广泛的应用。

多糖是生物体内的一种重要成分，具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老等生物活性。

本文旨在研究蒙古口蘑胞外多糖的提取、纯化方法及其生物活性，以期为多糖的进一步应用提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料蒙古口蘑采集自内蒙古地区，经过清洗、破碎后备用。

实验中使用的试剂均为分析纯。

2. 方法（1）胞外多糖的提取将破碎的蒙古口蘑置于蒸馏水中，加热煮沸后离心，收集上清液。

重复此步骤数次，直至上清液中的多糖含量达到较高水平。

将上清液浓缩、醇沉、离心，收集沉淀，得到粗多糖。

（2）胞外多糖的纯化采用离子交换、透析、凝胶过滤等方法对粗多糖进行纯化，得到纯化的多糖。

（3）生物活性的研究通过体外实验和动物实验，研究纯化后的多糖的免疫调节、抗肿瘤、抗衰老等生物活性。

三、结果与讨论1. 胞外多糖的提取通过蒸馏水煮沸提取和多次离心的方法，成功提取出蒙古口蘑中的胞外多糖。

经过浓缩、醇沉、离心等步骤，得到粗多糖。

2. 胞外多糖的纯化采用离子交换、透析、凝胶过滤等方法对粗多糖进行纯化。

纯化后的多糖具有较高的纯度，可用于后续的生物活性研究。

3. 生物活性的研究（1）免疫调节作用通过体外实验，发现纯化的蒙古口蘑胞外多糖能够显著提高免疫细胞的活性，促进免疫球蛋白的产生，具有明显的免疫调节作用。

（2）抗肿瘤作用动物实验表明，蒙古口蘑胞外多糖对肿瘤细胞具有明显的抑制作用，能够诱导肿瘤细胞凋亡，降低肿瘤组织的生长速度。

同时，多糖还能够增强机体的免疫力，提高机体对肿瘤的抵抗能力。

（3）抗衰老作用实验结果显示，蒙古口蘑胞外多糖能够清除体内的自由基，减轻氧化应激对机体的损伤，从而起到抗衰老的作用。

此外，多糖还能够提高机体的抗氧化酶活性，进一步增强其抗衰老效果。

四、结论本文成功提取、纯化了蒙古口蘑中的胞外多糖，并研究了其生物活性。

2008细菌胞外多糖提取优化及毒性试验研究

［９］
１．７急性毒性实验选取健康昆明种小鼠（山西医科大学实验动物中２０± ２）ｇ，每组１０只，阴性对照心），体重（ ♀♂ 各半，ＲＥＰＳ１．２５ｇ／ｋｇ，组、实验 Ⅰ ～Ⅳ 组分别采用蒸馏水、２．５０ｇ／ｋｇ，５．００ｇ／ｋｇ和１０．００ｇ／ｋｇ灌胃。灌胃前各组小６ｈ，灌胃后１２ｈ喂食，饲养观察１０ｄ。记录鼠均禁食１动物死亡数目、体重增长和进食等情况，确定ＲＥＰＳ的ＬＤ）。半数致死量（５０１．８蓄积毒性实验健康昆明种小鼠，体重（２０± ２）ｇ，随机 ♀♂ 各半，分为对照组（ｎ＝１０）和实验组（ｎ＝１０）。实验组以１／１０ＬＤ的剂量灌胃给予ＲＥＰＳ水溶液，１次／ｄ，连续５０ｄ，５０５１ｄ时再增加１个ＬＤ，继续观察７ｄ。对照组采用自由５０饮水方式。记录死亡状况，并计算蓄积系数Ｋ。Ｋ＝ＬＤ（ｎ）／ＬＤ１）。实验结束，肉眼观察部分小鼠的５０５０（心、肝、肺、脾、肾等器官，检查内脏有无异常现象。
表２乙醇浓度对ＲＥＰＳ提取的影响Ｔａｂｌｅ２ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｅｔｈａｎｏｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｎＲＥＰＳｙｉｅｌｄ
ＥｔｈａｎｏｌＲＥＰＳ（ｇ／Ｌ）６０％５．３４± ０．０８７０％７．８３± ０．０４７５％８．９７± ０．０３８０％８．９０± ０．０５９０％８．８８± ０．０２

乳酸杆菌胞外多糖高纯度提取工艺的优化

@AB! 实验方法
!*+*!% &’( 提取流程及参数设定 % 保加利亚乳杆菌 /+
发酵液"!##Q 下 !#K58 灭酶 " 离心除菌体 " 浓缩为原体积 ! R " "加 A?L " 离心除蛋白 " 加乙醇沉淀多糖 " 离心去上清 "丙酮清洗沉淀"温水溶解"加乙醇沉淀多糖"透析"定容 "多糖合成量的测定"冻干
，并且安全无毒，使其倍受青睐。目前国内对
乳酸菌 &’( 分离、提纯条件研究报道较少，而国外研
［" ］究相对较多。 &’( 的分离、纯化受到 &’( 的性质
和共存的组成成分的影响。目前研究中常先用离心然后用乙醇或丙法去除 &’( 中的蛋白质和细菌体，酮分级沉淀 &’( ，并用透析法去除沉淀的无机盐。本实验采用三氯乙酸法除去乳酸菌胞外多糖提取物中的蛋白质，不但可以除去提取物中的游离蛋白，还可以除去 &’( 中的结合蛋白，效果较好，同时还可以得到较高的 &’( 得率。本文通过从除 &’( 中蛋白条件优化、乙醇沉淀 &’( 条件优化、不同的离心力及离心时间对多糖获得量的影响等方面研究，获得了乳酸菌胞外多糖的最佳提取工艺。
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表 !" 除蛋白结果实验号 ! , 1 6 0 5 / 3 # 离心力（ $ %）（ !0... ） ! ! ! （ !/... ） , , , （ ,!... ） 1 1 1 & 三氯乙酸浓度（’ ） ! （ 1. ） , （ 6. ） 1 （ 0. ） ! , 1 ! , 1 ( 离心时间（ )*+） ! （ ,. ） , （ 1. ） 1 （ 6. ） 1 ! , , 1 ! #! ,-. .230! 4 .2.0. .2033 4 .2.!5 .201. 4 .2.5 .2/-, 4 .2.,! .21.- 4 .2.!. .2,1- 4 .2.0/ !2!6- 4 .2.11 .2-3! 4 .2.6! .21,/ 4 .2..6 #! ,/. .2-5. 4 .2...26.3 4 .2.!1 .2151 4 .2.,, .2-03 4 .2.0. .2,15 4 .2.,1 .2!3, 4 .2.13 .250/ 4 .2..6 .201, 4 .2.!1 .2,0- 4 .2..6

《蒙古口蘑胞外多糖提取、纯化及生物活性研究》范文

《蒙古口蘑胞外多糖提取、纯化及生物活性研究》篇一一、引言蒙古口蘑是一种具有重要经济价值的食用菌，其胞外多糖（EPS）因其独特的生物活性而备受关注。

EPS具有抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等多种生物活性，因此对其提取、纯化及生物活性的研究具有重要意义。

本文旨在研究蒙古口蘑胞外多糖的提取、纯化方法，并探讨其生物活性。

二、材料与方法1. 材料（1）菌种：蒙古口蘑。

（2）试剂：包括各种提取、纯化及生物活性检测所需试剂。

（3）仪器：离心机、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪等。

2. 方法（1）胞外多糖的提取：采用热水浸提法提取蒙古口蘑胞外多糖。

（2）纯化：通过透析、醇沉、柱层析等方法对提取的多糖进行纯化。

（3）生物活性检测：采用体外细胞实验、动物实验等方法检测多糖的抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等生物活性。

