2017年高考生物大冲刺 备考“最后30天”专题七 基因工程(含PCR技术)试题
高三生物基因工程知识点
高三生物基因工程知识点
以下是高三生物基因工程的一些重要知识点：
1.DNA重组技术：基因工程的核心技术之一，通过人为操作改变DNA序列，将不同的基因片段组合起来，创造新的DNA序列。
2.限制性内切酶：特定的酶，能够识别并切割DNA的特定序列，用于DNA的切割和粘接。
3.DNA合成：通过化学合成方法，合成具有特定序列的DNA片段，用于基因工程实验中的重组和合成。
4.基因克隆：将感兴趣的DNA片段插入到载体DNA中，构建重组DNA，然后转化到宿主细胞中，使其复制和表达。
5.载体：在基因工程中用于携带和传递外源基因的DNA分子，常用的载体包括质粒、病毒等。
6.DNA测序：确定DNA序列的方法，常用的技术包括Sanger测序和高通量测序技术，用于研究基因的结构和功能。
7.基因编辑技术：包括CRISPR-Cas9系统等，能够定点修改DNA 序列，用于基因功能研究、疾病治疗等领域。
8.基因表达调控：通过改变基因的启动子、转录因子等调控元件，控制基因的转录和翻译水平，实现对基因表达的调控。
9.转基因技术：将外源基因导入到目标生物体中，使其获得新的性状或功能，常用于农作物的改良和生物药物的生产。
10.基因药物：利用基因工程技术生产的用于治疗疾病的药物，如重组蛋白、基因疫苗等。
这些知识点是高三生物基因工程的一些基础概念和技术，通过深入学习和实践，能够更好地理解和应用基因工程在生物学领域的重要性和应用前景。
新人教《生物技术与工程》高考总复习：第7讲 重点研究“基因工程操作中限制酶的选择和PCR技术”
答案：(1)EcoR Ⅰ、Pst Ⅰ EcoR Ⅰ、Pst Ⅰ、Sma Ⅰ和EcoR Ⅴ (2)磷酸二 酯键 (3)自我复制 一个至多个限制酶切割位点 用含有该抗生素的培养基培养 宿主细胞，能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞 (4)位于基因首端的一段特 殊DNA序列，是RNA聚合酶识别及结合的部位，能驱动转录过程
同。而扩增后的产物中可能含有MunⅠ 和 XhoⅠ 的识别位点，故在引物末端添加限
制酶的识别序列不能被限制酶MunⅠ和Xho Ⅰ所识别，故应该选用添加限制酶 EcoRⅠ和限制酶SalⅠ识别序列，据图中对限制酶的注释可知，限制酶MunⅠ与限 制酶EcoRⅠ 识别并切割后的黏性末端相同，故 R 末端添加的序列所对应的限制酶 是EcoRⅠ，在 F1～F7 末端添加的序列所对应的限制酶是SalⅠ；荧光蛋白基因中含 有限制酶EcoRⅠ的识别位点，故对载体使用限制酶MunⅠ 和XhoⅠ 切割。综上所 述，对载体使用限制酶MunⅠ和XhoⅠ切割，对扩增后的产物选用添加限制酶EcoR Ⅰ和限制酶SalⅠ识别序列，然后在DNA连接酶的催化作用下，连接形成重组载体；
项目 已知序列
PCR引物
DNA序列(虚线处省略了部分核苷酸序列)
(4)对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中 (虚线处省略了部分核苷酸序列)，结果正确的是________。
A．5′AACTATGCG……AGCCCTT3′ B．5′AATTCCATG……CTGAATT3′ C．5′GCAATGCGT……TCGGGAA3′ D．5′TTGATACGC……CGAGTAC3′
(1)为将扩增后的产物定向插入载体指导荧光蛋白基因表达，需在引物末端添加 限制酶识别序列。据图可知，在 F1～F7末端添加的序列所对应的限制酶是______， 在 R 末端添加的序列所对应的限制酶是________。本实验中，从产物扩增到载体构 建完成的整个过程共需要________种酶。
基因工程期末试题及答案
基因工程期末试题及答案一、选择题（每题2分，共20分）1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。
2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
4. 在基因工程中，限制性内切酶用于切割DNA分子，产生特定片段。
5. 基因工程可以产生转基因生物，通过对生物基因进行改造，使其具有特定的特性。
6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具，可以精确地修改基因组中的特定片段。
7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗，通过修复或替换异常基因，治疗遗传性疾病。
8. 在农业领域，基因工程可以用于改良作物，提高产量和抗病虫害能力。
9. PCR是一种常用的基因扩增技术，可以通过复制DNA片段来放大特定基因。
10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。
二、问答题（每题10分，共30分）1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。
基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。
其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。
基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中，然后转化到宿主细胞中，使重组DNA在宿主细胞中大量复制。
PCR是一种基因扩增技术，通过在DNA复制过程中加入特定引物，使特定基因片段在体外大量扩增。
DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。
2. 什么是转基因生物？请举例说明。
转基因生物是指经过基因工程改造，将外源基因导入到目标生物体中，使其具有新的遗传性状的生物。
例如，将耐旱基因导入水稻，使其具有抗旱能力；将Bt毒素基因导入棉花，使其具有抗虫能力。
3. 基因工程在医学领域有哪些应用？举例说明。
基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。
例如，利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因，治疗遗传性疾病。
另外，基因工程也可以用于疫苗研发，通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞，产生病原体的抗原蛋白，从而刺激免疫系统产生抗体，用于预防传染病。
