炎症性肠病患者肠道菌群变化及其与炎性因子的相关性

稀释法用稀释液稀释至 １ Ｏ 一， 取１ Ｏ 进 行接种 ， 大肠 杆菌 、 肠球菌采 用需 氧培养 基 培养 ， 乳 酸杆 菌 、 双歧 杆 菌采用厌氧 培养基 培养 ， ３ ７℃培养 ４ ８ ｈ后 ， 计数 菌落
注： 与对照组 比较 ， Ｐ＜ ０ ． ０ ５； 与缓解 组 比较 ， Ｐ＜ ０ ． ０ ５ 。
５ ． ２． ４ － ０ ． ７ ７ ． ２±１ ． ６ ７ ． ５±１ ． ９
结肠炎 ７ ５例、 克 罗恩病 ３ ７ 例； 缓解期 ６ ６例 （ 缓解 组） ， 男３ ７例 、 女２ ９例 ， 年龄 ３ ３～ ６ ５ （ ４ ２ ． ５± ７ ． ６ ） 岁， 基 础疾 病 为 溃 疡 性 结 肠 炎 ４ ５例 、 克 罗恩病 ２ １ 例 。选取 同期 健康 查 体者 ８ ２例 （ 对照组） ， 男４ ５ 例、 女３ ７ 例， 年龄 ３ １ — ６ ８ （ ４ １ ． ９± ８ ． ２ ） 岁。三组年 龄、 性别差异均无统计学意义 。 １ ． ２ 肠道菌 群数量检测 取新鲜 粪便 ０ ． ５ ｇ ， 按１ ０倍
果 与对照组 、 缓解组 比较 ， 活动组粪便 中大肠 杆菌 、 肠球菌 数量升高 ， 双歧 杆菌 、 乳酸杆 菌数量降低 ， 血清 Ｉ Ｌ － ６ 、 Ｉ Ｌ ．
１ ７ 、 Ｉ Ｌ － ２ ２和 Ｉ Ｌ 一 ３ ３水平升高（ Ｐ均 ＜ ０ ． ０ ５ ） 。对照组 、 缓解组各观察指标 比较均无统计学差异 。大肠杆菌 、 肠球 菌数量
者 的肠道 菌群 进行分 析 ， 发现 双歧杆 菌 、 乳酸 杆菌数 量均 明显升 高， 而 产 丁酸盐 细 菌数 量 明显 下 降。 Ｖ ｅ ｒ ｂ ｅ ｋ ｅ 等 发现 ， Ｉ Ｂ Ｄ患 者肠 道菌 群存在 不 同程 度 的肠道 菌群 紊乱 现 象 ， 其 中梭 状 芽 胞 杆 菌数 量 明显
者肠 组织 微循 环 障碍 Ｊ 。Ｉ Ｌ ． １ ７是 Ｔ ｈ ｌ ７细胞 分泌 的
一
种细胞 因子 ， Ｉ Ｂ Ｄ患 者 的肠 黏 膜上 存 在 大 量 Ｔ ｈ ｌ ７
细 胞 。Ｉ Ｌ ２ ２是 Ｉ Ｌ 一 １ ０相 关 因子 ， 在Ｉ Ｂ Ｄ受损 的肠
黏 膜 中大量 表达 ， 隔 离 肠 道 细菌 与 免 疫 细胞 间 的相
组别 缓解组
对 照 日
见表 １ 。
肠球菌 双歧杆菌 乳酸杆菌
表 １ 各 组 肠 道 菌 群 数 量 比较 （ Ｆ Ｕ ／ ｇ 。 ± ）
ｎ 大肠杆菌 ６ ６ ６ ． ５±１ ． ２
８ ２ ６ ． １ ±０ ． ９
排除严重心脑血管疾病 、 自身免疫性疾病 、 其他炎性 疾病 患者 ， 检测 前 ４周未 服用 益生 菌 制剂 、 抗生 素 等 药物 。其 中活 动期 １ １ ２例 （ 活动组 ） ， 男６ ８例 、 女４ ４