三、结果与分析1. 胞外多糖的提取通过热水浸提法成功提取出蒙古口蘑胞外多糖，得率较高，且多糖纯度较好。

2. 纯化结果经过透析、醇沉、柱层析等纯化步骤，成功得到较为纯净的蒙古口蘑胞外多糖。

高效液相色谱分析表明，多糖的分子量分布较为集中，纯度较高。

3. 生物活性检测（1）抗肿瘤活性：通过体外细胞实验发现，蒙古口蘑胞外多糖对肿瘤细胞具有显著的抑制作用，且呈剂量依赖性。

进一步研究表明，该多糖主要通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖等机制发挥抗肿瘤作用。

（2）抗氧化活性：动物实验表明，蒙古口蘑胞外多糖具有显著的抗氧化作用，能够显著提高体内抗氧化酶的活性，降低氧化应激水平。

（3）免疫调节作用：该多糖能够显著增强机体的免疫功能，提高免疫细胞的活性，对免疫系统具有调节作用。

四、讨论本研究成功提取、纯化了蒙古口蘑胞外多糖，并对其生物活性进行了研究。

结果表明，该多糖具有显著的抗肿瘤、抗氧化、免疫调节等生物活性，具有重要的应用价值。

在今后的研究中，可以进一步探讨该多糖的作用机制，以及其在药物、保健品等领域的应用前景。

此外，还可以尝试对不同来源、不同种类的食用菌胞外多糖进行类似的研究，为食用菌的开发利用提供更多的科学依据。

细菌胞外多糖提取分离技术研究进展

食品与药品 Food and Drug 2010年第12卷第05期 217细菌胞外多糖提取分离技术研究进展王桂兰1,2，凌沛学1,2*（1.山东大学药学院，山东济南 250012；2. 山东省生物药物研究院博士后科研工作站，山东济南 250101）摘要：细菌胞外多糖是当今进入工业化发酵生产的一类重要的多糖。

由于多糖种类的不同，其分离纯化工艺不尽相同。

本文综述细菌胞外多糖发酵生产中提取分离技术的研究进展，并比较了各种分离技术，介绍了针对极具商业价值的微生物多糖的几种新型提取分离技术，展望了微生物多糖研究的发展趋势。

关键词：胞外多糖；提取；分离；发酵中图分类号：Q539 文献标识码： A 文章编号：1672-979X （2010）05-0218-03收稿日期：2010-03-01作者简介：王桂兰（1986-），女，山东滨州人，硕士研究生，微生物与生化药学专业*通讯作者：凌沛学，男，研究员，博士生导师 Tel:（0531）81213003 E-mail:peixue.ling@Progress on Extraction and Isolation T echnologies of Bacterial Exocellular PolysaccharidesW ANG Gui-lan 1,2, LING Pei-xue 1,2（1. School of Pharmaceutical Sciences, Shandong University, Jinan 250012, China; 2. Post-doctoral Scientific ResearchWorkstation, Institute of Biopharmaceuticals of Shandong Province, Jinan 250101, China ）Abstract: Bacterial exocellular polysaccharides are important in industrial fermentation now. Because of different species, the technologies of extraction and isolation are different for each polysaccharide. All the technologies applied usually at home and abroad in fermentation industry are reviewed in this paper and compared with each other. The paper also introduces some new technologies and methods for the extraction and isolation of certain valuable polysaccharides, and gives an outlook about the progress on bacterial exocellular polysaccharides.Key Words: exocellular polysaccharide; extraction, isolation; fermentation多糖在自然界高等植物、藻类、微生物及动物体内均存在，分布极广。