基因工程答案与解析
高考真题答案与解析【考点23】基因工程一、选择题1．【答案】C【解析】本题考察的是选修3基因工程的有关知识。
水母的绿色荧光蛋白的应用应该说是生物科学研究手段的进步，象同位素原子示踪法一样，可以更直观地揭示微观世界的运动规律。
2．【答案】D【解析】载体上的抗性基因主要起着标记基因的作用，有利于筛选含重组DNA的细胞，并不能促进目的基因的表达。
3．【答案】C【解析】基因控制生物的性状，蛋白质是生物性状的体现者，基因对性状的控制是通过DNA控制蛋白质的生物合成来实现的。
水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后控制相应绿色荧光蛋白的合成，检测到绿色荧光。
4．【答案】C【解析】若该线性DNA分子在3个酶切位点切断，得到4种长度不同的DNA片段；若在2个酶切位点切断，得到3种长度不同的DNA片段；若在1个酶切位点切断，得到2种长度不同的DNA片段。
因此最多能产生4+3+2=9（种）长度不同的DNA片段。
5．【答案】D【解析】本题考查目的基因的检测与表达，属于考纲理解层次，难度较小。
基因的表达即控制蛋白质的合成，只有合成了相应的蛋白质才能证明目的基因完成了在受体细胞中的表达。
6．【答案】C【解析】本题考查基因工程中限制性内切酶的理解，属于考纲理解层次，难度较小。
限制内切酶主要存在于微生物中。
一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点切割DNA分子，它不能识别和切割RNA。
由于是工具酶，其活性易受温度等外界环境的影响。
7．【答案】B【解析】本题综合考查基因工程的操作步骤，属于考纲理解层次，难度较小。
基因工程中限制性内切酶和DNA连接酶是构建重组质粒必需的工具酶。
质粒作为运载体必须具有标记基因，导入的目的基因不一定能够表达成功，还要进行修饰或其他处理。
8．【答案】D【解析】本题综合考查基因工程的原理技术及转基因技术的讨论，属于考纲理解层次，难度较小。
基因的非编码区上有调控遗传信息表达的核苷酸序列（主要是RNA聚合酶结合位点），对于抗虫棉基因在棉花细胞中的表达不可缺少。
高考生物基因工程专题训练
高考生物基因工程专题训练在高考生物中，基因工程是一个重要且具有一定难度的专题。
基因工程作为现代生物技术的核心领域之一，不仅在科学研究中发挥着关键作用，也是高考中的重点考查内容。
基因工程，又称为重组 DNA 技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程的操作工具，包括限制性核酸内切酶、DNA 连接酶和运载体。
限制性核酸内切酶能够识别特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割 DNA 分子。
DNA 连接酶则能将切割后的 DNA 片段连接起来，形成重组 DNA 分子。
而运载体，常见的有质粒、噬菌体和动植物病毒等，它们能够将目的基因导入受体细胞。
在基因工程的操作步骤中，首先要获取目的基因。
这可以通过从基因文库中获取、利用PCR 技术扩增，或者通过人工合成等方法来实现。
获取目的基因后，需要构建基因表达载体。
这是基因工程的核心步骤，目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并表达。
接下来是将基因表达载体导入受体细胞。
根据受体细胞的不同，导入的方法也有所不同。
例如，将目的基因导入植物细胞可以采用农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；导入动物细胞常用的方法是显微注射法；而导入微生物细胞则通常用感受态细胞法。
导入受体细胞后，还需要对目的基因进行检测与鉴定。
这包括检测转基因生物染色体的 DNA 上是否插入了目的基因，检测目的基因是否转录出了 mRNA，以及检测目的基因是否翻译成蛋白质等。
基因工程在农业、医药、环境保护等领域都有着广泛的应用。
在农业方面，通过基因工程可以培育出抗虫、抗病、抗逆的农作物新品种，提高农作物的产量和品质。
例如，抗虫棉就是通过基因工程技术将苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中培育而成的。
在医药领域，基因工程可以用来生产胰岛素、生长激素、干扰素等药物。
利用基因工程生产的药物具有成本低、效率高、质量好等优点。
基因工程复习资料（含答案）
基因工程复习资料（含答案）基因工程复习题一、名词解释：（10～20%）基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶的Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交：将细胞或组织的核酸固定保持在原来的位置上，然后用探针与之杂交的一种核酸分子杂交技术，该方法可较好地反映目的基因在细胞或组织中的分布和表达变化。
粘性末端：双链DNA被限制性内切酶切割后，形成的两条链错开几个碱基，而不是平齐的末端。
Northern印迹杂交：将RNA进行变性电泳后，再转移到固相支持物上与探针杂交的一种核酸分子杂交技术，可用于检测目的基因的转录水平。
转位：一个或一组基因片段从基因组的一个位置转移到另一个位置的现象。
基因工程：在体外，用酶学方法将各种来源的DNA与载体DNA 连接成为重组DNA，继而通过转化和筛选得到含有目的基因的宿主细胞，最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子的过程称为基因工程，又称基因克隆、DNA克隆和重组DNA等。
目的基因：基因工程中，那些被感兴趣的、被选作研究对象的基因就叫作目的基因。
连接器：人工合成的一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段，连接到目的基因的两端，便于基因重组中的切割和连接。
转化：受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变的过程。
停滞效应：PCR中后期，随着目的DNA扩展产物逐渐积累，酶的催化反应趋于饱和，DNA 扩增产物的增加减慢，进入相对稳定状态，即为停滞效应，又称平台期。
逆转录PCR：以mRNA为原始模板进行的PCR反应。
PCR: 即聚合酶链式反应。
在模板，引物，4种dNTP和耐热DNA 聚合酶存在的条件下，特异性地扩增位于两段已知序列之间的DNA区段地酶促合成反应。