作用 ， 其 中促炎 因子 与 抗炎 因子 失衡 在 Ｉ Ｂ Ｄ发 生 发 展 中起 到一 定 作 用 。 。 ｊ 。Ｉ Ｌ 一 ６能 够 通 过 Ｔ ｒ ａ ｍ — ｓ ｉ ｇ ｎ ａ ｌ — ｌ ｉ ｎ ｇ激 活转 录激活 因子 ， 诱导 Ｂ ｃ ｌ － ２和 Ｂ ｃ ｌ — ｘ Ｌ抗 凋亡 因 子 的生 成 ， 导 致 Ｔ细胞 发 生 抗 凋 亡 ， 在 肠 道 黏 膜 异 常堆积 ， 使 炎症 反 应 不 断 加 重 ， 可 通 过 诱 导 纤 维蛋 白原 启 动 凝 血 因子 ， 形 成微血栓 ， 造成 Ｉ Ｂ Ｄ 患
与Ｉ Ｌ － ６ 、 Ｉ Ｌ ・ １ ７ 、 Ｉ Ｌ 一 ２ ２和 Ｉ Ｌ 一 ３ ３水平呈正相关 ， 双歧杆菌 、 乳酸杆菌数量与 Ｉ Ｌ － ６ 、 Ｉ Ｌ 一 １ ７ 、 Ｉ Ｌ － ２ ２ 、 Ｉ Ｌ ． ３ ３ 水平均呈负相关 （ 尸均
＜ ０ ． ０ ５ ） 。结论 Ｉ Ｂ Ｄ活动期患者存在肠道菌群失衡 ， 后者与炎症的发生密切相关 。 关键词 ： 炎症 性肠病 ； 肠道 菌群 ； 炎性 因子
丕医药
生筮 鲞筮 Ｑ 翅
炎 症 性 肠 病 患 者 肠 道 菌 群 变 化 及 其 与 炎 性 因子 的相关 性
张艳丽 ， 刘新风 ， 于秀娟 ， 郭爱萍 ， 邹雄。 ， 张欣
（ １山东省 交通 医院 ， 济南 ２ ５ ０ ０ ３ １ ； ２山 东大 学齐鲁 医院）
摘要： 目的
解组 及对 照组 明显 升高 ， 而益 生菌 双歧杆 菌 、 乳 酸 杆
菌 数量 明显 降低 ， 呈 失衡 状态 ， 造成 肠黏 膜 的屏 障功
能减 退 ， 降低 了机体 免疫 防御 力 ， 进 而 导致肠 道 炎症
反 应 的发生 。
炎 性 因子 具 有 调节 细 胞 功能 、 维 持 生 理平 衡 等
对照组 ８ ２ １ １ ６ ． ５ ￣ ５ １ ． ３
９ １ ． ５ ± ３ ４ ． ５ ８ １ ５ ． ２ ＋ ２ １ ６ ． ８ ４ １ ５ ． ６ ± １ １ ９ ． ８ ５ ６ ． ５ ￣ １ ５ ． ２ ３ ３ ６ ． ９ ±９ ２ ． ５ ２ ５ ７ ． １ ±７ １ ． ８
统计学 意 义 。
２ 结果
１ ． １ 临床资料
选择 ２ ０ １ ２ 年８ 月～ ２ ０ １ ４年 ７月我
院 收治 的 Ｉ Ｂ Ｄ患 者 １ ７ ８例 ， 均符 合 中华 医学 会 消 化 病学 分 会 炎 症 性 肠 病 协 作 组 制 定 的 诊 断 标 准 ＿ ２ ］ 。
２ ． １ 肠 道菌 群数 量
互 作用 ， 加强 肠道 上皮 屏 障的完 整性 ， 从 而 发挥保 护 肠 黏 膜 的作 用 Ｉ ｏ ｉ 。Ｆ ａ ｕ ｂ ｉ ｏ ｎ等 发现 ， 】 活动 期 克 罗
恩病 患者血 清 Ｉ Ｌ 一 ２ ２表 达 明 显 升 高 ， 并 且 其 病 变 范 围越 大 、 病 变越 严重 ， Ｉ Ｌ ． ２ ２水 平越 高 。Ｉ Ｌ 一 ３ ３是新 发
