某理工大学《现代分子生物学》考试试卷(1893)

某理工大学《现代分子生物学》
课程试卷（含答案）
__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试
考试时间：90 分钟年级专业_____________
学号_____________ 姓名_____________
1、分析题（5分，每题5分）
1. 写出从组织中抽取RNA的关键步骤，并解释如何判断RNA质量。

答案：（1）从组织中提取RNA的步骤如下：
①将组织在液氮中磨碎，每50～100mg组织加入1ml TRIzol 裂解液溶解样品，充分吹打混匀。

②每1ml TRIzol加入2.0ml氯仿，剧烈震荡15s，室温放置
5min。

③4℃，10000g离心15min，此时RNA主要集中在水相中。

④将水相转移至新的离心管中，加入等体积异丙醇，室温放置10min。

⑤4℃，10000g离心10min，此时可在离心管底部观察到白色沉淀，即为RNA。

⑥用75冷的乙醇洗涤沉淀，4℃，7500g以下，离心5min，弃上清。

⑦超净台中吹干，加入无RNase的水溶解。

（2）检测RNA质量的方法如下：
①凝胶成像：取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后，跑琼脂糖凝胶电泳，如果28S和18S条带明亮、清晰，并且28S的亮度在18S条
带的两倍以上，则认为RNA的质量是好的。

②吸光度检测：使用紫外分光光度计检测RNA样品在260nm、280nm处的吸光度，若两者的比值在1.8～2.0时，可认为RNA纯
度良好，蛋白质等其他物质的污染可以接受。

解析：
2、判断题（80分，每题5分）
1. 限制性内切核酸酶具有极高的专一性，可以识别蛋白质或多肽链
上的特定位点，将其切断，形成黏性末端或平端。

（）
答案：错误
解析：限制性内切核酸酶具有极高的专一性，可以识别DNA双链的特定位点，将其切断，形成黏性末端或平端。

2. 表观遗传效应是不可遗传的。

（）
答案：错误
解析：表观遗传现象是指基因表达发生改变但不涉及DNA序列的变化，能够在代与代之间传递。

也就是说表观遗传现象是可以遗传的。

3. 基因组DNA复制时，先导链的引物是DNA，后随链的引物是RNA。

（）
答案：错误
解析：基因组DNA复制时，先导链和后随链的引物都是RNA。

4. 1953年WatsonJ.D.&Crick F.H.C.提出了操纵子模型。

（）
答案：错误
解析：
5. 端粒的序列在同一细胞各条染色体上都是相同的。

（）
答案：正确
解析：端粒为每个染色体末端特化的部位，着色较深。

由端粒DNA和端粒蛋白组成。

其作用主要是防止染色体降解、粘连，抑制细胞凋亡，与细胞寿命长短有关。

端粒DNA通常是由富含鸟嘌呤核苷酸（G）的短片段串联重复序列组成，伸展到染色体的3′端。

一个基因组内的所
有端粒，即一个细胞里不同染色体的端粒都由相同的重复序列组成，
但不同物种的染色体端粒的重复序列是各异的。

6. 叶绿体的rRNA核糖体是由16S、5S、23S、5.8S组成的。

（）
答案：错误
解析：叶绿体蛋白合成所有的核糖体的沉降系数为70S，由大小不等
的两个亚基（50S和30S）组成，和原核生物的核糖体十分相似。

叶
绿体核糖体的小亚基含有一个拷贝的16S rRNA，大亚基至少含有2个rRNA亚基，每个亚基一个拷贝：23S和5S。

7. 由于遗传密码子的简并性，一个氨基酸可以有几种tRNA，但通常只有一种氨酰tRNA合成酶。

（）
答案：正确
解析：许多氨基酸的密码子的第1和第2个碱基相同，只有第3个碱基不同，即为密码子的简并性。

由于遗传密码子的简并性，一个氨基酸可以有几种tRNA，但通常只有一种氨酰tRNA合成酶。

8. 原核生物应急反应信号是鸟苷四磷酸和鸟苷五磷酸。

它们的作用范围十分广泛，不是只影响一个或几个操纵子，而是影响一大批操纵子的转录，属于超级调控因子。

（）
答案：正确
解析：
9. 脉冲凝胶电泳采用一个很强的电场来分离非常长的DNA分子，其原理在于迫使DNA分子根据长度的不同而具有不同的速度，并按大小顺序通过凝胶。

