浓缩苹果汁中耐热耐酸菌的检验
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观察培养基上是否有菌落生长, 可用肉眼检查, 必要时用放大镜检查, 统计菌落数, 将接种的 3 个培 养皿上的菌落数相加, 即为 100 mL ( 或 10 mL) 样品中 的耐热耐酸菌数。 3 结果与讨论
测试中共检验样品 197 批, 厌氧条件下培养及对 照皿中无菌体生长。需氧条件下培养, 从 108 批样品 中分离出可疑菌落( 表 1) , 检出率 54. 8% 。挑选典型 菌样 10 株, 经传代培养, 送中国科学院微生物研究所 和西北农林科技大学微生物实验室做菌种鉴定, 结果 均为枯草芽孢杆菌( Bacillus subtilis) 。其主要特性是: 菌落不透明、皱褶、蔓延; 菌体革兰氏染色阳性, 杆状 ( 0. 7~ 0. 8Lm @ 2~ 3Lm) ; pH4. 5. 50 e 、需氧条件下生 长; 经诱导试验, 形成椭圆形芽孢。菌落形态及菌体 显微形态见图 1、2、3。
2002 年
检验检疫科学
第 12 卷 第 4 期
浓缩苹果汁中耐热耐酸菌的检验
* 蒋宏伟 X 张耀相 李高华 潘红延 魏守琦
( 陕西检验检疫局)
摘 要 对 197 批 浓缩 苹果 汁样 品进 行耐 热 耐酸 菌检 测, 从其中的 108 批中分离培养出可 疑菌落, 经鉴定为 枯草芽
孢杆菌, 检出率 54. 8% 。筛 选出适 应出口浓 缩苹 果汁 中耐热 耐酸菌的检验方法。
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合计 197 108
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检测中, 所有样品同时采用上述方法与 SN 0178 - 92 5出口食品噬热菌芽孢( 需氧芽孢总数, 平酸芽 孢和厌氧芽孢) 记数方法6进行对比试验, 后者从未检 出。前者的检验结果与国外反馈的检验结果基本一 致。在陕西浓缩苹果汁生产企业的产品质量监控中 已得到参考应用。本研究结果为浓缩苹果汁中耐热 耐酸菌检验标准的制定, 填补国内检验标准空白打下 了基础。本研究的测试样品仅为浓缩苹果汁, 应用于 其他果汁的检验还需进一步试验。 参考文献
分: 可分为大专、本科、硕士和博士; 按职称分: 可分为工 程师、 高级工程师 和教授级高程 师; 按专 业分: 可分 为商 品检验、动 了学术论文, 除编 辑部给稿费以外, 有的 局还另 外再给 稿费 1
植检、卫生检疫和质量 监督 , ,按 掌握外 语分: 会 一门外 语、 ~ 2 倍的奖励。但 是, 笔 者认 为我 们系 统是 否还 有值 得改 进
以无菌操作取样品 100mL ( 或 10ml ) , 放入 250mL 三角烧瓶中, 用 5mol/ L NaOH 调 pH 至 7. 0, 加入等量生 理盐水, 得 1 号样液。将 1 号样液瓶置 80~ 85 e 水浴 锅内保持 10~ 15min. ( 应不断振摇) 。取出后用冷水迅 速冷却至室温。将 1 号样液全部倾倒于内装 0. 22Lm 滤膜的滤器中, 连接真空泵抽滤, 使 1 号样液完全通过 滤膜。用滤膜镊子取下滤膜, 平铺于空培养皿内( 注意 不得有气泡) , 放入适量玻璃珠, 加入 4mL 生理盐水, 充 分摇匀, 得 2 号样液。取两个制备好的培养基平皿, 各 接种 2 号样液 lmL, 用 L 形玻璃棒刮匀; 在剩余 2mL 2 号样液的培养皿中倒入 55 e 左右的培养基, 摇匀后静 置至凝固。取制备好的培养基平皿 1 个, 加入 1mL 生 理盐水作为对照。将上述培养皿作标记后放入恒温培 养箱, 56 e 、相对湿度 60% ~ 70% 培养( 48 ? 2) h( 需氧、 厌氧对照) 。24h 观察, 48h 终判, 并做好记录。
1 食品卫生检验方法 微生 物学部 分. 北京: 北 京技术 标准 出 版社, 1976
2 中国进出口商品检验技术研究所. 中华人民 共和国进出 口 商品检验行业标准汇编. 1997
编者的话
周锦帆
元素。反映在发表论文上, 有几篇学术水平属一般的论文。 3. 深广 科研型。这类科技人员的特点是科 研工作有相 当