α-互补（α-complementation）：指在M13噬菌体DNA或PUC 质粒序列中，插入了lac启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸的核苷酸序列（又称α-肽），该序列不能产生有活性的β-半乳糖苷酶。
基因工程高三知识点
基因工程高三知识点基因工程是现代生物学中的一项重要技术，通过改变生物体的遗传物质（DNA）来创造新的基因组合或改变生物体的性状。
在高中生物学课程中，学生需要掌握基因工程的基本原理、应用以及相关的伦理和社会问题。
以下是基因工程的一些高三知识点。
一、基因工程的基本原理基因工程是利用DNA技术改变生物体的遗传信息，主要包括以下几个步骤：1. DNA提取：从感兴趣的生物体中提取DNA，通常使用PCR 技术扩增目标DNA片段。
2. DNA剪切：利用限制酶切割目标DNA，产生特定的切口。
3. DNA连接：将DNA片段连接到载体DNA上，形成重组DNA。
4. DNA转化：将重组DNA导入目标细胞中，使其具有新的遗传特性。
5. PCR扩增：使用聚合酶链反应扩增目标DNA的数量。
二、基因工程的应用领域1. 农业领域：基因工程可以用于改良作物，包括提高抗病虫害能力、增加产量、提高品质等。
2. 医学领域：基因工程可以用于制备重组蛋白药物，如胰岛素、生长激素等。
3. 环境领域：基因工程可以用于环境修复，包括通过基因修复技术降解污染物。
4. 科研领域：基因工程可以用于基因功能研究、疾病模型建立等。
三、基因工程的风险与伦理问题1. 生物安全风险：基因工程可能导致基因剥离和转基因生物的释放，风险包括基因污染、基因流动等。
2. 伦理问题：基因工程涉及到修改生物的基因组，可能引发对自然与人类的伦理关切，如人类基因改造、人类克隆等。
四、国际和国内基因工程的监管措施1. 国际监管：1992年生物安全议定书规定，转基因生物的跨国转运需要进行风险评估和合格证明。
2. 国内监管：我国设立了生物安全管理委员会，建立了转基因食品的安全管理体系。
五、基因工程的前景与挑战基因工程作为一种重要的生物技术，将会继续在农业、医学、环境等领域发挥重要作用。
但同时也面临着风险与挑战，需要加强监管、推动科学研究和公众教育。
总结：基因工程作为现代生物学的重要分支，已经在农业、医学、环境等领域取得了巨大的进展和应用。
专题 基因工程知识点梳理(含教材答案)
专题1 基因工程※基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
﹡原理：基因重组﹡目的：创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
﹡意义：能够打破生物种属的界限（即打破生殖隔离，克服远源杂交不亲和的障碍），在分子水平上定向改变生物的遗传特性。
﹡操作水平：DNA分子水平【思考】：（1）基因工程的物质基础是：所有生物的DNA均由四种脱氧核苷酸组成。
（2）基因工程的结构基础是：所有生物的DNA均为双螺旋结构。
（3）一种生物的DNA上的基因之所以能在其他生物体内得以进行相同的表达，是因为它们共用一套遗传密码子。
一、基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端（回文结构特点）。
①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。
②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶（1）分类：根据酶的来源不同，可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶两类（2）功能：恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
★两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶)的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键②区别：E．coIiDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能使黏性末端之间连接；T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低。
(3)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。
高考生物大冲刺 备考“最后30天”专题七 基因工程(含PCR技术)试题
专题七 基因工程（含PCR 技术）基因工程又称为DNA 重组技术，回答相关问题：（15分/10min ）（1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即__________和从___________中分离。
（2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA 文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA 文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是___________。
（3）在基因表达载体中，启动子是______聚合酶识别并结合的部位。
若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是__________。
（4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有______和______颗粒。
【解析】（1）获取目的基因主要有两大途径，即人工合成和从自然界已有的物种中分离。
（2）植物的成熟叶片中基因选择性表达，因此由所有RNA 逆转录形成的cDNA 文库中只含有叶细胞已转录（或已表达）的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因。
（3）在基因表达载体中，启动子是RNA 聚合酶识别并结合的部位。
采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，由于易于培养，最常选用大肠杆菌（或细菌）。
（4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉 和钨粉颗粒。