微生物胞外多糖提取纯化研究进展

黑龙江农业科学２０１９(５):１５９Ｇ１６１H e i l o n g j i a n g A gr i c u l t u r a l S c i e n c e s h t t p ://w w w．h a a s e p．c n D O I :１０．１１９４２/j．i s s n １００２Ｇ２７６７．２０１９．０５．０１５９韩勇．微生物胞外多糖提取纯化研究进展[J ]．黑龙江农业科学,２０１９(５):１５９Ｇ１６１．微生物胞外多糖提取纯化研究进展韩㊀勇(山西药科职业学院,山西太原０３００３１)摘要:近年来,微生物胞外多糖以其众多的生物和药理作用引起人们的重视,研究和开发具有生物活性的胞外多糖已成为科学研究的热点,其提取纯化工艺是多糖研究与开发的重要组成部分.本文综述了近些年微生物胞外多糖的提取纯化方法,旨在为其进一步的开发利用提供参考.关键词:微生物;胞外多糖;提取;纯化收稿日期:２０１８Ｇ１１Ｇ１９基金项目:山西药科职业学院科研资助项目(２０１６１０６).作者简介:韩勇(１９７８Ｇ),男,硕士,讲师,从事微生物发酵工程研究.E Ｇm a i l :s w x y h y＠１６３．c o m .㊀㊀多糖是一类天然大分子物质,不仅是生物体的组成成分,且具有重要的生物活性功能.胞外多糖是由微生物菌体产生的多糖,易与菌体分离,近些年通过液体深层发酵培养技术实现了许多胞外多糖的大规模工业化生产.到目前为止,已大量投产的微生物胞外多糖主要有黄原胶㊁结冷胶㊁热凝多糖等.采用液体深层发酵生产微生物胞外多糖具有生产周期短㊁产量大㊁提取率高,易于实现大规模工业化生产等优点,已逐渐成为获取胞外多糖的主要方法,具有广阔的开发应用前景.在微生物胞外多糖的生产过程中,除采用特殊工艺控制发酵过程以外,胞外多糖的提取纯化工艺,同样是保证产品质量㊁降低生产成本的关键,已成为多糖生产的制约因素.本文就近年来微生物胞外多糖的提取㊁纯化方法进行了综述,以期为微生物多糖进一步的研究提供参考.１㊀微生物胞外多糖的提取１．１㊀发酵液预处理发酵液的预处理工艺主要是将培养液中的细胞㊁残糖㊁色素及其他代谢产物进行提前处理,尽可能并大量的除去对多糖分离提取有影响的杂质.而且,许多胞外多糖发酵液的粘稠度较高,不易进行液固分离.为改变发酵液的物理流变特性,有必要对发酵液进行预处理操作.预处理可采用的工艺方法包括物理法㊁化学法㊁酶处理法等.邓振山等[１]对一株结皮真菌产胞外多糖的研究中,真菌经发酵培养,取其发酵液,布氏漏斗６层滤纸抽滤,５g １００m L Ｇ１活性炭吸附５m i n ,过滤,取其滤液用旋转蒸发器浓缩至１/４体积.刘晶等[２]在对副干酪乳杆菌V L ８产胞外多糖的研究中,将发酵液在９５ħ水浴５m i n 去酶活,４ħ,８０００r m i n Ｇ１条件下离心１５m i n,得发酵上清液.１．２㊀多糖的提取从发酵液中提取多糖的工艺方法主要是根据多糖在发酵液中的性质来决定的.实际生产研究中,可采用一些使多糖在溶液中溶解度降低后分相㊁脱水㊁析出或加入能与多糖结合絮凝沉淀的溶剂,以达到沉淀分离多糖的目的.１．２．１㊀有机溶剂法㊀有机溶剂沉淀是多糖分离纯化最常用的工艺方法.在多糖溶液中加入与水互溶的有机溶剂,可降低多糖的溶解度,从而引起多糖沉淀或凝聚,同时有助于脱色及脱去低分子量的杂质.甲醇㊁乙醇㊁异丙醇和丙酮等是多糖分离纯化较常用的有机溶剂,其中乙醇应用最为广泛.多糖水溶液中加入乙醇,随着溶液中乙醇浓度逐渐提高,多糖溶解度逐渐降低,形成沉淀析出.目前,醇沉法已广泛用于多糖的提取分离[３Ｇ５].韩蓓等[６]将P a n t o e aa n a n a t i sG Ｇ１４细菌发酵液离心取上清,上清液中加入３倍体积的９５％预冷乙醇过夜沉淀,经离心收集多糖.１．２．２㊀超滤㊀超滤是一种新型膜分离技术,是利用不同截留分子质量的微孔滤膜,将溶液中具有不同分子质量组成的组分高效分离.超滤具有条件温和㊁操作简单㊁分离效率高㊁极少破坏多糖的生物活性㊁可防止生物热敏性物质失活等优点,且没有有机溶剂法的试剂残留,现已成为多糖提取分离研究的重要方法,正在向大规模工业化方向发展.武忠伟等[７]采用切向流超滤系统,分别使用０．１μm 和１００k u 膜组件,将蝙蝠蛾拟青霉发酵液中的胞外多糖分为分子质量＞２０００k u ,１００~２０００k u 和＜１００k u 三部分.与传统的分离方法相比,超滤膜法分离发酵液中胞外多糖具有快速㊁９５１㊀㊀㊀㊀㊀黑㊀龙㊀江㊀农㊀业㊀科㊀学５期能耗低和损失率低等优点.１．２．３㊀喷雾干燥法㊀喷雾干燥法具有传热快㊁水分蒸发迅速㊁干燥时间短的特点,目前已用于多种生物活性物质的提取分离.张俐娜等[８]将４０L 茯苓菌丝体培养液用喷雾干燥机干燥得到５１．８g 胞外粗多糖,喷雾干燥机的入口温度２５０ħ,出口温度７０~８０ħ.１．２．４㊀冷冻干燥法㊀冷冻干燥法是通过冻结后升华原理去除物料中的水分,获得干燥制品的技术.与其他干燥方法相比,具有制品不变质㊁易长期储存㊁利于热敏性物质保持生物活性等优点.徐晓芬等[９]采用冷冻干燥,－８０ħ预冻１２h ,冷阱温度－５０ħ,真空度１０Ｇ３m B a r,冻干４８h ,得类芽孢杆菌B D ３５２６的胞外多糖粗品.２㊀微生物胞外多糖的脱蛋白在胞外多糖的纯化过程中,多糖中的蛋白质常常影响多糖纯度,因此多糖脱除蛋白质是多糖纯化精制的关键.一般选择使多糖不沉淀而使蛋白质沉淀的试剂来处理,但处理操作要求时间短,温度低,防止多糖降解.常用的多糖除蛋白的方法有:S e v a g 法㊁三氯乙酸法㊁三氟三氯乙烷法和酶法等.２．１㊀S e v a g 法多糖脱蛋白较好的方法是S e v a g 法,蛋白质在氯仿等有机溶剂中变性,形成胶状,可经离心后除去.S e v a g 法的优点是工艺条件温和,缺点是蛋白质脱除效率较低,需要经过多次操作才能除净蛋白质,并且S e v a g 法有机试剂用量大,容易造成有毒溶剂残留.杨晨璐等[１０]将植物乳杆菌胞外多糖溶液中加入１/３体积的S e v a g 试剂,震荡３０m i n 后,４０００r m i n Ｇ１离心１５m i n,收集上层水相溶液,重复以上操作至两相之间无蛋白质层为止.２．２㊀三氯乙酸法三氯乙酸法是在粗多糖溶液中加入三氯乙酸,应用三氯乙酸是一种强酸,使蛋白质变性沉淀而去除,但同时会使多糖链水解,造成多糖损失和多糖组分发生变化,此外也会造成有机试剂残留.王金玲等[１１]采用三氯乙酸法对桦褐孔菌胞外多糖进行脱蛋白操作,最佳工艺为三氯乙酸０．５m o l L Ｇ１,加入量１５％,振荡时间２０m i n,静止时间４０m i n.芦红云等[１２]将灰树花胞外粗多糖用体积分数３％三氯乙酸脱蛋白.２．３㊀三氟三氯乙烷法将多糖溶液与三氟三氯乙烷等体积混合,低温下搅拌１０m i n,离心后得上层水层,水层相继续用此方法处理多次,即得无蛋白质的多糖溶液.此方法的原理是三氟三氯乙烷可将蛋白质沉淀.本方法效率较高,但所用溶剂易挥发,不宜大规模工业化应用.２．４㊀酶法酶法是在多糖溶液中加入一定浓度的蛋白酶,在最佳的酶反应条件下水解去除蛋白质的方法.蛋白质水解酶类可以去除多糖的结合蛋白质,常用的酶有胃蛋白酶㊁胰蛋白酶㊁木瓜蛋白酶等.酶法具有条件温和,多糖损失率低等特点.缺点是酶法不能完全去除多糖中的蛋白质.３㊀微生物胞外多糖的纯化从发酵液中获得的多糖经除去杂质后,仍是含有多种不同相对分子质量级的混合物,要得到相对分子质量分布均一的组分,仍需对其进行进一步的纯化.３．１㊀脱色有些胞外多糖含有大量色素,影响成品的质量,因此粗多糖必须脱色.多糖脱色常常采用吸附法㊁氧化法㊁离子交换法.戴世华等[１３]对秀珍菇胞外多糖活性炭脱色工艺进行了研究,确定最佳的脱色工艺条件为:活性炭用量１．６％,脱色时间７０m i n,脱色温度７０ħ,pH ３.在此条件下,色素的脱除率为８０．５％,多糖的保留率为８４．８％.彭期定等[１４]采用３０％H ２O ２脱色木蹄层孔菌胞外多糖,H ２O ２用量为粗多糖溶液体积的１/１０.芦红云等[１２]采用大孔吸附树脂D ３０３对灰树花胞外粗多糖脱色.３．２㊀透析法透析法是利用一定大小孔目的透析袋,使多糖中的无机盐或其他小分子杂质透过从而达到分离纯化的目的.徐健等[１５]采用截留分子量为３５００的透析袋透析厚藤共生真菌胞外多糖,袋内透析液减压浓缩,冷冻干燥得胞外多糖粗品.