最新版中国药典培训问答（第1部分：培养基配置）（1）

最新版中国药典培训问答（第1部分：培养基配置）（1）2010版中国药典培训问答（第1部分：培养基配置）⼴东省药检所对《中国药典》2010版微⽣物专题培训班的有关问题解答答案。

1. 含琼脂培养基冷却⾄25℃后已凝固，如何测定其pH？
答：有专门的固体培养基pH计，如RadiometerA/S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。

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2. PH计测培养基的PH好像有⽐较⼤的差别，应如何选择PH计？（效价7.8的培养基我⽤普通理化室的PH计测定只有7.0左右，不知道是否因为在⾼温下测定（含琼脂）。

答：培养基应冷却到20℃～25℃才可测量，另外PH计应按时校准。

3. ⽣物指⽰剂对灭菌设备的性能，灭菌程序的验证是只验证⼀次呢，⽽后进⾏定期验证，如果⽣物指⽰剂换批号，是否要重新验证？
答：应定期或不定期验证⼀次，确保灭菌设备正常。

⽣物指⽰剂更换批号，不需重新验证。

4. 紫外线灭菌后，需要多久进去操作？
答：打开通风净化设备，半⼩时后可⼊内操作。

5. 孟加拉培养基是否可以取代玫瑰红钠琼脂进⾏培养霉菌和酵母菌？
答：根据中国药典，采⽤玫瑰红钠琼脂。

6. 配制PH值
7.0氯化钠-蛋⽩胨缓冲液时有时因为⾼压灭菌器灭
菌过程温度过⾼⽽导致培养基混浊了，这种情况缓冲液还能⽤吗？
答：建议按正常温度灭菌，混浊培养基建议不要使⽤。

7. 培养基在冷藏中形成结晶怎么处理？①销毁②加热再⽤③待冷却完⽤。

答：建议不要使⽤
8. 融化的培养基为什么不能再冷⽔中冷却？
答：防⽌受热不均引起结块
9. 取菌后测PH：（25℃）培养基配制好测PH，取其中⼀瓶测PH，那这⼀瓶测完就不能⽤了，污染了。

答：也可在⽆菌条件下取出适量测pH.
10. 配制分装过程中能否使⽤不锈钢锅？
答：我实验室使⽤不锈钢锅，⽬前未发现异常。

11. 对新购进⽆菌0.9%氯化钠（500ml）能否再次灭菌？
答：能。

但包装完好，购⼊时间较短的⽆需灭菌。

12.“要定期对压⼒表进⾏检定（消毒锅），检定周期⼀般为半年”，这句话怎样理解，是⼚家应半年⾃⼰检⼀次，还是有计量部门执⾏？
答：由计量部门计量，计量后应发有检定证书。

13. 灭菌后，灭菌锅需⾃然冷却降压才可以打开，这段时间是否会造成过度灭菌。

答：⾃然冷却过程已经计算在正常灭菌时间内了，不会造成过度灭菌。

14. 培养基常规质控有⽆强制检定项⽬？⽬前我们所做项⽬有：ph、⽆菌检查、⽣长检查、是否符合药典规定？
答：培养基应按2010版药典检查。

15. 培养基所⽤器具若使⽤湿热灭菌，是否必须待⼲燥后才可以使⽤？若烘⼲或其它⽅法，中间过程怎样防⽌微⽣物污染？
答：如果是马上使⽤且不是⽤于⾮⽔溶性供试液的制备及实验，不⼀定要烘⼲；否则，应⼲燥后使⽤，灭菌及⼲燥尽量在同⼀锅⾥进⾏，或⽤纱布和⽜⽪纸包扎紧密。

16. 培养基的避光储存，是否配置好的培养基其全部放避光储存？
答：最好都避光保存。

⽆条件时，光敏感的培养基⼀定要。

17. 商品培养基⼲粉说是加蒸馏⽔溶解，实际操作是否可以⽤纯化⽔或注射⽤⽔？
答：只要不含有任何可能抑制或影响微⽣物⽣长的物质的⽔均可。

18. 灭菌后的培养基是否都要测ph值？如何测定ph值？
答：每个制备批次的培养基都应测定ph，可采⽤ph试纸或ph计测量3002
19. 培养基及器具灭菌可否同⼀设备同灭菌时间进⾏灭菌？
答：最好分开灭菌，条件不允许时可同炉灭菌，前提是都是洁净⽆污染的。

20. 培养基的保温能否⽤60℃的培养箱，它与45℃—55℃⽔浴锅
保温⽅法有何不同？
答：不建议，因为温度不同，长时间⾼温影响培养基质量。

21. 培养基的贮存是否需要放置于2—10℃冰箱内？
答：需冷藏保存的培养基外包装上会写明。

22. 培养基灭菌后成份会有所蒸发减少，如何处理这个问题？
答：正常情况下蒸发量较少，可忽略不计。

23. 培养基融化后出现浑浊是有哪些⽅⾯的原因引起的？应如何避免？
答：可能的情况有1培养基配置⽤⽔不符合规定；2灭菌过程温度升温慢或降温慢；3培养基储存不当；4融化时沸腾时间较长等。

