2011年天津大学分子生物学考研模拟试题一、二、三及答案
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天津大学
2011年攻读硕士学位研究生入学考试模拟试题(一)科目代码:科目名称:分子生物学
考生注意:所有大题务必书写在考场提供的答题纸上,写在本试题单上的答题一律无效(本题单不参与阅卷)。
一、名词解释(每小题3分,共30分)
1.Immunoprecipitation
2.RNA in situ hybridization
3.Genome
4.FISH
5.Viral-like retrotransposons
6.Riboswitch
7.photoreactivation
8.CAP
9.Palindrome
10.gene therapy
二、简答题(每小题10分,共60分)
1.简述转基因动物的概念、原理及应用
2.简述模式生物及其相关信息
3.在DNA复制过程中会形成一种复制体(replisome)的结构,它是由哪几部分组成的?
4.描述cDNA文库构建原理与方法:(1)cDNA获得方法,(2)克隆方法,(3)文库质量定义。
5.请描述述端粒(Telomere)的结构、功能及复制过程。
6.什么是基因突变?并说明产生基因突变有哪些途径
三、论述题(每小题15分,共60分)
1.真核生物转录水平的调控机制?
2.生物大分子之间的相互作用是生命现象的具体表现,试以蛋白质之间以及蛋白质与核酸分子之间的相互作用为例加以说明。
3.请举例说明在细菌中RNA的二级结构可以调控基因的表达。
4.生物体存在大量的mRNA前体的选择性剪切(alternative splicing)过程。
什么是选择性剪接,有几种方式?可变剪接的生物学意义是什么?
天津大学
(评分参考卷)
2011年攻读硕士学位研究生入学考试模拟试题(一)科目代码:科目名称:分子生物学
一、Immunoprecipitation免疫沉淀是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。
是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。
其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。
如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。
RNA in situ hybridization:RNA原位杂交,是利用cDNA为探针来检测与其互补的mRNA 链在细菌或其他真核细胞中的位置,是检测基因组织特性表达的常用方法。
Genome:基因组,有机体或细胞中的所有DNA,包括核中的染色体和线粒体中的DNA。
FISH:荧光原位杂交技术,是一种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。
它将荧光信号的高灵敏度、安全性,荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合起来,通过荧光标记的DNA探针与待测样本的DNA进行原位杂交,在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数,从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断,为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
Viral-like retrotransposons类病毒反转座子,包括反转录病毒又称为LTR反转录转座子,带有末端重复序列和反转录酶,整合酶的基因。
Riboswitch某些依赖代谢物调节的基因转录产物的5′UTR存在特征性结构.核糖开关可以特异性结合代谢物,通过构象变化,在转录或翻译水平上调节基因表达
photoreactivation光复活,可见光将光裂合酶激活,它分解DNA上由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体,使它们恢复成两个单独的嘧啶碱。
CAP环腺苷酸受体蛋白或分解代谢物基因活化蛋白,是一种激活蛋白,因为细菌的许多启动子为弱启动子,本身与RNA聚合酶的作用较弱,在有CAP蛋白这类激活蛋白存在下,可使RNA聚合酶与启动子的亲和力增强,CAP蛋白的活性强烈依赖cAMP。
Palindrome回文序列,是指DNA某一片段旋转180度后顺序不变的序列。
回文序列中的单
链可形成发夹结构,双链可形成十字架结构。
gene therapy基因治疗,是利用分子生物学方法将目的基因导入患者体內,使之表达目的基因产物,从而使疾病得到治疗,为現代医学和分子生物学相结合合而诞生的新技术。
