不同厂家羟苯磺酸钙胶囊溶出曲线相似性研究

第48卷第24期2020年12月广㊀州㊀化㊀工
Guangzhou Chemical Industry
Vol.48No.24Dec.2020
不同厂家羟苯磺酸钙胶囊溶出曲线相似性研究
苏㊀峰1,2,3,汪㊀萍1,2,鲁胜男1,刘为中1,2,何广卫1,2
(1合肥医工医药股份有限公司,安徽㊀合肥㊀230088;2药物一致性评价及高端制剂安徽省重点实验室,
安徽㊀合肥㊀230088;3中国药科大学,江苏㊀南京㊀211198)摘㊀要:采用篮法(转速为100rpm)㊁紫外分光光度法(检测波长300nm)测定3种国产羟苯磺酸钙胶囊与进口参比制剂
在4种溶出介质中不同取样时间点的溶出样品吸光度,计算累积溶出百分率,并绘制溶出曲线㊂同时采用f 2相似因子法和溶出效率(DE)比较各溶出曲线的相似性㊂结果表明,在4种溶出介质中,不同厂家羟苯磺酸钙胶囊与进口参比制剂溶出曲线不一致㊂
关键词:羟苯磺酸钙胶囊;溶出曲线;f 2相似因子;溶出效率㊀
中图分类号:R917㊀㊀㊀㊀
㊀文献标志码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:1001-9677(2020)24-0060-04
㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀
第一作者:苏峰(1984-),男,主要从事创新药物制剂研究与开发㊂
通讯作者:何广卫(1966-),男,主任药师,硕士生导师,主要从事新药及药物新剂型的研发㊂
Study on Similarity of Dissolution Curve of Calcium Dobesilate Capsules
from Different Pharmaceutical Manufacturers
SU Feng 1,2,3,WANG Ping 1,2,LU Sheng -nan 1,LIU Wei -zhong 1,2,HE Guang -wei 1,2
(1Hefei Industrial Pharmaceutical Institute Co.,Ltd.,Anhui Hefei 230088;2Anhui Province Key Laboratory of Consistency Evaluation for Generic Drugs and R&D of Advanced Pharmaceuticals,Anhui Hefei
230088;3China Pharmaceutical University,Jiangsu Nanjing 211198,China)Abstract :The basket method (rotation speed was 100rpm)and UV (detection wavelength was 300nm)were used to measure the absorbance of three domestic Calcium Dobesilate Capsules and reference listed drug in four dissolution media at different time points,and the accumulation dissolution percentage was calculated,and a dissolution curve was drew.At the same time,the similarity factor method and dissolution efficiency (DE)were used to compare the similarity of each dissolution curve.The results showed that the dissolution curves of Calcium Dobesilate Capsules of different manufacturers and reference listed drug were inconsistent among the four dissolution media.
Key words :Calcium Dobesilate Capsules;dissolution curve;f 2similarity factor;dissolution efficiency