（）
答案：错误
解析：在脉冲场凝胶电泳中，相对较小的分子在电场转换后可以较快转变移动方向，然而较大的分子在凝胶中转向较为困难。

电场在两种
方向（有一定夹角，而不是相反的两个方向）变动。

DNA分子带有负电荷，会朝正极移动。

因此小分子向前移动的速度比大分子快。

10. 无义突变是指突变后对性状或蛋白质结构动能不发生明显变化
的无意义突变。

（）
答案：错误
解析：无义突变指原来编码氨基酸的密码子被突变成终止密码子从而
导致多肽合成提前终止的突变，题目所述突变应为沉默突变。

11. 原核生物基因表达的调控主要发生在转录水平上，真核生物基
因表达的调控可以发生在各个水平，但主要也是在转录水平。

（）
答案：正确
解析：基因表达是多级水平上进行的复杂事件，可分为转录水平（基
因激活及转录起始），转录后水平（加工及转运），翻译水平及翻译
后水平，但以转录水平的基因表达调控最重要。

12. 当大肠杆菌培养基中的葡萄糖浓度较低时，在培养基中加入乳糖，可以诱导相应的乳糖操纵子启动表达。

（）
答案：错误
解析：当大肠杆菌培养基中的葡萄糖浓度较低时，在培养基中加入乳糖，不会诱导相应的乳糖操纵子启动表达，只有当葡萄糖消耗完全，
才会诱导相应的乳糖操纵子启动表达。

（）
13. 同工tRNA可以转运相同的氨基酸。

（）[扬州大学2019研]
答案：正确
解析：同工tRNA是指几个代表相同氨基酸、能够被一个特殊的氨酰tRNA合成酶识别的tRNA。

14. SDSPAGE时，不同大小蛋白质分子的电荷质量比值趋近于相同。

（）
答案：正确
解析：
15. 密码子的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码子具有不同的使用频率。

（）
答案：正确
解析：
16. T4 DNA连接酶和E.coli连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。

（）
答案：错误
解析：E.coli连接酶只能催化黏性末端的连接。

3、名词解释（75分，每题5分）
1. 免疫沉淀（immunoprecipitation，IP）
答案：免疫沉淀是抗原和抗体之间专一性地相互作用而沉淀，从而保
留下来，其是一种经典的检测蛋白质相互作用的方法。

其实验过程比
较简单，裂解细胞后，加入抗体，抗原被沉淀下来后洗涤，去除非特
异性结合，再分析复合体。

抗体可以是单克隆，也可以是多克隆。

解析：空
2. 顺式作用元件[扬州大学2019研]
答案：顺式作用元件是指存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列。

顺式作用元件包括启动子、增强子、调控序列和可诱导元件等，
它们的作用是参与基因表达的调控。

顺式作用元件本身不编码任何蛋
白质，仅仅提供一个作用位点，要与反式作用因子相互作用而起作用。

解析：空
3. 复制子
答案：复制子是指单独复制的一个DNA单元，是从一个DNA复制起点开始，最终由这个起点起始的复制叉完成的片段。

复制子中含有复
制需要的控制元件。

在复制的起始位点具有原点，在复制的终止位点
具有终点。

它是一个可移动的单位。

一般来说，原核生物DNA只具
有一个复制子，真核生物DNA具有多个复制子。

解析：空
4. 分子杂交
答案：分子杂交是指形成杂交分子的过程。

不同的DNA片段之间，DNA片段与RNA片段之间，如果彼此间的核苷酸排列顺序互补也可
以复性，形成新的双螺旋结构。

这种按照互补碱基配对而使不完全互
补的两条多核苷酸相互结合的过程称为分子杂交。

分子杂交可以通过
待测单链核酸与已知序列的单链核酸间通过碱基配对形成可检出的双
螺旋片段来确定单链核酸碱基序列的技术。

解析：空
5. Northern blot hybridization[武汉科技大学2019研]
答案：Northern blot hybridization的中文名称是Northern杂交。

