高中生物必修一第二章 三类物质的鉴定

2.脂肪的鉴定
取材： 花生种子（浸泡３－４h），去皮，
切片：花生子叶横断面上切下若干薄片，放于盛清水的培养皿中
①选取最薄的薄片移至载玻片中央 ②在薄片上滴加苏丹Ⅲ染液2 ~ 3滴，染色３min
制片： (或苏丹Ⅳ染液染色1min)
③滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴，洗去浮色 (即洗去多余的苏丹Ⅲ 或苏丹Ⅳ染液)
实验流程(步骤) 1.可溶性还原糖
选材：含还原糖量较高的 白色或近于白色的植物组织
显色反应
排除材料本身的 颜色色素对实验 结果的干扰
刚配制的斐林 试剂1ml
(等量混匀)
50～65.C水浴 加热2min
还原糖的检测结果：
蓝色
棕色
砖红色沉淀
反应实质：Cu(OH)2溶液与还原性糖反应，生成砖红色 沉淀Cu2O
1、芝麻种子含脂肪量较高，为什么实验时不用芝麻
种子？
芝麻种子太小，不易切片
2、为什么可以用酒精洗去浮色？ 因为苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液易溶于酒精
辨析
X 1、可以用斐林试剂甲液、乙液来检测蛋白质 √ 2、可以用斐林试剂甲液、乙液和蒸馏水来检测蛋白
质
X 3、某样液遇斐林试剂成砖红色沉淀，说明有葡萄糖 存在 4、脂肪的鉴定一定需要显微镜
实验二、蛋白质的鉴定 1.实验原理：
蛋白质与双缩脲试剂作用发生紫色反应
双缩脲试剂： ①配制双缩脲试剂的A液（0.1g/ml的NaOH溶液）
和B液（0.01g/ml的CuSO4溶液）
②使用时先加2mlA液造成碱性环境，再加入4滴B液。
使用要点：先A再B B液不能加入过多
检测方法和步骤
向试管内注入2ml待测组织样液 ②向试管内注入双缩脲试剂A液1ml，摇匀 向试管内注入双缩脲试剂B液4滴，摇匀 观察颜色变化
④吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片
显微观察：先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察
现象：有被染成橘黄色(或红色)的脂肪微粒
脂肪微粒
脂肪的检测结果
实验四：淀粉的鉴定 ①向试管内注入2ml待测组织样液 ②向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化
碘液2滴
摇匀后变成蓝色
深化
问题探讨:
X X 5、葡萄糖中加斐林试剂后立即出现砖红色沉淀
4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？
比较项 试剂及成
目
分
ห้องสมุดไป่ตู้原理
溶液浓度
方法
加热 结 与否 果
新配制 NaOH
可溶还 斐林试剂 的
原糖的 NaOH和 Cu(OH)2
鉴定 CuSO4 溶液
浓度为
0.1g/mL CuS04 浓度为
先把NaOH 溶液和CuSO4 溶液混合，
实验概述：
某些化合物能够使生物组织中的有关有机 化合物产生特定的颜色反应
需鉴定 的物质
还原糖
淀粉
试剂
斐林 试剂
碘液
脂肪 蛋白质
苏丹Ⅲ染 双缩脲
液或苏丹 Ⅳ染液
试剂
实验一、检测还原糖
生物体中的还原糖主要有哪些呢? 还原糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖
1.实验原理： 还原糖与斐林试剂在50℃~65℃水浴加热下
水浴 加热
砖 红 色
而后立即使用。
沉
0.05g/mL
淀
在碱性
NaOH 浓度为
蛋白质 的鉴定
双缩脲试 环境下 剂NaOH和 的Cu2+
CuSO4
0.1g/mL
CuS04 浓度为
先加入Na0H 1mL，然后 再加CuS04 4滴，摇匀。 (不能过量)
不 需 要
溶 液 呈 紫
0.01g/mL
色
对斐林试剂和双缩脲试剂的配方叙述不正确的是
3.蛋白质的鉴定
避免试验后粘在试
选材与制备
管壁上，不易清洗
组织样液： 黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）
显 色 反
A液1ml (创设碱性条件)
B液4滴 (提供Cu2+)
应
现象：
紫色反应
实质是CuSO4在碱性条件下与蛋白质反应形成紫色物质
蛋白质的检测结果
深化
问题探讨:
1、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能 过量？
过量的双缩脲试剂B液会与A液反应，生成Cu(OH)2 使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。
2、为什么要先加A液，再加B液？ 反应的实质是CuSO4在碱性条件下与蛋白质反应，
先加A液的目的是创设反应所需的碱性条件
实验三、脂肪的鉴定
实验原理： 脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或被苏丹 Ⅳ染液染成红色
方法一、直接向组织样液中加入3滴苏丹Ⅲ染液 方法二、 制作花生子叶临时切片，显微镜观察子叶着色 情况
D．双缩脲试剂含有两种试剂：质量浓度为0.1 g/mL的NaOH溶液和质量浓度为0.01 g/mL的 CuSO 溶液
还原糖的检测结果
深化
问题探讨:
1、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？
Cu(OH)2溶液不稳定，时间太长，易沉淀，无法 参与反应。
2、斐林试剂为何要先等量混匀再加入样液，而不是 分开加入？
反应的本质是Cu(OH)2溶液与还原性糖反应,先 等量混匀的目的是要配成Cu(OH)2溶液 3、可以用甘蔗或西瓜汁做还原糖的鉴定吗？ 不可以，因为蔗糖不属于还原糖，而西瓜汁又 是红颜色
（C ）
A．都含有NaOH溶液和CuSO4溶液 B．斐林试剂含有两种试剂：质量浓度为0.1g/mL
的NaOH溶液和质量浓度为0.05 g/mL的
CuSO4 溶液，用时两种溶液等量混匀，现用现配
C．双缩脲试剂是将4滴0.1 g/mLCuSO4的溶液滴 入2 mL 0.01 g/mL的NaOH溶液中混合而成的
因为苏丹或苏丹染液易溶于酒精1可以用斐林试剂甲液乙液来检测蛋白质2可以用斐林试剂甲液乙液和蒸馏水来检测蛋白3某样液遇斐林试剂成砖红色沉淀说明有葡萄糖存在4脂肪的鉴定一定需要显微镜5葡萄糖中加斐林试剂后立即出现砖红色沉淀原理溶液浓度方法加热与否可溶还原糖的鉴定斐林试剂naoh和cuso蛋白质的鉴定剂naoh和cuso4斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同
作用，生成砖红色沉淀
配制斐林试剂： ①配制斐林试剂的甲液（0.1g/ml的NaOH溶液）和
乙液（0.05g/ml的CuSO4溶液） ②使用时将甲液和乙液等量混匀配得斐林试剂，并
立即使用
使用要点：甲、乙液等量混匀， 现配现用
检测方法和步骤
1.向试管中注入2ml组织样液 2.向试管中注入1ml斐林试剂（甲乙液等 量混匀） 3.将试管放入50~65℃水浴加热约2min 4.观察试管中颜色变化