羟苯磺酸钙是一种新型的血管保护药,自问世以来,已在临床上获得了广泛的应用,于1997年载入‘欧洲药典“,1998年载入‘英国药典“,国内于2001年投入市场㊂羟苯磺酸钙临床最早用于糖尿病视网膜病变的治疗,现已可用于糖尿病肾病㊁各种病因所致的慢性肾功能不全㊁冠心病等疾病的治疗[1-2]㊂目前,进口和国内生产的羟苯磺酸钙制剂分别为胶囊剂和片剂,根据CDE 公布的仿制药参比制剂目录公布,其胶囊剂和片剂的参比制剂均已明确(胶囊剂参比制剂序号为8-110,片剂参比制剂序号为23-76),羟苯磺酸钙胶囊参比制剂是由奥地利依比威大药厂(Ebewe Pharma )进口,进口注册证号为H20140641,商品名为导升明(DOXIUM ),为‘中国药典“2015版二部收载品种[3-4]㊂国内文献已有羟苯磺酸钙制剂的耐受性㊁药动学研究报道,但尚未有市售羟苯磺酸钙胶囊溶出曲线相似性研究的报道㊂
本研究的主要目的是对参比制剂和国内不同厂家羟苯磺酸钙胶囊在多种不同pH 溶出介质中的体外溶出特性进行评价,采用f 2相似因子法和溶出效率(DE)对试验药品与参比制剂的体外溶出度进行比较,为仿制药一致性评价体外溶出分析提供基
础数据㊂
1㊀仪器与试药
1.1㊀仪器与材料
AL104电子天平,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;XS105电子天平,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;FE -20型pH 计,梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司;FAVD -25真空脱气机,上海富科思分析仪器有限公司;708-DS 自动取样溶出仪,安捷伦科技有限公司;UV -2700紫外可见分光光度计,岛津仪器(苏州)有限公司;0.45μm 微孔滤膜,上海半岛实业有限公司净化器材厂㊂
1.2㊀药品与试剂
羟苯磺酸钙对照品,中国药品生物制品检定所;羟苯磺酸钙胶囊参比制剂(500mg),依比威大药厂;国产羟苯磺酸钙制剂(250mg,A 制剂);国产羟苯磺酸钙制剂(250mg,B 制剂);国产羟苯磺酸钙制剂(500mg,C 制剂);乙酸(分析纯),
第48卷第24期苏峰,等:不同厂家羟苯磺酸钙胶囊溶出曲线相似性研究61
㊀
西陇科学股份有限公司;三水合乙酸钠(分析纯),西陇科学股份有限公司;盐酸(分析纯),国药集团化学试剂有限公司;磷酸二氢钾(分析纯),上海润捷化学试剂有限公司;氢氧化钠(分析纯),西陇科学股份有限公司;纯化水,合肥医工医药股份有限公司㊂
2㊀方法与结果
2.1㊀溶出介质的配制
①水:直接取纯化水㊂②0.1mol/L盐酸:按‘普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则“[5]方法配制,取浓盐酸9mL,加水稀释至1000mL,摇匀,即得㊂③pH3.8醋酸盐缓冲液:按‘普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则“方法配制,称取0.67g三水合乙酸钠及22.6mL2mol/L醋酸溶液(取120.0g(114mL)冰醋酸用水稀释至1000mL,即得),加水溶解并稀释至1000mL,摇匀,即得㊂④pH5.5磷酸盐缓冲液:按‘普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则“方法配制,取250mL0.2mol/L磷酸二氢钾溶液(取27.22g磷酸二氢钾,用水溶解并稀释至1000mL)与9.0mL0.2mol/L氢氧化钠溶液(取8.00g氢氧化钠,用水溶解并稀释至1000mL)混合后,加水稀释至1000mL,摇匀,即得㊂
2.2㊀测定方法
取不同厂家羟苯磺酸钙制剂,照溶出度测定法[6],取羟苯磺酸钙胶囊12粒,分别以 2.1 项下的溶出介质各900mL,采用‘中国药典“2015年版四部0931溶出度与释放度测定法第一法(篮法),设定转速为100rpm,分别于15,30,60,90, 120,180min取样10mL,并同时补充相同温度㊁相同体积的溶出介质,滤过,滤液用相应溶出介质稀释成每1mL中约含31μg的溶液,另取羟苯磺酸钙对照品适量,加相应介质溶解并稀释成每1mL中约含31μg的溶液,取上述两种溶液按照紫外-可见分光光度法(‘中国药典“2015年版四部0401紫外-可见分光光度法),在301nm波长处分别测定各时间点吸光度,计算累积溶出度㊂另取羟苯磺酸钙胶囊参比制剂,平行操作,测定其在不同溶出介质中各对应时间点的累积溶出度,绘制溶出曲线㊂
2.3㊀标准曲线的绘制
取羟苯磺酸钙对照品31mg,精密称定,置100mL量瓶中,加0.1mol/L盐酸溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,分别移取5mL㊁3mL㊁2mL㊁5mL㊁3mL至100mL㊁50mL㊁25mL㊁50mL㊁25mL,配成浓度分别为15.5μg/mL㊁18.6μg/mL㊁24.8μg/mL㊁31μg/mL㊁37.2μg/mL的溶液,测定其在301nm
