需氧革兰阳性杆菌
第二十三章需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验
微生物第二十三章需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验考点棒状杆菌属(白喉棒状杆菌)、炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、产单核李斯特菌生物学性状、临床意义、微生物学检查。
棒状杆菌属芽胞杆菌属李斯特菌属丹毒丝菌属加特纳菌属形态棒状杆菌有芽胞短杆、链或丝状细杆或线状杆菌、多形性触酶+++--动力-++--对氧需、兼需、兼兼性兼性兼性G+C mol% 51~65 32~60 36~38 35~40 42~44(一)白喉棒状杆菌G+,杆菌,菌体粗细、长短不一,一端或两端膨大呈棒状。
着色不匀,有异染颗粒(异染颗粒的主要成分是RNA核糖核酸和多偏磷酸盐,具有鉴定意义)。
无鞭毛、无荚膜、无芽胞。
需氧,营养要求较高。
引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌,其他大多数为条件致病菌。
1.培养特性:在普通培养基上生长不良,形态不典型。
血液琼脂平板:灰白色S型菌落,有狭窄的β溶血环。
☆吕氏(Loeffler)血清斜面培养基:生长迅速,形成灰白色、湿润、S型菌落。
涂片染色形态典型,异染颗粒明显。
(让其迅速生长并形成典型涂片染色形态的培养方法)亚碲酸钾血琼脂:本菌能吸收亚碲酸盐,并使其还原为元素碲,使菌落呈黑色。
(选择鉴别培养基)<霍乱弧菌使菌落呈褐色>2.致病性本菌一般不侵入血流,但其产生的大量外毒素可吸收入血,致病物质:白喉毒素(主要的致病因素、索状因子、K抗原),引起毒血症。
白喉棒状杆菌和毒素可使局部黏膜上皮发生炎性渗出并将炎性细胞和坏死组织和菌体凝结在一起,形成灰白色假膜,假膜脱落与气管内,可阻塞呼吸道成为白喉早期致死的主要原因。
而严重的毒血症引起的细胞变性、坏死、内脏出血和神经麻痹等严重损害,是白喉晚期死亡的主要原因。
3.免疫性:☆锡克试验或致敏红细胞凝集试验。
调查人群对白喉是否产生免疫力。
4.标本采集:无菌长棉拭子,从可疑的伪膜边缘采集分泌物,未见伪膜的疑似。
5.生化反应:主要用于鉴别白喉棒状杆菌与类白喉棒状杆菌。
尿素分解试验:白喉棒状杆菌(-),类白喉棒状杆菌(+)。
其他需氧革兰阳性杆菌详解演示文稿
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检验流程
皮毛、腐败脏器等
血液
Ascoli试验 以NG制成悬液 经加温或饱和尿 素处理
肉汤增菌 培养
BAP或戊烷 脒平板
2%兔血清肉汤4~8h G染色镜检
菌落特征
动生
力 观 察
确定报告
初步报告
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标本直接检查
• 直接显微镜检查:
G染色、荚膜染色、芽胞染色—初步报告
• 荚膜荧光抗体染色 • 核酸检测:核酸杂交
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分离培养 --BAP、戊烷脒多黏菌素B平板 --2%兔血清肉汤增菌→分离培养
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鉴定试验
• 形态和菌落特征
• 生化试验:见教材表13-1 • 噬菌体裂解试验:
•接种半固体培养基,置室温孵育可出现倒 伞形生长
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•生化反应:
• 触酶阳性 • 分解葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖、水杨苷 • 不分解甘露醇、木糖、蔗糖 • 能水解七叶苷,甲基红和V-P试验阳性 • 不形成吲哚,不分解尿素,不还原硝酸盐
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•抵抗力:
• 耐盐、耐碱、不耐酸 • 对热、常用消毒剂敏感 • 首选氨苄青霉素,青霉素、链霉素、红霉素