Northern杂交是指一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。

主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的同一基因的表达情况。

解析：空
6. p53
答案：p53是指通过杂合缺失鉴定的一个抑癌基因，其失活对肿瘤的
形成起重要作用。

该基因编码一种分子质量为53kDa的蛋白质命名为P53，P53蛋白主要集中于核仁区，能与DNA特异结合，其活性受
磷酸化调控。

如p53基因的两个拷贝都发生突变，将对细胞的增殖失去控制，导致细胞发生癌变。

解析：空
7. 前导肽
答案：前导肽是指信号肽的一种，位于成熟蛋白的N端，引导蛋白穿膜，并且在后来被剪切掉。

色氨酸操纵子RNA的前导序列中含有一个
有效的核糖体结合位点，并能形成由前导RNA 27～68号碱基所编码的14个氨基酸的多肽，这一多肽被称为前导肽。

前导肽的特点：①在其第10和11位上有相邻的两个色氨酸密码子。

这些密码子参与了
trp及其他操纵子中的转录弱化机制。

②前导肽含有较多的碱性氨基酸、羟基氨基酸，并容易形成α螺旋结构的能力，便于穿膜。

③长约20～80个氨基酸，通常带正电荷的碱性氨基酸（Arg，lys）含量较丰富。

④有形成两性α螺旋的倾向。

⑤需要受体从接触点进去，解折叠能量，需前导肽酶，需分子伴侣，不同的前导肽无同源性。

解析：空
8. DNA甲基化
答案：DNA甲基化是指DNA甲基转移酶催化S腺苷甲硫氨酸作为甲基供体，将胞嘧啶转变为5甲基胞嘧啶（mC）的一种反应，是一种表观遗传修饰。

在真核生物的DNA中，5甲基胞嘧啶是唯一存在的化学性修饰碱基，CG二核苷酸是最主要的甲基化位点。

一般说来，DNA
的甲基化会抑制基因的表达，DNA的甲基化对维持染色体的结构、X
染色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起着重要的作用。

解析：空
9. 突变（mutation）
答案：突变是指一种遗传状态，是指可以通过复制而遗传的DNA结
构的任何永久性改变。

包括单个碱基改变所引起的点突变，或多个碱
基的缺失、重复和插入。

原因可以是细胞分裂时遗传基因的复制发生
错误、或受化学物质、辐射或病毒的影响。

突变一般指基因的变化，
广义的突变还包括染色体畸变。

解析：空
10. 斑点杂交
答案：斑点杂交是指把待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜（或
尼龙膜、NC膜）上，用已标记的探针进行杂交，洗膜（除去未接合的探针），放射自显影，判断是否有杂交及其杂交强度，一般用于基因
缺失或拷贝数改变的检测。

斑点杂交方法耗时短，可做半定量分析，
一张膜上可同时检测多个样品。

解析：空
11. 酵母菌人工合成染色体（YAC）
答案：酵母菌人工合成染色体（YAC）指利用酿酒酵母的染色体的复
制元件构建的载体，是迄今为止容量最大的克隆载体，插入片段平均
长度为200～1000kb，最大可达2Mb，含有酵母细胞中必需的端粒、着丝点和复制起始序列，用于构建基因组文库或物理图谱。

