杏鲍菇菌糠发酵饲料的制作方法与应用[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201711289322.2
(22)申请日 2017.12.07
(71)申请人 西北农林科技大学
地址 712100 陕西省西安市杨凌示范区邰
城路3号
(72)发明人 张恩平　高旭红　李佳腾　陈磊　
窦林敏　
(74)专利代理机构 西安通大专利代理有限责任
公司 61200
代理人 范巍
(51)Int.Cl.
A23K 10/12(2016.01)
A23K 10/30(2016.01)
A23K 10/37(2016.01)
A23K 40/10(2016.01)
A23K 50/10(2016.01)
(54)发明名称杏鲍菇菌糠发酵饲料的制作方法与应用(57)摘要本发明提供一种杏鲍菇菌糠发酵饲料的制作方法与应用：由杏鲍菇菌糠、复合菌剂、麸皮、红糖及食盐制成。

本发明利用含有复合菌剂、麸皮、红糖、食盐及杏鲍菇菌糠的发酵基料，通过厌氧发酵，获得菌糠发酵饲料，与杏鲍菇菌糠相比，所得发酵饲料的营养结构和风味均显著改善，而且杏鲍菇菌糠无需干燥预处理，所得发酵饲料不易发霉变质、耐贮藏，从而降低了杏鲍菇菌糠转化为发酵饲料的成本，转化效率高，有利于实现菌糠的大规模、资源化利用，可应用于肉羊育肥中。

本发明提供的杏鲍菇菌糠发酵饲料生产原料不受季节影响，全年可供应，制作程序简单，容易推广和应用，
经济效益显著。

权利要求书1页 说明书5页CN 107897506 A 2018.04.13
C N 107897506
A
1.一种杏鲍菇菌糠发酵饲料，其特征在于：按重量计由1份杏鲍菇菌糠、0.03～0.06份复合菌剂、0.04～0.1份麸皮、0.001～0.005份红糖及0.005～0.009份食盐制成。

2.根据权利要求1所述一种杏鲍菇菌糠发酵饲料，其特征在于：所述杏鲍菇菌糠选自出菇一次后的菌糠。

3.根据权利要求1所述一种杏鲍菇菌糠发酵饲料，其特征在于：所述复合菌剂包括芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌。

4.根据权利要求1、2或3所述一种杏鲍菇菌糠发酵饲料，其特征在于：所述复合菌剂由菌体数为1×106～109cfu/mL的解淀粉芽孢杆菌菌液、菌体数为1×106～109cfu/mL的特基拉芽孢杆菌菌液、菌体数为1×106～109cfu/mL的马克斯克鲁维酵母菌液、菌体数为1×106～109cfu/mL的发酵毕赤酵母菌液、菌体数为1×106～109cfu/mL的类肠膜魏斯氏菌菌液及菌体数为1×106～109cfu/mL的乳酸片球菌菌液，按照等体积混合而成。

5.一种杏鲍菇菌糠发酵饲料的制备方法，其特征在在于：包括以下步骤：
将杏鲍菇菌糠与杏鲍菇菌糠重量4～10％的麸皮、0.1～0.5％的红糖、0.5～0.9％的食盐及3～6％的复合菌剂混合，得发酵料，控制发酵料的含水量为35％～40％，然后于30～35℃下厌氧发酵7～9天，得杏鲍菇菌糠发酵饲料。

6.根据权利要求5所述一种杏鲍菇菌糠发酵饲料的制备方法，其特征在在于：所述复合菌剂的制备方法为：对组成复合菌剂的芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌分别进行扩大培养，将扩大培养得到的菌体数为1×106～109cfu/mL的菌液等体积混合，得到复合菌剂。

7.根据权利要求6所述一种杏鲍菇菌糠发酵饲料的制备方法，其特征在在于：所述扩大培养具体包括以下步骤：1)将解淀粉芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌、马克斯克鲁维酵母、发酵毕赤酵母、类肠膜魏斯氏菌及乳酸片球菌分别接入培养基中，类肠膜魏斯氏菌及乳酸片球菌于37℃中静置培养24h、解淀粉芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌、马克斯克鲁维酵母及发酵毕赤酵母于160～180r/min摇床、37℃中培养24h后得到一级种子液；2)将一级种子液按照步骤1)再培养一次，得到二级种子液，即菌液。