二、1.(1)概念:是指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内,并能稳定传代的一类动物。
它的特点是“分子及细胞水平操作,组织及动物整体水平表达”。
(2)基本原理:将目的基因或基因组片段用显微注射等方法注入实验动物的受精卵或着床前的胚胎细胞中,使目的基因整合到基因组中,然后将此受精卵或着床前的胚胎细胞再植入受体动物的输卵管或子宫中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,人们可以通过分析转基因和动物表型的关系,揭示外源基因的功能;也可以通过转入外源基因培育优良的动物品种。
(3)应用:建立用于研究外源基因表达调控体系;建立医学中常用的疾病模型;培育动物新品种;药理学和药用蛋白的生产研究。
2.大肠杆菌:原核生物,基因组全序列完成,全长5Mb,遗传背景清楚,技术操作简单,培养条件简单。
酿酒酵母:真核生物模式生物。
单细胞生物,能在基本培养基上生长,个体小,生长快,以培养操作,对人体无毒害。
遗传基因结构研究得较清楚。
秀丽线虫:是医学研究中的一种重要模式生物。
线虫虫体长1.5mm,容易培养和保存,一次杂交仅需3d时间,突变体性状特征明显。
细胞程序性死亡的遗传调控机制,RNAi及其遗传机制的发现是依赖于秀丽线虫的研究。
拟南芥:十字花科植物,具有一些独特的生物学特性而成为当今分子生物学家、遗传学家和发育生物学家的宠儿。
其个体小,成熟个体只有约15cm高,大量的植株可以种在一块很小的地方,而且也可在培养皿中生长。
生长周期短,播种后2d~3d就开始萌发,20d左右植株就开始开花结果,40d左右种子成熟并且每株能产生上万粒种子。
小鼠:小鼠已成为生物学、医学、分子生物学、分子遗传学、免疫学等广泛领域的模式动物,是人类的近缘亲戚的哺乳动物,基因组与人类的差不多,基因的数目与人的也差不多,已经发现的人类基因,小鼠不仅都有,而且都很相似,是生物医学研究中广泛使用的模式生物。
3.复制体(replisome):一种多蛋白复合体,包含DNA聚合酶、引发酶、解旋酶、单链结合蛋白和其它辅助因子。
复制体位于每个复制叉处执行着细菌染色体DNA复制的聚合反应。
4.cDNA:以mRNA为模板,利用反转录酶合成与mRNA互补的DNA(complementary DNA,cDNA),再复制成双链cDNA片段,与适当载体连接后转入受菌体,扩增为cDNA文库(cDNA library),然后再采用适当方法从cDNA文库种筛选出目的cDNA。
(1)cDNA获得方法:①Total RNA的提取;②mRNA的分离;③cDNA双链合成
(2)克隆方法:①载体制备②cDNA双链和载体的连接③转化④鉴定⑤cDNA文库扩增。
(3)文库质量定义:评价一个文库是否有实用价值主要在于文库的含量和插入片段的大小两个方面。
所构建的文库中必须有足够多的克隆数,这样才能确保基因组cDNA中的每一个序列至少有一个拷贝存在于重组文库中,同时为保证cDNA片段的完整性,插入片段的平均大小应不小于1kb。
5.端粒是染色体末端的一种特殊结构,作用是保持染色体的完整性,在正常人体细胞中,可随着细胞分裂而逐渐缩短。
端粒DNA是由简单的DNA高度重复序列组成的,染色体末端沿着5'到3'方向的链富含GT。
端粒DNA主要功能有:第一,保护染色体不被核酸酶降解;第二,防止染色体相互融合;第三,为端粒酶提供底物,解决DNA复制的末端隐缩,保证染色体的完全复制。
端粒、着丝粒和复制原点是染色体保持完整和稳定的三大要素。
同时,端粒又是基因调控的特殊位点,常可抑制位于端粒附近基因的转录活性。
端粒酶是参与真核生物染色体末端的端粒DNA复制的一种核糖核蛋白酶。
由RNA和蛋白质组成,其本质是一种逆转录酶。
它以自身的RNA作为端粒DNA复制的模版,合成出富含G的DNA序列后添加到染色体的末端并与端粒蛋白质结合,从而稳定了染色体的结构。
细胞发生癌变后,端粒酶活性比正常时明显增高,端粒DNA这种渐进性缩短趋势受到阻碍,使正常细胞转化成具有无限分裂能力的永生化恶性细胞。
6.什么是基因突变?并说明产生基因突变有哪些途径
基因突变的方式很多,主要有:(1)化学诱变,基因突变可以由某些化学物质所引起,这些化学物质称为化学诱变剂。
(2)物理诱变,如X射线、紫外线、电离辐射等物理因素可造成基因突变的特点为:
基因突变在生物界中是普遍存在的;基因突变是随机发生的;在自然状态下,对一种生物来说,基因突变的频率是很低的;大多数基因突变对生物体是有害的,由于任何一种生物都是长期进化过程的产物,它们与环境条件已经取得了高度的协调;基因突变是不定向的。
三、1.真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。