关键词 浓缩苹果汁 耐热耐酸菌 检验
1 前言 随着苹果产业规模的形成, 浓缩苹果汁加工生产已
成为陕西省新的经济快速增长点, 出口到欧洲、美国、日 本、俄罗斯、南非、澳大利亚及东南亚各国。据初步统 计, 2001/ 2002 榨季, 陕西出口量超过 8. 4 万吨, 比上一榨 季近乎翻一番, 占全国浓缩苹果汁出口量的三分之一以 上。近两年来, 美国、日本等进口商不断提出浓缩苹果 汁中耐热耐酸菌的检验要求, 使得我方出口受到一定阻 碍。
* 蒋宏伟: 女, 1959 年生, 毕业于云南农业大学兽医专业, 已发表论文 20 余篇。
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2002 年
检验检疫科学
第 12 卷 第 4 期
表 1 浓缩苹果汁中耐热耐酸菌检验结果
样品 来源
样品
数量 ( 批)
检验结果
需氧培养
厌氧培养
检出批数 未检出批数 检出批数 未检出批数
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等同。科技人员的学术水平 是否 可分 为三类, 以 下以 化学检 献的习惯, 即使他们想查阅 外文文献, 本局或本 地的图书馆 根
验人员为例。
本没有外文资料。当然, 也 存在本局图书馆确实有 外文资料,
1. 操作手型。这类科技人员能正确理解检验方法的( 例如国 标方法和行业标准) 原理并能规范地按分析手续检验, 得到的检 验结果准确。但是, 由于平时仅停留在常规的检验工作中, 几乎 不看外文文献及中文科技期刊, 对国 外同行的研究情况全然不 知, 具体来说, 不具备接受简单的科研项目的能力。反映在发表 论文上, 可能即使工作了相当长时间, 科技论文仍是空白。
2. 简易科研型。这类科技人员的特 点是对科研 或制标工 作有一定的兴趣, 平时 稍看一 点中文 和外文 资料 并比 较注意
可光顾者极少, 利 用率很低。其实, 不了解国外 同行研究现 状 的科技人员是不可能作出很高水平的研究工 作的。北京晚 报 ( 7 月 21 日) 有篇文章, 认为中 国国际 象棋队 队员水 平的提 高 离不开三个条件: 高人指点、勤学苦练和多打 实战。那么对 于 质检系统的科技人员来 说, 提 高自 已的学 术水 平的三 个条 件 是否可以是: 高人 指点、多看外文文献和多做实际检验研究。
学专家并有专著。
费。另外, 国家质检总 局和直 属局 经常性 地评 科技进 步奖 和
科技人员如何分 类, 是一 件很 有意思 的事: 按 岗位分: 可 优秀论文奖, 鼓励科 技人员 在科 研方 面作出 好的 成绩。科 技
分为公务员和事业单位; 按 年龄分: 可 分为 老、中、青; 按学历 成果获奖后有时上级给 了奖 励, 本单 位又再 奖励。即 使发 表
普通冰箱 、高压蒸汽灭菌器、电子天平、恒温干 燥箱、恒温培养箱、恒温水浴锅、培养皿、三角烧瓶、量 筒、烧杯、漏斗、L 形玻璃棒、玻璃珠、酒精灯、负压过 滤器、孔径为 0. 22Lm 的滤膜。 2. 2 试剂
月示蛋白胨 、葡萄糖 、酵母浸膏 、磷酸氢二钾 、琼 脂粉 、可溶性淀粉、硫酸锰、蒸馏水、生理盐水。 2. 3 样品由相关果汁生产厂提供, 共 197 份, 置于冷 藏柜 2~ 4 e 保存。 2. 4 检验步骤
三、国际刊号 和条形码
提高自己的学术水平, 能解决 局里迫 切要求 解决 的比 较简单
细心的读者可能已看到: 这期的5检验检疫科学6 已有国际
的实际检验问题。例如, 用 ICP- AES 法测定某食品 中某有害 刊号和条形码了。至于核心期刊问题, 编辑部正在努力之中。
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1995 年, 德国Hofsommer 博士提出, 有一种非常耐热 的产芽孢细菌可以经受通常果汁巴氏灭菌的条件存活 下来, 这种细菌能在低 pH 条件下长出芽孢, 其代谢过程 会在最终产品中产生一种不愉快的类化合物气味。后 来该细菌被 Baumgart 教授证实为耐热耐酸菌。此后不 久, 英国食品专家研究表明该菌的腐败在最终产品中产 生的气味, 确实影响到品牌产品的制造, 对产品的质量 造成潜在的威胁。1992~ 1996 年, 有关耐热耐酸菌引起 的异常污染在英国、美国及日本时有报道。