8.一种肉羊全混合育肥颗粒饲料，其特征在于：按重量计包括40～50份杏鲍菇菌糠发酵饲料、25～31份玉米、10～15份大豆饼、15～20份麸皮、2～4份菜籽油、0.6～1份石粉、0.3～0.7份小苏打、0.3～0.7份磷酸氢钙、0.5～0.7份食盐及1～1.5份预混料；所述杏鲍菇菌糠发酵饲料按重量计由1份杏鲍菇菌糠、0.03～0.06份复合菌剂、0.04～0.1份麸皮、0.001～0.005份红糖及0.005～0.009份食盐制成。

9.如权利要求1所述的杏鲍菇菌糠发酵饲料在制备肉羊育肥饲料中的应用，或者在提高肉羊生长性能中的应用。

10.如权利要求8所述的肉羊全混合育肥颗粒饲料在提高肉羊生长性能中的应用。

权　利　要　求　书1/1页CN 107897506 A
杏鲍菇菌糠发酵饲料的制作方法与应用
技术领域
[0001]本发明属于微生物发酵饲料生产技术与肉羊养殖领域，涉及一种杏鲍菇菌糠发酵饲料的生产及其应用。

背景技术
[0002]菌糠是利用农业秸秆、玉米芯、木屑、棉籽壳等原料进行食用菌代料栽培后的培育基质。

近年来，我国食用菌的产量呈现稳定增长的趋势，并且每生产1kg食用菌约产生大约2.5倍于食用菌产量的菌糠。

据《2015-2016年度全国食用菌工厂化生产情况调研报告》显示，2016年全国食用菌总产量已达2.57×107t，估算菌糠全年产量约6.43×107t。

饲料原料的匮乏和其成本问题一直是制约养殖业发展的重要因素，而且近年来越演越烈，因此尽快开发新型饲料资源迫在眉睫。

如此大的菌糠产量若能被利用，可有效缓解我国饲料资源紧张的问题。

[0003]总结影响杏鲍菇菌糠饲料品质的原因，主要有以下两点：一是难储存，刚被采摘过的菌糠水分含量较高、通常又以堆积的形式存放，容易霉变；二是难被动物利用，由于菌糠原料的特性导致其适口性差、采食量低、消化率低。

现阶段加工菌糠饲料的方法有：物理方式(风干、粉碎、装袋等)、化学调制(用NaOH、石灰乳、尿素等对菌糠进行处理)和生物处理(接种特定菌种进行有氧或厌氧发酵)。

物理方式易受季节天气影响且人工耗费大；化学法不环保，不能有效解决菌糠的储存问题。

微生物发酵饲料不仅能减少抗生素使用，提高饲用安全性，其中的大量有益菌还可抑制有害菌滋生，降解饲料的有毒物质，并且发酵工艺简单，成本低，效益好，可实现产业化，产品的市场前景广阔。

[0004]中国专利“杏鲍菇菌糠及非商品性菇体饲料及其制备方法和应用”(公开号：CN107156444A，公开日：2017.9.15)公开了一种用于提高猪生长性能的菌糠发酵饲料，但是，其需要对含水量较高的杏鲍菇菌糠进行晾干或烘干预处理，导致饲料生产周期长、成本高。

另外，此饲料需要粉碎过80目筛后发酵，不仅加大了生产工作量，而且饲料过细不利于反刍动物反刍、维持瘤胃pH。

目前，尚未见到一种生产周期短、成本低、适宜大规模生产的适用于促进肉羊生长性能的杏鲍菇菌糠发酵饲料。

发明内容
[0005]本发明的目的在于利用杏鲍菇菌糠资源，通过使用复合菌剂进行发酵，提供一种杏鲍菇菌糠发酵饲料的制作方法与应用。

本发明制得的杏鲍菇菌糠发酵饲料适口性好、纤维含量低，对肉羊生长性能有促进作用，且生产周期短，成本低。

[0006]为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：
[0007]一种杏鲍菇菌糠发酵饲料，按重量计由1份杏鲍菇菌糠、0.03～0.06份复合菌剂、0.04～0.1份麸皮、0.001～0.005份红糖及0.005～0.009份食盐制成。

[0008]所述杏鲍菇菌糠在实际生产应用中选自出菇一次后的菌糠。

杏鲍菇生长过程中对基质的营养成分消耗较大，出菇2次以上的菌糠品质大大降低，可利用率小。

[0009]所述复合菌剂包括芽孢杆菌(优选，解淀粉芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌)、酵母菌(优选，马克斯克鲁维酵母、发酵毕赤酵母)和乳酸菌(优选，类肠膜魏斯氏菌、乳酸片球菌)。

