第一节DNA和RNA的提取与纯化共77页PPT资料
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DNA和RNA提取方法及原理 ppt课件
• TE中的EDTA能螯和Mg2+或Mn2+离子，抑制DNase • pH值为8.0，可防止DNA发生酸解
DNA和RNA提取方法及原理
➢ 提取的基因组DNA片段在20kb－30kb之间
➢高质量的基因组DNA带型 单一无拖尾现象 ➢DNA浓度及纯度的检测 A260=1 约 50 μg/ mL 双链DNA；
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
取方法 及原理
DNA是遗传信息的载体，是最重要的生物 信息分子，是分子生物学研究的主要对象。为 了进行测序、杂交和基因的表达，获得高分子 量和高纯度的DNA是非常重要的前提。
DNA和RNA提取 方法及原理
保证DNA结构的完整性 纯化后不应存在对酶有抑制作用的物质 排除有机溶剂和金属离子的污染 蛋白质、多糖、脂类等降低到最低程度 排除其他核酸分子的污染
DNA和RNA提取方法 及原理
染色体DNA的提取
➢ CTAB法 ➢ SDS法 ➢ 其它
DNA和RNA提取方法 及原理
非染色体DNA的提取
➢ 质粒DNA的提取 • 碱裂解法 • 煮沸法
➢ 线粒体、叶绿体DNA的提取 • 差速离心结合SDS裂解法
DNA和RNA提取方法及 原理
CTAB法原理（植物DNA提取经典方法）
DNA和RNA提取方法 及原理
基因组DNA的提取
质粒DNA的提取
➢ 材料应适量，过多会影响裂解， 导致DNA量少，纯度低
➢ 针对不同材料，选择适当的裂 解预处理方式：
• 植物材料－－液氮研磨 • 动物组织－－匀浆或液氮研磨 • 组培细胞－－蛋白酶K • 细菌－－溶菌酶破壁 • 酵母－－破壁酶或玻璃珠
DNA和RNA提取方法 及原理
多酚的去除：
DNA和RNA提取方法及原理
➢ 提取的基因组DNA片段在20kb－30kb之间
➢高质量的基因组DNA带型 单一无拖尾现象 ➢DNA浓度及纯度的检测 A260=1 约 50 μg/ mL 双链DNA；
• “太阳当空照，花儿对我笑，小鸟说早早早……”
取方法 及原理
DNA是遗传信息的载体，是最重要的生物 信息分子，是分子生物学研究的主要对象。为 了进行测序、杂交和基因的表达，获得高分子 量和高纯度的DNA是非常重要的前提。
DNA和RNA提取 方法及原理
保证DNA结构的完整性 纯化后不应存在对酶有抑制作用的物质 排除有机溶剂和金属离子的污染 蛋白质、多糖、脂类等降低到最低程度 排除其他核酸分子的污染
DNA和RNA提取方法 及原理
染色体DNA的提取
➢ CTAB法 ➢ SDS法 ➢ 其它
DNA和RNA提取方法 及原理
非染色体DNA的提取
➢ 质粒DNA的提取 • 碱裂解法 • 煮沸法
➢ 线粒体、叶绿体DNA的提取 • 差速离心结合SDS裂解法
DNA和RNA提取方法及 原理
CTAB法原理（植物DNA提取经典方法）
DNA和RNA提取方法 及原理
基因组DNA的提取
质粒DNA的提取
➢ 材料应适量，过多会影响裂解， 导致DNA量少，纯度低
➢ 针对不同材料，选择适当的裂 解预处理方式：
• 植物材料－－液氮研磨 • 动物组织－－匀浆或液氮研磨 • 组培细胞－－蛋白酶K • 细菌－－溶菌酶破壁 • 酵母－－破壁酶或玻璃珠
DNA和RNA提取方法 及原理
多酚的去除：
《DNA提取纯化》课件
定量分析：通过荧 光定量PCR技术， 测定DNA的浓度和 纯度