(1)转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA聚合酶所识别并结合。
转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA 复合物形成一个闭合的复合物;其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物。
在这个过程中,反式作用因子的作用是:促进或抑制TFⅡD与TATA盒结合;促进或抑制RNA聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合;促进或抑制转录起始复合物的形成。
(2)反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域);能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件;对基因的表达有正性或负性调控作用。
(3)转录起始的调控:
1)反式作用因子的活性调节:①表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性;
②共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;③配体结合——许多激素受体是反式作用因子;
④蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。
2)反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用。
3)反式作用因子的作用方式——成环、扭曲、滑动。
4)反式作用因子的组合式调控作用:每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用,但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用。
2.可以从复制,转录及翻译过程中的的蛋白和蛋白,蛋白和核酸相互作用考虑。
比如翻译过程中,蛋白-蛋白:RNA聚合没和各种转录因子的作用
蛋白—核酸:RNA聚合酶和启动子
3.色氨酸操纵子中的弱化子
4.(1)可变剪接是指从一个mRNA前体中通过不同的剪接方式(选择不同的剪接位点组合)产生不同的mRNA剪接异构体的过程。
(2)可变剪接的方式有:选择不同的外显子;延长或者遗漏某个外显子;内含子可以不被除去而被保留下来。
(3)生物学意义及功能:
A、可变剪接是在RNA水平调控基因表达的机制之一。
一个基因通过可变剪接产生多个转录异构体,各个不同的转录异构体编码结构和功能不同的蛋白质,它们分别在细胞/个体分化发育不同阶段,在不同的组织,有各自特异的表达和功能。
因此,可变剪接是一种在转录后RNA水平调控基因表达的重要机制。
B、多样性与复杂性
可变剪接是从相对简单的基因组提高蛋白质组多样性的重要机制,蛋白质组的多样性与多细胞高等生物的复杂性相适应。
基因重排,RNA编辑,和可变剪接等机制可以从一个基因产生多种蛋白,从而使蛋白质组中蛋白质的数量超过基因组中基因的数量。
其中,可变剪接是扩大蛋白质多样性的最重要的机制。
天津大学
2011年攻读硕士学位研究生入学考试模拟试题(二)科目代码:科目名称:分子生物学
考生注意:所有大题务必书写在考场提供的答题纸上,写在本试题单上的答题一律无效(本题单不参与阅卷)。
一、名词解释(每小题4分,共40分)
1.cDNA
2.Microsatellite
3.TFIID
4.pre-initiation complex
5.Real time PCR
6.yeast two-hybrid system
7.Replisome
8.Wobble concept
9.tRNA synthetase
10.Telomerase
二、简答题(每小题10分,共60分)
1.反式作用因子有那些特点?其结合结构域有那些模式?
2.AP-PCR和普通PCR的区别.
3.什么是多聚核糖体?其形成的意义何在?
4.试述核型intron拼接中spliceosome的形成及拼接简单机制
5.什么是alternative spilcing?为什么它对人很重要?它是如何被调控的?
6.参与DNA复制的主要酶和蛋白质的特性。
三、论述题(第3题20分,1,2题各15分,共50分)
1.研究蛋白质与染色质DNA相互作用的方法主要有哪些?叙述其中一种的原
理和流程。
2.真核转录激活子有两个相对独立的结构功能区是如何证明的。
3.某公司要招聘技术人员加入他们的抗病毒小组帮助设计新药对抗艾滋病病毒感染。
为了得到这份工作,要求应聘者设计一个方案来阻止艾滋病病毒基因表达但不影响宿主基因的表达。
你能设计吗?
