血凝块DNA提取方法探讨(1)

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血凝块DNA提取方法探讨(1)

血凝块DNA提取方法探讨(1)

no m a trea ted with c i sp l a ti n.Ora lOnco,l2003,39(2):157 9Nakaya m a K,Kanzak iA,Oga wa K,et a.l Copper2transpor2 ti ng P2type adenosi ne triphosphatase(ATP7B)as a c isplati n based che m ores i stance m arker i n ovar i an carc i no m a:co m2 parati ve analysis w it h expressi on ofMD R1,MR P1,MR P2, L R P and BCRP.Int J Cancer,2002,101(5):48810Safae iR,H o we ll SB.Copper transporters regu l ate t he cell u2 lar phar m acolo gy and sensiti vity to P t drugs.Cr it R ev OncolH em ato,l2005,53(1):1311Katano K,Ko ndo A,Sa faei R,et a.l A cqu isiti on of resi st2 ance to c i sp l a tin is acco mpan ied by changes i n the ce ll u lar phar m acolog y of copper.Cancer R es,2002,62(22):6559 12Katano K,Sa fae i R,Sa m i m i G,et a.l The copper export pu m p ATP7B modulates t he cell u l ar phar m acol ogy of carbo p l atin i n ovarian carci no m a cell s.Mol Phar m aco,l2003,64(2):466(2005209212收稿责任编辑王曼)血凝块DNA提取方法探讨*何欣孙哲郭涛李韶华温巍王立东#郑州大学医学实验中心癌症研究室,河南省食管癌重点开放实验室,郑州大学第一附属医院内科郑州450052#通讯作者,E2ma i:l l d wang@关键词血凝块;DN A提取;冰冻切片中图分类号R735.1摘要目的:探讨血凝块DNA提取的方法。