【答案】（1）人工合成 生物材料（每空2分，共4分，其他合理答案可酌情给分） （2）cDNA 文库中只含有叶细胞已转录（或已表达）的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因（5分，其他合理答案可酌情给分）（3）RNA （2分） 大肠杆菌（或答细菌）（2分）（4）金粉 钨粉（每空1分，共2分）PCR 是一种DNA 体外扩增技术。
1988年，PCR仪问世，并被广泛应用于基因扩增和DNA 序列测定。
如图是PCR 技术示意图，请回答下列问题：（11分/6min ）①标准的PCR 过程一般分为 、 、 三大步骤。
②引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段 。
大学基因工程题库及答案
大学基因工程题库及答案基因工程是一种利用分子生物学技术对生物体的基因进行操作和改造的科学。
以下是一些大学基因工程的题目和答案示例：1. 题目：简述基因工程的基本步骤。
答案：基因工程的基本步骤包括：(1) 目的基因的获取；(2) 载体的选择与构建；(3) 目的基因与载体的连接；(4) 转化受体细胞；(5) 筛选含有重组DNA的细胞；(6) 目的基因的表达与检测。
2. 题目：什么是基因克隆？请说明其在基因工程中的重要性。
答案：基因克隆是指将特定的DNA片段插入到载体中，然后在宿主细胞内进行复制和表达的过程。
基因克隆在基因工程中的重要性体现在：(1) 允许科学家研究和分析特定基因的功能；(2) 可用于生产药物和疫苗等生物制品；(3) 有助于理解基因表达的调控机制。
3. 题目：PCR技术在基因工程中的应用是什么？答案：聚合酶链式反应（PCR）技术在基因工程中的应用主要包括：(1) 快速扩增目的基因，为基因克隆和表达提供足够的DNA模板；(2) 用于基因突变的检测和分析；(3) 制备单链DNA模板，用于DNA测序；(4) 用于基因表达分析，如定量PCR。
4. 题目：转基因生物的安全性问题主要包括哪些方面？答案：转基因生物的安全性问题主要包括：(1) 环境安全性，即转基因生物可能对生态系统产生的影响；(2) 食品安全性，即转基因食品对人体健康的潜在影响；(3) 生物安全性，即转基因生物可能对非目标生物产生的影响。
5. 题目：基因编辑技术CRISPR-Cas9的原理是什么？答案：CRISPR-Cas9基因编辑技术的原理是利用一种来自细菌的RNA导向的核酸酶系统。
该系统由两部分组成：(1) 一段小RNA （sgRNA），它能够特异性地识别目标DNA序列；(2) Cas9蛋白，一种核酸酶，能够在sgRNA的引导下精确地切割目标DNA。
通过这种机制，科学家可以在特定的基因位点进行切割，实现基因的敲除、插入或替换。
6. 题目：基因治疗的基本原理是什么？答案：基因治疗的基本原理是将正常或修正后的基因导入到患者的细胞中，以补偿或修复缺陷基因的功能。
高考常考基因工程知识点
高考常考基因工程知识点基因工程是生物学和生物技术中的一个重要分支，也是高考中常考的知识点之一。
它涉及到人类对遗传物质DNA的操作，以达到改变生物体特征的目的。
本文将以简明扼要的方式介绍高考中常被考察的基因工程知识点，包括基因工程的定义、重要技术、应用领域以及伦理道德问题等内容。
一、基因工程的定义基因工程是指通过技术手段对细胞或有性生殖生物的基因进行人工改造，以达到某种预期效果的技术。
核心方法是将目标基因从一个生物体转移到另一个生物体中，实现基因的增加、删除或修饰。
该技术的兴起给农业、医学和生物工程等领域带来了革命性的变革。
二、重要技术1. DNA重组技术：通过将不同来源的DNA片段进行切割和连接，可以合成新的DNA序列。
其中最重要的技术是限制性酶切和DNA连接酶。
2. DNA克隆技术：将目标基因插入到载体DNA中，并通过细菌进行复制和扩增。
常用的载体有质粒和噬菌体。
3. DNA测序技术：用于确定DNA序列的方法。
包括Sanger测序和新一代测序技术。
测序技术的发展极大地促进了基因工程的研究和应用。
三、应用领域1. 农业领域：基因工程在农业领域的应用主要包括转基因作物和转基因动物。
转基因作物常见的有抗虫、抗病作物。
转基因动物则可以用于提高农业生产效率和改良畜禽品种。
2. 医学领域：基因工程在医学领域的应用主要包括基因治疗、基因诊断和基因药物。
基因工程可以通过修复或替代有缺陷的基因来治疗遗传性疾病。
同时，基因工程也可以开发出用于基因诊断和基因靶向治疗的药物。
3. 生物工程领域：基因工程在生物工程领域的应用涉及到生物制药、酶工程和生物燃料等方面。
通过利用基因工程技术，可以制造出大量的蛋白质药物和高效酶催化剂，同时也可以利用微生物进行生物能源的制造。
四、伦理道德问题基因工程的发展也带来了一系列的伦理道德问题。
其中最常被讨论的问题包括食品安全问题、资源分配问题、基因隐私和克隆技术等。
对于这些问题，社会各界需要进行广泛而深入的讨论和研究，以寻找到既能促进科技发展又能保障人类福祉的平衡点。
高考生物基因工程专题复习超全
碱基序列。
“分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶
１.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。
２.DNA连接酶的种类
E·coliDNA连接酶：连接黏性末端 T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端
3.DNA连接酶的作用部位：
脱氧核苷酸链上相邻的两个脱氧核苷 酸之间的磷酸二酯键
DNA连接酶
DNA连接酶无特异性，其催化DNA片段末端 形成磷酸二脂键。连接情况有两种：一是 催化互补的粘性末端连接，二是催化平末 端连接。只要是相同的粘性末端、平末端 DNA连接酶用某种生物发育的某个时期的 mRNA 反转录产生的多种互补DNA（也 叫cDNA）片段，与载体连接后储存在一 个受体菌群中，那么，这外
操作对象
操作水平
基
因
DNA分子水平
基本过程 结果
剪切→拼接→导入→表达 人类需要的基因产物
二、基因操作的工具
1、基因的剪刀——限制性内切酶 2、基因的针线——DNA连接酶 3、基因的运输工具——运载体
“分子手术刀” ——限制酶
1、来源： 主要是从原核生物中分离纯化出来的一
反转录 cDNA (互补DNA） DNA聚合酶
mRNA 反转录酶
cDNA