其他需氧革兰阳性杆菌详解演 示文稿
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优选其他需氧革兰阳性杆菌
第2页,共69页。
第一节 炭疽芽胞杆菌 (Bacillus anthracis)
一、临床意义 • 炭疽是人畜共患的急性传染病 • 主要是牛、羊等食草类动物的传染病 • 人可通过接触或摄食病畜及畜产品而感染 • “生物恐怖”
需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验
第二十三章需氧或兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验本章考点:1.概述:概念2.棒状杆菌属(白喉棒状杆菌)、炭疽芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、产单核李斯特菌●生物学性状●临床意义●微生物学检查常见的与临床有关的需氧革兰阳性杆菌有棒状杆菌属、芽胞杆菌属、李斯特菌属、丹毒丝菌属、加特纳菌属。
上述菌属的主要区别见表5-23-1。
表5-23-1 革兰阳性杆菌属的鉴别棒状杆菌属芽胞杆菌属李斯特菌属丹毒丝菌属加特纳菌属形态棒状杆菌有芽胞短杆、链或丝状细杆或线状杆菌、多形性触酶+ + + - -动力- V + - -对氧需氧、兼性厌氧需氧、兼性厌氧兼性厌氧兼性厌氧兼性厌氧G+Cmol% 51~65 32~69 36~38 36~40 42~44一、棒状杆菌属(一)简述:棒状杆菌属是①一群革兰阳性杆菌,菌体粗细、长短不一,一端或两端膨大呈棒状.故名棒状杆菌。
②本菌着色不匀,有异染颗粒。
③无鞭毛、无荚膜、无芽胞。
(无特殊结构)④需氧,⑤营养要求较高,能分解一些糖类,产酸不产气。
本属细菌种类较多,有白喉棒状杆菌、假白喉棒状杆菌、干燥棒状杆菌、溃疡棒状杆菌等。
引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌,棒状杆菌除白喉棒状杆菌外,其余统称为类白喉棒状杆菌,大多数为条件致病菌。
(二)白喉棒状杆菌1.生物学特征(1)形态与染色:菌体细长微弯,一端或两端膨大的革兰阳性杆菌,大小为(2~5)μm×(0.5~1.0)μm。
无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。
细菌排列呈散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。
染色特点:在细菌的一端或两端有浓染的颗粒,和菌体着色不均匀,称为异染颗粒,这是白喉棒状杆菌的形态学特征,对鉴别细菌有重要意义。
美蓝染色菌体着色不均匀,呈现着色深浅相间的节段或着色较深的颗粒;Neisser(奈瑟)染色,菌体染成黄褐色,颗粒被染成紫黑色;Albert(阿培特)染色,菌体呈蓝绿色,异染颗粒蓝黑色。
(2)培养特性:需氧或兼性厌氧,生长最适温度为35℃~37℃,pH为7.2~7.8。
实验十五:需氧革兰阳性杆菌
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
实验目的
掌握需氧革兰阳性杆菌的形态特征
总结词
了解需氧革兰阳性杆菌的形态特点,如细胞壁结构、染色特 性等。
详细描述
需氧革兰阳性杆菌是一类具有革兰氏染色阳性特性的需氧菌 ,其细胞壁结构较为特殊,通常由肽聚糖和磷壁酸组成。在 显微镜下观察,需氧革兰阳性杆菌呈现为细长的杆状或球状 ,直径较小,染色后呈紫黑色。
在染色过程中,可以尝试使用其他染色方法或试剂,以提高染色效果和准确性。
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01
需氧革兰阳性杆菌是一类需氧生长的革兰氏阳性菌, 具有较高的代谢活性和生长速度。
02
这类细菌通常具有较厚的细胞壁和丰富的胞内物质, 对某些抗菌药物具有一定的抵抗力。
03
需氧革兰阳性杆菌在人体内可引起多种感染,如肺 炎、伤口感染和肠道感染等。
需氧革兰阳性杆菌的分离培养方法
选择适当的培养基
需氧革兰阳性杆菌需要选择适合 其生长的培养基,如血琼脂培养
05
结论
实验总结
实验目的