定性分析：通过电 泳技术，观察DNA 的条带，判断DNA 的完整性和纯度
定量分析：通过紫 外分光光度法，测 定DNA的浓度和纯 度
定性分析：通过凝胶 电泳技术，观察DNA 的条带，判断DNA的 完整性和纯度
PART FIVE
佩戴防护眼镜和 手套，避免直接 接触DNA样本
离心管处理：清洗离心管， 确保无污染
试剂准备：按照试剂盒说明 书准备所需试剂
实验材料：DNA提取试剂盒、 离心管、移液器、吸头、离心 机等
移液器处理：校准移液器， 确保准确度
吸头处理：清洗吸头，确保 无污染
离心机处理：检查离心机， 确保正常运行
PART FOUR
● 实验材料：细胞、缓冲液、酶等
沉淀：加入乙醇或异丙醇，使DNA 沉淀
离心：将沉淀和洗涤液离心，分离 DNA
添加标题
添加标题
添加标题
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洗涤：用70%乙醇或异丙醇洗涤沉 淀，去除杂质
干燥：将沉淀干燥，得到纯化的 DNA
● 实验材料：DNA样品、离心管、离心机、缓冲液等
● 实验步骤： a. 样品处理：将DNA样品与缓冲液混合，充分溶解 b. 离心分离：将样品与缓冲液混合物离心，分离出DNA c. 纯化：将离心 后的DNA样品进行纯化，去除杂质 d. 鉴定：通过电泳等方法鉴定DNA的纯度 ● a. 样品处理：将DNA样品与缓冲液混合，充分溶解 ● b. 离心分离：将样品与缓冲液混合物离心，分离出DNA ● c. 纯化：将离心后的DNA样品进行纯化，去除杂质 ● d. 鉴定：通过电泳等方法鉴定DNA的纯度
基因诊断：用于检测遗传性于古生物研究、 人类起源研究等
分别提取动物组织中的DNA和RNA及核酸的定性分析-经典PPT课件
在不同浓度电解质中溶解度有明显差别
0.14M
2. 核酸与蛋白质的分离 DN
氯仿-异丙醇
P
极小
1M 大两倍
3. 核酸的沉淀
RN P
相当大 变化不大
目录
实验原理 （二）核酸的鉴定 1. 核酸的水解
RNA和DNA均可被硫酸水解生成含氮碱 （嘌呤碱与嘧啶碱）、戊糖（RNA中的核糖 与DNA中的脱氧核糖）和磷酸。
CH3
2H2O
核糖
HO
OH
3，5-二羟甲苯
HO
C O
CH3
O OH
H3C 绿色化合物
目录
2. 成分的鉴定
实验原理
（3）脱氧核糖的鉴定原理
CHO
CHO
CH2 浓H2SO4 CH2
CHOH
CH2
CHOH H2O C O
CH2OH
CH2OH
脱氧核糖
ω —羟基—γ —酮基戊醛
NH
二苯胺
蓝色化合物
目录
2. 成分的鉴定
目录
实验操作
2．分离提取 将上述肝匀浆全部倾入一支10ml刻度离心
管中，再用0.14M NaCl溶液分两次将研钵中 肝匀浆洗入离心管中，使离心管内总量不超过 5ml。用玻璃棒充分搅匀，放置10min ，离心 （3500r/min）5min。溶液分为两层。
目录
实验操作
2．分离提取 用滴管吸取上清液于另一离心管中，用于进一
目录
实验操作
2．分离提取 分别在上清液中加入1.5～2倍体积的冰冷
的95%乙醇。在分离提取DNA时，要边加边 用玻璃棒搅拌，此时纤维状的DNA缠绕在玻 璃棒上。当分离提取RNA时，轻轻搅拌，出现 乳白色絮状沉淀。分别离心（3500r/min） 5min，弃去上层乙醇液，沉淀为RNA或DNA
核酸的提取ppt课件