彭期定等[１４]将预处理后的木蹄层孔菌胞外多糖溶液浓缩后于透析袋(截留量１３０００u 中),自来水流动透析４８h ,浓缩后真空冷冻干燥得粗品.３．３㊀大孔吸附树脂纯化大孔吸附树脂是一类不含交换基团,具有大孔结构的高分子吸附剂,其多孔性网状空穴可较好地吸附多糖中的杂质,主要用于分离㊁脱无机盐㊁浓缩及除去有机杂质.徐增龙等[１６]采用D １０１大孔吸附树脂分离冬虫夏草菌丝体发酵液０６１５期㊀㊀韩㊀勇:微生物胞外多糖提取纯化研究进展中的多糖,结果表明,在上样量和树脂比例为１ʒ１０时,多糖的纯化效果最佳,树脂的使用效率最大.大孔吸附树脂具有吸附量大㊁选择性好㊁吸附速度快㊁易于解吸附㊁机械强度高㊁再生处理简便等优点,尤其适用于从水溶液中分离低极性或非极性的化合物.３．４㊀柱层析法向玉玲等[１７]依次采用D E A EＧ５２柱层析, S e p h a d e xGＧ２００柱层析,将桦褐孔菌胞外多糖进行分级纯化.李辉等[１８]采用S e p h a r o s eC LＧ６B 凝胶柱层析纯化双歧杆菌R H胞外多糖,收集糖峰洗脱液,经透析㊁冷冻干燥,得胞外多糖纯品.曹永强等[１９]将植物乳杆菌粗多糖依次采用D EＧA EＧS e p h a r o s eF a s tF i o w离子交换柱层析,S e p hＧa r o s eC LＧ６B凝胶柱层析纯化,得多糖纯品.４㊀结语近年来,众多研究结果表明,多糖是一种能够增强人体免疫功能的生物活性物质,可作药物和保健品的有效成分,目前已经成为分子生物学㊁药学㊁食品科学等领域中的热点研究内容之一.其中,活性多糖的提取纯化直接影响多糖产品的质量及产量,已成为多糖研究的主要方向.参考文献:[１]㊀邓振山,崔凡,李军,等．１株结皮真菌胞外多糖的初步研究[J]．微生物学杂志,２０１７,３７(２):６２Ｇ６８．[２]㊀刘晶,杨森,陈杨杨,等．副干酪乳杆菌V L８产胞外多糖条件优化及其抗氧化性质[J]．中国食品学报,２０１７,１７(５):８２Ｇ８９．[３]㊀陈丽华,张清华,管咏梅,等．虫草发酵液胞外多糖的醇沉工艺优选[J]．中国实验方剂学杂志,２０１４,２０(１８):２０Ｇ２２．[４]㊀韩丽荣,程代,孟梦,等．灰树花胞外多糖的分离纯化及免疫调节作用[J]．天津科技大学学报,２０１６,３１(４):２５Ｇ２９．[５]㊀贾红倩,刘嵬,梁立,等．红曲霉菌胞外多糖的分离纯化㊁结构鉴定及抗氧化活性测定[J]．食品工业科技,２０１７,３８(１２):９２Ｇ９６．[６]㊀韩蓓,罗文娟,于燕,等．P a n t o e aa n a n a t i sGＧ１４细菌胞外多糖的体外抗氧化活性及抗肿瘤活性研究[J]．天然产物研究与开发,２０１３(２５):１４９４Ｇ１４９８．[７]㊀武忠伟,张明霞,陆隽雯,等．超滤分离蝙蝠蛾拟青霉胞外多糖工艺优化[J]．中国食品学报,２０１５,１５(１２):１１５Ｇ１２１．[８]㊀张俐娜,金勇,陈莉,等．一种具有抗肿瘤活性的茯苓菌丝体胞外多糖的制备方法:２００４１００６０６５０．１[P]．２００３Ｇ０６Ｇ２５．[９]㊀徐晓芬．类芽孢杆菌B D３５２６在无氮固体培养基上产胞外多糖的研究[J]．食品工业科技,２０１７,３８(１６):９５Ｇ１００．[１０]㊀杨晨璐,马林,周蕊,等．植物乳杆菌胞外多糖的分离纯化及其抗氧化性研究[J]．中国乳品工业,２０１８,４６(５):９Ｇ１３．[１１]㊀王金玲,杜文婧,王琦．桦褐孔菌胞外多糖脱蛋白工艺比较研究[J]．吉林农业大学学报,２０１０,３２(６):６３３Ｇ６３８．[１２]㊀芦红云,吴天祥,汤庆莉,等．天麻醇提物对灰树花胞外多糖单糖组成和生物活性的影响[J]．食品科学技术学报,２０１８,３６(３):４０Ｇ４７．[１３]㊀戴世华,孙玉军,宋玉铃,等．秀珍菇胞外多糖活性炭脱色工艺研究[J]．安徽科技学院学报,２０１４(４):２５Ｇ２９．[１４]㊀彭期定,梅小飞,徐茹玉,等．木蹄层孔菌胞外多糖的深层培养工艺优化及体外抗氧化研究[J]．食品科技,２０１７,４２(３):２６Ｇ３１．[１５]㊀徐健,陶洪文,陈荫,等．厚藤共生真菌(F u s a r i u mo x y s p oＧr u m Y２４Ｇ２)胞外多糖的化学组成和结构研究[J]．中国海洋大学学报,２０１１,４１(１０):８７Ｇ９２．[１６]㊀徐增龙,张如松．冬虫夏草菌丝体发酵液中多糖的分离纯化与含量测定[J]．浙江中医药大学学报,２００７,３１(３):３７６Ｇ３７７．[１７]㊀向玉玲,李娟,徐向群．桦褐孔菌胞外多糖级份的化学性质和抗氧化活性研究[J]．浙江理工大学学报,２０１２,２９(６):８６３Ｇ８６７．[１８]㊀李辉,宋居易,刘蕾,等．双歧杆菌R H胞外多糖提取纯化及体外抗凝血活性评价[J]．食品科学,２０１４,３５(２３):１２９Ｇ１３３．[１９]㊀曹永强,张健,赵雯,等．植物乳杆菌胞外多糖的分离纯化及其乳化特性[J]．食品科学,２０１６,３７(１７):７Ｇ１３．R e s e a r c hP r o g r e s s o nE x t r a c t i o na n dP u r i f i c a t i o no fM i c r o b i a l E x o p o l y s a c c h a r i d eH A NY o n g(S h a n x i P h a r m a c e u t i c a lV o c a t i o n a l C o l l e g e,T a i y u a n０３００３１,C h i n a)A b s t r a c t:I n r e c e n t y e a r s,m i c r o b i a l e x t r a c e l l u l a r p o l y s a c c h a r i d e sh a v e a t t r a c t e dm u c ha t t e n t i o nd u e t o t h e i r n uＧm e r o u sb i o l o g i c a l a n d p h a r m a c o l o g i c a l e f f e c t s．T h e r e s e a r c h a n dd e v e l o p m e n t o f b i o a c t i v e e x t r a c e l l u l a r p o l y s a cＧc h a r i d e sh a sb e c o m e ah o t s p o t i n s c i e n t i f i c r e s e a r c h．T h e e x t r a c t i o n a n d p u r i f i c a t i o n p r o c e s s o fm i c r o b i a l e x t r aＧc e l l u l a r p o l y s a c c h a r i d e s i s a n i m p o r t a n t p a r t o f t h e r e s e a r c h a n dd e v e l o p m e n t o f p o l y s a c c h a r i d e s．I n t h i s p a p e r, t h e e x t r a c t i o na n d p u r i f i c a t i o nm e t h o d s o fm i c r o b i a l e x t r a c e l l u l a r p o l y s a c c h a r i d e s i n r e c e n t y e a r sw e r e r e v i e w e d t o p r o v i d e r e f e r e n c e f o r t h e i r f u r t h e r d e v e l o p m e n t a n du t i l i z a t i o n．K e y w o r d s:m i c r o b e;e x o p o l y s a c c h a r i d e;e x t r a c t i o n;p u r i f i c a t i o n１６１。