本实验旨在观察需氧革兰阳性杆菌的形态、染色特性以及 培养特性,进一步了解该菌种的生物学特性。
实验材料
需氧革兰阳性杆菌菌种、显微镜、培养基、染色剂等。
实验步骤
将需氧革兰阳性杆菌接种在培养基上,在需氧条件下培养 ;观察菌落形态,并进行革兰染色;显微镜下观察染色后 的细菌形态。
实验结果
实验结果显示,需氧革兰阳性杆菌呈圆形或椭圆形,单个 或成双排列,菌落较小,表面光滑湿润。染色后呈紫色, 为革兰阳性菌。
需氧革兰阳性杆菌检验
指导抗生素治疗
抗生素是治疗细菌感染的主要手段, 但不同种类的细菌对不同抗生素的敏 感性不同,通过需氧革兰阳性杆菌检 验可了解细菌对抗生素的敏感性,指 导临床医生选择合适的抗生素。
VS
需氧革兰阳性杆菌的耐药性不断增强, 通过检验可了解细菌的耐药性情况, 有助于预防和控制耐药菌株的传播。
流行病学调查与监测
获得性耐药
细菌通过基因交换或获得 外源基因,获得对药物的 抗药性。
传播途径
耐药菌可通过患者之间的 接触、医院环境、动物和 食品等多种途径传播。
耐药性的检测与监测
实验室检测
通过细菌培养、药敏试验 等方法检测细菌的耐药性。
监测系统
建立全国性的耐药性监测 系统,收集和分析耐药菌 的数据,为防控提供依据。
需氧革兰阳性杆菌检验在流行病学调查中具有重要意义,通过对病原菌的分布和流行趋势进行监测,有助于了解疾病的传播 途径和流行规律。
通过需氧革兰阳性杆菌检验可监测细菌的变异和进化情况,及时发现新发和突发的病原菌,为防控措施提供科学依据。
04
需氧革兰阳性杆菌检验的注意事项
实验室安全与防护
实验操作应在生物安 全柜中进行,确保空 气流通,防止交叉污 染。
生化反应鉴定
生化反应鉴定是通过检测细菌对不同 底物的代谢反应来鉴别细菌种类的。 需氧革兰阳性杆菌在生化反应中表现 出一定的特异性,如分解葡萄糖、果 糖、甘露醇等。
生化反应鉴定的方法有多种,如纸片 法、试管法等。通过观察生化反应的 结果,可以初步确定细菌的种类和亚 种。
血清学鉴定
血清学鉴定是通过检测细菌表面抗原与特异性抗体结合的 反应来鉴别细菌的。需氧革兰阳性杆菌的表面抗原不同, 与特异性抗体的结合反应也不同。
需氧革兰阳性杆菌检验
14第十四章 需氧革兰阳性杆菌检验 (1)
第十四章需氧革兰阳性杆菌检验一、名词解释1.炭疽毒素2.侵袭因子3.BV (bacterial voyinosis)4.串珠试验5.Ascoli试验6.需氧芽胞杆菌属7.PA (protective antigen)8.EF (edema factor)9.线索细胞二、选择题【A1型题】1.下列细菌中不能引起人畜共患病的是A、炭疽芽胞杆菌B、腊样芽胞杆菌C、产单核细胞李斯特菌D、红斑丹毒丝菌E、结核分枝杆菌2.革兰阳性需氧杆菌中致病力最强的是A、腊样芽胞杆菌B、产单核李斯特菌C、炭疽芽胞杆菌D、阴道加特纳菌E、红斑丹毒丝菌3.下列哪种不是人感染炭疽芽胞杆菌的方式A、接触或摄食病畜B、接触或摄食畜产品C、吸入干燥菌粉D、吸入气溶胶E、接触饲料4.炭疽芽胞杆菌引起的炭疽病不会引起哪项并发症A、败血症B、菌血症C、脑膜炎D、内毒素血症E、毒血症5.不是炭疽芽胞杆菌形态特征的是A、两端平切,无鞭毛B、常单个存在或呈短链C、培养后形成长链,呈竹节排列D、在有氧条件下可形成芽胞E、芽胞位于菌体的头部6.炭疽芽胞杆菌的生化反应中不能分解的糖是A、葡萄糖B、半乳糖C、麦芽糖D、蔗糖E、蕈糖7.不是炭疽芽胞杆菌抗原的是A、菌体多糖抗原B、荚膜多肽抗原C、鞭毛抗原D、芽胞抗原E、炭疽芽胞杆菌8.以下细菌可引起败血症,除外的是A、表皮葡萄球菌B、脑膜炎奈瑟菌C、大肠埃希菌D、炭疽杆菌E、痢疾志贺菌9.可用荚膜肿胀试验鉴定的是A、大肠埃希菌B、金黄色葡萄球菌C、奇异变形杆菌D、结核杆菌E、炭疽杆菌10.下列既有荚膜又有芽胞的细菌是A、普通变形杆菌B、铜绿假单胞菌C、炭疽芽胞杆菌D、脂肪芽胞杆菌E、肺炎克雷伯菌11.对炭疽芽胞杆菌鉴定没有意义的实验是A、串珠试验B、毒力试验C、荚膜染色D、噬菌体裂解试验E、亚碲酸钾血平板生长12.炭疽毒素具有A、B片段结构,具有A 片段功能的是A、致死因子(PA)B、保护抗原(LF)C、水肿因子(EF)D、LF+EFE、PA+LF13.在青霉素作用下,可出现串珠现象的细菌是A、枯草芽胞杆菌B、嗜热脂肪芽胞杆菌C、炭疽芽胞杆菌D、腊样芽胞杆菌E、苏云金芽胞杆菌14.