表1浓缩苹果汁中耐热耐酸菌检验结果样品来源样品数量批检验结果需氧培养厌氧培养检出批数未检出批数检出批数未检出批数a473611047b925438092c25223025d14131014e51405f31203g1101h90909i10101合计197108890197检测中所有样品同时采用上述方法与sn0178925出口食品噬热菌芽孢需氧芽孢总数平酸芽孢和厌氧芽孢记数方法6进行对比试验后者从未检出
目前国内尚没有相应的检验标准( 方法) , 国外提 供的方法存在检验周期较长等缺陷。因此, 制定我国 浓缩苹果汁中耐热耐酸菌检验标准( 方法) 成为一项亟 待解决的问题。笔者于 2000~ 2001 年结合陕西浓缩苹 果汁生产和出口实际, 进行了该项研究, 现报道如下。 2 材料与方法 2. 1 设备和材料
高的学术水平, 能解决别人 不能解决的检验问题, 对国内外 同 行的研究现状相当清楚, 自己 在某 专业的 知识 有相当 的深 度
一、科技人员的分类 科技人 员在质检系统中 占相 当高 的比例, 这 是由 质检系 统的性质和任 务所 决定 的。在 总局 领 导中 就有 分 析化 学专
和广度。反映在发表论文上, 不但数量多而且质量 高, 并能 给 读者留下很深的印象, 论文 发表后 会引 起相 当的反 响, 此外, 确实有能力指导中青年科技人员从事科研工作。
会二门外语。另外, 按思维方式, 可分为理解型和创新型。
的地方, 例如, 年青的科技 人员不 是都 能得到/ 高人指 点0 , 具
笔者在此短文中, 重点 讲按学 术水 平分类。 虽然 学位和 体来说, 可能没有人教 他们 如何选 题、如何 搞科研、如 何撰 写
职称在一定程度上反映一 位科技 人员 的学术 水平, 但 两者不 论文。再如, 有的年青 的科技 人员 没有养 成经 常阅读 外文 文
家、机电检验专家和动 植检 专家。在 中原的 直属 检验 检疫局
二、质检系统 的科研环境
有位副局长是轻工产品检 验专家, 南 方某大 城市 的检 验检疫
质检系统的科研环境, 笔者认为可能是国内最 好的系统,
局的局长是金属材料检验 专家, 该局 有一位 副局 长是 分析化 简单来说: 各 级领 导重 视, 有 实际 的 研究 课题 、有仪 器、有 经
测试中共检验样品 197 批, 厌氧条件下培养及对 照皿中无菌体生长。需氧条件下培养, 从 108 批样品 中分离出可疑菌落( 表 1) , 检出率 54. 8% 。挑选典型 菌样 10 株, 经传代培养, 送中国科学院微生物研究所 和西北农林科技大学微生物实验室做菌种鉴定, 结果 均为枯草芽孢杆菌( Bacillus subtilis) 。其主要特性是: 菌落不透明、皱褶、蔓延; 菌体革兰氏染色阳性, 杆状 ( 0. 7~ 0. 8Lm @ 2~ 3Lm) ; pH4. 5. 50 e 、需氧条件下生 长; 经诱导试验, 形成椭圆形芽孢。菌落形态及菌体 显微形态见图 1、2、3。
2002 年
检验检疫科学
第 12 卷 第 4 期
浓缩苹果汁中耐热耐酸菌的检验
* 蒋宏伟 X 张耀相 李高华 潘红延 魏守琦
( 陕西检验检疫局)
摘 要 对 197 批 浓缩 苹果 汁样 品进 行耐 热 耐酸 菌检 测, 从其中的 108 批中分离培养出可 疑菌落, 经鉴定为 枯草芽
孢杆菌, 检出率 54. 8% 。筛 选出适 应出口浓 缩苹 果汁 中耐热 耐酸菌的检验方法。
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检测中, 所有样品同时采用上述方法与 SN 0178 - 92 5出口食品噬热菌芽孢( 需氧芽孢总数, 平酸芽 孢和厌氧芽孢) 记数方法6进行对比试验, 后者从未检 出。前者的检验结果与国外反馈的检验结果基本一 致。在陕西浓缩苹果汁生产企业的产品质量监控中 已得到参考应用。本研究结果为浓缩苹果汁中耐热 耐酸菌检验标准的制定, 填补国内检验标准空白打下 了基础。本研究的测试样品仅为浓缩苹果汁, 应用于 其他果汁的检验还需进一步试验。 参考文献