粘细菌胞外多糖提取纯化及其生物活性检测

粘细菌胞外多糖提取纯化及其生物活性检测摘要随着这几年来糖化学的迅速发展，微生物胞外多糖的理论和应用也受到了人们的重视。

胞外多糖的提取纯化和组分分析的实验技术都已成熟，为本实验提供了理论基础和实验指导。

本文通过观察粘细菌在CAS固体培养基平板上的菌落黏性圈，从79株粘细菌中筛选到6株胞外多糖产量高的菌株，并对其中4株粘细菌产生的胞外多糖进行了提取纯化。

粘细菌经液体发酵培养后，将发酵液进行乙醇沉淀得到粗多糖的提取物。

粗多糖经氯仿、三氯乙酸脱蛋白，过氧化氢脱色，得到白色粉状纯化物。

纯化的粘细菌胞外多糖采用0.5mol/L盐酸水解后，经高效液相色谱分析，可确定菌株92033、93147、94016的胞外多糖中均含有葡萄糖、甘露糖，其他成分需进一步验证。

4株粘细菌的胞外多糖纯化物的水溶液，经絮凝活性检测实验表明，均具有絮凝活性，其中菌株92033对4g/L的高岭土悬浊液的絮凝率达到92.84%，显示出良好的应用前景。

装关键词：糖化学胞外多糖粘细菌絮凝活性订线ABSTRACTAs the rapid development of sugar chemical over the past few years, the theory and application of the microbial exopolysaccharides were important for the people. The extraction, purification and component analysis experimental technique of the exopolysaccharide had been mature, which provided a theoretical basis and experimental guidance. In this article, Myxobacteria which produced many polysaccharide were screened from the CAS solid medium by observing the stickiness of colony. We had got six strains which could produced high exopolysaccharide from the 79 strains, and four strains had been extracted and purificated. After liquid culture fermentation, we could obtained the crude polysaccharide extracts by alcohol precipitation methd from the fermentation broth. We obtained the white powder of the polysaccharide by the chloroform and trichloroacetic acid removing protein and hydrogen peroxide detreated. After purified Myxobacteria exopolysaccharides 0.5mol/L hydrochloride hydrolysis, we could determine that the strains of 92033,93147,94016 which containing glucose and mannose by high performance liquid chromatography analysis. Other components were proved by further validation. After the testing of the flocculating activity, the four myxobacteria aqueous solution of exopolysaccharide purification were all had flocculation activity. Strains of the 92033 had an effct on 4g/L kaolin suspension and the flocculation rate rich to 92.84% and it showed a good application prospect.Key words:sugar chemical exopolysaccharides Myxobacteria flocculation activity目录一前言 (1)1.1粘细菌简介 (1)1.2微生物胞外多糖概况 (1)1.3微生物胞外多糖的应用 (2)1.3.1胞外多糖的药用性 (2)1.3.2胞外多糖的絮凝性 (2)1.4国内外研究现状 (3)1.5本实验的研究内容与意义 (3)二本论 (4)2.1实验材料 (4)2.1.1菌种来源 (4)2.1.2实验所用培养基 (4)2.1.3主要仪器与试剂 (4)2.1.3.1仪器 (4)2.1.3.2试剂 (4)2.2实验方法 (5)2.2.1实验方案 (5)2.2.2粘细菌的发酵培养 (5)2.2.2.1菌种活化 (5)2.2.2.2产多糖菌株的筛选 (5)2.2.2.3产多糖菌株的种子液培养 (5)2.2.2.4种子液的发酵培养 (5)2.2.3粘细菌胞外多糖的粗提取 (6)2.2.4粘细菌胞外多糖的纯化 (6)2.2.4.1初步纯化 (6)2.2.4.2胞外多糖蛋白质的去除 (7)2.2.4.3胞外多糖脱色 (7)2.2.5胞外多糖的组分分析 (7)2.2.5.1胞外多糖的完全水解 (7)2.2.5.2胞外多糖的高效液相色谱分析 (7)2.2.6胞外多糖的生物活性检测 (7)2.3结果与讨论 (8)2.3.1高产胞外多糖的粘细菌菌株的筛选 (8)2.3.2胞外多糖的提取物 (9)2.3.3胞外多糖的组分分析 (9)2.3.4胞外多糖的活性检测 (12)三结论 (14)谢辞 (15)参考文献 (16)一前言1.1粘细菌简介粘细菌（Myxobacteria）是一类滑行运动，革兰氏染色阴性的单细胞细菌[1]。

乳酸菌胞外多糖提取条件的研究

【ｉｌｇｃｃｅｃｎｇｎｅｎｓｔｔ，ＨｅｅｉｅｔｆｕｉｅｓａｄＥｏｏｃ，ＢｏｏｉａＳｉｎｅａｄＥｎｉｅｒｇＩｔｕｅｌｉｎｉｂｉＵｎｖ￣ｉｏｓｎｓｎｃｎｍｉｓｙＢ
Ｓｉｚｕｎ，Ｈｂｉ５０１ｈａｈｊｈａｇｅｅ００６，Ｃｉ）ｉａｎ
／ｂｔａｔＴｅｅａｅｍａｙｆｃｏｔａｆｃｅＳｅｔａｔｎｏｃｉｃｄｂｃｅａ．Ｓｖｅｍｅｈｄｗｓｕｅｏｇｔｒｆｋｓｒｅ：ｈｒｒｎａｔｍｈｔａｅｔｄＥＰｘｒｃｉｆｌｔａｉａｔｒ１ａａｔｏａｓｄｔｅｄｏｏａｃｉｇｉ
影响乳酸菌胞外多糖提取效果的因素较多采用savage法去除蛋白发酵上清液浓缩到原体积的13加入3倍体积的无水乙醇进行醇沉选择8000rmin作为醇沉溶液的离心速度离心2次透析12h以上对保加利亚乳杆菌产胞外多糖进行提取达到了较好的提取效果
维普资讯
第５总第１期）期（３６
Ｋｙｗｒｓａｔｂｃｌｓｂｌａｉｕ；ｅｔｅｌｌｒｐｌｓｃｈｒｄ；ｌｃｉｃｄｂｃｅａ；ｐｌｓｃｈｒｅｅｔｃｉｎｅｏｄ：ｌｃｏａｉｕｕｇｒｓｘｒｃｌａｏｙａｃａｉｅａｔａｉａｔｒｌｃａｕｃｉｌｏｙａｃａｄｘｒｔｉａｏ
微生物的胞外多糖（ｘｐｌａｃａｉｅＰ）是ｅｏｏｓｃｈｒ，ＥＳｙｄ２实验结果与讨论微生物在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的黏液多糖或荚膜多糖，具有增稠和胶体性质，并能溶解或分散２蛋白脱除方法的确定．１酶解后，发酵液中残存的蛋白在醇沉的过程中可水中的长链和高分子聚合物【２自２１１．。０世纪４年代０成功开发出由肠膜明串珠菌发酵生产右旋糖以来，世能会与多糖一起沉淀下来，这部分蛋白会对多糖的吸界范围内微生物ＥＳ的研究与开发取得令人瞩目的光度值产生一定的影响，从而造成对ＥＳ得率计算的ＰＰ成就，新的微生物ＥＳ的开发已成为工业微生物研误差。对比Ｓｖｇ法、等电点法、加热法以及三氯乙Ｐａａｅ究的热点。许多食品级的微生物具有合成ＥＳ的能酸法的去除效果，不同方法对蛋白脱除的影响见图１Ｐ。力，乳品工业中广泛使用产ＥＳ乳酸菌。本文研究Ｐ乳酸菌ＥＳ的提取和纯化，为其进一步应用提供了Ｐ理论依据。

微生物胞外多糖的提取与应用研究进展

微生物胞外多糖的提取与应用研究进展王蓓蓓1张伟2周晓伦2*（1白水镇白水中心卫生院，甘肃平凉744000；2甘肃医学院，甘肃平凉744000）摘要：随着科学研究的不断深入与提取技术的提高，近年来对多糖生物学功能的认识有了量的提升和质的飞跃，多糖的生物学功能涉及免疫、癌变、肿瘤和衰老等方面，可以应用于食品、医药、农业、污水处理等领域。