基因重？ 依据：目的基因的有关信息 如：根据基因的核苷酸序列 基因的功能基因在染色体上的位置 基因的转录产物mRNA 基因翻译需要酶相关的基因。 目前被广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基 因、植物抗病基因（抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。
1.基因的结构
（1）原核生物基因结构
非编码区
编码区
非编码区
…A‥………ATGTGCACGTAGTTA………‥G… 启动子 终止子 …T‥………TACACGTGCATCAAT………‥C…
高考生物专题复习题：基因工程
高考生物专题复习题：基因工程一、单项选择题（共6小题）1.PCR引物的3′端有结合模板DNA的关键碱基，5′端无严格限制，可用于添加限制酶切点等序列。
下列相关叙述错误的是（）A．图中两条子链合成一定都是从5′端向3′端延伸B．图示表示复性阶段，该过程的温度与引物的长短有关C．用图示引物扩增5次后，可以产生22个目标产物D．PCR每次循环都消耗引物和原料，在实验过程中需要及时补充2.CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。
其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。
通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（如下图）。
下列相关叙述错误的是（）A．合成Cas9蛋白需要mRNA、tRNA、rRNA参与B．向导RNA分子中不存在碱基互补配对C．Cas9蛋白通过作用于磷酸二酯键对目标DNA进行切割D．识别序列选择切割位点的原理是碱基互补配对原则3.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA聚合酶和运载体B．基因工程是在细胞水平上进行设计和操作的C．只要目的基因进入受体细胞，就能成功实现稳定存在和表达D．选细菌为重组质粒受体细胞，是因为质粒易进入细菌，且繁殖快4.下列关于DNA片段扩增及电泳鉴定实验的说法，错误的是（）A．放入PCR仪前，需要对离心管进行离心，使反应液集中在底部B．配置琼脂糖溶液时，需要根据DNA片段的大小调节琼脂糖浓度C．电泳时需要的两种缓冲液分别含有核酸染料和指示剂D．电泳时，需要根据电泳槽阳极至阴极之间的距离设定电压5.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（）A．利用DNA不溶于酒精溶液，而某些蛋白质能溶于酒精溶液，可将DNA 与蛋白质分离B．将实验材料的研磨液倒入离心管中，离心后取沉淀物备用C．在用预冷的酒精沉淀DNA时，要用玻璃棒沿一个方向搅拌，防止DNA 断裂D．利用DNA能溶于2mol/LNaCl溶液的原理，可将提取的丝状物或沉淀物溶解于其中6.下列有关目的基因导入受体细胞和检测与鉴定的叙述，正确的是（）A．用Ca2+处理植物细胞有利于重组Ti质粒的导入B．对目的基因进行扩增时，通过荧光标记技术实时定量测定产物的量C．将某种药用蛋白基因导入动物乳腺细胞中可获得乳腺生物反应器D．验证转基因抗虫棉是否成功时，通过RNA分子标记检测目的基因是否表达二、多项选择题（共4小题）1.科学家将苏云金杆菌中的Bt 基因（抗虫基因）利用农杆菌转化法导入棉花的愈伤组织细胞，并进行组织培养获得棉花植株。
高考生物专题复习《基因工程》含答案
高考生物专题复习《基因工程》【考点梳理.逐个击破】一、基因工程的操作工具1．限制性核酸内切酶(简称限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)作用：识别双链DNA 分子的某种特定的核苷酸序列并切开特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
(3)结果：产生黏性末端或平末端。
2．DNA 连接酶3．载体(1)作用：携带外源DNA 片段进入受体细胞。
(2)种类：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
(3)条件⎩⎪⎨⎪⎧能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特殊的标记基因二、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取(1)目的基因：主要是指编码蛋白质的基因，也可以是具有调控作用的因子。
(2)获取方法⎩⎪⎨⎪⎧从基因文库中获取利用PCR 技术扩增通过化学方法人工合成2．基因表达载体的构建 (1)构建基因表达载体的目的①使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代。
②使目的基因能够表达和发挥作用。
(2)基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子及标记基因等。
3．目的基因导入受体细胞微生物细胞感受态细胞法(Ca2＋处理法)4．目的基因的检测与鉴定检测目的检测方法判断标准目的基因是否插入转基因生物的DNA DNA分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否转录出了mRNA 分子杂交技术是否出现杂交带目的基因是否翻译出蛋白质抗原—抗体杂交技术是否出现杂交带个体水平的检测如抗虫、抗病的接种实验是否表现出相应的特性三、基因工程的应用及蛋白质工程1．基因工程的应用(1)动物基因工程：提高动物生长速度从而提高产品产量；改善畜产品品质；用转基因动物生产药物；用转基因动物作器官移植的供体等。
(2)植物基因工程：培育抗虫转基因植物(如抗虫棉)、抗病转基因植物(如转基因烟草)和抗逆转基因植物(如抗寒番茄)；利用转基因改良植物的品质(如新花色矮牵牛)。
2．基因诊断与基因治疗(1)基因诊断：又称为DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。
高考生物基因工程知识点归纳总结
高考生物基因工程知识点归纳总结基因工程是一门应用领域广泛的生物学技术，涉及到基因的操作、复制、修饰和转移等过程。
在高考生物考试中，基因工程是一个重要的考点，掌握相关知识点对于提高成绩至关重要。
本文将对高考生物基因工程的知识点进行归纳总结，以帮助考生高效备考。
1. 基因工程的概念和意义基因工程是指通过对生物体的基因进行操作，改变其遗传信息，达到某种特定目的的技术手段。
其意义在于解决人类与生活相关的问题，如农业、医学、环保等领域。
2. DNA技术2.1 DNA提取和纯化DNA提取可通过溶解、离心、沉淀等步骤获得纯净的DNA。
