聚乙二醇dna提取

聚乙二醇dna提取
步骤：
1.准备材料。

需要使用的材料有：细胞样品（包括培养的细胞、植物组织等）、聚乙
二醇2000（PEG2000）、75％的酒精、丙酮、0.5M EDTA、碳酸钠-氢氧化钙0.25N溶液、磷酸盐缓冲液。

2.细胞破碎。

将细胞样品用磷酸盐缓冲液悬浮，经过快速离心，将沉淀用碳酸钠-氢
氧化钙溶液洗净。

之后，将洗净的细胞以重量1：1（细胞体积/PEG2000）的比例加入3M
的磷酸盐缓冲液中，用均质器均匀破碎，直到核将细胞质膜全部破裂为止。

3.沉淀DNA。

将破碎过的样品加入65℃的75％酒精中，等待30分钟，此时DNA会缠绕在棒状物上，共同沉淀。

取下上层液体，并用75％酒精缓慢洗涤，使棒状物分离出来。

4.分离DNA。

用丙酮将棒状物洗涤，使其分离成单个DNA孪生体。

将孪生体沉淀下来，并用0.5M EDTA溶液缓慢溶解。

5.纯化DNA。

将上述合并液浸入65℃的75％酒精中30分钟提纯，沉淀在低速离心下，用0.5M EDTA溶液重悬。

优缺点：
聚乙二醇DNA提取方法具有以下优点：
1.速度快，简单易行。

聚乙二醇DNA提取从破碎到最终提取DNA只需3-4小时，操作
简单快捷。

2.效率高，回收率高。

聚乙二醇能将DNA迅速回收到沉淀中，提取到近乎完整的基因
组DNA，回收率高达90％以上。

3.纯度高。

在残留酒精中进行DNA的沉淀和分离，可以充分去除杂质和其他相干的物质。

因此，提取DNA的纯度也较高。

4.成本低。

与传统的DNA提取方法相比，聚乙二醇DNA提取不需要使用昂贵的化学试
剂或专业设备，成本较低。

1.只适用于大量的细胞样品。

由于聚乙二醇DNA提取方法需要大量的细胞质量，因此
这种方法不适用于少量的细胞样品提取DNA的情况。

2.许多原始基因组的降解。

由于聚乙二醇具有强烈的喜水性，会导致DNA在水中完全
破裂，而且这种破裂可能会影响原始基因组的完整性。

综上所述，聚乙二醇DNA提取方法是一种快速、高效、纯度高、成本低且易于操作的DNA提取方法。

在合适的样品情况下，可以优先考虑使用。