凝集反应检查人体血型

实验步骤
混合 滴 加 标 准 血 清
问题五
还有哪些其他相关拓展知识需要 我们了解？
一、抗原抗体结合力
项目4-1 凝集反应检测人体血型
拓展知识一 抗原和抗体的结合力
•抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合
•不形成牢固的共价键，通过非共价键结合 •这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力
*（1）静电引力 *（2）范德华引力 *（3）氢键结合力 *（4）疏水作用力
* 亲和力（avidity) 是指反应系统中复杂抗原与相应抗体之间的结合能力。 • 亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有效决定簇数目相关。 • 亲和力越大，抗原抗体结合越牢固。
项目4-1 凝集反应检测人体血型
拓
展
*1.特异性
*2.比例性
知
识
二
抗
原
抗
体
反
*概念：抗原分子，只能与由它刺激所
应
产生的抗体结合而起反应的专一性能。
[实验原理]：红细胞作为颗粒性
抗原与相应的抗体或抗体血清混合后， 在电解质参与下，经过一定时间，抗 原抗体凝聚成肉眼可见的凝集块，这
种现象称为凝集反应。血清中的抗体称为凝集素，抗原称为凝集
原。
项目64-凝1 集凝反集应反检应测检测人人体体血血型型
凝集反应定义：
颗粒性抗原（细菌、红细胞等）与相应抗体，在适宜
你作为医院检
接 到 工 作 任 务
验科的一名临床检 验人员在5月12日接 到一个工作任务： 用凝集反应检测一 批人体血样,判定血 型。这个工作需要 你了解反应原理,并
按照医院的标准操 作规程开展检测工作。
能够用试剂检测血
样，给出正确的结
论。
项目4-1 凝集反应检测人体血型
凝集反应检测人体血型
项 目 背 景
项目4-1 凝集反应检测人体血型
第
二
①消毒受检者的指尖。
步
血
②捏紧指尖，用消毒过的采血针迅速刺破皮肤。
型
测
③待血流出后用小滴管吸1滴血，各滴一滴在左侧抗A血
定
清和右侧抗B血清中。
④混合A型和B型标准血清和红细胞悬液。
⑤静置数分钟后，放在低倍镜下观察凝集现象。
实验步骤
采 做标记，准备样材料取血
问题四 我们怎么进行结果判定？
基 本
出现凝集，称为直接凝集 反应 。
概
念
玻片法
试管法
临床意义：
输血交叉配血试验 伤寒、副伤寒的肥达试 验
玻片法
… …
颗粒性 抗原
已知 抗体
试管法
凝 集 试 验 示 意 图 各管血清倍比稀释
Ab
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128
加入抗原
各管抗原量不变
Ag
振摇 混匀、37℃孵育
A型标准血清
数量
设备或材料
1支（每组） 毛细吸管
3支（每组） 载玻片
1000mL
记号笔
（共用）
1支（共用） B型标准血清
数量 5支（每组） 试剂5片（每组） 1支（每组）
1支（共用）
备注： A型标准血清（含抗B凝集素，使B型、AB型红细胞的凝集原凝集）； B型标准血清（含抗A凝集素，使A型、AB型红细胞的凝集原凝集）；
特
决定因素：由抗原决定簇和抗体分子
点
超变区之间空间结构的互补性决定的。
*3.可逆性
项目4-1 凝集反应检测人体血型
抗原抗体反应特异性示意 图
项目4-1 凝集反应检测人体血型
2.抗原抗体反应比例 性
*最适比或等价点 最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度比或量比。 • 等价带抗原与抗体分子比例合适的范围。
载体种类： 载体微球（红细胞） 聚苯乙烯胶乳微球
正向间 接凝集 试验
反向间 接凝集 试验
间接凝 集抑制 试验
协同凝集试 验
正向间接凝集试验
载
可
体 微
+
溶 性
球
抗
原
↓
免
疫
+
微
球
↓
原理： 诊断试剂：抗原致敏 载体微球 检测：标本中是否存 在相应抗体。
抗 体
免疫微球凝集
结果判定： 阳性：凝集 阴性：无现象
项目4-1 凝集反应检测人体血型
1.抗原和抗体的结合力示意图
抗体 O
H
氢键结合力 N
H
静电引力 -
-+ 范得华力
+-
疏水作用力
排斥的水
抗原
O N + + -+
+-
项目4-1 凝集反应检测人体血型
2.抗原和抗体的亲和性
* 亲和性 是抗体分子上一个抗原结合点与对 应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的 引力，这是抗原与抗体之间固有的结合力。
一 条件下发生结合，出现的肉眼可见的凝集现象。
、
基
特点：
本
抗原是较大的颗粒性物质
概
反应形成的凝集物主要由抗原物质组成
念
反应效价多以抗体稀释度判定
直接凝集技术
间接凝集技术
项目4-1 凝集反应检测人体血型
1.直接凝集技术
•操作步骤
定义：
细菌、细胞等颗粒性
一 抗原，在适当电解质参与
、 下可直接与相应抗体结合
问题三 我们怎么进行此检测？
项目4-1 凝集反应检测人体血型
观看录像
第
①取1个玻璃载玻片，放在一张白纸上，在载玻片左边写
一
检测这名字，玻片左上角写“A”右上角写“B”。
步
玻 片
②用小滴管吸A型标准血清，滴1滴在左侧，用另一 小滴管吸B型标准血清，滴1滴在右侧。
准
备
实验材料
手指
载玻片、白纸、记号笔、酒精 棉、ABO血清标品
项目4-1 凝集反应检测人体血型
结 果
阳性凝集
判
定
阴性未凝集
＋＋＋＋：出现大的凝集块，液体完全清亮透明，即100％凝集。 ＋＋＋：有明显的凝集片，液体几乎完全透明，即75％凝集。 ＋＋：有可见的凝集片，液体不甚透明，即50％凝集。 ＋：液体混浊，有小的颗粒状物，即25％的凝集。 －：液体均匀混浊，即不凝集。
项目4 抗原抗体反应的临床检验 4-1 凝集反应检测人体血型
解决的问题：
我们为什么要用凝集反应检测人体血型？ 我们用什么材料和设备完成此检测？ 我们怎么进行此检测？ 我们怎么进行结果判定？ 还有哪些其他相关知识需要我们拓展？
问题一
我们为什么要用凝集反应检测人 体血型？
项目4-1 凝集反应检测人体血型
反向间接凝集试验
载
体 微
+
球
↓
免 疫
+
微
球
↓
原理： 诊断试剂：抗体致敏 载体微球 检测：标本中是否存 抗 在相应抗原。 体
可 溶 性 抗 原
免疫微球凝集
结果判定： 阳性：凝集 阴性：无现象
问题二
我们用什么材料和设备完成此检 测？
项目4-1 凝集反应检测人体血型
器 具酶
设备或材料 采血针 小试管 无菌生理盐水
Ab
有无凝集
出现明显凝集现象的最高稀释倍数 为凝集效价：1：64
试管法
项目4-1 凝集反应检测人体血型
1.间接凝集技术
•操作步骤
定义：
将可溶性抗原或抗体先吸
一 附于适当大小的颗粒性载体
、 表面（这种载体与免疫无
基 关），然后与相应抗体或抗 Nhomakorabea本 原结合，在适量的电解质存
概 念
在下，出现特异性凝集现象， 称为间接凝集反应。