24. 准备好的培养基有效期如何验证？
答：定期取出培养基验证其⽆菌性，促⽣长能⼒等⽅⾯。

25. 某些培养基⽆pH变化范围，应该怎么确定该培养基的pH范围呢？
答：向培养基供应商索取。

26. ⽤于环境监控的培养基预培养时间如何确定？
答：与正常实验的培养时间应⼀样。

27. 培养基加热的温度⼀般超过100℃，是否符合要求？有⽆时间限制？
答：是指哪个环节？培养基灭菌温度规定是超过100℃，有具体的时间要求，如果是指固体培养基使⽤前的加热熔化，则完全融化即可，
避免长时间⾼温加热。

28. 培养基瓶的装量,例：瓶装量是500ml/瓶，装量超过500ml/每瓶是否可⾏？
答：培养基的分装量不得超过容器的2/3。

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29. 同⼀批培养基代表同⼀批号⽣产的培养基吗？
答：是。

30. 培养基配制好灭菌后，在⾼压容器中保温降⾄50℃左右，可不可⾏？
答：建议最好不要，避免过度受热。

31. 脱⽔培养基对湿度是否有要求？多少适宜？
答：按要求阴凉⼲燥环境储存即可。

32. 对照培养基何时能购买？
答：已经陆续开始销售。

33. 培养基pH值测定温度在25℃，这个温度应怎么控制？⽐如固体培养基，固体培养基使⽤过程中还能调节pH值吗？
答：可⽔浴控制培养基温度。

34. 配制培养基过程中，按说明书称定量，加规定的纯化⽔，煮沸溶解，为了避免煮沸过程总减少⽔分，是否要在配制过程适当增加⽔?⽐如陪硫⼄醇酸盐流体培养基.
答：可适量增加，⾃⼰掌握。

35. 商品培养基可否按照使⽤者验证的参数灭菌？
答：理论上可以，请⾃⾏掌握。

36. 商品培养基⼀定要当天配当天⽤吗？可否在⼀周内⽤完？
答：不是即配即⽤的培养基的话，储存的当，可以使⽤。

37. 称量培养基时，注意不要吸⼊粉末，这粉末是指何物？
答：就是你所称量的⼲粉培养基。

38. 从中检所购买的培养基还需要做适⽤性检查吗？
答：因为也是⼤批量⽣产的商业化培养基，应该做适⽤性检查。

39. 若商品化的脱⽔培养基说明书上的处⽅与药典上的标⽰的处⽅不符的，不能⽤吗？
答：不能。

40. ⽤于调pH值⽤的酸、碱溶液经灭菌后会对Hcl溶液，NaOH溶液发⽣物理、化学变化吗？如果有变化影响，会影响到所调培养基的质量吗？
答：理论上会，但未经试验证实。

41. 如果购买的预灌装培养基，是否需要做培养基灵敏度？
答：需要。

42. 购买回来的培养基有⼏个批号，那么适⽤性检查是只需做⼀次？还是每个批号都需做?
答：每批都需做。

43. 如果不同次买回来的培养基是同⼀批号，是否后⾯买回来的培养基不需要做适⽤性检查?
答：最好做
44. 如果配制和灭菌过程没有验证，是否每⼀次配制培养基均应进⾏适⽤性检查？
答：是。

45. ⽣物指⽰剂菌⽚浓度液如何进⾏复核？才可确认所购买⽣物指⽰剂菌⽚浓度符合要求.
答：我所未使⽤该产品，⽆此⽅⾯经验。

46. 紫外灯的使⽤期限，怎么规定，通常多长时间更换紫外灯？
答：每种型号的使⽤寿命不相同，有1000⼩时、1500⼩时、2000⼩时等，买来时应仔细阅读说明书。

47. 培养基灭菌，若规定为121℃15分钟，实际操作为（121+2）℃，（15+3）分钟，这样可取吗？是否只能按照培养基配制121℃15分钟说明来配制？
答：建议按照规定时间进⾏灭菌。

48. 培养基的灭菌程序如何验证？
答：可采⽤⽣物指⽰剂进⾏验证。

49. 煮培养基，⽤不锈钢锅在电磁炉上煮可⾏？硫⼄醇培养基是否要煮沸？如何煮沸？⽤不锈钢锅在电磁炉上煮沸可⾏吗？可不可以⽔浴煮沸呢？
答：硫⼄醇应煮沸，量⼤时，我实验室⽤不锈钢锅在电磁炉上煮沸。