处的吸光度,以样品的浓度(C,mg/mL)为横坐标,吸光度值(A)为纵坐标,作二次回归得到回归方程及相关系数,回归方程为A=1.765ˑ10-2C,r=0.9997,表明线性关系良好,线性范围为15.5~37.2μg/mL㊂
2.4㊀准确度试验
按照羟苯磺酸钙标示量的80%㊁100%㊁120%,分别精密称取羟苯磺酸钙约260mg㊁417mg㊁521mg及处方配比量的相应辅料,各平行3份,混匀,分别置200mL量瓶中,用0.1mol/L盐酸溶液超声溶解,并稀释至刻度,摇匀,0.45μm 微孔滤膜滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液3mL至200mL 量瓶中,介质稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另精密称取羟苯磺酸钙对照品适量,置容量瓶中,用0.1mol/L盐酸溶液超声溶解后,稀释至刻度,摇匀,精密量取溶液适量,并用介质稀释制成每1mL中约含31μg的溶液,作为对照溶液;按上述方法测定吸光度,计算平均回收率及RSD值,结果见表1㊂在高㊁中㊁低三个不同浓度下,本品羟苯磺酸钙的回收率均在98%~102%之间,且各次测得结果间相对标准偏差均小于2%,表明本方法回收率良好㊂
表1㊀回收率试验测定结果(n=9)
Table1㊀Measurement results of recovery rate test(n=9)
浓度加入量/mg测得量/mg回收率/%平均回收率/%RSD/%平均回收率/%RSD/%
低浓度(80%)中浓度(100%)高浓度(120%)260.8258.699.2
260.2257.198.8
260.3257.999.1
418.0415.299.3
418.0416.799.7
416.7418.2100.4
521.0514.298.7
521.4518.899.5
522.5518.199.2
99.00.22
99.80.56
99.10.41
99.30.44
2.5㊀重复性试验
精密称取羟苯磺酸钙胶囊内容物研粉末适量,0.1mol/L 盐酸溶液超声溶解,滤过,配制成含羟苯磺酸钙约低㊁中㊁高三种浓度的溶液,精密量取1mL(各6份),分别置25mL量瓶中,0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,在最大吸收波长处分别测定吸光度,考察重复性,结果见表2㊂在高㊁中㊁低三个不同浓度下,6份样品测定结果相对标准偏差均不大于2%,表明本方法重复性良好㊂
表2㊀重复性试验结果
Table2㊀Repeatability test results
C/(μg/mL)123456XʃSD RSD/%低浓度0.3290.3360.3420.3410.3350.3330.336ʃ0.0049 1.46中浓度0.4300.4380.4350.4360.4360.4320.435ʃ0.00300.68高浓度0.5090.5150.5320.5100.5200.5210.518ʃ0.0085 1.65
62㊀广㊀州㊀化㊀工2020年12月
2.6㊀稳定性试验
取重复性试验高㊁中㊁低三个不同浓度项下各一份样品溶液,于室温放置0㊁2㊁4㊁8㊁12㊁24h,在最大吸收波长处分别测定吸
光度值,计算羟苯磺酸钙的A 的相对标准偏差,考察其稳定性,结果见表3㊂室温放置24h,各浓度项下主成分含量的相对标准偏差均不大于2%,可认为室温放置24h 内样品溶液稳定㊂
表3㊀稳定性试验结果Table 3㊀Stability test results
C /(μg /mL)0h
2h
4h
8h
12h
24h
XʃSD RSD /%低浓度0.3290.3320.3320.3330.3330.3340.332ʃ0.00170.52中浓度0.4300.4290.4310.4330.4340.4350.432ʃ0.00240.55高浓度
0.509
0.507
0.507
0.5080.5090.516
0.509ʃ0.0034
0.67
2.7㊀溶出曲线测定与比较
2.7.1㊀溶出曲线测定结果
图1㊀不同厂家制剂于0.1mol /L 盐酸溶液中溶出曲线(n =12)
Fig.1㊀Dissolution curves of preparations from different manufacturers in 0.1mol /L hydrochloric acid solution (n =
12)
图2㊀不同厂家制剂于pH 3.8醋酸盐缓冲液中溶出曲线(n =12)
Fig.2㊀Dissolution curves of preparations from different manufacturers in pH 3.8acetate buffer (n =
12)
图3㊀不同厂家制剂于pH 5.5磷酸盐缓冲液中溶出曲线(n =12)
