细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95组成型表达载体的构建方法[发明专利]

专利名称：细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95组成型表达载体的构建方法
专利类型：发明专利
发明人：贾万忠,闫鸿斌,李立,郭爱民,李建秋,李文静,李文卉,李乐,张林生,张念章,付宝权
申请号：CN202011050126.1
申请日：20200929
公开号：CN112250748A
公开日：
20210122
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种细粒棘球蚴免疫原性蛋白EG95基因组成型表达载体，且提供含有该表达载体的毕赤酵母基因工程菌。

申请人成功在毕赤酵母组成型表达系统中实现了EG95蛋白的分泌性表达，经三角瓶摇床表达的蛋白浓度达到0.5g/L，目的蛋白纯度达到90％以上。

经Westernblotting 试验证实，表达的重组蛋白与现有羊棘球蚴病EG95亚单位疫苗免疫阳性血清具有良好的反应原性和特异性(与其他重组蛋白抗体无反应)。

本发明从构建的p‑GAPZαA‑Eg95重组质粒转化毕赤酵母SMD1168中筛选出可以高效稳定地分泌表达EG95重组蛋白的工程菌，且不需使用诱导剂，显著降低了生产周期、生产成本和生产的复杂性。

申请人：中国农业科学院兰州兽医研究所
地址：730010 甘肃省兰州市城关区盐场堡徐家坪1号
国籍：CN
代理机构：北京中誉威圣知识产权代理有限公司
代理人：王芊雨
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