天津大学
(评分参考卷)
2011年攻读硕士学位研究生入学考试模拟试题(二)科目代码:科目名称:分子生物学
一、cDNA互补DNA,指以RNA为模板在反转录酶的作用下于体外合成的与该RNA分子互补的DNA链。
Microsatellite微卫星DNA,指以少数几个核苷酸为单位多次串联重复的DNA序列。
TFIID II型RNA聚合酶的转录因子,由TBP和TAF组成,TBP识别TATA框,TBP-DNA复合体为其他的转录因子与聚合酶和启动子结合起到了桥梁作用;TAF结合核心启动子元件,同时调节TBP与DNA的结合。
pre-initiation complex前起始复合体,一起结合在启动子上准备开始转录的一套完整的通用转录因子和聚合酶称为前起始复合体。
实时PCR,是引入了荧光标记分子,使得在PCR反应中产生的荧光信号与PCR产物量成正比,对每一反应时刻的荧光信号进行实时分析,计算出PCR模版DNA的含量。
yeast two-hybrid system酵母双杂交,是利用杂交基因通过激活报道基因的表达研究蛋白-蛋白的相互作用的一种技术。
其原理是建立在真核生物转录因子具有两个不同的结构域,结合结构域和激活结构域,具有各自的功能,需要在一起发挥转录调控的作用。
Replisome参与DNA复制的蛋白质复合物,其中至少含有DNA聚合酶及引发体(primosome,引发酶与其他分子的复合物),SSB,解旋体等,复制体位于每个复制叉处进行细菌染色体DNA 复制的聚合反应。
Wobble concept指反密码子的前两个碱基(3’-端)按照标准与密码子的前两个碱基(5’-端)配对,而反密码子中的第三个碱墓则有某种程度的变动,使其有可能与几种不同的碱基配对。
tRNA synthetase催化氨基酸活化的酶称氨酰-tRNA合成酶,形成氨酰-tRNA,反应分两步进行:活化和转移
Telomerase端粒酶是参与真核生物染色体末端的端粒DNA复制的一种核糖核蛋白酶。
由RNA 和蛋白质组成,其本质是一种逆转录酶。
它以自身的RNA作为端粒DNA复制的模版,合成DNA
序列后添加到染色体的末端并与端粒蛋白质结合,从而稳定了染色体的结构。
二、1.反式作用因子的特点:
(1)一般具有三个功能结构域:DNA结构域、转录活性域和结合其他蛋白的结合域。
(2)能识别并结合基因调控区中的顺式作用元件。
(3)对基因表达有正性和负性调控作用,即激活和阻遏基因的表达。
反式作用因子DNA结合域的结构模式:
(1)锌指结构。
(2)同源结构域。
(3)亮氨酸拉链。
(4)螺旋-环-螺旋结构。
(5)碱性α-螺旋。
2.随机引物PCR(Arbitrary-primer PCR,缩写为AP-PCR)又称随机扩增多态性DNA (Random amplified polimophic DNA,缩写为RAPD),是在PCR的基础上发展起来的一种实验技术。
在RAPD扩增中,仅用一个8-10碱基的寡核苷酸引物,引物的序列是随机的。
RAPD反应的条件与普通PCR基本相同。
但由于引物较短,一般退火所需温度较低。
RAPD与普通PCR的另一个明显的不同是前者不需知道模板DNA的序列,扩增出来的片段也是非特异性的;而后者则必须知道待扩增目的片段的序列,根据这一序列设计一对相应的引物。
3.多聚核糖体是在一条mRNA上同时进行翻译的多个核糖体。
同一条mRNA被多个核糖体同时翻译成蛋白质,大大提高了蛋白质合成的速率,更重要的是减轻了细胞核的负荷,减少了基因的拷贝数,也减轻了细胞核进行基因转录和加工的压力。
4.(1)U1识别5’splice site.
(2)U2结合到分支位点,形成A complex.