• 三、操作步骤 • 1、1.5ml菌液（每组两管）4 ℃ 12000rpm离心 30sec，弃去上清，倒置试管于吸水纸上吸干。 • 2、每管加入400µl裂解液，用移液枪枪头反复抽 吸辅助裂解，37 ℃水浴30min。 • 3、每管加入132µl的5M NaCl溶液，颠倒试管， 充分混匀后，13000rpm离心15min。用粗口的枪 头（用剪刀剪去1ml枪头的尖端）小心取出上清液 转倒两支新的eppendorf管中。 • 4、加入等体积的饱和苯酚/氯仿，充分混匀后， 12000rpm离心3min，离心后的水层如混浊则说 明仍含有蛋白质，则需将上清液转入新的试管， 重复上述步骤直到水层透明，水层和酚层之间不 再白色沉淀物为止（约2次）。
DNA提取方法很多，实验采用酚抽 提法。其基本原理是超低温粉碎， 通过蛋白酶K和SDS消化，破碎细胞， 再用酚/氯仿去除蛋白质。
SDS
Proteinase K 酚/氯仿
1）防止和抑制内源 Dnase对DNA的降解； 只需加入一定浓度的 螯合剂如EDTA，因 为几乎所有Dnase 都 需要Mg2+或Mn2+为 辅助因子。
• 5、将上层清液转入新的eppendorf管，加等体积 的氯仿，混匀后13000rpm离心3min，除去苯酚。 • 6、小心吸出上清液转入新的eppendorf管，用预 冷的两倍体积的无水乙醇沉淀，放置－20℃冰箱 30min，然后13000rpm离心15min，可见白色丝 状沉淀物。 • 7、小心吸出液体，弃上清液，用预冷的400µl 70 ％乙醇洗涤2次，室温干燥后，用50µlTE （含 20µg/ml的Rnase）溶解DNA，－20℃冰箱放置 备用。
5.核酸提取的一般过程
I.材料准备 破碎细胞 II.破碎细胞或包膜－内容物释放
生物植物DNA、RNA及蛋白的提取与分析ppt课件
讨论？
1、样品不纯 2、样品降解 3、样品得率低 4、样品电泳时检测不到条带
一、DNA样品不纯
原 因
1. DNA中含有蛋白、糖类、 酚类杂质
2. DNA在溶解前，有酒精残 留，酒精抑制后续酶解反
对
应
策
3. DNA中残留有金属离子
1. 重新抽提DNA，去除蛋 白、糖类、酚类等杂 质
2. 重新沉淀DNA，让酒精 充分挥发后再溶解
3. 细胞裂解后的后续操作应尽量轻柔 4. 所有试剂用无菌水配制，耗材经高
灭菌 5. 将DNA分装保存于缓冲液中，避免
复冻融
三、DNA提取量少
原 因
1. 实验材料不佳或量少
2. 破壁或裂解不充分 对
3. 沉淀不完全
策
4. 洗涤时DNA丢失
1. 尽量选用新Байду номын сангаас（幼嫩）的材料 2. 液氮研磨充分，适当延长裂
干燥溶解
注意事项
1. 所有用品均需要高温高压，以灭活 残余的DNA酶。
2. 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。 3. 在提取过程，应尽量在温和的条件
下操作,如尽量减少酚/氯仿抽提、混 匀过程要轻缓, 以保证得到较长的 DNA。
DNA的质量检测
电泳 带型单一无拖尾现象 点样孔无残留杂质
TRI Reagent提取步骤
1. 研钵研杵预冷后,加入少量样品用液N迅速研 磨成冰粉状
2. 将样品（样品量不超过100mg)移入1.5mlEP管 中,迅速加入1mlTRI Reagent混匀,室温静置 5min
3. 加0.2ml氯仿,剧烈振荡15S,室温静置10min 4. 4℃,12000g,15min;取上清于另一EP管中，加
实验一核酸的提取ppt课件
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
如何创造一个无RNase的环境 ？