分: 可分为大专、本科、硕士和博士; 按职称分: 可分为工 程师、 高级工程师 和教授级高程 师; 按专 业分: 可分 为商 品检验、动 了学术论文, 除编 辑部给稿费以外, 有的 局还另 外再给 稿费 1
植检、卫生检疫和质量 监督 , ,按 掌握外 语分: 会 一门外 语、 ~ 2 倍的奖励。但 是, 笔 者认 为我 们系 统是 否还 有值 得改 进
以无菌操作取样品 100mL ( 或 10ml ) , 放入 250mL 三角烧瓶中, 用 5mol/ L NaOH 调 pH 至 7. 0, 加入等量生 理盐水, 得 1 号样液。将 1 号样液瓶置 80~ 85 e 水浴 锅内保持 10~ 15min. ( 应不断振摇) 。取出后用冷水迅 速冷却至室温。将 1 号样液全部倾倒于内装 0. 22Lm 滤膜的滤器中, 连接真空泵抽滤, 使 1 号样液完全通过 滤膜。用滤膜镊子取下滤膜, 平铺于空培养皿内( 注意 不得有气泡) , 放入适量玻璃珠, 加入 4mL 生理盐水, 充 分摇匀, 得 2 号样液。取两个制备好的培养基平皿, 各 接种 2 号样液 lmL, 用 L 形玻璃棒刮匀; 在剩余 2mL 2 号样液的培养皿中倒入 55 e 左右的培养基, 摇匀后静 置至凝固。取制备好的培养基平皿 1 个, 加入 1mL 生 理盐水作为对照。将上述培养皿作标记后放入恒温培 养箱, 56 e 、相对湿度 60% ~ 70% 培养( 48 ? 2) h( 需氧、 厌氧对照) 。24h 观察, 48h 终判, 并做好记录。
1 食品卫生检验方法 微生 物学部 分. 北京: 北 京技术 标准 出 版社, 1976
2 中国进出口商品检验技术研究所. 中华人民 共和国进出 口 商品检验行业标准汇编. 1997
编者的话
周锦帆
元素。反映在发表论文上, 有几篇学术水平属一般的论文。 3. 深广 科研型。这类科技人员的特点是科 研工作有相 当
关键词 浓缩苹果汁 耐热耐酸菌 检验
1 前言 随着苹果产业规模的形成, 浓缩苹果汁加工生产已
成为陕西省新的经济快速增长点, 出口到欧洲、美国、日 本、俄罗斯、南非、澳大利亚及东南亚各国。据初步统 计, 2001/ 2002 榨季, 陕西出口量超过 8. 4 万吨, 比上一榨 季近乎翻一番, 占全国浓缩苹果汁出口量的三分之一以 上。近两年来, 美国、日本等进口商不断提出浓缩苹果 汁中耐热耐酸菌的检验要求, 使得我方出口受到一定阻 碍。
* 蒋宏伟: 女, 1959 年生, 毕业于云南农业大学兽医专业, 已发表论文 20 余篇。
# 44 #
2002 年
检验检疫科学
第 12 卷 第 4 期
表 1 浓缩苹果汁中耐热耐酸菌检验结果
样品 来源
样品
数量 ( 批)
检验结果
需氧培养
厌氧培养
检出批数 未检出批数 检出批数 未检出批数
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等同。科技人员的学术水平 是否 可分 为三类, 以 下以 化学检 献的习惯, 即使他们想查阅 外文文献, 本局或本 地的图书馆 根
验人员为例。
本没有外文资料。当然, 也 存在本局图书馆确实有 外文资料,
1. 操作手型。这类科技人员能正确理解检验方法的( 例如国 标方法和行业标准) 原理并能规范地按分析手续检验, 得到的检 验结果准确。但是, 由于平时仅停留在常规的检验工作中, 几乎 不看外文文献及中文科技期刊, 对国 外同行的研究情况全然不 知, 具体来说, 不具备接受简单的科研项目的能力。反映在发表 论文上, 可能即使工作了相当长时间, 科技论文仍是空白。
2. 简易科研型。这类科技人员的特 点是对科研 或制标工 作有一定的兴趣, 平时 稍看一 点中文 和外文 资料 并比 较注意
可光顾者极少, 利 用率很低。其实, 不了解国外 同行研究现 状 的科技人员是不可能作出很高水平的研究工 作的。北京晚 报 ( 7 月 21 日) 有篇文章, 认为中 国国际 象棋队 队员水 平的提 高 离不开三个条件: 高人指点、勤学苦练和多打 实战。那么对 于 质检系统的科技人员来 说, 提 高自 已的学 术水 平的三 个条 件 是否可以是: 高人 指点、多看外文文献和多做实际检验研究。