２ ． ２ 炎性 细胞 因子
见表 ２ 。
表 ２ 各 组炎 性因子水平比较 （ ｉ ｒ ｇ ／ Ｌ， ｉ． ４ － ｓ ）
组别 Ⅱ Ｉ Ｌ － ６ Ｉ Ｌ － １ ７ Ｉ Ｌ － ２ ２ Ｉ １ ． － ３ ３
活动组 ｌ １ ２ ２ １ ５ ． ４ ± ７ ８ ． ６ 缓解组 ６ ６ １ ２ ３ ． ８ ＋ ５ ９ ． ８
现的 Ｉ Ｌ 一 １家族 成 员 ， 其 作 用 机 制 具 有 双 向性 ， 一 方
面 可作为 细胞核 内 因子 发挥 转 录 抑 制 作用 ， 另一 方
面又 可作 为 促 炎 因子 参 与 调 节 Ｔ ｈ ２型 免 疫 应 答 。
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探讨炎症性肠病 （ Ｉ Ｂ Ｄ ） 患者肠道菌群 的变化 ， 并 分析其与炎性因子的相关性 。方法 选择 Ｉ Ｂ Ｄ患
者１ ７ ８ 例， 其 中活动期 １ １ ２ 例（ 活动组 ） 、 缓解期 ６ ６ 例（ 缓解组 ） ， 另选择 ８ ２ 例健康查 体者作为对照组。采集 各组新鲜 粪便 ， 使用梯度稀释法定量培养分析肠道菌群 ； 采集 静脉血应用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法检测血 清 Ｉ Ｌ － ６ 、 Ｉ Ｌ 一 １ ７ 、 Ｉ Ｌ ． ２ ２ 、 Ｉ Ｌ － ３ ３水平。结
例， 年龄 ３ １ ～ ６ ３ （ ４ １ ． ２± ７ ． １ ） 岁， 基础 疾 病 为溃 疡性
活 动 组 １ １ ２ ８ ． ２±２ ． １
７ ． ９． ４ － １ ． ７— ５ ． ４± Ｏ ． ８ — ５ ． ６± ０ ． ８
５ ． ６± ０ ． ９ ６ ． ９±１ ． ４ ７ ． １±１ ． ８
中的作用逐渐引起重视。我们观察 了 １ ７ ８ 例Ｉ Ｂ Ｄ患 者肠 道 菌群 结构 及 炎 性 因 子 的变 化 ， 分析 两 者 的相 关性 。现报 告如 下 。
１ 资料 与方 法
１ ． ４ 统 计 学方 法
采用 Ｓ Ｐ Ｓ Ｓ １ ３ ． ０统计 软 件 ， 计 量
资料 以 ±ｓ 表示 ， 组 间 比较 采 用 方 差 分 析 ， 相 关 性 分析采 用 Ｐ ｅ ａ ｒ ｓ ｏ ｎ相 关 性 分 析 。Ｐ＜０ ． ０ ５为 差 异 有
５ ４ ． １ ±８ ． ７ ３ １ ７ ． ２ ±８ ６ ． ７ ２ ２ ３ ． ５ ±６ ５ ． ９
注： 与对照组 比较 ， Ｐ＜ ０ ． ０ ５ ； 与缓解 组比较 ， Ｐ＜ ０ ． ０ ５ 。
２ ． ３ Ｉ Ｂ Ｄ患 者肠 道 菌 群 与 炎 性 因子 的相 关 性 大 肠杆 菌 、 肠球 菌数 量 与 Ｉ Ｌ － ６ 、 Ｉ Ｌ － １ ７ 、 Ｉ Ｌ ． ２ ２及 Ｉ Ｌ － ３ ３水 平呈 正 相 关 ， 双歧杆 菌、 乳 酸杆 菌数量 与 Ｉ Ｌ － ６ 、 Ｉ Ｌ 一