均为革兰阳性杆菌的是A、白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌、产单核细胞李斯特菌B、结核分枝杆菌、鼠疫耶尔森菌、腊样芽胞杆菌C、枯草芽胞杆菌、产气肠杆菌、产单核细胞李斯特菌D、产气荚膜梭菌、百日咳鲍特菌、白喉棒状杆菌E、红斑丹毒丝菌、腊样芽胞杆菌、铜绿假单胞菌15.下列细菌中可用来“冷增菌”的是A、淋病耐瑟菌B、炭疽芽胞杆菌C、产单核李斯特菌D、红斑丹毒丝菌E、流感嗜血杆菌16. 下列细菌中属于需氧芽胞杆菌的是A、破伤风芽胞梭菌B、肉毒梭菌C、炭疽芽胞杆菌D、葡萄球菌E、白喉棒状杆菌17.人类历史上第一个被发现的病原菌是A、破伤风芽胞梭菌B、肉毒梭菌C、炭疽芽胞杆菌D、产气荚膜梭菌E、白喉棒状杆菌18.控制炭疽芽胞杆菌毒力的物质是A、染色体B、噬菌体C、质粒D、侵袭性酶E、毒素19.主要引起食草动物传染病的细菌是A、炭疽芽胞杆菌B、结核分枝杆菌C、鼠疫杆菌D、枯草芽胞杆菌E、小肠结肠炎耶氏杆菌20.关于炭疽芽胞杆菌致病性的叙述,错误的是A、荚膜的抗吞噬作用使该菌易于在体内生长B、水肿因子激活后可独立发挥毒性作用C、炭疽毒素各成分可独立发挥毒性作用D、致死因子可抑制细胞的生长E、炭疽毒素主要损害微血管的内皮细胞21.炭疽毒素毒性作用主要是直接损伤A、白细胞B、红细胞C、微血管内皮细胞D、肝细胞E、脾细胞22.炭疽微生物学检查采集标本,下列方式中不正确的是A、无菌割取兽尸耳朵或舌尖组织B、人皮肤炭疽无菌取病灶渗出液C、人肺炭疽无菌取痰及血液D、人肠炭疽无菌取畜肉及血液E、兽尸剖检并取血液23.结合临床症状可作为炭疽初步诊断的直接镜检结果是A、找到革兰阳性芽胞大杆菌B、找到有荚膜的竹节状革兰阳性大杆菌C、找到有芽胞链状革兰阳性大杆菌D、找到有荚膜的革兰阳性大杆菌E、找到革兰阳性大杆菌24.关于炭疽杆菌的叙述,错误的是A、引起人畜共患病B、主要引起草食动物炭疽病C、对人畜危害最大的病原体D、可传染给肉食动物E、可通过多种途径传染给人25.炭疽杆菌与类炭疽杆菌的鉴别试验中,炭疽杆菌阴性的一项是A、荚膜B、动力C、串珠试验D、噬菌体裂解试验E、动物致病试验【A2型题】26.某女性患者,38岁,喝牛奶后出现食物中毒症状,取剩余牛奶分离培养出革兰阳性小杆菌,37℃无动力,在半固体培养基上生长呈倒立伞状,CAMP试验阳性,触酶阳性,耐盐耐碱,据此判断最可能是何种细菌?A、群链球菌B、鼠伤寒沙门菌C、产单核细胞李斯特菌D、腊样芽胞杆菌E、金黄色葡萄球菌27.某男性患者,32岁,屠宰工,高热,寒战,右臂外侧皮肤有一1×3cm的坏死,初起时为丘疹,后转为水疱,周围组织水肿,继之中心区出血性坏死并有焦痂。
临床医学检验学主治医师:需氧革兰阳性杆菌题库二
临床医学检验学主治医师:需氧革兰阳性杆菌题库二1、单选青霉素串珠试验阳性的细菌为().A.布鲁菌B.炭疽芽孢杆菌C.蜡样芽孢杆菌D.假结核耶氏菌E.白喉杆菌正确答案:B参考解析:炭疽芽孢杆菌感染皮肤,可(江南博哥)引起皮肤坏死并形成黑色焦痴的是青霉素串珠试验,是将炭疽芽孢杆菌在含微量(0.05~0.5U/ml)青霉素的培养基中培养后,细菌形态可发生变异而形成大而均匀的圆珠状,排列如串珠,此现象可用于鉴别炭疽芽孢杆菌与其他为需氧杆菌。
白喉棒状杆菌用Neisser或Alert染色法染色,颗粒的着色与菌体的着色明显不同,称为异染颗粒。
2、单选在固体培养基上生长出现卷发状菌的细菌是().A.炭疽芽孢杆菌B.肉毒梭菌C.脆弱杆菌D.棒状杆菌E.蜡样芽孢杆菌正确答案:A3、单选白喉杆菌的最主要致病物质是().A.内毒素B.外毒素C.脂质D.菌毛E.荚膜正确答案:B参考解析:白喉棒状杆菌一般不侵入血流,但其产生的大量外毒素可被吸收入血,造成毒血症。
白喉毒素有剧毒,可使局部黏膜上皮细胞产生炎症、渗出和坏死反应。
4、单选传播媒介为鼠蚤的病原菌是().A.布鲁菌B.炭疽芽孢杆菌C.白喉棒状杆菌D.鼠疫耶尔森菌E.痢疾志贺菌正确答案:D参考解析:炭疽芽孢杆菌是致病菌中最大的革兰阳性杆菌,也是人类历史上最早被发现的病原菌。
本菌为需氧或兼性厌氧,生长条件不严格,在普通琼脂培养基上形成灰色、扁平、粗糙的菌落,在低倍镜下可见菌落边缘呈卷发状。