提dna步骤及原理

提dna步骤及原理

提dna步骤及原理DNA提取是一种分离纯化DNA的过程,它可以用于分子生物学的各种实验和研究。

以下是DNA提取的步骤及原理:步骤1:细胞破碎首先,需要将目标细胞破碎以释放DNA。

这可以通过机械方式(如刮取细胞)或者化学方式(如孵育细胞在酶溶液中)来完成。

破碎细胞的目的是破坏细胞膜和核膜,释放DNA。

步骤2:细胞溶解接下来,要将破碎细胞中的蛋白质和其他细胞组分溶解。

这可以通过加入表面活性剂(如SDS)来破坏蛋白质的结构,使其变为可溶解状态。

细胞溶解的目的是除去蛋白质和其他细胞成分,保留DNA。

步骤3:蛋白质沉淀通过加入盐类,可以使DNA溶液中的蛋白质形成沉淀。

盐类中的离子与蛋白质形成复合物,使其聚集在一起并沉淀到溶液底部。

这一步的目的是除去大部分蛋白质,净化DNA溶液。

步骤4:DNA沉淀将溶液中的DNA沉淀到管壁上,可以通过加入酒精或其他有机溶剂来实现。

这些溶剂改变了DNA溶液的物理性质,使DNA变得不溶于水而沉淀。

这一步的目的是分离纯化DNA。

步骤5:洗涤和纯化DNA最后,通过洗涤沉淀的DNA,可以除去残留的盐类和其他杂质。

洗涤可以使用乙醇或其他缓冲液。

洗涤后,可以用缓冲液溶解DNA并进一步纯化。

DNA提取的原理是基于DNA和其他细胞成分的物理和化学特性的差异。

其中,细胞破碎和溶解步骤破坏了细胞膜和核膜,并释放了DNA。

蛋白质沉淀和DNA沉淀步骤利用了盐类和有机溶剂对不同分子的溶解性差异,将蛋白质和DNA分离。

洗涤步骤则进一步清洁和纯化DNA。

整个过程旨在从复杂的细胞混合物中分离纯化出DNA,以便在后续实验中进行分析和应用。

血凝块DNA提取方法探讨

血凝块DNA提取方法探讨

血凝块DNA提取方法探讨何欣;孙哲;郭涛;李韶华;温巍;王立东【期刊名称】《郑州大学学报(医学版)》【年(卷),期】2006(041)001【摘要】目的:探讨血凝块DNA提取的方法.方法:利用血凝块融化液直接进行DNA提取,并通过血凝块融化液涂片、血凝块冰冻切片以及琼脂糖电泳鉴定所提DNA的质和量.并与常规研磨法提取DNA进行比较.结果:利用血凝块融化液直接提取DNA浓度可高达(13.9±10.4)mg/L,A(260 nm)/A(280 nm)为1.85±0.11;高于研磨法的(9.70±4.1)mg/L和1.74±0.08(P<0.05).血凝块融化液中以及血凝块冰冻切片中均含有较多的有核细胞.结论:利用血凝块的融化液直接进行DNA提取是一种简便、实用的DNA提取方法.【总页数】2页(P56-57)【作者】何欣;孙哲;郭涛;李韶华;温巍;王立东【作者单位】郑州大学医学实验中心癌症研究室,河南省食管癌重点开放实验室,郑州大学第一附属医院内科,郑州,450052;郑州大学医学实验中心癌症研究室,河南省食管癌重点开放实验室,郑州大学第一附属医院内科,郑州,450052;郑州大学医学实验中心癌症研究室,河南省食管癌重点开放实验室,郑州大学第一附属医院内科,郑州,450052;郑州大学医学实验中心癌症研究室,河南省食管癌重点开放实验室,郑州大学第一附属医院内科,郑州,450052;郑州大学医学实验中心癌症研究室,河南省食管癌重点开放实验室,郑州大学第一附属医院内科,郑州,450052;郑州大学医学实验中心癌症研究室,河南省食管癌重点开放实验室,郑州大学第一附属医院内科,郑州,450052【正文语种】中文【中图分类】R735.1【相关文献】1.两种血凝块基因组DNA提取方法的比较 [J], 任来峰2.人血凝块DNA三种提取方法的比较 [J], 张敏;李三相;贾海军;兰小平;杨亚军3.两种提取人血凝块基因组DNA方法的比较 [J], 朱建立;李晓天;温战迎;王巨才;赵阳;华海婴;何美霞4.高通量自动化磁珠提取血凝块DNA的方法研究 [J], 潘亭亭;汪伟伟;吉栩5.应用改良法从冷冻血凝块中提取基因组DNA [J], 邹春波;俞星;韩春姬因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

凝血块核酸提取-概述说明以及解释

凝血块核酸提取-概述说明以及解释

凝血块核酸提取-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述凝血块核酸提取是一种常见的分子生物学技术,用于从凝血块中提取核酸(包括DNA和RNA)。