该文对多糖的定义、分类、生物合成和多糖的提取方法进行了概述，重点阐述了高压脉冲电场技术、超临界流体萃取法、双水相萃取法。

虽然对微生物多糖的研究仍在不断深入，但微生物多糖真正的应用价值尚未得到实现。

目前，胞外多糖已经作为食品添加剂运用到食品工业中，除此之外多糖还可用于制备抗肿瘤新药或疫苗、抗凝血等应用。

关键词：微生物胞外多糖；提取方法；生物合成；超临界流体萃取法中图分类号Q539文献标识码A文章编号1007-7731（2021）18-0021-03Research Progress on Extraction and Application of Microbial Extracellular Polysaccharides WANG Beibei1et al.（1Baishui Central Health Center,Pingliang744000,China）Abstract:With the continuous development of scientific research and the improvement of extraction technology,re⁃searchers in recent years on the biological function of polysaccharide understanding has a quantity of improvement and qualitative leap,involving immunity,cancer,tumor and aging and other aspects,can be applied to food,medi⁃cine,agriculture,sewage treatment and other fields.This article gives a detailed overview of the definition,classifica⁃tion,biosynthesis and extraction methods of polysaccharides,with emphasis on high-voltage pulsed electric field technology,supercritical fluid extraction,and aqueous two-phase extraction.Although the research on microbial polysaccharides continues to deepen,the true application value of microbial polysaccharides has not been realized. At present,extracellular polysaccharides have been used as food additives in the food industry.In addition,polysac⁃charides can also be used to prepare new anti-tumor drugs or vaccines.Key words:Microbial Exopolysaccharide;Extraction method;Biosynthesis;Supercritical fluid extraction1多糖的定义与分类多糖（Polysaccharide）属于典型的糖类物质，其分子结构十分庞大而且复杂，是由多个单糖分子失水与缩合构成，为典型的聚合糖高分子碳水化合物，由至少4个单糖并通过糖苷键进行结合。

乳酸菌胞外多糖的分离筛选方法研究进展

关键词：乳酸菌胞外多糖分离筛选方法中图分类号：ＴＳ２０１．３文献标识码：Ａ文章编号：１６７２ — ５３３６（２０１４）０６ — ０００１ — ０３
１引言
２产胞外多糖乳酸菌的筛选方法２．１ＭＲｓ一溴甲酚紫平板筛选法乳酸菌，是一类无芽孢、革兰氏染色为阳性的异养
厌氧型原核细菌，能够发酵糖类，产物主要为乳酸（辨别的主要标志），其形态多样主要以链状和杆状存在。乳酸菌对人体有诸多益处，比如乳酸菌在生长过程中消耗乳酸对预防和治疗乳糖不耐症有良好的作用；同时发酵的产物可以促进钙、镁离子及蛋白质、单糖等营养物质的吸收；还可以产生Ｂ族维生素等大量有益物质；另外，乳酸菌的生长可以增加肠道的益生菌群，进一步改善人体胃肠道功能，保持人体肠道内菌群平衡，维护人体健康；也可以抑制腐败菌的繁殖；同时消解腐败菌产生的毒素，清除肠道垃圾；代谢产物还可以抑制胆固醇吸收，有降血脂、降血压作用；亦可以提高ＳＯＤ酶活力，消除人体自由基，具有抗衰老、延年益寿作用。此外，还有一些报道认为乳酸菌能有效的预防女性泌尿生殖系统细菌感染，还能控制人体内毒素水平，保护肝脏并有助于增强肝脏的解毒、排毒功能。总之，乳酸菌现在是备受瞩目，前景广阔。胞外多糖（ｅｘｏｌｍｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＥＰＳ）是由细菌及少数酵母菌和丝状真菌在生长的过程中产生的。微生物产生的ＥＰＳ可以在自然环境中起到保护微生物细胞的作用，比如使细胞避免因干燥而引起脱水、防止被噬菌体侵染，同时还可维持细胞的渗透压，并且参与到细胞的信息传递和细胞的构成等作用。自从通过肠膜明串珠菌肠膜亚种（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｃｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓｓｕｂｓｐ．ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）的发酵生产出右旋糖酐以来，乳酸菌胞外多糖的开发与应用便引起了诸多研究人员的关注，已变成了一个重大的研究热点［】ｌ。乳酸菌ＥＰＳ是乳杆菌诸多菌属中多种乳酸细菌在特定环境下分泌到细胞壁外的黏液或荚膜多糖（ｃａｐｓｕｌａｒｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ）。乳酸菌ＥＰＳ的作用很多，在酸乳形成方面，对其质构与风味，产生特有的营养价值方面有极为重要的作用与影响，它可以增加酸奶的黏度，提高酸奶稳定性和保水性，使产品具有良好的口感、质地和风味。又因为乳酸菌ＥＰＳ具有安全无毒的特性，所以在食品工业中作为增稠剂、稳定剂、乳化剂、胶凝剂及保湿剂而被广泛的应用。通过研究，部分乳酸菌ＥＰＳ还具有抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、降低血糖、增强人体免疫力、调节胃肠功能、降血清胆固醇等多种生理功能，因此将其开发为功能性食品具有广阔的推广前景。本文综合阐述拉近几年有关乳酸菌ＥＰＳ分离纯化实验的研究报道，总结分析一些分离纯化的手段并说

微生物胞外多糖研究进展

微生物胞外多糖研究进展崔艳红1　黄现青2(1河南科技学院动物科学系,新乡　453003;2南京农业大学食品科技学院,南京　210095)摘　要:　微生物胞外多糖主要是指微生物产生的一些水溶性胶,近几年来由于糖化学的迅速发展,微生物胞外多糖理论和应用的研究逐渐受到了人们的关注。

对黄原胶、结冷胶多糖的结构与性能、研究现状和应用状况进行了综述。

关键词:　胞外多糖　黄原胶　结冷胶　应用The Advance in Investigation of Microbial Extracelluer PolysacchardesCui Yanho ng 1　Huang Xianqing 2(1College of A ni mal Science and V eterinary Medicine ,Henan I nstit ute of S cience and Technolog y ,X i nx iang 453003;2College of Food S cience and Technolog y ,N anj ing A gricult ural Universit y ,N anj ing 210095)Abstract :　The microbial extracelluer polysaccharde in is mainly referred to as water 2soluble gums produced by microorganisms.In recent years ,with the quick development of sugar chemistry the theory and application of micro 2bial extracelluer polysaccharide were concerned .In the paper ,the structure and performance ,present state and prospect of the application of xanthan gum and gellan gum were reviemed.K ey words :　Microbial extra polysaccharides Xanthan gum G ellan gum Application 微生物多糖主要指大部分细菌、少量的真菌和藻类产生的多糖。