学专家并有专著。
费。另外, 国家质检总 局和直 属局 经常性 地评 科技进 步奖 和
科技人员如何分 类, 是一 件很 有意思 的事: 按 岗位分: 可 优秀论文奖, 鼓励科 技人员 在科 研方 面作出 好的 成绩。科 技
分为公务员和事业单位; 按 年龄分: 可 分为 老、中、青; 按学历 成果获奖后有时上级给 了奖 励, 本单 位又再 奖励。即 使发 表
普通冰箱 、高压蒸汽灭菌器、电子天平、恒温干 燥箱、恒温培养箱、恒温水浴锅、培养皿、三角烧瓶、量 筒、烧杯、漏斗、L 形玻璃棒、玻璃珠、酒精灯、负压过 滤器、孔径为 0. 22Lm 的滤膜。 2. 2 试剂
月示蛋白胨 、葡萄糖 、酵母浸膏 、磷酸氢二钾 、琼 脂粉 、可溶性淀粉、硫酸锰、蒸馏水、生理盐水。 2. 3 样品由相关果汁生产厂提供, 共 197 份, 置于冷 藏柜 2~ 4 e 保存。 2. 4 检验步骤
三、国际刊号 和条形码
提高自己的学术水平, 能解决 局里迫 切要求 解决 的比 较简单
细心的读者可能已看到: 这期的5检验检疫科学6 已有国际
的实际检验问题。例如, 用 ICP- AES 法测定某食品 中某有害 刊号和条形码了。至于核心期刊问题, 编辑部正在努力之中。
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1995 年, 德国Hofsommer 博士提出, 有一种非常耐热 的产芽孢细菌可以经受通常果汁巴氏灭菌的条件存活 下来, 这种细菌能在低 pH 条件下长出芽孢, 其代谢过程 会在最终产品中产生一种不愉快的类化合物气味。后 来该细菌被 Baumgart 教授证实为耐热耐酸菌。此后不 久, 英国食品专家研究表明该菌的腐败在最终产品中产 生的气味, 确实影响到品牌产品的制造, 对产品的质量 造成潜在的威胁。1992~ 1996 年, 有关耐热耐酸菌引起 的异常污染在英国、美国及日本时有报道。
表1浓缩苹果汁中耐热耐酸菌检验结果样品来源样品数量批检验结果需氧培养厌氧培养检出批数未检出批数检出批数未检出批数a473611047b925438092c25223025d14131014e51405f31203g1101h90909i10101合计197108890197检测中所有样品同时采用上述方法与sn0178925出口食品噬热菌芽孢需氧芽孢总数平酸芽孢和厌氧芽孢记数方法6进行对比试验后者从未检出
目前国内尚没有相应的检验标准( 方法) , 国外提 供的方法存在检验周期较长等缺陷。因此, 制定我国 浓缩苹果汁中耐热耐酸菌检验标准( 方法) 成为一项亟 待解决的问题。笔者于 2000~ 2001 年结合陕西浓缩苹 果汁生产和出口实际, 进行了该项研究, 现报道如下。 2 材料与方法 2. 1 设备和材料
高的学术水平, 能解决别人 不能解决的检验问题, 对国内外 同 行的研究现状相当清楚, 自己 在某 专业的 知识 有相当 的深 度
一、科技人员的分类 科技人 员在质检系统中 占相 当高 的比例, 这 是由 质检系 统的性质和任 务所 决定 的。在 总局 领 导中 就有 分 析化 学专
和广度。反映在发表论文上, 不但数量多而且质量 高, 并能 给 读者留下很深的印象, 论文 发表后 会引 起相 当的反 响, 此外, 确实有能力指导中青年科技人员从事科研工作。
会二门外语。另外, 按思维方式, 可分为理解型和创新型。
的地方, 例如, 年青的科技 人员不 是都 能得到/ 高人指 点0 , 具
笔者在此短文中, 重点 讲按学 术水 平分类。 虽然 学位和 体来说, 可能没有人教 他们 如何选 题、如何 搞科研、如 何撰 写
职称在一定程度上反映一 位科技 人员 的学术 水平, 但 两者不 论文。再如, 有的年青 的科技 人员 没有养 成经 常阅读 外文 文
家、机电检验专家和动 植检 专家。在 中原的 直属 检验 检疫局
二、质检系统 的科研环境
有位副局长是轻工产品检 验专家, 南 方某大 城市 的检 验检疫
质检系统的科研环境, 笔者认为可能是国内最 好的系统,
局的局长是金属材料检验 专家, 该局 有一位 副局 长是 分析化 简单来说: 各 级领 导重 视, 有 实际 的 研究 课题 、有仪 器、有 经