[0010]所述复合菌剂由菌体数为1×106～109cfu/mL的解淀粉芽孢杆菌菌液、菌体数为1×106～109cfu/mL的特基拉芽孢杆菌菌液、菌体数为1×106～109cfu/mL的马克斯克鲁维酵母菌液、菌体数为1×106～109cfu/mL的发酵毕赤酵母菌液、菌体数为1×106～109cfu/mL的类肠膜魏斯氏菌菌液及菌体数为1×106～109cfu/mL的乳酸片球菌菌液，按照等体积混合而成。

[0011]上述杏鲍菇菌糠发酵饲料的制备方法，包括以下步骤：
[0012]将杏鲍菇菌糠与其重量4～10％的麸皮、0.1～0.5％的红糖、0.5～0.9％的食盐及3～6％的上述复合菌剂混合，得发酵料，控制发酵料的含水量为35％～40％，然后于30～35℃下厌氧发酵7～9天，得杏鲍菇菌糠发酵饲料。

[0013]所述复合菌剂的制备方法为：对组成复合菌剂的芽孢杆菌(优选，解淀粉芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌)、酵母菌(优选，马克斯克鲁维酵母、发酵毕赤酵母)和乳酸菌(优选，类肠膜魏斯氏菌、乳酸片球菌)分别进行扩大培养，将扩大培养得到的菌体数为1×106～109cfu/mL的各菌液等体积混合，得到复合菌剂。

[0014]所述扩大培养具体为：将冷冻保存的6种菌液以4％(V/V)的比例接入相应培养基中，乳酸菌于37℃中静置培养24h、芽孢杆菌和酵母菌于160～180r/min摇床上、37℃中培养24h后得到一级种子液，用以上方法再扩繁一次得到二级种子液(即菌液)。

[0015]一种肉羊全混合育肥颗粒饲料，按重量计包括40～50份上述杏鲍菇菌糠发酵饲料、25～31份玉米、10～15份大豆饼、15～20份麸皮、2～4份菜籽油、0.6～1份石粉、0.3～0.7份小苏打、0.3～0.7份磷酸氢钙、0.5～0.7份食盐及1～1.5份预混料。

[0016]所述石粉是石灰石矿石粉，含钙量为35～38％。

[0017]所述肉羊全混合育肥颗粒饲料饲喂肉羊的具体方法为：舍饲，每日8:00及17:00各投料1次，自由采食，自动饮水器饮水。

[0018]本发明的有益效果体现在：
[0019]本发明利用含有复合菌剂、麸皮、红糖、食盐及杏鲍菇菌糠的发酵基料，通过厌氧发酵，获得菌糠发酵饲料，与杏鲍菇菌糠相比，所得发酵饲料的营养结构和风味均显著改善，而且杏鲍菇菌糠无需进行干燥预处理，所得发酵饲料不易发霉变质、耐贮藏，从而降低了杏鲍菇菌糠转化为发酵饲料的成本，转化效率高，有利于实现菌糠的大规模、资源化利用。

[0020]本发明利用上述发酵饲料与经过优化的组分形成了一种适宜于反刍动物(例如肉羊)的配合饲料(肉羊全混合育肥颗粒饲料)，可显著提高育肥羊生产性能，从而有效缩短出栏时间，降低饲养成本，可广泛应用于肉羊育肥中。

[0021]本发明提供的杏鲍菇菌糠发酵饲料及肉羊全混合育肥颗粒饲料，生产原料不受季节影响，全年可供应，制作程序简单，容易推广和应用，经济效益显著。

具体实施方式
[0022]下面结合实施例对本发明做进一步说明。

所述实施例仅用于解释本发明。

[0023](一)复合菌剂的制备
[0024] 1.1、培养基
[0025](1)LB液体培养基(g/L)：取10g蛋白胨、5g酵母提取物、5g氯化钠，溶于1L蒸馏水，121℃灭菌30min。

[0026](2)PDA液体培养基(g/L)：马铃薯去皮，取200g切成块，煮沸30min，然后用纱布过滤，再向滤液中加20g葡萄糖，溶化后补足蒸馏水至1000mL，121℃灭菌30min。

[0027](3)MRS液体培养基(g/L)：取牛肉膏10.0g、蛋白胨10.0g、酵母膏5.0g、葡萄糖20.0g、吐温80 1.0g、磷酸氢二钾2.0g、乙酸钠5.0g、柠檬酸三铵2.0g、硫酸镁0.2g、硫酸锰0.05g，溶于1L蒸馏水，121℃灭菌20min。