减少 ， 而硫 酸盐还 原菌 和大 肠杆 菌等数 量 明显增 加 。 Ｎ ｅ ｍ ｏ ｔ ｏ等 纠 研 究显 示 ， 溃疡性 结 肠 炎患 者 存 在肠 道
咖 康 对 。 一 向缓 于因 子菌 数歧 杆平 呈 产 的 与 且参 湾 妇
引
菌 群失 调 ， 且 菌 群 的 多样 性 也 明 显 降低 。本 研 究 发 现， 活 动组 的条 件致 病菌大 肠杆 菌 、 肠 球菌 数量 较缓
分 布于 结肠 和小肠 。肠 道菌 群主要 分 为与人 体共 生 的生理 性细 菌 、 与人 体 共存 的条 件 致 病菌 和病 原 菌
三类 ， 其 中前两类 是肠 道 的 固有 菌群 ， 维持 宿 主正常 的生 理 功 能 ， 其 变 化 常 引 起 疾 病 的 发 生 。 Ｗａ ｎ ｇ 等 采 用实 时 荧光 定 量 Ｐ Ｃ Ｒ方 法 对 活 动 期 Ｉ Ｂ Ｄ患
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山东 医药 ２ ０ １ ５年第 ５ ５卷第 １ ０期
１ ７ 、 Ｉ Ｌ ． ２ ２及 Ｉ Ｌ 一 ３ ３水 平 呈负 相关 （ Ｐ均 ＜ ０ ． ０ ５ ） 。见
表 ３ 。
表３ Ｉ Ｂ Ｄ 患 者 肠 道 菌 群 与 炎 性 因子 的 相 关 性
３ 讨 论
人 体 生 理状 态 下 肠道 存 在 ５ ０ ０多种 细 菌 ， 主 要
ｄ ｏ ｉ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ２ － ２ ６ ６ Ｘ． ２ ０ １ ５ ． １ ０ ． ０ ３ ０
中图分类号 ： １ １ ３ ７ ２
文献标志码 ： Ｂ
文章编号 ： １ ０ ０ ２ － ２ ６ ６ Ｘ（ ２ ０ １ ５ ） １ ０ － ０ ０ ７ ９ － Ｏ ２
数。细菌经革兰染色 、 生化进行鉴定， 计算每克粪便所
含菌群 的数量 （ Ｃ Ｆ Ｕ ／ ｇ ） ， 结果 以对数形式表示 。 １ ． ３ 血 清炎性 因子 检测 采 集 受 试 者 清晨 空 腹静
脉血 ５ ｍ Ｌ， 采用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ法检测血清 Ｉ Ｌ － ６ 、 Ｉ Ｌ － １ ７ 、 Ｉ Ｌ 一 ２ ２ 、 Ｉ Ｌ ． ３ ３水平 。
炎症 性肠 病 （ Ｉ Ｂ Ｄ） 是一 组慢 性 非 特异 性 肠 道炎 症 性疾 病 ， 易反 复 发 作 ， 严 重 影 响 患 者 的生 活 质 量 。 Ｉ Ｂ Ｄ 的发病 机制 至 今 尚不 明确 ， 可 能 与宿 主 的遗 传 易感 性 、 生 活 环境 、 感 染 以 及 免 疫 反 应 等 因 素 有 关＿ ｌ Ｊ 。近年来 ， 肠 道 菌群 结 构 变 化在 Ｉ Ｂ Ｄ发 生发 展