纯化DNA时，可通过酚-氯仿提取法或凝胶电泳分离法来除去杂质。
2.2 DNA限制酶切割DNA限制酶是能切割特定DNA序列的一类酶。
常用的限制酶有EcoRI、BamHI等。
限制酶切割后得到的DNA片段可通过凝胶电泳分离。
2.3 DNA连接和重组DNA连接可使用DNA连接酶将不同来源的DNA片段连接成一个完整的DNA序列，从而实现DNA的重组。
2.4 DNA克隆技术DNA克隆是指将特定DNA片段复制成大量相同的DNA分子。
常用的DNA克隆方法有质粒载体法和核酸杂交法。
3. 基因组学和蛋白质组学3.1 基因组学基因组学是研究生物所有基因组的学科。
通过对基因组的测序和分析，可以了解生物的基因组结构和功能。
3.2 蛋白质组学蛋白质组学是研究生物体内全部蛋白质的学科。
通过对蛋白质组的分析，可以了解生物体内蛋白质的种类、结构和功能。
4. 基因工程在农业领域的应用4.1 转基因作物转基因作物是通过基因工程手段向作物中导入外源基因，使其具有抗虫、抗病、耐旱等性状，提高作物的产量和质量。
4.2 基因治理和基因编辑基因治理是通过基因工程手段修复作物中的功能缺陷基因，提高其抗性和适应性。
基因编辑则是通过CRISPR-Cas9等技术对作物的基因进行精确修饰，使其具有更好的性状和抗性。
5. 基因工程在医学领域的应用5.1 基因诊断和基因治疗基因诊断通过检测和分析个体的基因组，用于疾病的诊断和预测。
高三生物基因工程的知识点
高三生物基因工程的知识点近年来，基因工程成为了生物学领域的热门话题。
对于高三生物学学生来说，了解和掌握基因工程的知识点是非常必要的。
本文将从DNA技术、基因工程的应用以及伦理道德等方面来探讨高三生物基因工程的知识点。
一、DNA技术DNA技术是基因工程的核心技术之一。
通过DNA技术，科学家们可以对基因进行修改、复制和移植，实现对生物体的基因组进行精确操作。
其中，PCR（聚合酶链式反应）是基因工程中常用的技术之一。
PCR技术能够在体外从一小段DNA片段扩增出大量完全相同的复制品，为基因工程的研究提供了重要的工具。
二、基因工程的应用基因工程的应用十分广泛，涉及医学、农业、环保等多个领域。
在医学领域，基因工程的应用最为突出。
例如，基因工程可以用于制造重组蛋白，如生长激素、胰岛素等，用于治疗疾病。
此外，基因工程还可以用于疾病的早期诊断，如基因检测技术可以帮助人们了解自身患病的概率，并采取相应的预防措施。
在农业领域，基因工程也发挥着重要作用。
通过对作物进行改良，使得作物具备抗虫、抗病等特性，能够提高农作物的产量和质量。
此外，基因工程技术还可以改良植物的耐旱性和耐盐性，为困境地区的农业发展提供了新的可能。
然而，基因工程的应用也存在一些争议。
例如，转基因食品引发了广泛的关注和争议。
有人认为转基因食品可能对人体健康产生不利影响，对环境造成潜在威胁。
因此，基因工程在应用过程中也需要进行严格的风险评估，并遵守相关的法律法规。
三、伦理道德基因工程的发展引发了许多伦理和道德问题。
例如，基因编辑技术的发展是否会导致“设计人类”？科学家是否有道德上的责任来干预人类的基因组？这些问题都需要我们认真思考和讨论。
伦理道德是基因工程领域最为复杂和敏感的问题之一。
在进行基因编辑时，必须考虑到对人类的尊重和人权。
应该进行合法的、道德的、自愿的和透明的过程来进行基因编辑。
另外，基因工程技术的应用还涉及到基因隐私的问题。
为了保护个体的基因信息，需要建立健全的信息保护机制和法律法规。
高考生物冲刺专题卷 专题30 基因工程(含解析)(2021年最新整理)
2017年高考生物冲刺专题卷专题30 基因工程（含解析）编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（2017年高考生物冲刺专题卷专题30 基因工程（含解析））的内容能够给您的工作和学习带来便利。
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本文可编辑可修改，如果觉得对您有帮助请收藏以便随时查阅，最后祝您生活愉快业绩进步，以下为2017年高考生物冲刺专题卷专题30 基因工程（含解析）的全部内容。
专题30 基因工程一、选择题（20小题）1．下列物质或过程不影响磷酸二酯键数目变化的是（）A. RNA聚合酶、逆转录酶、Taq酶B。
DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶C。
遗传信息的翻译、PCR中DNA解链D. cDNA文库的构建、染色体的结构变异【答案】C【题型】选择题【难度】较易2．下列有关基因工程和酶的相关叙述，正确的是（）A．同种限制酶既可以切割目的基因又可以切割质粒,因此不具备专一性B．运载体的化学本质与载体蛋白相同C．限制酶不能切割烟草花叶病毒的核酸D．DNA连接酶可催化脱氧核苷酸链间形成氢键【答案】C【解析】一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子,体现酶的专一性。
既可以切割目的基因又可以切割质粒,说明含有目的基因的DNA片段和质粒上均含有该限制酶的识别序列， A错误；运载体的化学本质是DNA，而细胞膜上载体的化学本质是蛋白质，B错误；限制酶能识别并切割DNA分子，而烟草花叶病毒的遗传物质是RNA，C正确;DNA连接酶可以催化连接被限制酶切割开的核苷酸之间的磷酸二酯键，不催化氢键的形成，D错误。
【题型】选择题【难度】一般3．若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体（见图乙）构建重组DNA(见图丙），限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT）、EcoRⅠ（G↓AATTC)和Sau3AⅠ（↓GATC)。
人教版高中生物选择性必修第3册 基因工程 基因工程(7)专题复习
教案
教学基本信息
课题
基因工程专题复习
学科
生物学段：ຫໍສະໝຸດ 中年级高二教材
书名：选修3《现代生物科技专题》出版社：人民教育出版社出版日期：2月
教学目标及教学重点、难点
教学目标
1.通过例题复习基因工程中的“一二三四多”，对PCR技术、三种基本工具、操作程序的四个步骤、蛋白质工程和基因工程的应用进行巩固。
2.通过例题使用基因工程技术解决较为复杂情境下的实际问题，渗透科学思维。
具体内容
1.一项技术——PCR技术，与体内DNA复制有什么区别与联系？例题1判断对错。
2.两个工程——基因工程和蛋白质工程，二者有什么区别与联系？例题2。
3.三个工具——限制酶、DNA连接酶和载体的功能、特点。