[0028] 1.2、菌株来源
[0029]制备复合菌剂中使用的菌株分别为：2株芽孢杆菌(解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum strain FZB42、特基拉芽孢杆菌Bacillus tequilensis strain 10b)、2株酵母菌(马克斯克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus strain W103、发酵毕赤酵母Pichia fermentans strain ATCC 10651)、2株乳酸菌(类肠膜魏斯氏菌Weissella paramesenteroides strain NRIC 1542、乳酸片球菌Pediococcus acidilactici strain DSM 20284)。

所使用的菌种可联系西北农林科技大学动物科技学院绒肉羊遗传改良与种质创新科研团队索要，或购买拉丁名相同商品菌株代替。

[0030] 1.3、复合菌剂制备工艺
[0031]各菌株对应的培养基为：芽孢杆菌使用LB液体培养基；酵母菌使用PDA液体培养基；乳酸菌使用MRS液体培养基。

[0032]将冷冻保存的6种菌液以4％(V/V)的比例接入相应培养基中，乳酸菌于37℃中静置培养24h，芽孢杆菌和酵母菌于160～180r/min摇床上、37℃中培养24h后，得到一级种子液。

用以上方法再扩繁一次得到二级种子液。

[0033]作为一个实施例，解淀粉芽孢杆菌、特基拉芽孢杆菌、马克斯克鲁维酵母、发酵毕赤酵母、类肠膜魏斯氏菌、乳酸片球菌的二级种子液(菌体含量均达到≥1×108cfu/mL)按照体积比为1:1:1:1:1:1混合，得复合菌剂。

[0034](二)杏鲍菇菌糠发酵饲料的制备
[0035]杏鲍菇菌糠取自陕西省国人菌业产业科技园，于出菇1次后收割。

[0036]杏鲍菇菌糠发酵饲料具体制作步骤如下：
[0037]1)将出菇后的杏鲍菇菌棒进行打散，得到杏鲍菇菌糠；
[0038]2)在杏鲍菇菌糠中混合其重量5％的麸皮、0.3％的红糖及0.85％的食盐；[0039]3)再加入杏鲍菇菌糠重量4％的复合菌剂，并将含水量调至35％～40％，得发酵料；
[0040]4)将发酵料放入搅拌机中混合均匀后装进发酵袋(发酵罐)中，压实密封；[0041]5)在30℃条件下(即夏季可在常温下发酵)，发酵7天，得杏鲍菇菌糠发酵饲料；[0042]发酵完后随取随用，保存条件：室内避光、常温(不超过30℃)保存，若在1个月内无法用完，则需进行烘干至水分≤10％保存。

[0043](三)肉羊全混合育肥颗粒饲粮的制备
[0044]具体由以下成分组成：杏鲍菇菌糠发酵饲料41份、玉米31份、大豆饼13份、麸皮20份、菜籽油3份、石粉0.6份、小苏打0.5份、磷酸氢钙0.7份、食盐0.5份及预混料1份。

[0045]所述预混料的组成为每千克牲畜饲料提供：150000～250000IU/kg维生素A、50000～95000IU/kg维生素D、维生素E≥125IU/kg、烟酸≥500mg/kg、叶酸≥12mg/kg、磷≥18000mg/kg、2000～3500mg/kg镁、1500～3500mg/kg锰、7～8mg/kg硒、250～700mg/kg铜、50～60mg/kg碘、2000～3700mg/kg锌及15～25mg/kg钴。

预混料生产厂商：上海牧昌生物科技有限公司。

[0046]制粒使用河南光辉机械厂生产的KL-260型颗粒饲料机制作，工艺参数：颗粒直径3cm；配用动力：11～15KW；主轴转数：360r/min；效率：500～700Kg/h。

[0047](四)效果对比实验
[0048] 4.1、检测复合菌剂发酵杏鲍菇菌糠对杏鲍菇菌糠饲料品质的影响
[0049](1)分组：本实验设置杏鲍菇菌糠原料为对照组(C1组)，试验组为未加复合菌剂发酵杏鲍菇菌糠饲料(T1组)、添加复合菌剂发酵杏鲍菇菌糠饲料(T2组)。

未发酵组为T2组发酵前。

[0050]未加复合菌剂杏鲍菇菌糠饲料的基料组成和制作工艺与上述“杏鲍菇菌糠发酵饲料”相同，省略加菌剂的步骤。

[0051](2)测定指标具体为：感官鉴定、干物质、pH、乳酸、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、粗蛋白和黄曲霉毒B1。