凝血块,也称为血栓,是由凝血因子和血小板在血液凝固过程中形成的固态物质。

在医学领域,凝血块的形成常常是疾病如心脏病和中风的根源。

因此,研究凝血块中的核酸成分对于深入理解这些疾病的发生机制具有重要意义。

凝血块核酸提取的过程涉及到破坏凝血块的结构,并提取其中的核酸分子。

随着生物技术的不断发展,提取核酸的方法也在不断改进,使得提取效率和纯度更高。

通过凝血块核酸提取,研究人员可以获得凝血块中的基因组DNA、转录组RNA等核酸样本。

这些样本可以被用于各种分子生物学研究,如基因突变的检测、特定基因的表达分析等。

本文将介绍凝血块核酸提取的原理、方法和应用。

首先,我们将探讨凝血块核酸提取的原理,包括凝血块的组成和核酸在凝血块中的存在形式。

接着,我们将详细介绍凝血块核酸提取的方法,包括常用的提取试剂、步骤和注意事项。

最后,我们将探讨凝血块核酸提取在医学和生命科学研究中的应用,以及未来的发展趋势。

通过本文的阅读,读者将对凝血块核酸提取有一个全面的了解,从而为相关研究和技术应用提供指导和参考。

1.2 文章结构文章结构包括引言、正文和结论三个部分。

引言部分介绍了文章的背景和研究意义,概述了凝血块核酸提取的主要内容,并提出了本文的目的。

正文部分详细介绍了凝血块核酸提取的原理、方法和应用。

在原理部分,解释了凝血块中存在的核酸的来源以及提取的原理和步骤。

在方法部分,介绍了凝血块核酸提取的具体操作方法和关键步骤。

在应用部分,列举了凝血块核酸提取的实际应用场景和重要价值。

结论部分对全文进行总结,指出凝血块核酸提取的能力和潜力,并展望了未来可能的研究方向和改进方向。

最后,给出了对凝血块核酸提取的结论,强调其在医学、科研和临床实践中的重要性和应用前景。

通过以上结构的编排,读者可以清晰地了解凝血块核酸提取的背景和意义,了解其原理、方法和应用,最终了解到该领域的研究现状和展望。

实验一、血液标本提取DNA(蛋白酶K-酚抽提法)

实验一、血液标本提取DNA(蛋白酶K-酚抽提法)

实验一、血液标本提取DNA(蛋白酶K-酚抽提法)一、实验原理离心分离到外周血的白细胞层;用细胞裂解液溶解细胞膜、核膜,使组蛋白与DNA分离,再用酚、三氯甲烷/异戊醇抽提去除蛋白质,最后经乙醇沉淀即可得到基因组DNA片段。

二、实验步骤:1、血液标本处理 1.0ml抗凝全血(ACD、EDTA抗凝均可)2000rpm离心10min(1.5mlEP管)。

轻轻去上清液(血浆),吸出淡黄色悬浮液(白细胞层)置于另一2.0mlEP管中。

(约50μl)2、细胞裂解加入10倍体积组织细胞裂解液,37℃1h,3、加入蛋白酶K消化加入蛋白酶K至终浓度100μg/ml(约4μl),充分混匀,37℃震荡12-24h或37℃1h后,56℃水浴3h。

保温过程中不时摇动,混匀反应液。

液体逐渐变粘稠,表明已有DNA释放出来,操作应轻柔。

4、酚抽提:将上述溶液冷却至室温,加等体积的Tris饱和酚(pH8.0)溶液,温和缓慢颠倒离心管10min,混匀两相成乳液。

12000rpm 5分钟,两相分层。

用宽口径移液管小心吸出上层粘稠的水相,移至一新的2.0mlEP管中。

(小心一点,不要吸入蛋白层。

如交界处有白色沉淀,需重新抽提有机相,用酚重新抽提两次,合并水相)5、三氯甲烷/异戊醇抽提上清液加等体积三氯甲烷:异戊醇(24:1),倒转混匀10分钟,12000rpm5分钟,取上层水相0.5ml入另一新的2.0mlEP管;6、DNA沉淀上清液中加0.2倍体积3.0mol/L 醋酸钠,再加2倍体积的4℃冰箱冷却后的无水乙醇,轻柔振摇,充分混匀;应可看到白色絮状物(DNA)。

12000rpm 5分钟,弃上清液;7、纯化:加1ml 70%乙醇洗涤,12000rpm 离心5分钟,去上清夜,重复1次;(此过程不得振荡摇动)8、溶解:弃上清液后,自然干燥(挥发痕量乙醇)后,用30μl pH8.0TE完全溶解,保存在-20℃备用。

三、注意事项1、加样准确,操作轻柔;微量加样器绝对不能超过最大量程;2、加酚试剂时,不要接触到皮肤上,有腐蚀性;如不小心弄到,立即用清水冲洗;3、取上清液时,不可吸到下层溶液;4、加TE液后轻摇10min溶解DNA或-4˚C保存待用。

从血液中提取DNA方法探讨[1]