(3)U4,U5and U6形成三联tri-snRNP颗粒
(4)随着tri-snRNP进入,A complex变成B complex.
(5)U1离开复合体,U6取代其在5’splice site的位置.
(6)U4从复合体解离,以便U6和U2作用.重排后形成C complex.
(7)C complex的形成产生了活性位点,U2and U6RNAs成分参与了催化反应
(8)活性位点产生后,the pre-mRNA的5’splice site和branch site被拉到了一起,加速了第一次转酯反应
(9)第二次转酯反应由U5协助,把两个外显子连接在一起,释放出mRNA产物及snRNPs 5.在高等真核生物中,很多蛋白的编码基因含有多个内含子,他们可以通过选择性剪接的方式产生不同的mRNA。
对人类的重要性:
可以使单个基因产生多个蛋白,因此极大的增加了蛋白的多样性;
可以开关基因的表达;
90的人类基因是通过可变剪接的方式
调控机制:
反式作用因子(激活子或抑制子)可以识别外显子(或内含子)剪接增强子或者沉默子(ESE,ESS,ISE,ISS);
激活子包括SR蛋白家族,他们可以用RNA结合结构域结合ESS从而激活剪接,还可以通过募集剪接机器;
抑制子包括核内不均一RNP(hnRNP)家族,可以通过其RNA结合结构域结合ESS或ISS,阻碍特异性的剪接位点。
6.解旋酶(DnaB)沿模板移动,需要ATP,将DNA双链解开;
DNA促旋酶(TOPⅡ),引入负超螺旋,抵消解旋过程中形成的正超螺旋,利于复制叉的前进;
单链结合蛋白(SSB),与单链结合稳定单链;
引物酶,合成复制所需的RNA引物;
DNA聚合酶Ⅲ全酶,催化新生链的合成;
DNA聚合酶Ⅰ,5→3外切活性除去引物,5→3聚合活性补上相应的DNA;
DNA连接酶,填补最后的缺口,机磷酸二酯键的合成。
三、1.凝胶阻滞实验
DNA足迹法
染色质免疫共沉淀
原理和步骤见课本
2.域交换试验见课本。
3.思路:可以利用RNAi
天津大学
2011年攻读硕士学位研究生入学考试模拟试题(三)科目代码:科目名称:分子生物学
考生注意:所有大题务必书写在考场提供的答题纸上,写在本试题单上的答题一律无效(本题单不参与阅卷)。
一、名词解释(每小题4分,共40分)
1.Nest PCR
2.ρ-independent termination
3.Trombone model
4.transposable element
5.primer-template junction
6.hnRNA
7.Nonsense mediated mRNA decay
8.Suppressor
9.Pesudogene
10.virusoncogene
二、简答题(每小题10分,共60分)
1.什么是宏基因组(Metagenome)?基本研究路线策略如何?
2.什么是Epigenetic?其调控机制是什么?
3.请解释与DNA复制有关的两个术语:进行性和忠实性。
在E.coil DNA复制过程中,哪些蛋白质或酶能够增强DNA复制的进行性和忠实性?
4.简述逆转录病毒复制过程
5.组蛋白的尾部修饰在基因的转录调控中发挥了重要作用,请列举我们在课程中讨论的一种修饰,并说明其发挥作用的机制。
6.简单说明有那些方法可以得到所需要的基因。
三、论述题(第1题20分,2,3题各15分,共50分)
1.阐述一条反向遗传克隆功能基因的途径
2.请叙述原核生物当中从核酸指导到蛋白质合成的基本过程?