解析：空
12. 春化作用
答案：春化作用是指植物必须经历一段时间的持续低温才能由营养生
长阶段转入生殖阶段生长的现象。

春化过程中，感受低温的部位分生
组织中的RNA和蛋白质含量增加，代谢也发生顺序性变化。

春化作用
分为两个阶段：①春化作用的前体物质在低温下转变成不稳定的前体
物质。

②在20℃下，中间产物转变为热稳定的物质，即最终产物。

解析：空
13. SD序列[扬州大学2019研]
答案：SD序列指存在于原核生物起始密码子AUG上游7～12个核苷酸处的一种4～7个核苷酸的保守片段。

它与16SrRNA3′端反向互补，SD序列帮助招募核糖体RNA，并将核糖体比对并结合到信使RNA
的起始密码子，从而开始蛋白质合成。

一旦被招募，tRNA可以按照
密码子的指令顺序添加氨基酸，从翻译起始位点向下游移动进行蛋白
质合成。

解析：空
14. 顺式激活
答案：顺式激活是指同一染色体上的DNA序列直接调控其他邻近基
因表达的调控方式。

如当带有病毒启动子或增强子的基因整合到癌基
因相应位点时，插入的病毒基因对毗邻的细胞癌基因产生激活作用，
启动癌基因的转录，增强癌基因的表达的一种机制。

解析：空
15. 辅阻遏物
答案：辅阻遏物是指在可阻遏系统中，能与阻遏蛋白结合导致该操纵
子结构基因转录被阻遏的小分子物质。

若是辅阻遏物钝化了无辅基诱
导蛋白或是活化了无活性的阻遏蛋白，操纵子即转入被阻遏的状态。

与一个基因的调控序列或操纵基因结合以阻止该基因转录。

解析：空
4、填空题（60分，每题5分）
1. 经典的分子标记技术有、和等。

答案：限制性片段长度多态性|简短串联重复|单核苷酸多态性
解析：分子标记的概念有广义和狭义之分。

广义的分子标记是指可遗传的并可检测的DNA序列或蛋白质。

狭义分子标记是指能反映生物个体或种群间基因组中某种差异的特异性DNA片段。

经典的分子标记技术有限制性片段长度多态性、简短串联重复和单核苷酸多态性等。

2. 原癌基因编码的产物主要有、、、、等几大类。

答案：细胞增殖因子（如sis）|增殖因子等的受体（如erbB，trk）|蛋白磷酸化酶（如src）|G蛋白（如ras家族中的Hras，Kras）|转录因子（如myc家族，fos家族，Jun家族）
解析：
3. 遗传密码的特点包括：、、、、、。

答案：连续性|不重叠性|简并性|摆动性|通用性|终止密码子
解析：遗传密码是一组规则，将DNA或RNA序列以三个核苷酸为一组的密码子转译为蛋白质的氨基酸序列，以用于蛋白质合成。

遗传密
码的特点包括：连续性、不重叠性、简并性、摆动性、通用性、终止密码子
4. 蛋白质生物合成可以分为五个阶段，它们是、、、、。

答案：氨基酸的活化|肽链合成的起始|肽链的延伸|肽链合成的终止|蛋白质前体的加工
解析：
5. DNA通过分子折叠形成的三股螺旋叫，它存在于区，因而具有重要的生物学意义。

答案：HDNA|基因的调控区
解析：
6. 含HTH的DNA结合蛋白多以结构插入DNA双螺旋的以识别DNA的特定序列。

答案：α螺旋|大沟
解析：
7. 由于不同构型的DNA插入的EB的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同，SC DNA的泳动速度，OC DNA泳动速度，L DNA 居中。

通过凝胶电泳和EB染色的方法可把不同构型的DNA分开。

答案：最快|最慢
解析：溴化乙锭（EB）是一种高度灵敏的荧光染色剂，用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。

不同构型的DNA插入的EB的量不同，在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率不同，SC DNA的泳动速度最快，
OC DNA泳动速度最慢，L DNA居中。

因此，通过凝胶电泳和EB染
色的方法可把不同构型的DNA分开。

8. 在DNA复制和修复过程中修补大片段DNA损伤的酶为。

答案：DNA聚合酶Ⅰ
解析：DNA聚合酶Ⅰ具有3′→5′聚合酶活性，可以修补大片段DNA
损伤。

9. DNA高级结构的主要形式是结构，可以分为和两大类。

答案：超螺旋|正超螺旋|负超螺旋
解析：DNA的高级结构是指DNA的二级、三级结构，主要形式是超
螺旋，包括正超螺旋和负超螺旋。

10. 差示杂交（differential hybridization）技术需要两种的群体，例如或者。

答案：不同的|在特定组织中表达的基因|经特殊处理而被诱导表达的基因
解析：差示杂交是用于显示组织细胞间基因表达差异的分子杂交方法，通常需要两种不同的群体，例如在特定组织中表达的基因或者经特殊
处理而被诱导表达的基因。

11. 氨酰tRNA合成酶既能识别tRNA，也能识别相应的。

答案：氨基酸
解析：
12. 氨基酸活化过程中，需要氨酰tRNA合成酶（AARS），在AARS 中存在的三个位点分别是，和。

答案：氨基酸结合位点|ATP结合位点|tRNA结合位点
解析：
5、简答题（50分，每题5分）
1. 简述病毒、原核、真核基因组的特点。

答案：（1）病毒基因组的特点：
①种类单一；
②单倍体基因组：每个基因组在病毒中只出现一次；
③形式多样；
④大小不一；
⑤基因重叠；
⑥噬菌体（细菌病毒）不含内含子序列，而真核细胞病毒的基因是不连续的，含有内含子；
⑦具有不规则的结构基因；
⑧基因编码区无间隔，通过宿主及病毒本身酶切；
⑨无帽状结构；
⑩结构基因没有翻译起始序列。

（2）原核基因组的特点：
①为一条环状双链DNA；
②只有一个复制起点；
③具有操纵子结构；
④绝大部分为单拷贝；
⑤可表达基因约50，大于真核生物小于病毒；
⑥基因一般是连续的，无内含子；
⑦重复序列很少。