鼠疫耶尔森菌的传播媒介为鼠蚤,是烈性传染病鼠疫的病原菌。
5、单选分离培养粪便标本中肠道致病菌常用().A.吕氏血清斜面B.SS琼脂平板C.亚碲酸钾血琼脂平板D.庖肉培养基E.罗氏培养基正确答案:B参考解析:分离白喉棒状杆菌常用的鉴别选择培养基含0.03%~0.04%亚碲酸钾的血平板,能抑制杂菌,且白喉棒状杆菌能吸收亚碲酸钾使其还原为元素碲,菌落呈黑色。
白喉棒状杆菌在吕氏血清斜面上生长迅速,菌落为细小灰白色有光泽的圆形菌落,涂片染色异染颗粒明显。
其他主治系列-临床医学检验【代码:352】-微生物学和微生物学检验(一)需氧革兰阳性杆菌
其他主治系列-临床医学检验【代码:352】-微生物学和微生物学检验(一)需氧革兰阳性杆菌[单选题]1.下列哪种方法可用于产单核细胞李斯特菌的特殊鉴定A.革兰染色B.触(江南博哥)酶试验C.伞形动力D.七叶苷水解E.尿素正确答案:C参考解析:产单核细胞李斯特菌特征性的伞形动力阳性。
[单选题]2.有关沙雷菌属的特性中,哪一项不正确()A.革兰阳性杆菌B.有周鞭毛C.菌落不透明,常呈白色、粉红色或红色D.触酶强阳性,氧化酶阴性E.发酵葡萄糖正确答案:A[单选题]3.关于产单核李斯特菌的叙述中,不正确的是A.是革兰阳性短小杆菌B.25℃培养时有动力,能在4℃生长C.CAMP试验阳性D.在血平板上培养没有溶血环E.在半固体培养基上呈倒伞状生长正确答案:D参考解析:产单核李斯特菌在血平板上菌落周围有狭窄的β-溶血环。
[单选题]4.下列关于肺炭疽的叙述正确的是()A.由炭疽杆菌引起B.革兰染色阴性C.厌氧菌D.营养要求高E.抵抗力低正确答案:A参考解析:炭疽芽孢杆菌是G+大杆菌,专性需氧,在普通培养基上生长良好,本菌芽胞体抵抗能力低,可致人类皮肤炭疽、肺炭疽、肠炭疽等。
[单选题]5.在半固体培养基内可以出现倒伞行生长的是A.白喉棒状杆菌B.产单核李斯特菌C.炭疽芽胞杆菌D.厌氧类白喉棒状杆菌E.枯草芽胞杆菌正确答案:B参考解析:产单核李斯特在半固体培养基上呈倒伞状生长。
[单选题]6.食入被大量的蜡样芽孢杆菌污染的食物,可导致?A.假膜性肠炎B.阿米巴痢疾C.中毒性痢疾D.出血性大肠炎E.食物中毒正确答案:E参考解析:食物中如被大量的蜡样芽孢杆菌污染可致食物中毒,有腹泻型与呕吐型之分。
[单选题]7.下列细菌种既有荚膜又有芽孢的是A.铜绿假单胞菌B.脂肪芽胞杆菌C.炭疽芽胞杆菌D.肺炎克雷伯菌E.伤寒沙门菌正确答案:C参考解析:炭疽芽胞杆菌在机体内或含血清培养基上可以形成荚膜,人工培养或在外界环境中易产生芽孢。
[单选题]8.下述细菌中引起人畜共患的急性传染病的病原体是A.蜡样芽孢杆菌B.枯草芽孢杆菌C.炭疽芽孢杆菌D.阴道加德纳菌E.红斑丹毒丝菌正确答案:C参考解析:炭疽芽孢杆菌主要引起食草动物患炭疽病,也可经一定途径感染人类,为人畜共患的急性传染病。
【精选】实验十五需氧革兰阳性杆菌
实验目的
• 掌握炭疽芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌的形态、 落特点和常用鉴定试验。
• 掌握白喉棒状杆菌的培养特点及形态特征, 熟悉常用染色方法(ALBERT染色法)。
实验内容
• 炭疽杆菌: 1、GS:+大杆菌,呈矩形,短链状或竹节状,陈旧培养
物上可见芽孢. 2、菌落形态:粗糙,灰白色,边缘不整齐,低倍镜下直
接观察卷发状菌落,或看卷发状菌落示教片。 3、串珠试验:将新鲜炭疽杆菌肉汤培养物用棉签均
匀涂布于血平板上,干后贴5-6张青霉素药敏纸 片,,35°C孵育2小时左右,用接种环在纸片周 边盲目刮取培养物(注意不可刮到琼脂)进行涂片, 注意涂片范围小些,尽量涂厚些,涂片固定后进 行GS,可见炭疽杆菌因细胞壁受损,菌体膨大形 成串珠样。
白喉棒状杆菌
• 1、观察白喉棒状杆菌在鸡蛋斜面上的菌落 表现。
• 2、GS • 3、Albert染色:最为常用的异染颗粒染色
法。涂片干燥固定后,滴加甲液染10分钟, 水洗,滴加乙液染5分钟,水洗,吸干水分 后油镜下观察,可见菌体呈草绿色,异染 颗粒呈蓝紫色。
白喉棒状杆菌
小结
蜡样芽孢杆菌
1、GS:+大杆菌,两端钝圆.6小时后可见小于菌体的 圆形芽孢.
2、菌落形态:直接观察在卵黄琼脂平板上的菌落,圆 形突起,表面粗糙有蜡光,不透明。