RNA分离的关键因素是： ➢ 尽量减少RNA酶的污染！ ➢极力避免外源RNase的污染：主要来源于
开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕形成网状 结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA， 蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
而RNA酶，不但分布广泛、极易污染样品， 而且耐高温、耐酸、耐碱，不易失活，所以生 物降解是RNA提取过程中的主要危害因素。
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
二、真核细胞染色体DNA的制备
1. 真核细胞的破碎 （1）物理方式:超声波法、匀浆法、液氮
破碎法、Al2O3粉研磨法等。这些物理操作均可 导致DNA链的断裂。
（2）为了获得大分子量的DNA，一般采用 蛋白酶K和去污剂温和处理法。
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
采用PP管及配件：根据给水设计图配 置好PP管及配 件，用 管件在 管材垂 直角切 断管材 ，边剪 边旋转 ，以保 证切口 面的圆 度，保 持熔接 部位干 净无污 物
生物课件植物dna、rna及蛋白的提取与分析
质谱分析
通过将蛋白质离子化并测量其质量，对蛋白质进行鉴定和定量分析。
DNA、RNA及蛋白在生物科学研究中的应用
基因组学研究
通过对基因组进行测序和分析， 研究基因组的组成、结构和功能，
揭示生物体的遗传特征和进化关 系。
转录组学研究
通过对mRNA进行定量分析，研究 基因的表达调控机制，揭示生物体 的生理和病理过程。
优化提取条件
可以通过调整试剂浓度、温度 、时间等参数来优化提取效果
。
02
CHAPTER
植物RNA的提取
RNA提取的基本原理
核酸是生物体内重要的遗传物质，RNA作为核酸的一种，在生物体的生命活动中 起着重要的作用。RNA提取的基本原理是利用RNA在细胞中的稳定性和其在碱 性环境下易与蛋白质分离的特性，将RNA从细胞中分离出来。
选择合适的分离方法
根据实际情况选择合适的离心分离或膜分 离等方法，以提高蛋白质的纯度和分离效 果。
04
CHAPTER
DNA、RNA及蛋白的分析 与应用
DNA、RNA及蛋白的分析方法
基因组测序
通过高通量测序技术，对整个基因组 进行测序，获取基因组的序列信息。
荧光定量PCR
利用荧光染料或荧光标记的特异性探 针，对DNA片段进行定量分析。
根据实验目的和要求选择新鲜、健康的植 物组织，以保证提取的蛋白质质量和数量 。
优化实验条件
根据实际情况对实验条件进行优化，如温 度、pH值、离子强度等，以提高蛋白质 的提取效率和纯度。
控制破碎条件
破碎细胞时要注意控制破碎时间和力度， 避免过度破碎导致蛋白质降解。
注意操作细节
在去除杂质和浓缩干燥过程中要注意操作 细节，避免损失和污染。
通过将蛋白质离子化并测量其质量，对蛋白质进行鉴定和定量分析。
DNA、RNA及蛋白在生物科学研究中的应用
基因组学研究
通过对基因组进行测序和分析， 研究基因组的组成、结构和功能，
揭示生物体的遗传特征和进化关 系。
转录组学研究
通过对mRNA进行定量分析，研究 基因的表达调控机制，揭示生物体 的生理和病理过程。
优化提取条件
可以通过调整试剂浓度、温度 、时间等参数来优化提取效果
。
02
CHAPTER
植物RNA的提取