（3）真核基因组的特点：
①真核生物基因组远大于原核生物基因组，结构复杂，基因数庞大，具有多个复制起点；
②基因组DNA与蛋白质结合成染色体，储存于细胞核内；
③真核基因为单顺反子，而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子；
④基因组中非编码区多于编码区；
⑤真核基因多为不连续的断裂基因，由外显子和内含子镶嵌而成；
⑥存在大量的重复序列；
⑦功能相关的基因构成各种基因家族；
⑧存在可移动的遗传因素；
⑨体细胞为双倍体，而精子和卵子为单倍体。

解析：空
2. 阐述同源重组的机理。

答案：同源重组是指发生在DNA的同源序列之间的重组，真核
生物的非姐妹染色单体的交换，细菌的转化、转导和接合，噬菌体的
重组等都属于这种类型。

同源重组要求较大的DNA片段进行交换，
它们的序列相同或接近相同。

同源重组的机理是：
（1）两个双链DNA分子配对，同源区发生链的断裂；
（2）断开的单链交叉连接，形成异源双链DNA；
（3）分支点迁移：两个双螺旋形成的交叉连接以拉链式效应扩散，即链交换沿双链滑动，形成异源双链区的杂种DNA长片段；
（4）Holliday中间体的形成；
（5）连接分子的拆分：根据切开方向，Holliday中间体的拆分
可产生两种螺旋，亲体双螺旋和重组双螺旋。

无论哪种拆分方式，链
交换后总会在两条DNA分子上留下一段异源双链区，但侧翼区域的
重组过程不一定会同时发生。

解析：空
3. 为什么RNA分子的稳定性不如DNA分子？
答案：RNA分子的稳定性不如DNA分子是因为：
（1）RNA的磷酸酯键容易被碱水解，而DNA的磷酸酯键不容
易被碱水解。

（2）DNA是双螺旋结构，两条链之间氢键作用比较普遍，如
GC对之间有3条氢键，AT之间有两条氢键。

（3）由于双螺旋结构中相邻碱基处置距离为3.4nm，而嘌呤环
和嘧啶环的范德华半径刚好为1.7nm，因此范德华力加强了疏水作用。

解析：空
4. 何为安慰诱导物（gratuitous inducer），你知道有些什么安慰
诱导物？与应用真正的诱导物相比，应用安慰诱导物进行试验的好处
有哪些？
答案：（1）安慰诱导物定义
安慰诱导物是指一种与天然诱导物结构相似的化合物与转录中实
际诱导物相似，但不是该诱导酶的底物。

（2）我知道的安慰诱导物
①含硫的乳糖类似物异丙基巯基半乳糖苷（IPTG）。

②巯甲基半乳糖苷（TMG）。

③在酶的活性分析中，常用显色底物O硝基半乳糖苷（ONPG）。

（3）应用安慰诱导物进行试验比应用真正的诱导物的好处
①真正的诱导物乳糖会被诱导合成的β半乳糖苷酶所催化降解，
从而使其浓度发生变化。

②而安慰诱导物由于本身不被降解所以浓度不会发生变化，可以
持续的诱导基因表达。

解析：空
5. 简述tRNA、mRNA和rRNA的功能。

答案：（1）tRNA的功能：tRNA在蛋白质合成过程中，将活化的氨基酸搬运到核糖体上，并根据mRNA的遗传密码依次准确地将它携带的氨基酸链接成多肽链，参与蛋白质的生物合成。

（2）mRNA的功能：传达DNA上的遗传信息，作为蛋白质合
成的模板，决定肽链的氨基酸排列顺序。

把DNA上的遗传信息精确
无误地转录下来，负责将它携带的遗传信息在多核糖体上翻译成蛋白质。

（3）rRNA的功能：一般与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖
体。

核糖体是合成蛋白质的场所。

rRNA还可作为mRNA的支架，使mRNA分子在其上展开，实现蛋白质的合成。

解析：空
6. 肽链延伸包括哪些基本过程？
答案：肽链延伸包括的基本过程如下：
（1）后续氨酰tRNA与核糖体结合：氨酰tRNA首先必须与GTP及EFTu复合物相结合，形成AAtRNA·EFTu·GTP复合物并与核糖体的A位点相结合。