3、乳光反应:蜡样芽孢杆菌能产生卵磷脂酶,在有 钙离子存在时,能迅速分解培养基中的卵磷脂, 生成甘油酯和水溶性磷脂酰胆碱,在菌落周围出 现乳白色混浊环,称乳光反应或卵黄反应。一般3 小时即可观察结果。
需氧芽胞杆菌属
+ 3、生化反应 氧化酶(-)触酶(-) 发酵葡萄糖,麦芽糖,蔗糖,产酸不 产气,尿素酶(-)吲哚(-)
+ 4、抵抗力 TMP,10%胆汁抑制生长 氨苄青霉素,羟苄青霉素,苯唑青霉素, 青霉素,万古霉素,甲硝唑敏感 萘啶酸,新霉素,多粘菌素和磺胺嘧啶 耐药
+ 二、致病性 + BV诊断标准 + (1)分泌物 + (2)PH + (3)胺试验 + (4)线索细胞
(2)菌体抗原 多糖半抗原,D-葡萄糖胺,D-半乳糖 和醋酸组成。种特异性,耐热,耐腐
败。Ascoli试验。
+ 环状沉淀反应 又称环状试验。主要用于抗 原的定性试验。用已知抗体来检测未知抗 原。在小口径试管中先加入已知抗血清, 然后将待检抗原小心地加在血清的表面, 成为界面清晰的两层。数分钟后,两界面 交界处出现白色沉淀环,为阳性反应。本 试验常用做抗原定性,如炭疽的诊断 (Ascoli氏试验)
+ 二、致病性 传染源:健康带菌者 传播途径:粪—口 本病特点:通过胎盘和产道感染新生儿 产生外毒素 细胞免疫功能
+ 三、微生物学检查 + 1、标本采集 + 2、检查程序 + 3、检查方法 + (1)分离培养 (脑脊液、血、咽拭子) + (2)鉴定
+
+ 直接涂片 + 革兰染色 + 镜检
+ + + + + + + + + +
+ 2、培养特性 需氧、兼性厌氧,最适温度:30-35.C PH 7.0-7.4,营养要求不高。 普通培养基: 灰白色,粗糙型菌落, 边缘不整齐,在低倍镜下:呈卷毛状。 血琼脂培养基:不溶血或微溶血,在液 体培养基上絮状生长,呈长链状。
《需氧革兰阳性杆菌》PPT课件
检验方法
涂片染色:革兰阳性大杆菌、竹节状排列、 有明显荚膜和芽胞—初步报告
荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验 核酸性
培养基。 2%兔血清肉汤增菌→别离培养
鉴定试验
菌落特征 形态染色 生化试验:表13-1 串珠试验: 接种于含青霉素(0.05~0.5U/ml)
荚膜多肽抗原:抗吞噬,与毒力有关
芽胞抗原:
炭疽毒素Anthrax toxin: 由保护性抗原、 致死因子、水肿因子形成。
抵抗力
耐热、耐枯燥 对氧化剂敏感 对青霉素、磺胺类抗生素敏感
微生物学检查
标本的采集:分泌物、痰、血液、粪便、 呕吐物、脑脊液等,严禁宰杀解剖死蓄。
标本的处理:液体标本取沉渣别离培养; 固体标本用生理盐水浸泡,水浴杀死非 芽胞菌;血液、脏器、渗出液增菌或直 接别离培养
致病因子: – 荚膜:抗吞噬,有利于细菌在组织内繁殖扩散 – 炭疽毒素:保护性抗原、致死因子、水肿因子
病后可获得持久免疫力
炭疽芽胞杆菌
炭疽芽胞杆菌
革兰阳性大杆菌,两端截平,竹节状排列,有芽胞、 无鞭毛、可有毒株有荚膜,芽胞椭圆形,小于菌体, 位于菌体中央,多在有氧条件下形成,25~30℃,在 培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中, 都易形成芽胞在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞, 尸体严禁解剖
形态:革兰阳性大杆菌、两端钝圆、 有芽胞、周鞭毛、无荚膜
培养特性:需氧或兼性厌氧,最适 温度30~35℃,营养要求不高。
普通琼脂平板:菌落较大,灰白 色,外表粗糙似毛玻璃状或融蜡状, 有蜡样光泽
BAP 有β溶血
卵黄平板—生长迅速,培养3h 后,虽看不到菌落,但该菌可分解 卵磷脂而形成白色的混浊环,称乳 光反响或卵黄反响
临床意义
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肉汤增 菌培养
2%兔血清肉汤4-8h
动 力 观 察
生 化 反 应 串 珠 试 验 噬 菌 体 裂 解 荚 膜 肿 胀 试 验 青 霉 素 抑 制
G染色镜检
毒 力 试 验
菌落特征
确定报告
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戊烷脒多粘菌素琼脂