细菌胞外多糖提取优化及毒性试验研究

写一篇细菌胞外多糖提取优化及毒性试验研究的报告，800字
细菌胞外多糖提取优化及毒性试验研究的报告
本报告旨在探讨细菌胞外多糖（Glycans）的有效提取方式。

研究过程采用了覆盖实验、评估样品的毒性以及进行多糖提取的方法。

初步研究发现多糖提取有三种方法，分别是热水提取、超声提取和酸提取。

首先，我们采用折线图来评估三种提取方式对细菌多糖含量的影响。

结果表明，热水提取得到的Glycans最多，而酸提取方式获得的细菌多糖最少。

接着，要进行多糖提取的优化，我们选择了热水提取作为基础。

研究中，根据温度、提取时间和浓度三大条件，进行了一系列的折线图和散点图的分析。

最后，热水提取的最佳条件设定为：温度60℃，提取时间1h，浓度5g/ml。

使用此优化方案后，
分离出的细菌多糖含量提升了17.8%。

最后，为了评估提取物的毒性，我们进行了抑制率分析，发现抑制率处于安全范围，表明细菌胞外多糖提取物的毒性不高。

综上所述，本研究通过三种提取方式和优化方案，探讨了细菌胞外多糖的有效提取方式。

结果表明，调整热水提取方式参数，可以有效提高细菌多糖提取物的含量；此外，由于提取物的抑制率较低，表明提取物的毒性也不高。

本研究为细菌胞外多糖提取方式的改进提供了新的见解，为将来细菌胞外多糖的更好应用奠定了基础。

《蒙古口蘑胞外多糖提取、纯化及生物活性研究》范文

《蒙古口蘑胞外多糖提取、纯化及生物活性研究》篇一一、引言蒙古口蘑是一种珍贵的食用菌，其胞外多糖（EPS）具有多种生物活性，如免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等。

因此，本文旨在探讨蒙古口蘑胞外多糖的提取、纯化及其生物活性的研究。

通过对EPS的提取、纯化过程进行研究，分析其结构和生物活性，为开发具有重要药用价值的天然多糖药物提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料（1）蒙古口蘑子实体：采自内蒙古高原。

（2）实验试剂与仪器：乙醇、丙酮、透析袋、超滤膜等实验试剂，以及离心机、紫外分光光度计、扫描电镜等实验仪器。

2. 方法（1）胞外多糖的提取：将蒙古口蘑子实体进行破碎、洗涤，经过一定的溶剂处理后进行离心分离，收集上清液并浓缩。

（2）胞外多糖的纯化：采用乙醇沉淀法、透析法、超滤法等方法对EPS进行纯化。

（3）生物活性研究：通过体外实验和动物实验，研究EPS 的免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等生物活性。

三、结果与讨论1. 胞外多糖的提取通过破碎、洗涤等步骤，成功从蒙古口蘑子实体中提取出胞外多糖。

经过浓缩处理后，得到较为纯净的EPS溶液。

2. 胞外多糖的纯化采用乙醇沉淀法、透析法、超滤法等方法对EPS进行纯化。

在纯化过程中，通过调节溶液的pH值、温度等参数，可以有效去除杂质，提高EPS的纯度。

经过纯化后的EPS呈现为白色粉末状，具有良好的溶解性和稳定性。

3. 生物活性研究（1）免疫调节作用：通过体外实验和动物实验发现，EPS具有显著的免疫调节作用，能够增强机体的免疫力，提高抵抗力。

（2）抗氧化作用：EPS具有良好的抗氧化性能，可以清除体内的自由基，减缓细胞衰老，对预防和治疗多种疾病具有重要作用。

（3）抗肿瘤作用：EPS对肿瘤细胞具有显著的抑制作用，能够诱导肿瘤细胞凋亡，对肿瘤的治疗和预防具有潜在的应用价值。

四、结论本文通过对蒙古口蘑胞外多糖的提取、纯化及其生物活性的研究，发现EPS具有显著的免疫调节、抗氧化和抗肿瘤等生物活性。

《蒙古口蘑胞外多糖提取、纯化及生物活性研究》范文

《蒙古口蘑胞外多糖提取、纯化及生物活性研究》篇一一、引言蒙古口蘑作为一种具有重要药用价值的食用菌，近年来在医学与营养学领域引起了广泛的关注。

胞外多糖是其主要生物活性成分之一，具有增强免疫功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种药理作用。

本篇研究以蒙古口蘑为研究对象，深入探讨其胞外多糖的提取、纯化及生物活性，以期为该菌种的药用和营养价值提供理论依据。

二、材料与方法1. 材料（1）菌种来源：蒙古口蘑，采集自内蒙古高原。

（2）试剂与仪器：包括但不限于乙醇、丙酮、透析袋、离心机、旋转蒸发仪等。

2. 方法（1）胞外多糖的提取：将蒙古口蘑培养液进行离心，收集上清液，采用乙醇沉淀法提取胞外多糖。

（2）纯化：通过透析、柱层析等方法对提取的胞外多糖进行纯化。

（3）生物活性检测：采用体外实验和动物实验，检测胞外多糖的免疫调节、抗肿瘤等生物活性。

三、结果与分析1. 胞外多糖的提取与纯化通过乙醇沉淀法成功提取了蒙古口蘑的胞外多糖，经过透析、柱层析等纯化步骤，得到了纯度较高的胞外多糖。

2. 生物活性研究（1）免疫调节作用：体外实验表明，蒙古口蘑胞外多糖能够显著增强巨噬细胞的吞噬功能，提高淋巴细胞增殖能力，具有明显的免疫调节作用。

（2）抗肿瘤作用：动物实验显示，蒙古口蘑胞外多糖对肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用，能够显著延长肿瘤小鼠的生存期。

四、讨论本研究成功提取并纯化了蒙古口蘑的胞外多糖，通过体外实验和动物实验证实了其具有显著的免疫调节和抗肿瘤生物活性。

这些发现为蒙古口蘑的药用和营养价值提供了有力的理论依据。

同时，本研究也为其他食用菌胞外多糖的研究提供了参考。

五、结论本研究通过提取、纯化及生物活性研究，证实了蒙古口蘑胞外多糖具有显著的免疫调节和抗肿瘤作用。

这为进一步开发蒙古口蘑的药用和营养价值提供了重要的理论依据。

未来研究可进一步探讨其作用机制，为开发新型药物和保健品提供新的思路和方法。

六、展望随着人们对健康生活的追求和对天然药物的认识加深，蒙古口蘑作为一种具有重要药用价值的食用菌，其研究价值将越来越高。

产胞外多糖细菌的分离和鉴定的开题报告

产胞外多糖细菌的分离和鉴定的开题报告
1. 研究背景
胞外多糖是一类在细菌表面产生的高分子聚合物，通常由多种糖类
分子组成。

这些多糖具有重要的生物学功能，包括在抗菌、抗病毒和免
疫系统应答等方面发挥重要作用。

胞外多糖的生产已经广泛应用于食品、医药、化妆品等领域，因此研究和分离产胞外多糖的细菌对于这些领域
的应用十分重要。

2. 研究目的
本研究旨在从自然环境中分离和鉴定产胞外多糖的细菌，并对其生
产胞外多糖的能力进行评估。

3. 研究方法
3.1 样品采集
从自然环境中采集土壤、水、植物等多种样品，将样品分别在不同
条件下进行分离和培养。

3.2 细菌分离和培养
将样品分别加入不同培养基中进行培养，筛选产胞外多糖的细菌。

将筛选得到的细菌通过PCR方法进行鉴定，确认其种属。

3.3 胞外多糖的提取和鉴定
将筛选得到的菌株培养并进行胞外多糖提取。

通过FTIR、NMR等方法对提取得到的多糖进行鉴定和分析。

4. 预期结果
本研究预期能够从自然环境中筛选得到多个产胞外多糖的细菌，并
对这些细菌的胞外多糖进行鉴定和分析。

通过比较这些细菌产生胞外多
糖的能力，对其生产规律进行初步探究。

5. 研究意义
本研究所得到的产胞外多糖的细菌，可以应用于食品、医药、化妆品等领域。

并且通过对其胞外多糖的分析和鉴定，对其在不同应用领域的潜在应用价值进行探究。

同时，本研究能够对细菌产生胞外多糖的规律进行深入研究，有助于优化其生产工艺和提高产量。

超声波提取乳酸菌胞外多糖初步研究

BEA Confidential. | 12
单因素优选实验的结果

不同超声波时间对多糖提取率的影响
1.2 1.1
多糖提取率%
1 0.9 0.8 0.7 0.6 10 20 30 40 超声波提取时间min 50
超声波时间对多糖提取率的影响 The impact of time on the extraction rate
BEA Confidential. | 7
0.9
0.8
0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 0.02 0.04 0.06 0.08 y = 13.586x - 0.002
R2=0.9966
葡萄糖标准曲线 Standard curve of glucose
苯酚- 浓硫酸法测乳酸菌胞外多糖含量：