此时GTP被水解释放，形成EFTu·GDP复合物，进入新一轮循环。

（2）肽键生成：肽键形成之初，两个氨基酸仍然分别与各自的tRNA相结合，仍然分别位于A位点和P位点上。

A位点上的氨基酸（第二个氨基酸）中的仅一氨基作为亲核基团取代了P位点上的tRNA，并与起始氨基酸中的COOH基团形成肽键。

本反应可能由肽基转移酶催化。

（3）移位：核糖体向mRNA的3′方向移动一个密码子，使得带有第二个氨基酸（现已成为二肽）的tRNA从A位进入P位，并使第一个tRNA从P位进入E位。

此时模板上的第三个密码子正好在A位上。

EFG是核糖体的移位所必需的蛋白质因子，移位的能量来自另一分子GTP的水解。

解析：空
7. 结合最新的科学发现，列举RNA的种类并简要说明其生物学的功能。

答案：（1）转运RNA（tRNA），功能：转运氨基酸；
（2）核糖体RNA（rRNA），功能：参与蛋白质翻译；
（3）信使RNA（mRNA），功能：蛋白质合成模板；
（4）核不均一RNA（hnRNA），功能：成熟mRNA的前体；
（5）核内小RNA（snRNA），功能：参与hnRNA的剪接；
（6）核仁小RNA（snoRNA），功能：参与rRNA的修饰；
（7）反义RNA，功能：对基因的表达起调节作用；
（8）微RNA（microRNA），功能：对基因的表达起调节作用；
（9）干扰RNA（siRNA），功能：对基因的表达起调节作用；
（10）核酶，功能：tRNA、rRNA加工。

解析：空
8. 简述tRNA的结构特征及其作用。

答案：（1）tRNA分子的结构特征
①tRNA分子含有稀有碱基：稀有碱基是指除A、G、C、U外的一些碱基，包括双氢嘧啶（DHU），假尿嘧啶（ψ）和甲基化的嘌呤（mG，mA）等。

②tRNA分子形成茎环结构：组成tRNA的几十个核苷酸中存在
着一些能局部互补配对的区域，可以形成局部的双链。

这些局部双链
呈茎状，中间不能配对的部分则膨出形成环或盘状结构，称为茎环结
构或发夹结构。

③tRNA分子末端有氨基酸接纳茎：所有tRNA的3′端的最后3
个核苷酸序列均为CCA，是氨基酸的结合部位，称为氨基酸接纳茎。

④tRNA序列中有反密码子：每个tRNA分子中都有3个碱基与mRNA上编码相应氨基酸的密码子具有碱基反向互补关系，可以配对结合，这3个碱基被称为反密码子。

⑤X射线衍射分析表明，tRNA的共同三级结构是倒L型的。

（2）tRNA的作用
①tRNA在蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的载体，将氨基酸转呈给mRNA。

②在逆转录作用中作为合成互补链DNA链的引物。

③在细菌细胞壁、叶绿素、脂多糖和氨酰磷脂酰甘油的合成中都与某些tRNA的参与有关。

解析：空
9. 基因工程操作中黏性末端连接是最常用的连接方法，具有许多优点，但是也有一些不足。

请指出这些不足之处，如何克服？
答案：（1）基因工程操作中黏性末端连接的不足之处
①载体易自身环化，或载体间相连成二联体乃至n联体；
②用这种方法产生的重组体往往含有不止一个外源片段或不止一个载体连接起来的串联重组体，增加筛选工作的困难；
③大片段DNA的重组率较低，即使用碱性磷酸酶处理载体防止载体的自身环化，载体也有成环的倾向；
④只用一种限制性内切核酸酶产生的黏性末端连接，不易定向克隆；
⑤可能会出现不定数个载体和插入片段串联得到“超级重组体”
的现象。

（2）克服黏性末端连接不足的方法
①利用碱性磷酸酶处理酶切的载体，使其不能自身环化；
②采用双酶切的方法进行克隆，使载体不能自身连接，同时也降
低了外源片段串联重组的概率。

解析：空
10. 简述染色质免疫沉淀技术（chromatin immunoprecipitation）
的原理和应用。

答案：染色质免疫沉淀技术是指研究体内蛋白质和DNA相互作
用的一种技术。

它运用抗原抗体反应的特异性，可以真实地反映体内
蛋白因子和基因组DNA结合的状况。

（1）染色质免疫沉淀技术的基本原理
在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起，通过超声
或酶处理将染色质切为小片段后，利用抗原抗体的特异性识别反应，
将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来，通过对目的片段的纯化
与检测，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。

染色质免疫沉淀
技术一般包括细胞固定，染色质断裂，染色质免疫沉淀，交联反应的
逆转，DNA的纯化，和DNA的鉴定。

（2）染色质免疫沉淀技术的应用
①检测体内反式因子和DNA的动态作用。

②CHIP和体内足迹法相结合，用于寻找反式因子的体内结合位点。

③研究组蛋白的各种共价修饰和基因表达的关系。