基础培养基 25μg/L戊烷脒: 杀灭利什曼原虫等寄生虫 3000IU/L多粘菌素 2%脱纤维羊血
• 毒素动物试验:小鼠、家兔或豚鼠皮下接种 •植物凝集素试验:荧光或酶标记PHA与菌体多糖反应 •Ascoli热沉淀试验:可作追溯性诊断
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临床意义
Hale Waihona Puke 蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus
食物中毒:含菌量达105/g以上,夏、秋季
多见,中毒食物大多无腐败、变质现象, 感官性状正常,应引起注意
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抗原
菌体多糖抗原:与毒力无关,耐热,特异性 不高,病兽脏器皮毛加热后仍可与相应抗体 反应,称Ascoli热沉淀反应 荚膜多肽抗原:抗吞噬,与毒力有关 芽胞抗原: 炭疽毒素Anthrax toxin: 由保护性抗原、 致死因子、水肿因子形成。
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抵抗力
耐热、耐干燥 对氧化剂敏感 对青霉素、磺胺类抗生素敏感
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三、枯草芽胞杆菌
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生物学性状——形态染色
炭疽芽胞杆菌
2
炭疽芽胞杆菌
革兰阳性大杆菌,两端截平,竹节状排列,有芽胞、 无鞭毛、可有毒株有荚膜,芽胞椭圆形,小于菌体, 位于菌体中央,多在有氧条件下形成,25~30℃,在 培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中, 都易形成芽胞在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞, 尸体严禁解剖
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普琼平板:灰色、粗糙型菌 落;卷发状边缘(低倍镜下) BAP:不溶血 NaHCO3 BAP: --有毒株产生荚膜呈黏液 型菌落,挑取时呈粘丝状(鉴 别要点) --无毒株—粗糙型菌落
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生化反应
葡萄糖+、蔗糖+、麦芽糖+等 卵磷脂酶+ 、VP+ 胨化牛乳+、液化明胶+, 多次传代后生化特性常可改变
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微生物学检查
呕吐物、残留食物等 活菌计数 接种 BM BAP 卵黄琼脂平板 直接涂 片染色 镜检
37℃18~24h
动物试验
生化反应
血清凝集
报告结果
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结果解释
因食品暴露于空气中,在一定程度都会受到 本菌污染,所以不能分离出该菌就认为是引 起食物中毒的病原菌。 从食物中分离出菌数≥105CFU/g,提示本菌 活跃生长,构成潜在危险 从可疑食物分离到的菌株与从病人粪便和(或) 呕吐物中分离到的菌株属同一血清型
痰、呕吐物、CSF 及炎症分泌物
核 酸 检 测 直接涂片
2%兔血清肉 汤快速增菌 37℃4h
荚膜染色
G染色
0.2ml注射小白鼠 腹腔,8h后解剖
涂片G染色、 荚膜染色 初步报告
初步报告
快速检验程序
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分离培养 检验程序
法定报告传染病,发现疑是病例应于24小时内上报CDC
皮毛、腐败脏器等
血液
以NG制成悬液 经加温或饱和 尿素处理 BAP或戊 烷脒平板
肉汤培养基:絮状 沉淀 明胶—37℃18~24h 表面液化成漏斗状, 由于细菌沿穿刺线 向四周扩散形成倒 松树状。
培养特性
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生化反应