3.试比较原核和真核生物转录的差异。
天津大学
(评分参考卷)
2011年攻读硕士学位研究生入学考试模拟试题(三)科目代码:科目名称:分子生物学
一、Nest PCR,巢式PCR,先用一对外侧引物扩增含目的基因的大片段,再用一对内侧引物以大片段为模板扩增获取目的基因。
筑巢PCR可以提高PCR的效率和特异性。
ρ-independent termination不依赖于ρ的终止子一类不依赖于蛋白质辅因子就能实现终止作用,除具有发夹结构外,在终止点前有一寡聚U序列,回文对称区通常有一段富含GC 的序列。
寡聚U序列可能提供信号使RNA聚合酶脱离模板。
Trombone model长号模型,该模型是用于解释DNA同时在前导链和后随链上合成两个聚合酶是如何在复制叉处保持连接的。
transposable element转座元件,转座是一种特殊的遗传重组,它是将特定的遗传因子从DNA上的一个地方移位到另一个地方,这些可以移动的遗传因子叫做转座因子。
primer-template junction引物模板接头,引物模板接头由两个元件组成,引物是与模板互补但是比模板短的一小段序列,模板是指供指导所有互补脱氧核苷酸添加的单链DNA引物。
核不均一RNA,由DNA转录生成的原始转录产物,即mRNA前体。
Nonsense mediated mRNA decay无义密码子介导的mRNA的衰减,当一个mRNA分子含有提前的终止密码子时,这一mRNA很快地被降解,这一过程即无义密码子介导的mRNA的衰减。
Suppressor抑制基因,正向突变的无义突变,错义突变和移框突变都可以为另一基因上的突变所致,这类抑制突变均发生在tRNA基因或与tRNA功能有关的基因上。
Pesudogene假基因,由原始活性基因突变产生的存在于基因组中的稳定但不具活性的基因。
virusoncogene病毒癌基因,存在于病毒(大多是逆转录病毒)基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因。
它不编码病毒结构成分,对病毒无复制作用,但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用。
二、1.宏基因组即生境中全部微小生物遗传物质的总和。
它包含了可培养的和未可培养的
微生物的基因,目前主要指环境样品中的细菌和真菌的基因组总和。
研究对象:环境样品中的微生物群体基因组为,
研究手段:功能基因筛选和测序分析,
研究目的:微生物多样性、种群结构、进化关系、功能活性、相互协作关系及与环境之间的关系
基本研究路线:一般包括从环境样品中提取基因组DNA,克隆DNA到合适的载体,导入宿主菌体,筛选目的转化子。
2.表观遗传学是指不需要核苷酸序列变异的基因表达的可遗传改变。
调控机制:DNA甲基化,组蛋白共价修饰,染色体重塑,非编码RNA调控,基因表达重新编程。
3.进行性是指DNA聚合酶沿着DNA模板所能移动的最大距离,即合成DNA分子的长度。
DNA聚合酶Ⅲ的β钳确保DNA复制的进行性。
忠实性是衡量DNA聚合酶合成子代DNA分子的准确度,DNA聚合酶Ⅲ的3’→5’核酸外切酶校正功能确保DNA复制的忠实性。
4.(1)逆转录酶以RNA为模板,催化dNTP聚合生成DNA互补链,产物是RNA/DNA杂化双链。
(2)杂化双链中的RNA被逆转录酶中有RNA酶活性的组分如RNaseH水解.
(3)利用单链DNA为模板,由逆转录病毒催化合成第2条DNA互补链。
5.组蛋白的乙酰化与基因活性有一定的相关性。
具有转录活性的基因倾向于结合在乙酰化程度较高组蛋白上,无转录活性的基因所结合的组蛋白其乙酰化程度较低。
抵消赖氨酸残基上的正电荷,从而减弱DNA-组蛋白之间相互作用的强度。
破坏组蛋白N末端尾部与各种参与维持染色质高度有序结构的蛋白质之间相互作用的稳定性。
6.⑴PCR法设计特定的引物,即可以扩增得到特定目的基因。
⑵酶法经过特定的限制性内切酶作用及凝胶电泳后可以专一的获取特定大小的目的基因。
⑶探针法用特定的探针(探针根据DNA序列、RNA序列或蛋白质序列进行设计)从总DNA溶液中获取特定目的基因。
⑷cDNA法用特异功能的mRNA进行反转录,也可以获取特定目的基因。
(5)人工合成基因知道蛋白质的氨基酸顺序,就可以根据密码子推断其基因组成并人。