从血液中提取DNA方法探讨[1]

anti2citrulline antibody assay for rheumatoid arthritis [ J ]. Clin
Chem , 2001, 47 ( 6) : 1089.
(收稿日期 : 2006211218)
从血液中提取 DNA方法探讨
焦 鹏 1 , 叶文静 1 , 常 起 2 , 赵晓民 1
and joint damage p rogression in early rheumatoid arthrits: relation to IgG、IgA and IgM rheumatoid factor[ J ]. Ann Rheum D is, 1990, 49
( 11) : 906. [ 6 ] Pai S, Pai L, B irkenfeldt R, et a l. Correlation of serum IgA rheu2
从凝血中得到dna质?较高方法简?快速而且可靠得到的高质?dna适合于临床分子生物学研究而且在临床检测中使用本方法从凝血中提取的dna?但足够用于基因检测还能一血多用完成血清其他项目检测因此为临床检测和科学研究提供了很大的方?
实用医技杂志 2007年 1月第 14卷第 3期 (旬刊 ) JPMT, January. 2007, Vol. 14, No. 3 ( Issued Every Ten Days)
[关键词 ] DNA提取 ;血液 ; DNA 检测 [中图分类号 ] R737. 9 [文献标识码 ] B [文章编号 ] 167125098( 2007) 0320287203
D NA Isola tion by S im ple Rap id and Innocuous M ethod from Blood Useful in C lin ica l M olecular Testing

从人血凝块中提取基因组DNA

从人血凝块中提取基因组DNA

文章编号:1007-6611(2006)08-0881-02从人血凝块中提取基因组DNA商亚丽1,解军1,程牛亮1,牛勃2,张悦红1(1山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,太原030001;2首都儿科研究所)摘要:目的从人血凝块中提取基因组DNA。

方法室温自然解冻,机械磨碎,高盐、高EDTA提取液处理,消化液消化,酚氯仿抽提。

结果用改良酚氯仿法从人血凝块中成功提取基因组DNA,提取的DNA浓度为:(32?10)mg/L,且光吸收比值A260/A280>1.8。

结论用改良法提取的基因组DNA的总量较高,提取效率高,PCR扩增效果好,可很好的用于血凝块基因组DNA的提取。

关键词:血凝块;DNA提取;聚合酶链式反应;多态性,限制性片段长度中图分类号:DF795.2文献标识码:AA method for DNA extr action fr om human blood clotsSHANG Ya2li,XIE Jun,CHENG Niu2liang,et al(Dept of Bio chemistry and Molecula r Biolo gy,Sha nxi Medical Univer sity, Taiyuan030001,China)Abstract:Ob jective To explor e a simple method of DNA extraction fr om human blood clots.Methods Blood clots t hawed in room temperature,homogenized extraction buffer including higher sodium chloride and higher EDTA,the homogenized samples were digested with digestion buffer and extracted with phenol2chlorofor m.Results The genomic DNA were successfully extr acted.The average quant ity of the extracted DNA was(32?10)mg/L,while A260/A280> 1.8.Conclusion The improved extraction method was reliable for obtaining high quantities of DNA from blood clot suited for PCR amplification.Key wor ds:blood clot;DNA extraction;polymer ase chain reaction;polymor phism,r eaction fragment length血样中DNA的提取在基因工程和分子生物学的研究中占有主要地位。

DNA提取的几种方法

DNA提取的几种方法

DNA提取的几种方法DNA提取的几种方法(1).浓盐法利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M氯纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA钠盐沉淀出来.也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.以稀盐酸溶液提取DNA时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA的分离。

在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.(2).阴离子去污剂法:用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA.由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.(3).苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。

蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。

离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA。

此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。

此法的特点是使提取的DNA保持天然状态.(4).水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.提取DNA主要有SDS和CTAB法,其实提取效果的好坏主要看提取的对象是什么样的材料,在提取之前一定要好好分析材料的特性,然后在设计实验步骤。