50. 从中检所购买的培养基还需要做适⽤性检查吗？
答：因为也是⼤批量⽣产的商业化培养基，必须做。

51. 在灭菌条的效⼒验证时选取微⽣物指⽰剂，由于我公司产品品种多，同⼀种微⽣物指⽰剂⼜存在着在不同介质中耐热性（D值）不同，那应如何测定某微⽣物指⽰剂在某⼀介质耐热性（D值）呢？应如何选取最适宜的微⽣物指⽰剂呢？
答：选择⽣物指⽰剂，应以所选⽤的灭菌⽅法向对应。

52. 各种成品培养基要求的灭菌温度与时间不⼀样，做灭菌锅的验证应该如何确定温度和时间？
答：我们未遇此种情况，但认为应按照最低温度和最短时间进⾏验证。

53. 琼脂平板最好现配现⽤，但现有规定要求培养基需要经适⽤性检查后才可使⽤，时间上的冲突如何解决？
答：⼀个批次的培养基做⼀次适⽤性检查即可，以后再使⽤时可现配现⽤。

54. 培养基（微⽣物限度⽤）是否需作⽆菌性检查？若培养基还需作阳性⽣长试验，那么⽆菌检查与阳性检查是否应分区域进⾏？
答：按药典规定进⾏验证。

阳性应在专门区域内进⾏。

55. 是不是有⼀种1ml的沙⼟培养管（⽤来传代接种），在哪⾥可以买到？
答：我们未⽤过，不清楚如何购买。

56. 固体培养基能存多久？（已灭菌的）融化的培养基在⽔浴中不超8⼩时，⽽它呢？
答：视培养基种类⽽定，不可⼀概⽽论。

57. 可否使⽤紫外线强度指⽰卡来检测紫外灯是否需要更换？
答：我们未⽤过紫外线强度指⽰卡，我们了解有⼀种紫外线强度检测仪⼤概可以满⾜你们的要求。

58. 如培养基在⾼压灭菌器中温度需⾃然下降20度才开盖吗？
答：⾼温灭菌器有安全阀，温度下降到安全阀可打开时将培养基取出室温冷却，各型号灭菌器安全开盖温度不尽相同。

59. 稀释液灭菌后ph值是否有变化？有何影响？（如ph7.0氯化钠-蛋⽩胨缓冲液，ph6.8⽆菌磷酸盐缓冲液）。

答：⼀般pH有下降现象，约0.2左右，不同培养基pH变化可能不同。

60. 对照培养基在省所可以买到吗？
答：中检所已经陆续开售，请与我所业务科直接联系（020-********）。

61. 按要求每批培养基要做系统适⽤性验证，下⾯分所或⼚家如直接从省所购买，省所买回来的时候肯定每批已已验证了，那下⾯分所还要做验证的话，那不就⼤⼤的浪费⼈⼒、财⼒、物⼒。

可否省所购进的不验证或提供验证报告？
答：各实验室配制培养基的程序不同，必须⾃⼰做验证。

62. 有些培养基要⽤到梭菌等，下⾯所可能⼀两年也没检测阴道
内⽤药，也很少⽤到这个菌，按验证要求，就得把各种菌买回去，还得花很多时间去维护、保管、传代等，下⾯有些药⼚这⽅⾯的⼈才就更加稀缺，这就逼得很多⼚家为了应付检查做更多的假记录或买N⽀菌回来这只是为了应付检查。

答：这种情况我们能理解，但是还请按照药典规定处理吧。

63. 配好的MUG有没有要求多长时间内要使⽤完？可以⼀次过配很多，⽤上⼏个星期？
答：请按药典中对培养基的⼀般要求操作。

64. 配好的靛基质有没有要求多长时间内要使⽤完？可以⼀次过配很多，⽤上⼏个星期？
答：请放冰箱保存，我们的经验可使⽤⼀到两个⽉。

65. 对照培养基中检所还是没有卖，在10⽉1⽇未买到对照培养基之前，可否沿⽤05版药典来确认培养基适⽤性？
答：在未买到之前，请尽量购买有资质的品牌培养基。

尽快按10版执⾏。

66. ⼤肠埃希菌检查时，MUG培养基必须在5⼩时和24⼩时，两个时间段做观察？还是选其中⼀个适应的时间点作观察好？答：如5⼩时可以明显观察到结果，就可做进⼀步检查。

67. 我公司是⽣产⼤容量注射液的，由于国家对灭菌效⼒F0值的要求不断提⾼，结合我公司现⾏灭菌条件所达到的F0值不⾼，故必须进⾏灭菌⼯艺变更，在灭菌⼯艺变更中，需做灭菌效⼒验证，需选取适宜的微⽣物指⽰剂。

但由于我公司品种较多，同⼀微⽣物指⽰剂在不同品种药液中会有不同的耐热性（D值），这影响到我公司对微⽣物指⽰剂的选取，请问国内对耐热性较⾼的微⽣物指⽰剂的耐热性测定是怎样的办法？
答：我们未做过此类研究，请咨询相关产品公司。