紫外可见分光光度计, 752－PC, 上海光谱仪器有限公司
烘箱电子恒温水浴锅，HH－6，深圳天南海北实业有限公司

超声波细胞粉碎仪
BEA Confidential. | 6
多糖测定方法

苯酚—浓硫酸法
多糖类物质在强酸和加热条件下能迅速水解成单糖，单糖在强酸条件下与酚反应生成橙色衍生物，该橙色衍生物在波长490nm处有最大吸收，可用光度法进行定量分析。
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致谢
本论文是在导师张铁华老师悉心指导下完成的，张老师在工作繁忙之余总是抽空认真耐心负责地引导我查阅资料以及做实验，带给我巨大的帮助和指导。在此我要对我的恩师表示由衷的感谢。
感谢实验室各位师兄师姐和朋友们在我试验遇到困难和阻碍的时候给予我的帮助，这为实验的成功带来了巨大帮助, 也增进了我们的友情。

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ａｈｍｅａｄａｒａｎｆｒｅｔｔｏｉｄｔｙａｅｒｖｅｅｉｔｉｐａｒｄｃｍｐｅｔｏｎｂｏｄｉｅｍｎａｉｎｎｕｒｒｉｗｄｎｈｓｐｅａｓｅｎｏａｄｗｉａｈｏｅ．ｅｐｐｒａｓｒｈｔｅｃｔｒＴｈａｅｌｏｈ
食品与药品
ＦｏｎｕｏｄａｄＤｒｇ
２１年第１卷第０期００２５
２７１
细菌胞外多糖提取分离技术研究进展
王桂兰，凌沛学
（．大学药学院，山东济南２０１；２山东省生物药物研究院博士后科研工作站，山东济南２００）１山东５０２．５１１
Ｋｅｏｄｓｘｃｌａｏｙｓｃｈｒｄ；ｘｒｃｉｎ，ｓｌｔｎ；ｅｍｅｔｔｏｙＷｒ：ｅｏｅｌｒｐｌａｃａｉｅｅｔａｔｏｉｏａｉｕｌｏｆｒｎａｉｎ
多糖在自然界高等植物、藻类、微生物及动物体内均存在，分布极广。近年，微生物来源的多糖越来越引起人
外多糖，已经广泛实现了工业化深层发酵。１细菌胞外多糖
盐、剪切速度等因素对其黏度的影响，在保证多糖生物活性的前提下尽可能降低黏度以便提取分离。因此，提取分
４Ｊ细菌多糖主要以３种形式存在：黏附在细胞表面的荚离前一般要对发酵液稀释处理【。
ｔｃｎｌｇｓｆｘａｔｎｎｏｔｎａｆｒｎｆｒａｈｏｓｃｈｒｅＡｌｅｅｈｏｏｅｐｉｕｌｈｔｈｏｏｉｔｃｏｄｉｌｉｅｉｅｅｔｏｃｌａｃａｄ．ｌｎｌｓｐｌｄｕａｙｅｅｅｏｅｒｉａｓａｏｒｄｅｐｙｉｔｈｔｃｉｇａｅｓｌ
摘要：细菌胞外多糖是当今进入工业化发酵生产的一类重要的多糖。由于多糖种类的不同，其分离纯化工艺不尽相同。本文综述细菌胞外多糖发酵生产中提取分离技术的研究进展，并比较了各种分离技术，介绍了针对极具商业价值的微生物多糖的几种新型提取分离技术，展望了微生物多糖研究的发展趋势。
关键词：胞外多糖；提取；分离；发酵
中图分类号：Ｑ５９３
文献标识码：Ａ
文章编号：１７－７Ｘ（００５０１－３６２９９２１）０ —２８０
ＰｒｇｅｓｏｔａｔｏｎｓｌｔｏｅｈｏｏｉｓｏＢａｔｒａｏｅｌｌｒＰｏｙａｃａｉｓｏｒｓｎＥｘｒｃｉｎａｄＩｏａｉｎＴｃｎｌｇｅｆｃｅｉｌＥｘｃｌａｌｓｃｈｒｄｅｕ
膜多糖；构成细胞内成分的胞内多糖；合成后可分泌到介３胞外多糖的一般提取分离方法
质中的胞外多糖。在实际的细菌培养中，荚膜多糖和胞外
胞外多糖提取分离主要包括灭菌、粗提取、除蛋白质
ＷＡＮＧｉ１ｎＬＩＧｕ．，ＮＧｅ－ｕａＰｉｘｅ。
（．ｃｏｌｆｈｒａｅｔａＳｉｃｓＳａｄｎｎｖｒｉ，ｉｎ５０２Ｃｉ，．ｏｔｏｔｒｌｃｎｉＲｓａｃ１ＳｈｏｏＰａｍｃｕｃｌｃｎｅｈｎｏｇＵｉｓｙＪａ０１，ｈｎ＂ＰｓｄｃａＳｉｔｃｅｅｒｉｅ，ｅｔｎ２ａ２－ｏｅｆｈＷｒｔｉ，ｎｔｕｏＢｏｈｒａｅｔａｓｆｈｎｏｇｒｖｃ，ｉｈ５１１Ｃｉ）ｏｋａｏＩｓｔｅｆｉａｍｃｕｉｌｏＳａｄｎＰｏｉｅｄｎ２００，ｈａｓｔｎｉｔｐｃｎａｎ
ＡｂｔａｔＢａｔｒａｘｃｌｌｒｏｙｓｃｈｒｄｓａｅｉｐｒｎｔｎｉｄｔｉｌｅｍｅｔｔｎｎｗ．ｃｕｅｏｄｆｅｅｔｐｃｅ，ｓｒｃ：ｃｅｉｌｏｅｌａｌａｃａｉｅｒｅｕｐｍｏｔｕｓｒｒｎａｉｏＢｅａｓｆｉｒｎｅｉｓａｉｎａｆｏｓ
发酵生产的多糖中很重要的一类为糖胺聚糖
（ｌｃｓｍｉｏｌｃｎＧＡＧ）。Ｇｇｙｏａｎｇｙａ，ＡＧ通常具有较高的黏
们的注意，尤其是易分离纯化且含量高的细菌和真菌的胞度，分离纯化时应了解发酵液的浓度、温度、ｐＨｓｈｄｒｔｃｏｏｔｎｏｅｔｕｌｐｌａｃａｄｓａｉｒｄｃｓｏｗｔｈｏｇｅａｄｔｏｓｏｅｘｒｔｎｄｓｌｉｃｒｉｖｌｂｅｏｓｃｈｒｅ，ｄｔｎｅｎｏｍｅｉｎｆｔｅａｉａｉａｏｆａａｈｎｎａｙｉｎｉｓｎｕｌｋｂｕｏｒｓｏｃｒｌｘｃｌｌｙａｃａｄｓｇｅｔｏｏｔｅｒｇｅｓｎａｔｉｏｅｕａｐｌｓｃｈｒｅ．ｖａｏｏａｈｔｐｂｅａｅｌｒｏｉ