RNA提取的基本原理
核酸是生物体内重要的遗传物质，RNA作为核酸的一种，在生物体的生命活动中 起着重要的作用。RNA提取的基本原理是利用RNA在细胞中的稳定性和其在碱 性环境下易与蛋白质分离的特性，将RNA从细胞中分离出来。
选择合适的分离方法
根据实际情况选择合适的离心分离或膜分 离等方法，以提高蛋白质的纯度和分离效 果。
04
CHAPTER
DNA、RNA及蛋白的分析 与应用
DNA、RNA及蛋白的分析方法
基因组测序
通过高通量测序技术，对整个基因组 进行测序，获取基因组的序列信息。
荧光定量PCR
利用荧光染料或荧光标记的特异性探 针，对DNA片段进行定量分析。
根据实验目的和要求选择新鲜、健康的植 物组织，以保证提取的蛋白质质量和数量 。
优化实验条件
根据实际情况对实验条件进行优化，如温 度、pH值、离子强度等，以提高蛋白质 的提取效率和纯度。
控制破碎条件
破碎细胞时要注意控制破碎时间和力度， 避免过度破碎导致蛋白质降解。
注意操作细节
在去除杂质和浓缩干燥过程中要注意操作 细节，避免损失和污染。
DNA的提取与鉴定讲解ppt课件
4D不 溶、N解同AD，，和NA而利蛋的当m大D一液在m随逐时ND使用N白o中，氯Na原o溶N，N渐lAC杂这lA／溶浓化质/aa理l的D降L的溶解CC质L解度钠一时N等，ll溶时低溶液溶溶A或为性的沉特，可其解，；解浓溶液液析物淀D以点0D度他在度度解浓浓出质．NN，使最，0又继成度度度A的1A.或D14的低续逐选的最的低量分4N者m。溶增渐溶小浓增于择A在mo相利 在加度增解解；加0ol适不／.l1为用 盐度时大反当而度/4当LL同时最这 溶， 。2的浓，盐度浓的度Na就C能l溶使液D中N溶A解充度分
4.DNA的再溶解。 用高浓度（2mol/L）的氯化钠溶液再溶解DNA粘稠物。
5.DNA的沉淀和浓缩。
对于除去了蛋白质的DNA的氯化钠溶液，必须再进 一步沉淀和浓缩，常用酒精沉淀法。即往含有Na＋的 DNA溶液，加入体积分数为95%的冷却酒精，混匀后可 以使DNA沉淀、浓缩，形成含杂质较少的DNA丝状物， 悬浮于溶液中。若丝状物较少，可将混合液再放入冰 箱中冷却几分钟即可。浓缩后的DNA丝状物可以用玻棒 （玻棒有吸附DNA的作用）缓缓旋转的方法卷起。
3.DNA的鉴定： 加入二苯胺试剂4mL，用玻棒搅拌使DNA溶解，沸水 浴5min，观察溶液是否出现浅蓝色。
三、实验小结
1.共有“三次过滤，两次析出，七次搅拌”
2.加入“两次蒸馏水，三次NaCl溶液，一次酒精”
四、实验原理拓展介绍。
1.DNA的释放。 DNA主要在鸡血细胞的细胞核内，正常情况下不会释 放出来，蒸馏水对于鸡血细胞是一种低渗液，水分可以 大量进入血细胞，使之胀破，同时加上玻璃棒快速搅拌 的机械作用，加速血细胞的细胞膜和核膜的破裂。但释 放出来的大量DNA与RNA、蛋白质结合在一起，即释放 的不是纯净的DNA，常称为DNA核蛋白。 2.DNA与蛋白质分离。 在高浓度（2mol/L）的氯化钠溶液中，核蛋白易溶解， 析出DNA并溶解在高浓度的氯化钠溶液中 3.DNA的析出与获取。 因为DNA在低浓度（ 0.14mol/L ）的氯化钠溶液中溶解 度小，而蛋白质的在其中的溶解度大。所以在向含DNA 的高浓度的氯化钠溶液中加入大量蒸馏水稀释氯化钠溶 液，从而使DNA溶解度下降，蛋白质溶解度增高。
生物课件植物DNA、RNA及蛋白的提取与分析
利用酶分解细胞膜和核膜，释放出DNA，再通过离心分 离得到DNA。
03
吸附法
利用硅藻土或玻璃纤维等介质吸附DNA，再通过洗涤和 洗脱得A的稳定性