4.四个步骤——基因工程的操作流程。例题3-6
5.综合应用——例题7
通过例题复习巩固
小结
小结基因工程
教学重点
1.PCR技术的原理和流程，限制酶、DNA连接酶、载体的功能特点，基因工程基本操作程序的四个步骤，蛋白质工程的流程。
2.利用基因工程技术解决综合性实际问题。
教学难点
利用基因工程技术解决综合性实际问题。
教学过程(表格描述)
教学环节
主要教学活动
设置意图
导入
简介基因工程专题中的“一二三四多”
导入新课
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专题七 基因工程（含PCR 技术）基因工程又称为DNA 重组技术，回答相关问题：（15分/10min ） （1）在基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即__________和从___________中分离。
（2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA 文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA 文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是___________。
（3）在基因表达载体中，启动子是______聚合酶识别并结合的部位。
若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是__________。
（4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有______和______颗粒。
【解析】（1）获取目的基因主要有两大途径，即人工合成和从自然界已有的物种中分离。
（2）植物的成熟叶片中基因选择性表达，因此由所有RNA 逆转录形成的cDNA 文库中只含有叶细胞已转录（或已表达）的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因。
（3）在基因表达载体中，启动子是RNA 聚合酶识别并结合的部位。
采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，由于易于培养，最常选用大肠杆菌（或细菌）。
（4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有金粉 和钨粉颗粒。
【答案】（1）人工合成 生物材料（每空2分，共4分，其他合理答案可酌情给分） （2）cDNA 文库中只含有叶细胞已转录（或已表达）的基因，而基因组文库中含有该植物的全部基因（5分，其他合理答案可酌情给分）（3）RNA （2分） 大肠杆菌（或答细菌）（2分）（4）金粉 钨粉（每空1分，共2分） PCR 是一种DNA 体外扩增技术。
1988年，PCR 仪问世，并被广泛应用于基因扩增和DNA 序列测定。
如图是PCR 技术示意图，请回答下列问题：（11分/6min ）①标准的PCR 过程一般分为 、 、 三大步骤。
②引物是此过程中必须加入的物质，从化学本质上说，引物是一小段 。
③将双链DNA ______________ ，使之变性，从而导致 。
④引物延伸需提供 作为原料。
【解析】①标准的PCR 过程一般分为高温变性、低温复性、中温延伸三大步骤．②引物是一小段单链DNA 或RNA 。
③高温变性时，需要将双链DNA 加热到95℃，使之变性，从而导致双链DNA 分离成两条单链。
④中温延伸是需要以四种脱氧核苷酸为原料。
【答案】①变性 复性 延伸 ②单链DNA 或RNA ③加热到95℃ 双链DNA 分离成两条单链 ④四种脱氧核苷酸基础回归例 题 例 题1．基因工程的主干知识（1）目的基因的获取⎩⎪⎨⎪⎧ ①从基因文库中获取②利用PCR 技术扩增③用化学方法直接人工合成（2）基因表达载体的构建(目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因)。
（3）将目的基因导入受体细胞导入植物：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；导入动物：显微注射技术；导入微生物细胞：感受态细胞法(用Ca 2＋处理)。
（4）目的基因的检测与鉴定插入检测：DNA 分子杂交；转录检测：DNA —RNA 分子杂交；翻译检测：抗原—抗体杂交；个体水平检测：抗性接种实验。
2．基因表达载体的构建过程3．PCR 反应的过程非选择题（45分/45min ） 1．α1﹣抗胰蛋白酶是肝脏产生的一种糖蛋白，缺乏会引起肺气肿。
某公司成功研制出转基因羊，进入泌乳期后，其乳汁中含有人类的α1﹣抗胰蛋白酶，用于治疗肺气肿。
问答下列问题：（1）为获取目的基因，需要在肝细胞中提取 ，通过反转录产生cDNA ，再通过 技术进行快速扩增。
规范训练（2）将α1﹣抗胰蛋白酶基因与乳腺蛋白基因的等调控组件重组在一起，构建基因表达载体，然后通过技术，导入羊的受精卵中。
（3）受精卵通过早期胚胎培养，一般发育到阶段，通过胚胎移植到受体子宫孕育。
为选育出能泌乳的雌羊，移植前须从胚胎的部位取样，做DNA分析鉴定性别。
（4）α1﹣抗胰蛋白酶是一种结构较复杂的糖蛋白，因此用上述方法生产，相对传统的转基因大肠杆菌生产，优势在于。
【解析】（1）α1﹣抗胰蛋白酶基因在肝细胞中表达，所以可以在肝细胞中提取mRNA，反转录产生相应cDNA，再通过PCR扩增。
（2）为了使α1﹣抗胰蛋白酶基因在乳腺细胞中表达，需要将其与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组，构建基因表达载体，然后通过显微注射技术，导入受精卵中。
（3）牛和羊的胚胎一般发育到桑椹胚或囊胚，再进行胚胎移植；DNA分析鉴定性别须从胚胎的滋养层部位取样，这样既保证了遗传信息一致，又不影响内细胞团进一步发育。
（4）糖蛋白的形成需要进行蛋白质的加工，相对原核细胞而言，羊细胞有内质网和高尔基体，具备蛋白质加工的能力。
【答案】（1）mRNA PCR（2）启动子（或启动子、终止子）显微注射（3）桑椹胚或囊胚滋养层满分规范1.时间：你是否在限定时间内完成？□是□否2.语言：答题学科用语是否精准规范？□是□否3.书写：字迹是否工整？卷面是否整洁？□是□否4.得分点：答题得分点是否全面无误？□是□否5.教材：教材知识是否全面掌握？□是□否（4）羊细胞有内质网和高尔基体，具备蛋白质加工的能力2．基因表达载体的构建是基因工程的核心。