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no m a trea ted with c i sp l a ti n.Ora lOnco,l2003,39(2):157 9Nakaya m a K,Kanzak iA,Oga wa K,et a.l Copper2transpor2 ti ng P2type adenosi ne triphosphatase(ATP7B)as a c isplati n based che m ores i stance m arker i n ovar i an carc i no m a:co m2 parati ve analysis w it h expressi on ofMD R1,MR P1,MR P2, L R P and BCRP.Int J Cancer,2002,101(5):48810Safae iR,H o we ll SB.Copper transporters regu l ate t he cell u2 lar phar m acolo gy and sensiti vity to P t drugs.Cr it R ev OncolH em ato,l2005,53(1):1311Katano K,Ko ndo A,Sa faei R,et a.l A cqu isiti on of resi st2 ance to c i sp l a tin is acco mpan ied by changes i n the ce ll u lar phar m acolog y of copper.Cancer R es,2002,62(22):6559 12Katano K,Sa fae i R,Sa m i m i G,et a.l The copper export pu m p ATP7B modulates t he cell u l ar phar m acol ogy of carbo p l atin i n ovarian carci no m a cell s.Mol Phar m aco,l2003,64(2):466(2005209212收稿责任编辑王曼)血凝块DNA提取方法探讨*何欣孙哲郭涛李韶华温巍王立东#郑州大学医学实验中心癌症研究室,河南省食管癌重点开放实验室,郑州大学第一附属医院内科郑州450052#通讯作者,E2ma i:l l d wang@关键词血凝块;DN A提取;冰冻切片中图分类号R735.1摘要目的:探讨血凝块DNA提取的方法。

方法:利用血凝块融化液直接进行D NA提取,并通过血凝块融化液涂片、血凝块冰冻切片以及琼脂糖电泳鉴定所提DNA的质和量。

并与常规研磨法提取DN A进行比较。

结果:利用血凝块融化液直接提取D NA浓度可高达(13.9?10.4)m g/L,A(260n m)/A(280n m)为1.85?0.11;高于研磨法的(9.70?4.1)m g/L和1.74?0.08(P<0.05)。

血凝块融化液中以及血凝块冰冻切片中均含有较多的有核细胞。

结论:利用血凝块的融化液直接进行DNA提取是一种简便、实用的DN A提取方法。

A novelmethod f or DN A extraction fro m bl ood cl otH E X in,SU N Zhe,GU O Tao,LI Sha ohua,WE N Wei,W A NG Li d ongLabora tory for Canc er Rese a rch,Experi m enta l Center for M e dicine;H e nan Ke y L a bora tory for E s ophagea l Cance r;D e part m e nt of M e dicine,t h e F irst A ffilia te d H os pita l,Zhengz hou University,Zhengz hou450052K ey word s blo od c l ot;DNA extracti on;frozen secti onAbstr ac t A m i:To i ntroduce a novel m et hod for D NA extracti on fro m blood c l ot.Me thods:DNA was extracted d i2 rectly fro m t he fl u i d at the botto m of se m i2frozen blo od clot.The frozen sectio n for the bloo d clot,s m ear for b l ood ce lls fro m the fl uid and ge l ose electrophores i s were app lied t o identify the quantit y and qua lity of t he D NA and to explore the possi b le pr i nciple for this me t hod.R e su lt s:R i ch DNA w it h h i gh qua lit y could be obta i ned d irectly fro m the b l ood c l ot fl u i d and the obta i ned DNA co ncen trati on was as hig h as(13.9?10.4)mg/L.P l enty of t he nuclear ce lls were observed on t he fl u i d s m ear and frozen sec tio n.C onc l us i on:DNA extractio n w it h se m i2frozen b l ood clot is easy and practi ca.l近年来,采用分子标志物从机制上对疾病的病*国家杰出青年科学基金资助项目30025016;河南省高校创新人才工程基金资助项目1999125;河南省医学科技攻关基金资助项目20058;河南省食管癌重点开放实验室基金资助项目20050227;郑州大学211工程基金资助项目因及遗传易感性进行研究已成为研究的一个热点[1]。

这种研究需要从大量的人体组织和血液等生物标本中提取D NA后进行分析。

目前,临床检验和流行病学调查所采集的血样,在分离血清后,因血凝块不能做某些分析而被弃去,若需提取D NA,则需另外采集抗凝血,既增加成本,又降低现场可行#56#郑州大学学报(医学版)2006年1月第41卷第1期性。