DNA分子在细胞核中以染色质或去氧 核糖核酸（DNA）的形式稳定存在， 通过适当的裂解条件可以将其释放出 来。
细胞裂解
DNA纯化
硅藻土法
将植物组织研磨后与硅藻土混合，离心后取 上清液，再通过离心分离得到RNA。
D
植物RNA提取的原理
01
植物组织中的RNA与蛋白质结合形成核蛋白复合物，需 要在酸性或碱性条件下将其分离。
02
利用不同的化学物质与RNA结合，通过离心分离得到纯 化的RNA。
03
在提取过程中需要去除DNA和蛋白质等杂质，以保证提 取到的RNA纯度。
植物RNA提取的应用
01
02
03
基因表达分析
提取到的RNA可用于反转 录成cDNA，进行基因表 达分析。
转录组学研究
提取到的RNA可用于测序 分析，研究植物的转录组 学。
分子生物学实验
提取到的RNA可用于分子 生物学实验，如实时荧光 定量PCR、Northern blot等。
03 植物蛋白的提取
bow to has =sim j囊-油烟 for =踯
Tes hasitive in 1鬟,11 (嘲,
Ndkescrion-1 on-mir1在这.1走廊
抬头- 乎1itti and on which1,呕(11
about
04 DNA、RNA及蛋白的分析
DNA、RNA及蛋白的分析方法
DNA分析方法
生物进化研究
通过对不同物种的DNA、 RNA和蛋白质进行分析， 了解生物进化历程和物种 间的亲缘关系。
03
吸附法
利用硅藻土或玻璃纤维等介质吸附DNA，再通过洗涤和 洗脱得A的稳定性
DNA分子在细胞核中以染色质或去氧 核糖核酸（DNA）的形式稳定存在， 通过适当的裂解条件可以将其释放出 来。
细胞裂解
DNA纯化
硅藻土法
将植物组织研磨后与硅藻土混合，离心后取 上清液，再通过离心分离得到RNA。
D
植物RNA提取的原理
01
植物组织中的RNA与蛋白质结合形成核蛋白复合物，需 要在酸性或碱性条件下将其分离。
02
利用不同的化学物质与RNA结合，通过离心分离得到纯 化的RNA。
03
在提取过程中需要去除DNA和蛋白质等杂质，以保证提 取到的RNA纯度。
植物RNA提取的应用
01
02
03
基因表达分析
提取到的RNA可用于反转 录成cDNA，进行基因表 达分析。
转录组学研究
提取到的RNA可用于测序 分析，研究植物的转录组 学。
分子生物学实验
提取到的RNA可用于分子 生物学实验，如实时荧光 定量PCR、Northern blot等。
03 植物蛋白的提取
bow to has =sim j囊-油烟 for =踯
Tes hasitive in 1鬟,11 (嘲,
Ndkescrion-1 on-mir1在这.1走廊
抬头- 乎1itti and on which1,呕(11
about
04 DNA、RNA及蛋白的分析
DNA、RNA及蛋白的分析方法
DNA分析方法
生物进化研究
通过对不同物种的DNA、 RNA和蛋白质进行分析， 了解生物进化历程和物种 间的亲缘关系。
DNA的提取与鉴定ppt课件
（3）培养细胞： 离心，弃细胞培养液； 用缓冲液多次漂洗；
.
3、微生物培养物样品
离心获取菌体细胞， 加缓冲液洗涤， 加缓冲液悬浮菌体细胞。
4、微生物混合样品
用缓冲液悬浮菌体，低速离心，沉淀杂质。 高速离心获取菌体细胞。 用缓冲液洗涤菌体细胞。 加缓冲液悬浮菌体细胞。Biblioteka .（二）提取用具预处理
1、DNA提取用具的处理
核酸的降解:核苷酸间的磷酸二酯键的断裂
引起核酸变性的因素有：高温、强酸强碱 有机溶剂、尿素等
.
