rafls细胞实验记录
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rafls细胞实验记录
选择类风湿关节炎关节成纤维样滑膜细胞的细胞MH7A和正常人关节成纤维样滑膜细胞HFLS用于实验研究.MH7A和HFLS细胞生长至汇合度80%左右时进行细胞传代,三代至六代细胞用于实验研究。
台盼蓝染色实验鉴定细胞活性。
利用Transwell细胞迁移实验和Transwell细胞侵袭实验检测并比较两种细胞的迁移、侵袭能力。
Trizol法分别提取两组细胞的总RNA,并进行RNA定量分析。
按照SYBR RPrimeScriptTM miRNA RT -PCRKit (Takara，RR716）说明书进行Poly(A)加尾反应和反转录成cDNA。
选定用于实验的miRNAs和内参，查找miRNAs数据库，分别找到选定miRNAs的原始序列，并按照引物设计原则进行引物设计，合成扩增miRNAs的引物。
进行实时定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)，并对实验数据进行统计学分析。