图1为限制酶EcoRⅠ的识别序列，图2表示目的基因及限制酶切点，图3表示目的基因上的DNA片段，图4表示质粒。
请回答下列问题：（1）若用图1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA，就其特异性而言，切开的是之间相连的化学键。
（2）图3为目的基因中的某一片段，下列有关叙述正确的是。
A．若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②处，解旋酶作用于①处C．若只用这个片段中的3个碱基对，排列出的DNA片段有64种D．就游离的磷酸基而言，该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取作为引物（DNA复制子链的延伸方向5′→3′）。
该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生等长的目的基因片段个。
（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，应该选择的限制酶是。
如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成含有完整抗四环素基因的DNA片段有种。
（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。
目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是。
【解析】（1）DNA分子的一条多核苷酸链中，两个脱氧核苷酸之间以磷酸基团和五碳糖相连．由题目可知，EcoR Ⅰ识别的DNA序列只有G和A，故切开的是鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸之间相连的化学键。
（2）A．密码子是mRNA上决定一个氨基酸的3个相邻的碱基，若图中的ACT能决定一个氨基酸，则其对应的密码子是UGA，A错误；B．DNA聚合酶和DNA连接酶都可作用于②磷酸二酯键处，解旋酶作用中①氢键处，B正确；C．A和T之间有2个氢键，C和G之间有3个氢键，因此若只用这片段中的3个碱基对，可以排列出23种片段，C错误；D．就游离的磷酸基而言，该片段有2个游离的磷酸基，而重组质粒不含游离的磷酸基，因此该片段与重组质粒相比多了2个游离的磷酸基，D正确。
故选：BD。
（3）若利用PCR技术增加目的基因的数量，由图2可知，DNA复制只能从5’到3’，因此构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，A、B、C、D四种单链DNA片段中应选取 B和C 作为引物，该DNA分子在PCR仪中经过4次循环后会产生基因片段16个，其中等长的目的基因片段8个。
（4）为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，提高重组效率，四环素抗性基因没有被破坏，gu8 应该选择的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠ。
如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，若Pst I酶的切割位点用1表示，EcoR I酶的切割位点用2表示，HindⅢ酶的切割位点用3表示，则形成的DNA片段1→2，2→1，2→3，3→2，1→3，3→1六种片段，其中只有2→1片段含有完整四环素抗性基因，即含有完整四环素抗性基因的DNA片段只有1种。
（5）如果大肠杆菌是受体细胞，则其体内应不含抗四环素基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。
目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是各种生物共用一套密码子。
【答案】（1）鸟嘌呤脱氧核苷酸和腺嘌呤脱氧核苷酸（2）BD（3）B和C 8（4）PstⅠ、EcoRⅠ1满分规范1.时间：你是否在限定时间内完成？□是□否2.语言：答题学科用语是否精准规范？□是□否3.书写：字迹是否工整？卷面是否整洁？□是□否4.得分点：答题得分点是否全面无误？□是□否5.教材：教材知识是否全面掌握？□是□否（5）抗四环素基因各种生物共用一套密码子3．已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图：请回答：（1）①代表的是过程。
为获得A基因表达载体，需用酶对A基因和运载体进行切割。
将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是。
（2）利用PCR技术扩增A基因时，设计引物序列的主要依据是，加入引物的作用是。
（3）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制等条件。
（4）过程③采用的技术是，获得的X叫细胞。
【解析】（1）由以上分可知①是逆转录过程．构建基因表达载体时，首先需要用同种限制酶切割含有目的基因的外源DN A和运载体，其次需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA．将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。
（2）利用PCR技术扩增A基因时，根据A基因两端的部分核苷酸序列设计引物序列，加入引物的作用是与A基因单链相应互补序列结合，然后再DNA聚合酶作用下进行延伸。
（3）PCR扩增目的基因的过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。
因此，与体内DNA复制相比较，PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行，并且要严格控制温度等条件。
（4）③过程需要采用动物细胞融合技术，根据图中信息可知X为杂交瘤细胞。
【答案】（1）逆转录限制显微注射法（2）A基因两端的部分核苷酸序列与A基因单链相应互补序列结合，然后再DNA聚合酶作用下进行延伸（3）温度（4）动物细胞融合杂交瘤满分规范1.时间：你是否在限定时间内完成？□是□否2.语言：答题学科用语是否精准规范？□是□否3.书写：字迹是否工整？卷面是否整洁？□是□否 4.得分点：答题得分点是否全面无误？□是□否 5.教材：教材知识是否全面掌握？□是□否。