[0052]其中，感官鉴定：通过观察杏鲍菇菌糠的色泽、气味、松软程度等评价；pH值：取3g 发酵饲料鲜样，加入30mL去离子水中，浸提40min后用pH酸度计测定；乳酸含量：取发酵饲料鲜样用羟基联苯比色法测定；
[0053]发酵结束后将样品置于鼓风干燥烘箱，65℃烘干至恒重，经24h充分回潮后粉碎，过40目筛，装袋备用。

干物质：使用冠亚水分测定仪测出水分后计算得到；酸性洗涤纤维：按照NY/T1459-2007测定；中性洗涤纤维：按照GB/T20806-2006测定；粗蛋白：按照GB/6432-94测定；黄曲霉毒素B1含量：送至陕西省石羊集团饲料厂检测。

[0054](3)结果如表1所示，试验数据采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，用Duncan 氏法进行多重比较，以P＜0.05为差异显著性标准，结果用平均值±标准差表示。

[0055]表1.复合菌剂对杏鲍菇菌糠饲料品质的影响
[0056]
[0057]发酵后的杏鲍菇菌糠饲料均呈黄褐色，而未发酵的菌糠颜色发白。

发酵后均无霉
变情况发生，质地松散，无粘手现象，有浓郁的酒香味与乳酸香味。

[0058]但表1结果显示，复合菌剂发酵的杏鲍菇菌糠(T2组)的pH、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维显著低于其他各组(P<0.05)；粗蛋白显著高于其他各组(P<0.05)。

杏鲍菇菌糠原料(C1组)的乳酸显著高于其他各组(P<0.05)；未发酵组的黄曲霉毒素含量显著高于其他各组(P<0.05)。

表明：复合菌剂发酵的杏鲍菇菌糠的品质优于杏鲍菇菌糠原料、未发酵组和不加复合菌剂发酵组。

[0059] 4.2、检测肉羊全混合育肥颗粒饲粮饲喂肉羊对肉羊生长性能的影响
[0060](1)分组：试验组(T3组)即上述肉羊全混合育肥颗粒饲粮；采用某市售EM原液发酵的杏鲍菇菌糠饲料组作为对照组(C2组)，其他成分具体组成与T3组相同。

[0061](2)实验动物：选用体重在20.99±3.90Kg、月龄相近的马头山羊(羯羊)24只，按同质原则随机分为2组，每个处理3个重复，每个重复4只羊。

整个试验期为45天，包括5天预试期和40天正试期。

试验开始前给试验羊编号、驱虫和防疫，并清理消毒圈舍。

试验羊实行全舍饲养，饲养管理条件相同，按重复分栏饲喂。

每日早上8:00及下午17:00各投料1次，自由采食，自动饮水器饮水。

[0062](3)测定指标具体为：始重、末重、平均日增重、干物质采食量、料重比。

[0063]始重、末重：正式期开始和结束当天早晨空腹称取各组羊只个体重；干物质采食量：每天准确记录投料量和剩料量，统计采食量；平均日增重：体增重与试验天数之比；料重比：各组饲料总消耗与总的体增重之比。

[0064](4)结果如表2所示，试验数据采用SPSS 20.0软件进行单因素方差分析，用Duncan 氏法进行多重比较，以P＜0.05为差异显著性标准。

[0065]表2.杏鲍菇菌糠发酵饲料对肉羊生长性能的影响
[0066]
[0067]表2结果显示：试验羊初始体重差异不显著(P>0.05)；各组干物质采食量差异不显著(P>0.05)；但T3组试验羊的末重和平均日增重显著高于C2组(P<0.05)，且料重比显著低于C2组(P<0.05)。

说明使用复合菌剂发酵的杏鲍菇菌糠饲料饲喂效果优于EM液发酵菌糠饲料。

[0068]本发明的复合菌剂发酵杏鲍菇菌糠饲料具有以下优点：
[0069](1)营养丰富，适口性好，家畜喜食，有助于增加采食量，从而缩短牲畜出栏时间。

[0070](2)原料价格低廉、全年可供应，制作方式简单、成本低，与其他饲料配合使用可有效提高养殖户经济效益。

[0071](3)不添加抗生素，利用微生物产生的抗菌物质达到降低饲料中毒素含量及延长保质期的作用，符合现在的环保理念、生产的饲料绿色安全可靠，具有可推广性。