草莓无菌组培快繁技术

草莓无菌组培快繁技术
草莓（FagariaananassaDuch）属蔷薇科草莓属多年生草本植物，目前世界上栽培面积和产量在浆果类水果生产中仅次于葡萄，是一种经济价值很高的果品，除可以鲜食外，还可加工成果酱、果酒和饮料等制品。

目前在育苗繁殖中，传统的匍匐茎无性繁殖方法因其病毒感染严重、品种退化、繁殖系数低、速度慢，已不能满足目前规模化生产的实际需求。

因此采用组织培养不但可以试验快繁，满足规模化生产的需求，还对一些繁殖系数较低、杂合的材料有性繁殖易分离、或从杂合的遗传群体中赛选能保持优良遗传性的植株，具有更重要的意义。

本次研究通过草莓茎尖组织培养，对草莓进行试管苗快速繁殖试验。

一、母株选择
建立无菌体系中，筛选母株是十分重要的工作，它关系到大量试管苗的质量问题。

母株应选择健康且已达到生育期的植株。

改善供试母环境条件也是外植体成活的一个因素，快繁用的母株必须保持在适于新梢继续萌发的条件下生长，这样才有利于外植体生长。

为此，必须有一个带补充光照装置的温室，以满足草莓生长需要，并调节光质和温度，从而影响植株代谢，进而影响植物及激素产生。

二、外植体处理
草莓的组织培养以茎尖作为外植体效果比较好。

可从用分株、组织培养法所繁殖的植株上取材。

在接种前选择健壮无病的茎尖，采用
70%无水乙醇消毒10秒，用无菌水冲洗1次，再用0.1%升汞消毒8分钟，用无菌水反复冲洗5次。

这种消毒方法污染率低，成活率高，恢复生长快。

三、培养条件
切割已经灭菌的茎尖，使之长3mm,然后保持极性集中到芽诱导培养基上，经3-4周的培养后，外植体上分化出较多的嫩茎，这时可以将其切下进行继代培养。

当嫩茎长出3-4枚较大的叶片后，即可以将其切下进行生根诱导。

经过2-3周培养，就能形成带根系的再生植株，培养温度22-28℃每天光照8-12小时，光照强度2000-6000lux。

四、褐化问题
在草莓组织培养中，从外植体接种到成苗，褐化现象经常发生，其主要原因及解决办法有：
1.消毒：接种环境温度过高引起褐化死亡，这常在封闭式的环境内操作时发生，如在接种箱、无菌室内，应降低操作室环境温度，或缩短在高温环境中的操作时间。

2.消毒过度造成褐化死亡，这是植物外植体经常发生的现象。

其
中包括消毒剂选择不当、消毒剂浓度过高、消毒时间过长及消毒后冲洗不净等原因。

解决办法：先做消毒剂种类、浓度、消毒时间、消毒后无菌水冲洗次数、时间等诸因素的筛选，找出最适宜的指标。

3.培养温度过高，据观察，草莓培养温度超过30℃既有褐化现象发生，超过32℃褐化增多，其中在脱分化形成愈伤组织时特别易发生高温引起的褐化。

最好的解决方法就是降低培养温度。

4.培养基不适合和培养基老化，不适宜或老化的培养基一般是所含各种成分，特别是生长素和细胞分裂素偏高或偏低，或含量比例不适合草莓脱分化、再分化的要求，以致发生褐化，引起死亡。

解决办法：应用适宜的培养基，培养基配好后3天内食用，培养物3-4周转移1次。

五、试管苗管理
当试管苗高约3cm并生有3-4条1cm左右长的新根时，即可进行移栽，基质可采用经过灭菌处理的腐叶、细砂按体积计以1:3的比例配成混合物。

移栽前期，要将空气湿度保持在80-90%之间，遮光率为50%，环境温度控制在15-20℃之间。

经1-2个月管理，即可定植于排水良好、疏松肥沃的砂质壤土中。

草莓喜潮湿的土壤环境，不耐旱，管理期间要经常喷水。

在定植时不必施用基肥，随着小苗的长大，每隔1-2天可接受过强的日光照射，应该采用先遮荫，在逐渐增加光照的管理方法。

其喜温暖，怕高温，最好将环境度保持在15-25℃之
间，幼苗移栽成活率可达100%。