当呈双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时，其中的氢键便断开，双 链DNA便脱解为单链，这叫做核酸的“溶解”或变性。在适宜的 温度下，分散开的两条DNA链可以完全重新结合成和原来一样的 双股螺旋。这个DNA螺旋的重组过程称为“复性”。
.
（二）复性 变性DNA在适当条件下，可使两条分开的单链重新形成双螺旋DNA
的过程称为复性（renaturation）。 当热变性的DNA经缓慢冷却后复性称为退火（annealing）。DNA复
性是非常复杂的过程，影响DNA复性速度的因素很多：DNA浓度高，复 性快；DNA分子大复性慢；高温会使DNA变性，而温度过低可使误配对 不能分离等等。最佳的复性温度为Tm减去25℃，一般在60℃左右。离 子强度一般在0.4mol/L以上。
新鲜组织先用无菌生理盐水洗； 干药材除去霉点，无菌水浸洗；
捣碎或剪碎；加液氮研磨成粉状。
.
2、动物样品
（1）组织样品：
新鲜样品，生理盐水洗，直接使用（或分装、 -70℃/液氮低温保存）；
甲醛固定组织要先去掉甲醛；
石蜡包埋组织要经过组织切片和二甲苯脱蜡等处 理。
.
（2）血细胞样品： 来源：新鲜血液或者冻贮血液； 抗凝剂：一般用EDTA-Na2或柠檬酸钠（枸橼酸 钠 ），不可使用肝素； 分离：红白细胞，一般用明胶，加缓冲液悬浮白细 胞。（血清DNA是研究肿瘤的材料之一）
.
3、微生物培养物样品
离心获取菌体细胞， 加缓冲液洗涤， 加缓冲液悬浮菌体细胞。
4、微生物混合样品
用缓冲液悬浮菌体，低速离心，沉淀杂质。 高速离心获取菌体细胞。 用缓冲液洗涤菌体细胞。 加缓冲液悬浮菌体细胞。Biblioteka .（二）提取用具预处理
1、DNA提取用具的处理
核酸的降解:核苷酸间的磷酸二酯键的断裂
引起核酸变性的因素有：高温、强酸强碱 有机溶剂、尿素等
.
当呈双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时，其中的氢键便断开，双 链DNA便脱解为单链，这叫做核酸的“溶解”或变性。在适宜的 温度下，分散开的两条DNA链可以完全重新结合成和原来一样的 双股螺旋。这个DNA螺旋的重组过程称为“复性”。
.
（二）复性 变性DNA在适当条件下，可使两条分开的单链重新形成双螺旋DNA
的过程称为复性（renaturation）。 当热变性的DNA经缓慢冷却后复性称为退火（annealing）。DNA复
性是非常复杂的过程，影响DNA复性速度的因素很多：DNA浓度高，复 性快；DNA分子大复性慢；高温会使DNA变性，而温度过低可使误配对 不能分离等等。最佳的复性温度为Tm减去25℃，一般在60℃左右。离 子强度一般在0.4mol/L以上。
新鲜组织先用无菌生理盐水洗； 干药材除去霉点，无菌水浸洗；
捣碎或剪碎；加液氮研磨成粉状。
.
2、动物样品
（1）组织样品：
新鲜样品，生理盐水洗，直接使用（或分装、 -70℃/液氮低温保存）；
甲醛固定组织要先去掉甲醛；
石蜡包埋组织要经过组织切片和二甲苯脱蜡等处 理。
.
（2）血细胞样品： 来源：新鲜血液或者冻贮血液； 抗凝剂：一般用EDTA-Na2或柠檬酸钠（枸橼酸 钠 ），不可使用肝素； 分离：红白细胞，一般用明胶，加缓冲液悬浮白细 胞。（血清DNA是研究肿瘤的材料之一）
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