补体介导的细胞毒试验(教学)
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+ complement
振荡混匀，滴片加盖玻片，镜检
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结果观察
台盼蓝染色：如 果细胞膜不完整、破 裂，台盼蓝染料进入 细胞，细胞变蓝。 如 果细胞膜完整，细胞 不为台盼蓝染色，则 为正常细胞或凋亡细 胞。此方法对反映细 胞膜的完整性，区别 坏死细胞有意义。
实验主要材料
实验材料
1. 小鼠 2. 抗血清（Ab） 3. 补体 新鲜豚鼠 血（补) 4. RPMI 1640培 养液，载玻片、 盖玻片、一次 性试管 5. 台盼蓝染色液
需要收回的
剪刀、镊子、 玻璃培养皿。
LOGO实验目的1细胞毒实验的原理
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补体依赖细胞毒实 验的原理及基本操 作步骤
logo补体依赖的细胞毒实验complementdependentcytotoxicity实验目的1细胞毒实验的原理2补体依赖细胞毒实验的原理及基本操补体依赖细胞毒实验的原理及基本操作步骤3补体依赖细胞毒实验的应用补体依赖细胞毒实验的应用www
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补体依赖的细胞毒实验
Complement-dependent cytotoxicity
A. 对照组
A B. 实验组
B
注意事项： 台盼蓝染色后放置时间不能太长，否则出现假阳性。
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胸腺
注意事项： 小鼠断颈要迅速、彻底，以防小鼠挣扎过程中出血过多，也可事 先摘眼球放血。
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操作步骤
二、细胞毒实验：
按下表加样
振荡混匀，置37C水浴箱，10min
Ag+Ab
振荡混匀，置37C水浴箱，20min 0.4%台盼蓝 各管加1滴，混匀，室温2min
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补体依赖细胞毒实 验的应用
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实验原理
抗原与抗体结合
+ 补体
台盼蓝染液
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操作步骤
一、小鼠胸腺细胞悬 液的制备
4~6周龄小鼠断颈 处死，取出胸腺放至含 有3 mL RPMI 1640培养 液的平皿中，以剪刀和 镊子将组织处理成单细 胞悬液，利用移液器取 出后放入试管内备用。