传统提取血凝块D NA的方法为研磨血凝块,但费时费力,且易污染[1,2]。

作者发现血凝块半融化状态时,不断渗出融化的液体,对这种液体离心后可提取出浓度较高、质量较好的D NA,且比传统的方法省时省力,污染少,介绍如下。

1材料与方法1.1材料¹血凝块:所采集的全血来自食管癌高发区河南省林州市,共20人份。

受检对象每人采空腹外周静脉血5m,l分离血清后将血凝块分为2份,-20e保存,每份体积约为2~3m,l1份用半融血凝块法提取D NA,另1份用研磨血凝块法提取D NA。

保存时间2~18个月。

º主要试剂:红细胞裂解液、蛋白酶K、异丙醇(Si g m a2A l d rich Co.Cana2 da Ltd,Oakville,Ontari o,Canada),有核细胞裂解液、蛋白沉淀剂、D NA水化液(Puregene T M,Gentra Syste ms,M inneapolis,MN,US A)。

1.2半融血凝块DNA的提取先将冻存血凝块于冰冻切片机上,分别于上、中、下3部分切片,厚度为10L m,H E染色。

血凝块于室温下自然解冻后,提取凝块周围残留融化液体100L,l置500L l洁净Epen2 dorf管中离心,弃上清液,同时采用全自动血细胞记数仪对上清液进行细胞记数;加入3倍体积红细胞裂解液,与残留液充分颠倒混匀,于室温下静置10m in,中间至少再颠倒混匀1次;13000@g离心1m i n,弃上清;剧烈振荡试管,使底部细胞团块散开;抽取底部细胞做涂片,HE染色;每管加入有核细胞裂解液100 L l及20g/L蛋白酶K1L,l振荡、混匀;55e水浴1 h;冷却至室温下,每管加入蛋白沉淀剂35L,l于振荡器剧烈振荡20s,使之充分混合;13000@g离心3 m in,取上清,加入纯异丙醇100L,l轻轻颠倒混匀50次以上;13000@g离心2m i n,取上清,加入体积分数70%乙醇100L l洗涤,轻轻颠倒混匀100次以上; 13000@g离心1m i n,弃上清,室温下晾10~15m in;加入D N A水化液35L,l室温下静置30m i n,-20e 保存;以7g/L琼脂糖凝胶电泳及紫外分光光度仪检测所提取的DN A质量及浓度[3]。

D N A浓度(mg/L)=A(260nm)/0.020。

1.3研磨法提取DNA按常规方法研磨血凝块提取D NA,并测定D NA质量及浓度。

2结果融化液中细胞记数结果:白细胞(0.22?0.10)@109L-1,淋巴细胞(0.12?0.05)@ 109L-1,单核细胞(0.03?0.01)@109L-1。

血凝块冰冻切片HE染色后镜检发现大量纤维蛋白原,而离心过的半融液体细胞涂片HE染色显示大量有核血细胞(图1A、B)。

半融血凝块组提取的DNA浓度达(13.9?10.4)mg/L,纯度(A(260nm)/A(280 nm))为1.85?0.11,高于研磨组的(9.70?4.1) mg/L和1.74?0.08(P<0.05)。

图1血凝块冰冻切片(A)和血凝块融化液细胞涂片(B)结果(HE,@20)3讨论作者改进了传统血凝块提取DNA的方法,显示冰冻血凝块在室温中逐渐解冻,析出部分融化液体,把这些融化液体离心后,抽取底部部分液体,进行DN A提取,省时省力且提取的DN A数量比用传统方法提取的多。

将冰冻血凝块直接做冰冻切片,然后做H E染色,观察结果为含有大量纤维蛋白原及一些白细胞。

而把融化液体离心抽取底部液体涂片行HE染色,镜下发现大量白细胞。

提示,研磨冰冻血凝块提取DN A效果之所以不及改进后的方法,在于冰冻血凝块中含有大量纤维蛋白原,影响研磨及纯度,而血凝块融化时大量血细胞从纤维蛋白原的间隙中释放出来,经过离心融化液体,由于单位体积内细胞含量大量增加,一次提取DN A的量也因此增加。

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