Fig.3㊀Dissolution curves of preparations from different manufacturers in pH 5.5phosphate buffer (n =
12)
图4㊀不同厂家制剂于水中溶出曲线(n =12)Fig.4㊀Dissolution curves of preparations from different
manufacturers in water (n =12)分别在4种介质中,按 2.2 项下方法测定,得不同厂家羟苯磺酸钙制剂与参比制剂在4种介质中累积溶出度曲线㊂研究结果见图1~图4㊂
2.7.2㊀制剂曲线相似性比较本研究采用f 2相似因子法和溶出效率(DE)法对试验药品与
参比制剂的溶出行为进行比较㊂比较结果见表4㊂相似因子f 2的数学表达式为:
f 2=20lo
g 1+
1
n
ðn t =1
(R t
-T t
)
2
éëêùû
ú-0.5
ˑ100
{
}
式中,R t 为t 时间对照药品平均累积溶出百分数;T t 为t 时间试验药品平均累积溶出百分数;n 为取样点的个数㊂如果
50ɤf 2ɤ100,可认为2种制剂的溶出曲线相似㊂
溶出效率(DE)定义为时间点t 1和t 2间溶出曲线下的面积
在相同时间100%溶出度的长方形面积中所占的百分比[6]㊂公式表达如下:时间点t 1和t 2间溶出曲线下的面积在相同时间
100%溶出度的长方形面积中所占的百分比㊂公式表达如下:
DE =
ʏt 2t 1y ㊃d t
y 100(t 2-t 1)ˑ100%
式中y 为溶出的百分率㊂曲线下面积计算方法有梯形法和Simpson 法[7]㊂
从表4可知,A㊁B㊁C 制剂相似因子f 2值远小于50,进口
Doxium 胶囊在4种溶出介质中溶出效率DE 均低于A㊁B㊁C 三种不同国产制剂㊂
从图1~图4看出,A㊁B 和C 制剂较参比制剂Doxium 于
4种溶出介质中的溶出快速,对照药品于0.1mol /L 盐酸溶液和pH 3.8醋酸盐溶液中60min 累积溶出量达85%,pH 5.5磷酸盐溶液和水中180min 累积溶出量达85%㊂A 制剂和B 制剂在4种溶出介质中15min 累积溶出量均达85%,C 制剂在
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㊀0.1mol /L 盐酸和pH 3.8醋酸盐缓冲液中15min 累积溶出量均达85%,在pH 5.5磷酸盐缓冲液中60min 累积溶出量达85%,在水中30min 累积溶出量达85%㊂由此可见,A㊁B 和C 制剂与参比制剂Doxium 在4种不同溶出介质中溶出曲线有明显差异㊂
表4㊀不同厂家制剂在4种溶出介质中溶出效率(DE )和相似因子(f 2)的变化
Table 4㊀Changes of dissolution efficiency (DE )and
similarity factor (f 2)of preparations from different manufacturers
in four dissolution media
溶出介质和参数Doxium
A 制剂
B 制剂
C 制剂0.1mol /L 盐酸f 2
/
2320
24
DE 51.6987.1786.6486.25pH 3.8醋酸盐缓冲液f 2/152021DE 65.8486.5386.8185.77pH 5.5醋酸盐缓冲液
f 2/181927DE 44.5784.6285.7369.32水
f 2/16
1520DE 50.5586.26
85.4175.343㊀结㊀论
溶出度试验技术是评价口服固体制剂内在质量的一种重要手段,溶出度测定作为一种简便可行的方法,在一定条件下与制剂的生物利用度有一定的相关性,溶出度已作为一种控制药品内在质量的重要指标,广泛应用于药品的研发㊁生产和监督检验中,而f 2相似因子法是美国FDA 推荐的采用溶出曲线评价产品内在质量的首选方法,可用来推测仿制制剂与原研制剂是否生物等效[8-9]㊂故在本次研究中采用模拟人体胃肠道的不同pH 环境下的溶出介质,以f 2相似因子法考察不同市售羟苯
磺酸钙产品体外溶出曲线的相似性㊂
研究结果表明,4个不同厂家的羟苯磺酸钙胶囊在不同pH 溶出介质中溶出行为均有显著差异,这种溶出性能的差异除了和药物粒度㊁晶型有关外,与不同厂家间辅料种类㊁处方配比㊁生产设备和工艺等差异密切相关[10]㊂各生产企业需深入研
究原辅料及工艺,提高产品质量的均一性和稳定性,生产出不仅与原研制剂溶出曲线有区分力且质量相当的产品,以期为患者提供更好的药物选择㊂
参考文献
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比制剂选择和确定等3个技术指导原则的通告(2016年第61号)[EB /OL].(2016-03-18)
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