葡萄糖+ 、麦芽糖+ 、蔗糖+、 卵磷脂酶弱+、触酶+ 硝酸盐还原试验+、VP+、吲哚-、硫化氢 -、柠檬酸盐-、尿素- 明胶液化+ 胨化牛乳:在牛乳中生长2~4天后牛乳凝固 并缓慢胨化
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检验方法
涂片染色:革兰阳性大杆菌、竹节状排列、 有明显荚膜和芽胞—初步报告 荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验 核酸检测:核酸杂交 分离培养:BAP或戊烷脒多粘菌素B等选择性 培养基。 2%兔血清肉汤增菌→分离培养
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鉴定试验
菌落特征 形态染色 生化试验:表13-1 串珠试验: 接种于含青霉素(0.05~0.5U/ml) 的肉汤中,37℃ 6h,大而均匀成串的圆球 状菌体,与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关, 类炭疽无此现象
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青霉素抑制试验 接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板,
37℃24h
生长 受抑制不生长
•串珠和青霉素抑制联合试验:
青霉素纸片 抑菌环 串珠形成区 兔血琼脂平板
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其它实验
• 噬菌体裂解试验:AP631炭疽噬菌体
• NaHCO3毒力试验:接种于含0.5%NaHCO3和10% 马血清的平板,10%CO2、37℃、24~48h,有毒株 形成荚膜—黏液型菌落,无毒株不形成荚膜—粗糙型 菌落
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微生物学检查
标本的采集:分泌物、痰、血液、粪便、 呕吐物、脑脊液等,严禁宰杀解剖死蓄。 标本的处理:液体标本取沉渣分离培养; 固体标本用生理盐水浸泡,水浴杀死非 芽胞菌;血液、脏器、渗出液增菌或直 接分离培养
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Ascoli试验
皮毛、腐 败脏器等
或荚 荚膜 膜荧 肿光 胀抗 试体 验染 色
丹毒斯菌属 Erysipelothrix
加德纳菌属 Gardnerella
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临床意义 引起人、蓄共患的急性传染病,包括皮肤炭疽、肺炭 疽、肠炭疽、败血性炭疽,烈性传染病, 死亡率极 致病因子: – 荚膜:抗吞噬,有利于细菌在组织内繁殖扩散 – 炭疽毒素:保护性抗原、致死因子、水肿因子 病后可获得持久免疫力
需氧革兰阳性杆菌
芽胞杆菌属 Bacillus 李斯特菌属 Listeria 需氧芽胞杆菌属(Bacillus)48个种 与医学有关5个种 炭疽芽胞杆菌(B.anthracis) 蜡样芽胞杆菌(B.cereus) 蕈状芽胞杆菌(B.mycoides) 巨大芽胞杆菌(B.megaterium) 苏云金芽胞杆菌(B.thuringiensis)
呕吐型——耐热肠毒素 腹泻型——不耐热肠毒素 全眼球炎(外伤后) 心内膜炎、败血症和脑膜炎
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蜡样芽胞杆菌 Bacillus cereus
形态:革兰阳性大杆菌、两端钝圆、 有芽胞、周鞭毛、无荚膜 培养特性:需氧或兼性厌氧,最适 温度30~35℃,营养要求不高。 普通琼脂平板:菌落较大,灰白色, 表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状,有 蜡样光泽 BAP 有β溶血 卵黄平板—生长迅速,培养3h后, 虽看不到菌落,但该菌可分解卵磷 脂而形成白色的混浊环,称乳光反 应或卵黄反应